LC-MS/MS 测定患者全血中百草枯的浓度

 目的 建立测定人全血中百草枯浓度的高效液相串联质谱电喷雾检测法 (LC/MS/MS) 。 方法 以 Waters 公司 C₁₈ 反相柱（ Symmetry C₁₈ column , 4.6 mm × 50 mm , 5 μ m ）为色谱柱,流动相为乙腈 - 水（含 0.3% 三氟醋酸） =5 ∶ 95 ,流速为 0.3 mL·min^-1 ,以乙腈沉淀蛋白法提取百草枯。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测（ SRM ）对百草枯（ <> m/z 185.2 → 169.1 ）进行测定,并将此法应用于临床监测患者血中百草枯浓度。 结果 百草枯的高（ 5 mg·L^-1 ）、中（ 1.25 mg·L^-1 ）、低（ 0.08 mg·L^-1 ） 3 个质量浓度的平均回收率分别为 71.80% , 70.77% 和 77.84% ,日内（ <> n =5 ）、日间（ <> n =3 ） RSD 均小于 15% ;分析方法的最低定量限为 0.04 mg·L^-1 。线性范围为： 0.04 ～ 10 mg·L^-1, 回归方程为 <> y =10 200<>x+309 , <> r =0.998 8 （ <> n =8 ）。 结论 该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床检测患者血中百草枯浓度。     

RP-HPLC 测定复方盐酸替利定口服液含量及有关物质

 目的 建立一种适用于复方盐酸替利定口服液有关物质及含量测定的高效液相色谱法。 方法 采用 Phenomenex Luna C₈ 柱（ 4.6 mm × 250 mm , 5 μm ）;流动相：甲醇 -0.2% 碳酸氢铵水溶液（ 70 ∶ 30 ）;流速： 1 mL · min^-1 ;检测波长： 229 nm ;柱温： 35 ℃ 。 结果 盐酸替利定和盐酸纳洛酮浓度分别在 0.02 ～ 2 .00 g · L^-1 （ <> r =1.000 0 , <> n= 6 ）和在 0.001 6~ 0.16 g · L^-1 （ <> r= 0.999 8 , <> n= 6 ）内,浓度与峰面积呈良好的线性关系;盐酸替利定和盐酸纳洛酮测定的平均回收率分别为 99.02% 和 98.98% ;盐酸替利定和盐酸纳洛酮的检测限 (S/N<>=3) 分别为 1.0 和 0.4 ng 。 结论 该法简单、快速准确、适用,可同时用于本品中盐酸替利定和盐酸纳洛酮的含量测定及有关物质检查。     

高效液相色谱 - 质谱法测定人血浆中左卡尼汀的浓度

 目的 建立人血浆中左卡尼汀浓度的高效液相色谱 - 质谱（ HPLC-MS ）测定法。 方法 以米屈肼作为内标,血浆样品经蛋白沉淀法处理,用氰基色谱柱 (Ultimate XB-CN , 4.6 mm × 250 mm , 5 μm) 进行分离,以乙腈 -30 mmol·L^-1 醋酸铵水溶液 ( 含 0.8% 甲酸 ) (80 ∶ 20) 为流动相,柱温 40 ℃ ,流速 1.0 mL·min^-1 ,柱后分流比为 4 ∶ 1 , HPLC-MS/ESI⁺ 法选择性监测准分子离子峰 [M+H]⁺ ( 左卡尼汀： <> m/z =162.1 , IS ： <> m/z =147.1) 。 结果 左卡尼汀及内标米屈肼在氰基柱上保留较好,分离完全,左卡尼汀在 0.4~12.8 mg·L^-1 内线性关系良好, <> r =0.999 4 ,平均萃取回收率大于 80% ,方法回收率大于 92% ,小于 114% ,日内日间 RSD 均小于 12% 。 结论 本方法简便快速、灵敏准确,适用于人血浆中左卡尼汀临床治疗监测和药物研究的需要。     

3 种秦皮香豆素的毛细管区带电泳快速分析

 目的 考察秦皮香豆素在不同实验条件下的提取与电泳行为,建立其中主要活性成分秦皮苷、秦皮甲素、秦皮乙素的毛细管区带电泳快速定量方法。 方法 采用 50 mmol·L^-1 硼砂溶液为运行缓冲溶液,熔融石英毛细管有效长度 45 cm （ 75 μm × 53.5 cm ）,以对羟基苯甲酸丙酯为内标,操作电压 18kV ,柱温 25 ℃,于 210 nm 波长处测定。 结果 在优化的电泳条件下, 3 种秦皮香豆素在 10 min 内完全分离。秦皮苷、秦皮甲素、秦皮乙素的线性范围分别为： 6.0 ～ 96 mg·L^-1 （ <> r =0.999 7 , <> n =5 ）, 7 ～ 112 mg·L^-1 （ <> r =0.999 6 , <> n =5 ）和 4.7 ～ 75.2 mg·L^-1 （ <> r =0.999 4 , <> n =5 ）;平均加样回收率分别为 101.74% , l00.92% 和 102.44% ,相应的 RSD 分别为 2.18% , 1 ． 97% , 2.66%(<>n=9) 。 结论 本实验为秦皮苷、秦皮甲素和秦皮乙素的同时定量提供了一种快速简便的检测方法。     

HPLC 测定消结安合剂中延胡索乙素的含量

 目的 建立用高效液相色谱法测定消结安合剂中延胡索乙素含量的方法。 方法 采用高效液相色谱 - 紫外检测器法 , 以十八烷基键合硅胶柱（ Kromasil C₁₈ , 4.6 mm × 250 mm , 5 μm ）为色谱柱,甲醇 - 水 - 三乙胺（ 65 ∶ 35 ∶ 0.5 ）为流动相,流速： 0.8 mL·min^-1 ,检测波长： 280 nm 。 结果 消结安合剂中延胡索乙素在 0.250~8.00 mg·L^-1 内线性良好, <> r =0.999 8 ,平均回收率（ <> n =5 ）为 100.19%,RSD 为 2.43% 。 结论 本方法操作简便、准确、灵敏,为该制剂的质量控制建立了方法。     

RP-HPLC 同时测定十味活血丸中苦杏仁苷和羟基红花黄色素 A 的含量

  目的 建立同时测定十味活血丸中苦杏仁苷和羟基红花黄色素 A 含量的 RP-HPLC 法。 方法 以十味活血丸为研究对象,采用 Diamonsil C₁₈ 柱 ( 4.6 mm × 200 mm , 5 μm) 色谱柱 , 流动相为甲醇 -0.05% 磷酸 (26 ∶ 74) ,流速 1.0 mL·min^-1 ,检测波长 210 nm ,柱温 35 ℃ 。 结果 苦杏仁苷和羟基红花黄色素 A 质量 浓度分别在 2.40~ 24.0 g ·L^-1 ( r = 0.999 8 , n =6) , 1.76~ 17.6 g ·L^-1 ( r = 0.999 7 , n =6) 内与峰面积呈良好线性关系;精密度实验 RSD 分别为 1.1% , 0.59% ;重复性实验 RSD 分别为 0.74% , 0.89% ;平均加样回收率 ( n =9 ) 分别为 99.9%(RSD=1.2%) 和 99.1%(RSD=1.5%) 。 结论 本测定方法简便、快捷、准确,为 十味活血丸 质量评价提供依据。     

全国主要产区生姜中 6 - 姜酚、 6 - 姜醇含量的测定

 目的 建立同时对全国主要产区生姜中 6- 姜酚、 6- 姜醇进行含量测定的方法。 方法 采用 Lichrospher C₁₈ 柱 （ 4.6 mm × 250 mm , 5 μm ）,以甲醇 - 水（ 65 ∶ 35 ）为流动相,体积流量 0.8 mL·min^-1 ,λ＝ 280 nm ,柱温 30 ℃ 。 结果 生姜中的 6- 姜酚与 6- 姜醇的线性范围和相关系数分别为 13.92~125.32 mg·L^-1 （ r = 0.999 9 ）, 4.04~36.40 mg·L^-1 （ r = 0.999 9 ）;加样回收率分别为 100.85% （ RSD=1.44% ）, 100.79% （ RSD=1.35% ）;方法精密度、重复性良好, RSD 均小于 2.0% 。 结论 本法操作简便、结果可靠、重现性好、检测快速、定量准确,可作为控制生姜质量的方法。     

LC-MS/MS同时测定大鼠血浆中4种黄连生物碱的含量

目的: 建立LC-MS/MS同时测定大鼠血浆中黄连碱、药根碱、巴马汀和小檗碱含量的方法。 方法: 采用ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7 μm),流动相乙腈-水(含2 mmoL乙酸铵和0.05%甲酸),流速0.3 mL·min^-1,柱温30 ℃,以士的宁为内标,血浆样品用4倍量乙腈萃取并沉淀蛋白,用电喷雾离子化(ESI)和正离子多离子反应监测(MRM)模式检测,选择离子对为药根碱m/z 338.227→m/z 322.824;黄连碱m/z 320.244→m/z 291.996;巴马汀:m/z 352.243→m/z 308.016;小檗碱:m/z 336.227→m/z 277.981;士的宁:m/z 335.264→m/z 184.017。 结果: 药根碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱的线性范围分别为1.01~505,1.06~530,1.13~565,1.07~535 μg·L^-1;定量下限分别为0.539 2,0.646 3,0.761 5,0.197 1 μg·L^-1; 平均回收率分别为103.90%,101.50%,101.58%,115.54%;日内和日间精密度、稳定性的RSD均<10%。 结论: 建立的方法准确、灵敏、特异、简便,适用于大鼠血浆中黄连碱、药根碱、巴马汀和小檗碱的同时测定及药动学研究。     

丹参、川芎与葛根配伍对葛根素的大鼠药动学影响

 目的 研究丹参、川芎与葛根配伍对葛根素的大鼠药动学性质的影响。 方法 Wistar 大鼠分别灌胃给予葛根和复方葛根提取物（相当于葛根素单体 300 mg· kg^-1 ）后,采用高效液相色谱法测定不同时间点大鼠血浆中葛根素的含量,绘制各时间点平均药 - 时曲线, 采用 3 P97 药动学软件对数据进行处理 。 结果 葛根素在大鼠体内的药动学行为符合开放二室模型,主要药动学参数有些不同,结果如下：葛根提取物组 <> t _{1/2 (ka)} =( 9.48 ±3.94) min , <> t _1/2α =(13.74±3.67) min , <> t _{1/2 β} =( 136.65±26.00) min , <> t _(peak) =( 29.02±11.94)min , <> ρ _(max) = (0.90±0.26)mg · L^-1 , AUC=( 186.10±49.57)m g · min · L^-1 , <> CL /<>F(s)= (1.72±0.53) L · kg^-1 · min^-1 , <> V /<>F(c)=( 241.57±94.64) L · kg^-1 ;复方葛根提取物组 <> t _{1/2 ka} =( 11.12 ±2.78) min , <> t _1/2α =(27.65±7.06) min , <> t _{1/2 β} =( 610.34±293.58) min , <> t _(peak) =( 24.50±4.56)min , <> ρ _max =( 2.57±1.34)mg · L^-1 , AUC=( 571.64±504.22)m g · min · L^-1 , <> CL /<>F(s)= (0.84±0.55 )L · kg^-1 · min^-1 , <> V /<>F(c)= (79.45±38.23) L · kg^-1 。 结论 丹参、川芎与葛根配伍使用,可以促进葛根素的吸收,提高其血药浓度,延长其体内作用时间。     

液相色谱质谱联用法测定静脉复合麻醉患者血浆中舒芬太尼的浓度

 目的 建立液相色谱质谱联用（LC-MS/MS）测定静脉复合麻醉患者血浆中舒芬太尼的药物浓度方法。方法 血浆样品经2 mol· L^-1 NaOH溶液20 μL碱化后用乙醚萃取,以芬太尼为内标,采用LC-MS/MS测定。色谱柱为Diamonsil C₁₈柱（4.6 mm×150 mm, 5 μm）,以甲醇-5 mmol·L^-1醋酸铵-醋酸（74∶26∶0.5）为流动相,流速为0.5 mL·min^-1;质谱条件采用TIS离子源,检测方式为正离子电离,多离子反应监测（MRM）,用于定量分析的离子反应分别为m/z 387.2→m/z 238.2（舒芬太尼）和m/z 337.4→m/z 188.2（芬太尼）。结果 舒芬太尼在0.01~1.00 μg·L^-1（r=0.998 1）内线性关系良好,高、中、低3浓度的提取回收率在64.2%以上,日内、日间精密度均小于11.6%。结论 本试验建立的舒芬太尼血药浓度的测定方法简单、快速、准确、灵敏,可用于临床上复合麻醉中小剂量应用舒芬太尼患者的血药浓度测定及临床药动学研究。     

LC-ESI-MS/MS快速测定人血浆中艾司西酞普兰的浓度

 目的建立测定人血浆中艾司西酞普兰浓度的高效液相色谱串联质谱电喷雾法(LC-ESI-MS/MS)。方法以Agilent C₁₈反相柱(Agilent C₁₈ column,2.1 mm×30 mm,3.5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-5 mmol·L^-1甲酸铵(75∶25),流速为0.4mL·min^-1,柱温:25℃,以正己烷-异戊醇(95∶5)为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对艾司西酞普兰(m/z 325→109)和内标利培酮(m/z 411→191)进行测定。并用此法测定40例患者稳态血药浓度。结果艾司西酞普兰的高、中、低(25,10,0.5μg·L^-1)3个浓度的平均回收率分别为99.16%、99.94%和92.28%,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于10%;分析方法的最低定量限为0.2μg·L^-1。线性范围为:0.2～50μg·L^-1,回归方程为Y=0.394 2ρ+0.020 5,r=0.999 4(n=8)。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血浓监测和药动学研究。     

LC-MS/MS方法同时测定人血浆和尿液中乌头碱与次乌头碱的含量

 目的 建立同时测定血浆和尿液中乌头碱（aconitine）与次乌头碱（hypaconitine）含量的LC-MS/MS分析方法。 方法 采用Phenomenex Gemini C₁₈柱 (4.6 mm×150 mm,5 μm) 为色谱柱,以甲醇-0.1%甲酸（70∶30）为流动相,流速为0.5 mL·min-1,以乙醚提取血浆和尿液中乌头碱与次乌头碱。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过API3200三重四级杆串联质谱仪,采用多反应离子监测（MRM）对乌头碱(m/z 646.3→105.2)与次乌头碱(616.3→105.2)进行测定。结果 生物样品中乌头碱在0.5~40 μg·L-1内、次乌头碱在0.25~25 μg·L-1内线性关系良好;乌头碱与次乌头碱最低定量限分别为0.5和0.25 μg·L-1,在尿液中的平均提取回收率76.54%~81.25%,血浆中的平均提取回收率73.22%~80.31%;日间和日内精密度均小于15%。结论 本方法简便、灵敏可靠,适用于血浆、尿液中乌头碱与次乌头碱的分析。     

高效液相色谱-质谱联用测定大鼠体内西罗莫司血药浓度

 目的 建立测定SD大鼠体内雷帕霉素（RAPA）血药浓度的HPLC-MS/MS联用方法。方法 色谱柱为Phenomenex Luna C₁₈（2.0 mm×250 mm,5 μm）;以甲醇-水（90∶10）为流动相;流速0.25 mL·min-1;柱温55 ℃。选用ESI源,以多反应采集模式（MRM）进行正离子检测,RAPA m/z 936.6→409.2和丙酸睾酮（内标）m/z 345.4→109.1。取全血样品经液-液萃取后,HPLC进样10 μL。结果 RAPA的线性范围为0.54～108.00 μg·L-1,定量下限为0.54 μg·L-1,日内、日间精密度（RSD）均小于12％。结论 本方法精密、准确,适用于RAPA在大鼠体内的药动学研究。     

SPE-LC-ESI-MS/MS测定人血浆中咪达普利拉浓度及其在药动学研究中的应用

 目的 建立测定人血浆中咪达普利拉浓度的固相萃取高效液相串联质谱电喷雾检测法(SPE-LC-ESI-MS/MS)。方法 以美国 Agilent Eclipse plus C₁₈（4.6 mm×150 mm,3.5 μm）为色谱柱,流动相为甲醇-水（含 0.005 mol·L-1 甲酸铵,含 0.1% 甲酸）（87∶13）;流速：0.5 mL·min-1;柱温：40 ℃。样品用Agilent C8固相小柱净化。经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM )对咪达普利拉(m/z 378.2→206.2)和内标依那普利拉(m/z 349.1→206.1)进行测定。结果 咪达普利拉的高(20 μg·L-1)、中(10 μg·L-1 )、低(1 μg·L-1。)3个质量浓度的方法回收率分别为102.44％,102.46％和105.69％,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于15％;分析方法的最低定量限为0.5 μg·L-1。线性范围为0.5~25 μg·L-1,回归方程为y=0.480 7x+0.008 7×10-4,r=0.997 6（n=6）。结论 该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血药浓度监测和药动学研究。     

反相高效液相串联质谱法快速测定人血浆中齐拉西酮的浓度及临床应用

 目的建立测定人血浆中齐拉西酮浓度的反相高效液相串联质谱电喷雾检测法(LC-ESI-MS/MS)。方法以迪马公司C18反相柱(Dialmonsil C₁₈ column,4.6 mm×150 mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-5 mmol·L^-1甲酸铵(90∶10),流速为1 mL·min^-1,柱温:25℃,以醋酸乙酯-二氯甲烷(4∶1)为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对齐拉西酮(m/z 413.2→194.1)和内标替米沙坦(m/z 515.3→276.2)进行测定,并用此法测定20例患者稳态血药浓度。结果齐拉西酮的高(250μg·L^-1)、中(100μg·L^-1)、低(10μg·L^-1)3个质量浓度的平均回收率分别为100.33%,94.31%和104.70%,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于15%;分析方法的最低定量限为5μg·L^-1。线性范围为:5～500μg·L^-1,回归方程为F=1.367 7ρ-0.024 5,r=0.999(n=7)。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血浓监测和药动学研究。     

HPLC-MS/MS测定人体内齐墩果酸血药浓度

 目的 建立快速、灵敏的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）法测定人血浆中的齐墩果酸。方法 血浆样品定量加入内标液,经乙酸乙酯液液萃取后,以甲醇-0.1%醋酸铵缓冲溶液（93∶7）为流动相,采用Zorbax Extend-C₁₈（4.6 mm×250 mm, 5 μm）柱分离。使用电喷雾离子化,负离子SRM检测。用于定量的离子反应分别为m/z 455.1→455.3（齐墩果酸）;m/z 469.1→469.3（内标甘草次酸）。结果 测定血浆中齐墩果酸的线性范围为0.1～40.0 μg·L-1,定量限为0.1 μg·L-1,批内、批间精密度（RSD）均小于20.0%,方法学回收率94.0%～102.0%,符合相关规定。单个样品的分析时间为6.5 min。本法已用于齐墩果酸口服制剂的人体生物等效性研究。结论 本方法灵敏度高,选择性强,分析测试时间较短,适用于人血浆样品中齐墩果酸的测定。     

反相高效液相串联质谱检测法测定人血浆中阿立哌唑的浓度及临床应用

 目的建立测定人血浆中阿立哌唑浓度的反相高效液相串联质谱电喷雾检测法(LC-ESI-MS/MS)。方法以迪马C18反相柱(4.6mm×150mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-5mmol·L^-1甲酸铵(90∶10),流速为1mL·min^-1,柱温:25℃,以醋酸乙酯-二氯甲烷(4∶1)为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对阿立哌唑(m/z 448.3→285.0)和内标替米沙坦(m/z 515.3→497.3)进行测定。并用此法测定30例患者稳态血药浓度。结果阿立哌唑的高(400μg·L^-1)、中(125μg·L^-1)、低(10μg·L^-1)3个质量浓度的平均回收率分别为94.27%、102.58%和97.97%,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于15%;分析方法的最低定量限为1μg·L^-1。线性范围为:5～500μg·L^-1,回归方程为F=0.5469ρ+0.0714,r=0.999(n=7)。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血浓监测和药动学研究。     

HPLC-MS/MS 法测定 C6 胶质瘤荷瘤大鼠脑组织中替尼泊苷的浓度

 目的 建立测定 C6 胶质瘤荷瘤 大鼠脑组织中替尼泊苷含量的高效液相色谱 - 串联质谱联用法 。 方法 脑组织匀浆后用乙酸乙酯 - 二氯甲烷（ 4 ∶ 1 ）液 - 液提取,流动相重组离心后进样分析。色谱柱为 Lichrospher C ₁₈ (2.1 mm×100 mm , 5 m m) 柱 ,依托泊苷为内标, 以 甲醇 -0.1% 甲酸的 5 mmol·L-1 乙酸铵（ 70 ∶ 30 ）为 流动相, 流速 0.2 mL·min-1 ,柱温 35 ℃,以多反应离子监测方式检测：替尼泊苷 [M+NH₄]+ , <> m/z 674/383 ;内标：依托泊苷 [M+ NH₄]+ , 606/229 。 结果 替尼泊苷和内标依托泊苷的保留时间分别在 2.7 和 2.2 min ,替尼泊苷的线性范围为 3 ~300 μg ? L-1 。提取回收率大于 75 ％ ,方法回收率大于 90 ％,日内 、 日间 RSD<10 ％ (<>n=5) 。 结论 本试验方法简便快速 ,适用于替尼泊苷体液的浓度测定,利于 新药临床研究。