反相高效液相串联质谱检测法测定人血浆中阿立哌唑的浓度及临床应用

 目的建立测定人血浆中阿立哌唑浓度的反相高效液相串联质谱电喷雾检测法(LC-ESI-MS/MS)。方法以迪马C18反相柱(4.6mm×150mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-5mmol·L^-1甲酸铵(90∶10),流速为1mL·min^-1,柱温:25℃,以醋酸乙酯-二氯甲烷(4∶1)为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对阿立哌唑(m/z 448.3→285.0)和内标替米沙坦(m/z 515.3→497.3)进行测定。并用此法测定30例患者稳态血药浓度。结果阿立哌唑的高(400μg·L^-1)、中(125μg·L^-1)、低(10μg·L^-1)3个质量浓度的平均回收率分别为94.27%、102.58%和97.97%,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于15%;分析方法的最低定量限为1μg·L^-1。线性范围为:5～500μg·L^-1,回归方程为F=0.5469ρ+0.0714,r=0.999(n=7)。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血浓监测和药动学研究。     

反相高效液相串联质谱法快速测定人血浆中齐拉西酮的浓度及临床应用

 目的建立测定人血浆中齐拉西酮浓度的反相高效液相串联质谱电喷雾检测法(LC-ESI-MS/MS)。方法以迪马公司C18反相柱(Dialmonsil C₁₈ column,4.6 mm×150 mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-5 mmol·L^-1甲酸铵(90∶10),流速为1 mL·min^-1,柱温:25℃,以醋酸乙酯-二氯甲烷(4∶1)为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对齐拉西酮(m/z 413.2→194.1)和内标替米沙坦(m/z 515.3→276.2)进行测定,并用此法测定20例患者稳态血药浓度。结果齐拉西酮的高(250μg·L^-1)、中(100μg·L^-1)、低(10μg·L^-1)3个质量浓度的平均回收率分别为100.33%,94.31%和104.70%,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于15%;分析方法的最低定量限为5μg·L^-1。线性范围为:5～500μg·L^-1,回归方程为F=1.367 7ρ-0.024 5,r=0.999(n=7)。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血浓监测和药动学研究。     

顶空气相色谱法测定鸡肝散7种挥发油成分的含量

 目的建立同时测定鸡肝散(Elsholtzia blanda)中7种挥发油成分含量的方法,并初步比较不同提取方法对挥发油组成的影响。方法采用顶空毛细管气相色谱法,INNOWAX型毛细管柱(0.53 mm×30 m,5μm),氢离子化检测器(FID),以乙酸乙酯为溶剂,采用程序升温法:初始温度60℃,以30℃·min^-1升至90℃,再以5℃·min^-1升至180℃;进样口温度200℃,检测器温度240℃。结果7种成分能较好分离,其线性范围分别为α-蒎烯33～330 mg·L^-1(r=0.9999);β-蒎烯32～320 mg·L^-1(r=0.9998);1,8-桉叶醚111～1110mg·L^-1(r=0.9998);樟脑238～2380 mg·L^-1(r=0.9996);芳樟醇140～1400 mg·L^-1(r=0.9997);乙酸龙脑酯65～650 mg·L^-1(r=0.9995);龙脑53～530 mg·L^-1(r=0.9995)。该法的平均回收率分别为96.6%,97.0%,97.8%,99.9%,96.5%,97.4%,97.1%。结论该法简便、准确、灵敏,可为该药材的质量控制和进一步研究开发提供科学依据。     

LC-ESI-MS/MS快速测定人血浆中艾司西酞普兰的浓度

 目的建立测定人血浆中艾司西酞普兰浓度的高效液相色谱串联质谱电喷雾法(LC-ESI-MS/MS)。方法以Agilent C₁₈反相柱(Agilent C₁₈ column,2.1 mm×30 mm,3.5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-5 mmol·L^-1甲酸铵(75∶25),流速为0.4mL·min^-1,柱温:25℃,以正己烷-异戊醇(95∶5)为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对艾司西酞普兰(m/z 325→109)和内标利培酮(m/z 411→191)进行测定。并用此法测定40例患者稳态血药浓度。结果艾司西酞普兰的高、中、低(25,10,0.5μg·L^-1)3个浓度的平均回收率分别为99.16%、99.94%和92.28%,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于10%;分析方法的最低定量限为0.2μg·L^-1。线性范围为:0.2～50μg·L^-1,回归方程为Y=0.394 2ρ+0.020 5,r=0.999 4(n=8)。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血浓监测和药动学研究。     

HPLC法测定布洛芬与盐酸伪麻黄碱血药浓度

 目的建立布洛芬和盐酸伪麻黄碱血药浓度HPLC测定方法。方法采用蛋白沉淀法处理血样,以萘普生为内标,测定布洛芬血药浓度。采用液-液萃取法,以硝基苯胺为内标,测定盐酸伪麻黄碱血药浓度。测定了5名志愿受试者服药后布洛芬和盐酸伪麻黄碱血药浓度。结果布洛芬在0.5～120 mg·L^-1内线性良好,回归方程为：Y=7.770 6ρ+1.2224,r=0.9988,日内日间RSD为2.57%,6.02%；盐酸伪麻黄碱在20～4000μg·L^-1内线性良好,回归方程为：Y=1180.163 0ρ+5.5970,r= 0.9984,日内、日间RSD为5.33%,6.62%。结论本方法灵敏、结果准确,可供临床血药浓度检测和药动学研究使用。     

HPLC测定麻黄药材中麻黄碱与伪麻黄碱的含量

 目的建立麻黄药材中麻黄碱与伪麻黄碱的HPLC含量测定方法。方法麻黄药材提取液采用高效液相色谱法分析,色谱柱LunaC₁₈(4.6mm×250mm,5μm),流动相:乙腈-0.2%磷酸(4:96),流速1.0mL·min^-1,检测波长210nm。结果盐酸麻黄碱的回归方程为ρ=0.049221A-2.16942,r=0.9990,线性范围4.0～120mg·L^-1,平均回收率为99.3%;盐酸伪麻黄碱的回归方程为ρ=0.040223A-0.77840,r=0.9999,线性范围4.1～123mg·L^-1,平均回收率为100.4%。结论本方法稳定,重现性好,操作简单,是检测麻黄药材中麻黄碱与伪麻黄碱的较理想方法。     

HPLC荧光法测定盐酸曲马多及其片剂人体生物等效性

 目的建立HPLC荧光检测法测定曲马多及活性代谢物O-去甲基曲马多在血浆中的浓度,研究曲马多片在健康人体中的药动学及生物等效性。方法采用随机交叉自身对照试验设计,20名健康男性受试者单次po 100 mg曲马多口腔崩解片和曲马多片后,按规定时间采集肘静脉血,血样经液.液萃取处理,以0.03 mol·L^-1四硼酸钠(含0.5%三乙胺,磷酸调pH至4.0)-甲醇(75:25)为流动相,色谱柱为Diamonsil C₁₈柱(4.6 mm×200mm,5μm),流速1.0 mL·min^-1,柱温50℃,荧光检测的激发波长275 nm,发射波长304 nm,测定曲马多和O-去甲基曲马多的血药浓度,并计算两制剂的主要药动学参数及相对生物利用度。结果测定血浆中曲马多和O-去甲基曲马多的最低检测限均为1.0μg·L^-1,曲马多和O-去甲基曲马多分别在1.0～600.0和1.0～300.0μg·L^-1内线性关系良好;血药浓度测定的日内、日间精密度RSD均小于5%;测得曲马多口腔崩解片和曲马多片的血样中曲马多的主要药动学参数为:t_max(2.2±1.0)和(1.9±0.9)h,ρ_max (350.4±66.0)和(339.0±73.2)μg·L^-1,t_1/2(6.9±1.8)和(6.8±1.8)h,AUC_0-t(3 953±1 550)和(3 703±1 310)μg·h·L^-1;血样中O-去甲基曲马多的主要药动学参数为:t_max(3.4±1.7)和(3.0±1.5)h,ρ_max(51.5±20.7)和(50.2±19.4)μg·L^-1,t_1/2(7.8±2.0)和(7.5±1.8)h,AUC_0-t(744±200)和(691±141)μg·h·L^-1;曲马多口腔崩解片的相对生物利用度以曲马多计算为(106.4±16.4)%,以O-去甲基曲马多计算为(107.5±17.2)%。结论建立的HPLC荧光法灵敏、准确;测定结果经统计学分析曲马多口腔崩解片和曲马多片为生物等效制剂。     

HPLC同时测定心脑联通胶囊中葛根素、虎杖苷和野黄芩苷的含量

 目的利用梯度洗脱,建立高效液相色谱法测定心脑联通胶囊中葛根素、虎杖苷和野黄芩苷含量的方法。方法采用高效液相色谱法。Diamonsil ODS柱(4.6mm×200mm,5μm),流动相为乙腈(A)和0.05%磷酸水溶液(B)梯度洗脱,流速1.0m L·min^-1,检测波长336nm。结果葛根素的线性范围为0.0232～0.1856g·L^-1(r=0.9995),平均回收率为100.0%,RSD=1.3%,虎杖苷的线性范围为0.0152～0.1216g·L^-1(r=0.9996),平均回收率为98.7%,RSD=0.9%,野黄芩苷的线性范围为0.0046～0.0369g·L^-1(r=0.9998),平均回收率为100.4%,RSD=0.9%。结论本方法操作简便,测定结果准确可靠,可用于心脑联通胶囊的质量控制。     

高效毛细管电泳法测定注射用水溶性维生素的含量

 目的采用高效毛细管电泳法(HPCE)的胶束毛细管色谱(MECC)模式分离和测定注射用水溶性维生素的含量。方法未涂层熔融石英毛细管67 cm(有效长度55 cm)×50μm;运行缓冲液为50 mmol·L^-1 SDS-50 mmol·L^-1的硼酸钠溶液(pH8.33);6.89 KPa×10 s压力进样;运行电压15.0 kV;检测波长214 nm;毛细管柱温25℃。结果注射用水溶性维生素中的九种成分分离完全,烟酰氨、维生素B6、D-生物素、核黄素磷酸钠、维生素B12、维生素C、泛酸钠、叶酸、维生素B1的线性范围分别为4.16～520.0 mg·L^-1(r=0.999 1),0.40～50.0 mg·L^-1(r=0.999 7),0.42-52.0 mg·L^-1(r=0.999 3),0.40～50.0 mg·L^-1(r=0.998 2),0.39-49.0 mg·L^-1(r=0.999 6),8.00～1 000.0 mg·L^-1(r=0.992 0),0.83-104.0 mg·L^-1(r=0.999 5),0.42～53.0 mg·L^-1(r=0.999 0),0.41～51.0 mg·L^-1(r=0.999 8),n=5;精密度(RSD)分别为1.75%,1.04%,1.6%,2.84%,1.85%,3.26%,1.58%,2.5%,1.92%(n=5);最低检测质量浓度分别为0.60,0.16,0.24,0.23,0.21,0.45,0.41,0.20,0.18 mg·L^-1。结论采用HPCE测定注射用水溶性维生素的方法简便、结果可靠。     

固相萃取结合HPLC-MS测定人血浆中奥美沙坦的药物质量浓度

 目的建立人血浆中奥美沙坦质量浓度的HPLC-MS测定法。方法血浆样品用OASIS HLB 3cc固相萃取小柱萃取,在Diamonsil C₁₈(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱上分离,流动相为甲醇-水(含体积分数为0.2%醋酸)(70∶30),流速0.5 mL·min^-1。LC-ESI/MS选择离子检测,正离子模式,用于定量分析的离子分别为m/z 447.2(奥美沙坦),m/z515.3(内标,替米沙坦)。结果奥美沙坦血药质量浓度在1～3 000μg·L^-1内的线性关系良好(r=0.999 9),血浆中低、中、高3种质量浓度(3,100,2 400μg·L^-1)的相对回收率在97.6%～100.9%之间,日内RSD≤5.2%,日间RSD≤13.3%。结论本法操作简便、准确、灵敏,适用于临床药动学研究。     

HPLC-MS/MS测定人血浆中丁螺环酮浓度及人体药动学

 目的建立测定人血浆中丁螺环酮的LC-MS/MS方法,并用于缓释盐酸丁螺环酮胶囊的临床药动学试验。方法血浆样品经固相萃取后,以10mmol·L^-1的甲酸铵溶液-含0.5‰甲酸的乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,经Symmetry C₁₈色谱柱(2.1mm×150mm,5μm)分离。通过电喷雾离子源,以多反应离子监测(MRM)方式进行检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z 386→121.7(丁螺环酮)和409→237.7(内标,氨氯地平)。结果LC-MS/MS测定人血浆中丁螺环酮的线性范围为0.025～12.8μg·L^-1,r=0.9993。该方法的绝对回收率为74.97%～77.83%,相对回收率为93.67%～102.0%,日内、日间精密度(RSD)分别为0.9%～5.1%和1.9%～6.7%。在临床药动学研究中,应用此法测试了10名受试者口服盐酸丁螺环酮缓释胶囊后血浆中丁螺环酮的浓度。结论本法快速、准确,灵敏度高,重现性好,可以满足本试验低浓度药物测定及药动学研究要求。     

LC-MS/MS测定人血浆中依折麦布和总的依折麦布含量及其药动学研究

 目的建立测定人血浆中依折麦布和总的依折麦布浓度的LC-MS/MS方法,进行依折麦布片po给药的药动学研究。方法22名志愿者血样经叔丁基甲醚萃取吹干重组后进样测定依折麦布浓度,另取血样经β-葡萄糖苷酸酶水解后叔丁基醚萃取吹干重组后进样测定总的依折麦布浓度。分析柱:Capcell C₁₈柱(2mm×50mm,5μm),内标(IS)¹³C6-依折麦布。流动相:5mmol·L^-1醋酸铵水溶液(A泵)和乙腈(B泵)组成,梯度洗脱。采用电喷雾去质子化三重四极杆二级串联质谱,多反应监测方式(MRM)测定样品浓度,依折麦布的监测离子对为m/z408.5→m/z270.8,内标为m/z414.5→m/z276.8。结果依折麦布在0.020～20μg·L^-1内线性关系良好,相关系数r=0.9994(n=9)。总的依折麦布在0.25～250μg·L^-1内线性关系良好,相关系数r=0.9998(n=9)。最低定量线(LLOQ)、低、中、高浓度的依折麦布和总的依折麦布质控样品的日内、日间精密度均小于12%,方法回收率在97%～104%内。志愿者口服10mg依折麦布后采血72h,依折麦布和总的依折麦布的药动学参数分别为AUC_0-inf(121.9±41.7)和(536.8±182.7)μg·h·L^-1;AUC_0-t(102.1±31.4)和(478.8±170.0)μg·h·L^-1;ρ_max(4.9±1.6)和(48.46±17.3)μg·L^-1;t_max(5.2±6.4)和(1.5±0.9)h;t_1/2(26.4±28.8)和(22.5±11.0)h;MRT(23.6±3.8)和(19.7±3.8)h。结论该方法符合生物样品分析要求,可用于依折麦布血浆浓度的测定,依折麦布和总的依折麦布的药动学参数与文献相近。     

HPLC-MS/ESI测定人血浆中阿立哌唑的浓度

 目的建立测定人血浆中阿立哌唑的HPLC-MS,并用于研究阿立哌唑在精神分裂症患者体内的药动学。方法血浆样品中加入内标艾司唑仑,用叔丁基甲醚萃取。色谱柱为Hypersil GOLD(2.1 mm×150 mm,5μm),流动相为乙腈-30 mmol·L^-1醋酸铵缓冲液-甲酸(42∶58∶0.1),流速0.35 mL·min^-1。采用电喷雾电离源正源(ESI+),选择离子检测方式,用于定量分析的检测离子为m/z448,450(阿立哌唑)和m/z295(内标)。结果阿立哌唑在19.90～1 119.60μg·L^-1内线性关系良好(r=0.999 9),最低定量质量浓度为1.00μg·L^-1(S/N=10),方法回收率在97.2%～103.5%之间,日内与日间RSD均小于8.0%(n=5)。结论该方法灵敏度高,结果准确,适用于治疗剂量阿立哌唑体内药动学的研究。     

HPLC测定小儿双扑伪麻片3组分及含量均匀度

 目的：研究和寻找能准确测定小儿双扑伪麻片中3组分含量的简便方法。方法：采用高效液相色谱法，以2种不同的样品浓度，同一流动相，同一内标，2次进样测定3组分含量，可在20min内完成。结果：本方法线性范围：对乙酰氨基酚为1．5μg·ml^－1～7．5μg·ml^－1，r＝0．9993；盐酸伪麻黄碱为0．12mg·ml^－1～0．36mg·ml^－1，r＝0．9995；马来酸氯苯那敏为8μg·ml^－1～24μg·ml^－1，r＝0．9971。平均回收率（x％）及变异系数（RSD％）分别为：对乙酰氨基酚（99．8±1．7）；盐酸伪麻黄碱（99．8±1．2）、马来酸氯苯那敏（98．7±1．5）。结论：本方法可用于小儿双扑伪麻片的含量测定；外标法可用于盐酸伪麻黄碱、马来酸氯苯那敏的含量均匀度测定。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中氟桂利嗪

 目的建立快速、灵敏的液相色谱-质谱法测定人血浆中氟桂利嗪的浓度。方法取0.25 mL血浆样品经液-液萃取后,以乙腈-水-甲酸(80∶20∶0.5)为流动相,Zorbax SB C₁₈柱分离,通过大气压化学电离源四极杆串联质谱,以选择离子反应监测(SRM)方式进行检测。结果测定血浆中氟桂利嗪方法的线性范围为0.2～200.0μg·L^-1,定量下限为0.2μg·L^-1。日内、日间精密度(RSD)均小于6.5%,准确度(RE)在99.1%以内。氟桂利嗪和内标苯海拉明的平均提取回收率分别为75.1%和73.1%;每个样品测试时间为3.1 min。结论该法选择性强,灵敏度高,适用于临床药动学研究。     

LC-MS/MS同时测定愈创甘油醚、溴己新和氨溴索及人体药动学中的应用

 目的建立同时测定人血浆中愈创甘油醚、溴己新和氨溴索浓度的LC-MS/MS方法,并应用于人体药动学研究。方法以盐酸维拉帕米为内标,血浆样品经液-液提取后经C₁₈柱分离,流动相:甲醇-16mmol·L^-1醋酸铵缓冲液(50∶50,甲酸调pH3.8),流速0.22mL·min^-1。采用SEI源正离子模式、多反应监测(MRM)方式进行定量分析,监测离子分别为199.1→125(愈创甘油醚)、374.9→114.1(溴己新)、378.9→264(氨溴索)。结果线性范围分别为愈创甘油醚10.0～5000μg·L^-1,溴己新、氨溴索为0.2～100μg·L^-1。3种药物的日内、日间精密度小于11%,方法回收率在97%～108%之间。结论该法灵敏、准确、快速,并成功用于复方制剂的药动学研究。     

HPLC-MS研究盐酸恩丹西酮缓释胶囊人体药动学及生物等效性

 目的首次建立人血浆中盐酸恩丹西酮浓度的HPLC-MS分析方法,用以测定健康受试者口服盐酸恩丹西酮缓释胶囊后的血药浓度,估算受试制剂和参比制剂的药动学参数,评价两种制剂的生物等效性和相对生物利用度。方法血浆中加入内标米氮平后,乙酸乙酯提取,HPLC-MS分离、分析。色谱系统:ODS柱(4.6mm×150mm,5μm),甲醇-乙腈-醋酸铵溶液(0.01mol·L^-1)(35∶30∶35)为流动相,流速1.0mL·min^-1,柱温35℃。质谱检测方式:SIM。结果盐酸恩丹西酮的线性范围为0.1～80μg·L^-1(r=0.9999),最低检测质量浓度达0.1μg·L^-1,提取回收率≥85%。口服单剂量和多剂量的盐酸恩丹西酮缓释胶囊后的相对生物利用度分别为(94.1±15.8)%和(94.8±14.3)%。结论本法简便,准确,灵敏度高。统计学结果表明,口服单剂量和多剂量的缓释胶囊与普通参比胶囊相比,达峰浓度低,达峰时间延长,稳态的波动度小,缓释特征明显。经方差分析和双单侧t检验表明,缓释胶囊和普通参比胶囊生物等效。