LC-MS/MS同时测定愈创甘油醚、溴己新和氨溴索及人体药动学中的应用

 目的建立同时测定人血浆中愈创甘油醚、溴己新和氨溴索浓度的LC-MS/MS方法,并应用于人体药动学研究。方法以盐酸维拉帕米为内标,血浆样品经液-液提取后经C₁₈柱分离,流动相:甲醇-16mmol·L^-1醋酸铵缓冲液(50∶50,甲酸调pH3.8),流速0.22mL·min^-1。采用SEI源正离子模式、多反应监测(MRM)方式进行定量分析,监测离子分别为199.1→125(愈创甘油醚)、374.9→114.1(溴己新)、378.9→264(氨溴索)。结果线性范围分别为愈创甘油醚10.0～5000μg·L^-1,溴己新、氨溴索为0.2～100μg·L^-1。3种药物的日内、日间精密度小于11%,方法回收率在97%～108%之间。结论该法灵敏、准确、快速,并成功用于复方制剂的药动学研究。     

HPLC测定血浆中黄豆苷元浓度及其人体药动学研究

 目的建立HPLC测定人血浆中黄豆苷元浓度的方法,进行其人体药动学研究。方法以氟康唑为内标,血浆样品经预处理后,选用HypersilODS₂色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),甲醇-水(49∶51)为流动相,流速1.0mL·min^-1,室温260nm处测定。结果黄豆苷元血浓度线性范围为5～640μg·L^-1,最低定量浓度为5μg·L^-1;相对回收率为89.53%～110.35%,绝对回收率为61.24%～85.04%,日内、日间变异系数均<12%。黄豆苷元药动学参数t_1/2为(3.863±0.983)h,ρ_max(192.261±115.077)μg·L^-1,t_max(0.900±0.409)h,AUC_0～12(490.839±162.855)μg·h·L^-1,AUC_0～∞(535.279±163.190)μg·h·L^-1。结论本法分离效果良好,灵敏度高,重现性好,回收率高,日内、日间误差小,适用于黄豆苷元人体药动学及生物利用度研究。     

高效液相-质谱联用测定人血浆中单硝酸异山梨酯的浓度

 目的建立了高效液相-质谱联用法测定人血浆中单硝酸异山梨酯（IS-5-MN）的浓度。方法采用Waters C₁₈150mm×2.1mm色谱柱,以甲醇-氨水溶液(0.03 mol·L^-1)=20∶80(pH=7.8)为流动相, 流速为0.25 mL·min^-1,检测质荷比（m/z）为190,血浆样品用醋酸乙酯直接提取,进样量为20μL。结果线性范围为10～640μg·L^-1,最低检测浓度7μg·L^-1,日内、日间的RSD皆小于8%。结论适用于临床血浆中单硝酸异山梨酯的测定及药动学的研究。     

LC-ESI-MS/MS测定人血浆中氨氯地平的含量

 目的建立高灵敏度的LC-ESI-MS/MS测定人血浆中氨氯地平浓度的方法。方法血浆样品经氢氧化钠溶液碱化,乙醚液-液萃取后进行分析。色谱柱COSMOSIL C₁₈柱(2.0mm×150mm,5μm),流动相甲醇-水-甲酸(60∶40∶0.1),流速0.25mL·min^-1,通过电喷雾离子化四极串联质谱,以选择离子反应监测(SRM)扫描方式进行检测。用于定量分析的监测离子分别为m/z409→238(氨氯地平)和m/z237→194(内标,卡马西平)。结果回收率为86%～95%,线性范围为0.1～6μg·L^-1,定量下限为0.1μg·L^-1,检测限为0.01μg·L^-1,应用此法测定了20名健康受试者交叉口服5mg氨氯地平剂量的试验制剂和参比制剂后的血药浓度经时过程。结论该法具有更高的灵敏度,适用于测定口服低剂量药物后人血浆中氨氯地平的浓度。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中氟桂利嗪

 目的建立快速、灵敏的液相色谱-质谱法测定人血浆中氟桂利嗪的浓度。方法取0.25 mL血浆样品经液-液萃取后,以乙腈-水-甲酸(80∶20∶0.5)为流动相,Zorbax SB C₁₈柱分离,通过大气压化学电离源四极杆串联质谱,以选择离子反应监测(SRM)方式进行检测。结果测定血浆中氟桂利嗪方法的线性范围为0.2～200.0μg·L^-1,定量下限为0.2μg·L^-1。日内、日间精密度(RSD)均小于6.5%,准确度(RE)在99.1%以内。氟桂利嗪和内标苯海拉明的平均提取回收率分别为75.1%和73.1%;每个样品测试时间为3.1 min。结论该法选择性强,灵敏度高,适用于临床药动学研究。     

高效液相色谱-库仑电化学检测法定量测定小鼠血浆中CTN986

 目的建立血浆中CTN986的定量测定方法,为药物代谢研究提供技术手段。方法采用HPLC-库仑电化学色谱方法,Diamonsil^TM(钻石)C₁₈(,4.6 mm×200 mm,5μm)色谱柱,0.2 mol·L^-1磷酸二氢钠-甲醇(60∶40)为流动相,CoulochemⅢ电化学检测器,Model 5010 Analytical cell为检测手段,以峰面积定量。结果检测下限为150μg·L^-1,定量下限为390μg·L^-1,方法线性范围为0.390～12.5,12.5～50 mg·L^-1;在1.563,6.25,12.5,25 mg·L^-14种质量浓度平均回收率为53.43%;日内、日间平均RSD为1.03%,2.28%。结论该方法灵敏度高,方法操作简便,可满足药动学研究的要求。     

反相高效液相色谱法同时测定人血浆中替米沙坦、氢氯噻嗪含量

 目的建立可同时检测人血浆中替米沙坦、氢氯噻嗪含量的反相高效液相色谱方法。方法色谱条件:色谱柱为Zorbax80A Extend-C₁₈(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相为乙腈-四丁基氢氧化铵磷酸盐缓冲液(24∶76);流速:1.0 mL·min^-1;检测波长:230 nm(替米沙坦),272 nm(氢氯噻嗪);柱温:20℃。结果本法替米沙坦的线性范围为31.8～1 591.2μg·L^-1,r=0.999 4,方法回收率为98.68%,RSD=3.09%,最低检测质量浓度为20μg·L^-1。氢氯噻嗪的线性范围为30～240μg·L^-1,r=0.999 1,方法回收率为100.32%,RSD=5.11%,最低检测质量浓度为20μg·L^-1。结论本法可以同时测定血浆中替米沙坦和氢氯噻嗪的浓度,具有样品处理简单、方法稳定、有较好的实用性,易于开展药动学及药效学研究。     

UPLC–MS/MS同时测定大鼠血、脑脊液中奎硫平及其活性代谢物

 目的建立同时测定大鼠血、脑脊液中奎硫平及其活性代谢物7-羟基奎硫平羟7-羟基-N-去烷基奎硫平浓度的UPLC-MS/MS法。方法样品经碱化后用叔丁基甲醚提取,采用Acquity UPLC^TM BEH C₁₈柱(2.1mm×50mm,1.7μm),柱温40℃,以水(含50mmol·L^-1醋酸铵,3‰甲酸)-乙腈(73∶27)为流动相,流速0.25mL·min^-1,进样量5μL。采用电喷雾离子化四极杆串联质谱,选择离子监测方式进行扫描,测定样品浓度,卡马西平作为内标。结果血浆中:奎硫平在0.0775～155μg·L^-1,7-羟基奎硫平在0.049～98μg·L^-1,7-羟基-N-去烷基奎硫平在0.067～670μg·L^-1内线性关系良好,萃取回收率均>89%,方法回收率均>87%,,内羟,间,密度RSD均<9%。脑脊液中:奎硫平在0.02～38.75μg·L^-1,7-羟基奎硫平在0.0098～29.5μg·L^-1,7-羟基-N-去烷基奎硫平在0.067～670μg·L^-1内线性关系良好,萃取回收率均>87%,方法回收率均>85%,,内羟,间,密度RSD均<16%。结论该方法该该度高、快速羟该确羟有效,且血、脑中浓度均可测定,为研究转运蛋白对抗,神分裂药物进入血脑屏障的影响提供了依据。     

高效液相色谱串联电喷雾质谱法测定大鼠血浆中水苏碱

 目的应用LC/ESI-ITMS检测大鼠血浆中水苏碱的含量。方法取血浆样品0.2mL,经3 mL乙腈-甲醇(90∶10)混合液沉淀蛋白并萃取后,以甲醇-水-甲酸(70∶30∶1,pH 3.5)为流动相,用Agilent zorba Extend-C₁₈色谱柱分离,通过电喷雾离子阱质谱,以选择离子反应监测(SRM)方式进行检测检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z144→m/z84(水苏碱)和m/z166→m/z148(内标,麻黄碱)。结果水苏碱线性范围为0.02～5.00 mg·L^-1,定量限20μg·L^-1,最低检测限为1μg·L^-1,日内、日间测定值RSD小于5.4%。在大鼠体内药动学研究中,应用此法测定了6只大鼠给予盐酸水苏碱后血浆中水苏碱的浓度。结论该法快速灵敏,准确度高,适用于大鼠体内水苏碱的药动学研究。     

RP-HPLC测定西洛他唑的血药浓度及药动学研究

 目的建立RP-HPLC测定人血浆中西洛他唑含量,并研究西洛他唑片在健康人体内的药动学。方法色谱柱为HypersilODS-2(4.6 mm×150 mm,5μm)柱,流动相为乙腈-水(45∶55),流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃,检测波长254 nm。结果西洛他唑在25～2 000μg·L^-1内线性关系良好(r=0.999 2),血浆最低检测浓度为10μg·L^-1,日内及日间RSD均小于6%,在3种不同浓度下,平均回收率分别为102.71%,102.03%和99.01%。人体药动学研究表明,药-时曲线符合二房室模型,主要药动学参数t_max 3.7 h,ρ_max749.2μg·L^-1,AUC_0～48 10 088.5μg·h·L^-1,t_1/2α 2.5 h,t_1/2β11.9 h。结论此法简便、灵敏、准确、稳定,可用于药物分析,其药动学参数可为临床合理用药提供理论依据。     

HPLC-MS/MS快速同时测定全血中3种免疫抑制剂的浓度

 目的建立液质联用(HPLC-MS/MS)法同时测定人全血中环孢素A、他克莫司、西罗莫司的方法。方法采用Symmetry C₁₈色谱柱(2.1 mm×150 mm,5μm),流动相:10 mmol·L^-1醋酸铵-0.1%甲酸溶液和0.1%甲酸甲醇溶液为90∶10,流速0.25 mL·min^-1,采用多反应监测进行定量。结果环孢素A在人全血中50～1 500μg·L^-1内线性良好,他克莫司、西罗莫司在人全血中1～30μg·L^-1内线性良好,相对回收率在98.67%～103.56%之间,日内及日间精密度(RSD%)均小于10%。结论本方法能满足同时测定人全血中环孢素A、他克莫司、西罗莫司的要求,用于临床血药浓度的监测。     

液相色谱-串联质谱联用测定人血浆中伪麻黄碱、O-去甲基右美沙芬和苯海拉明的浓度

 目的建立同时测定人血浆中伪麻黄碱、苯海拉明和O-去甲基右美沙芬的液相色谱-串联质谱方法。方法血浆中加入内标酚妥拉明后,进行固相萃取,以甲醇-0.5%甲酸水溶液(55∶45)为流动相,经C₁₈柱分离后;采用三重四极杆串联质谱,电喷雾离子源(ESI),以正离子多反应监测(MRM)方式进行定量分析,用于监测的离子为m/z 166.4→m/z 115.2(伪麻黄碱),m/z258.2→m/z157.1(O-去甲基右美沙芬),m/z256.2→m/z167.2(苯海拉明),m/z282.2→m/z212.2(内标,酚妥拉明)。结果线性范围为伪麻黄碱1.0～200μg·L^-1(r=0.9993),O-去甲基右美沙芬为0.05～10μg·L^-1(r=0.9991),苯海拉明为1.0～200μg·L^-1(r=0.9988);提取回收率为伪麻黄碱在67.4%～73.4%之间,O-去甲基右美沙芬在74.6%～75.7%之间,苯海拉明在81.9%～83.9%之间,日内、日间RSD均小于6.2%,伪麻黄碱、苯海拉明和O-去甲基右美沙芬的最低定量浓度分别为1.0,1.0和0.05μg·L^-1。结论该方法专属性强、灵敏度高、准确,适用于伪麻黄碱、O-去甲基右美沙芬、苯海拉明的临床药动学研究。     

高效液相色谱法同时测定滴鼻剂中盐酸麻黄素和氢化可的松的含量

 目的：用HPLC法同时测定滴鼻剂中盐酸麻黄素氢化可的松的含量。方法：采用C₁₈色谱柱，流动相为甲醇-0.05 mol·L^-1KH₂PO₄-三乙胺（50∶50∶0.2），用磷酸调pH3.7，检测波长257 nm。结果：盐酸麻黄素在360～600 μg·ml^-1浓度范围内线性关系良好（r=0.9999），回收率101.3%，RSD为1.0%。氢化可的松在36～60μg·ml^-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9998)，回收率101.5%，RSD为1.0%。结论：该方法可同时测定滴鼻剂中盐酸麻黄素氢化可的松含量。     

RP-HPLC同时测定不同采集地紫丁香树枝中丁香苷和橄榄苦苷的含量

 目的建立反相高效液相色谱法同时测定紫丁香树枝中丁香苷和橄榄苦苷含量的方法。方法Agilent ZORBAX SB-C₁₈柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速1.0mL·min^-1;柱温30℃,检测波长232nm。结果丁香苷和橄榄苦苷均有较好的分离度,二者分别在0.021～1.05g·L^-1(r=1.0000)之间和0.093～0.72g·L^-1(r=0.9992)之间有良好的线性范围;平均回收率分别为101.1%和99.4%;具有良好的精密度和重现性。结论本方法准确、精密度高、专属性好,可用于紫丁香树枝及其制剂的质量控制。     

HPLC-MS/MS测定人血浆中丁螺环酮浓度及人体药动学

 目的建立测定人血浆中丁螺环酮的LC-MS/MS方法,并用于缓释盐酸丁螺环酮胶囊的临床药动学试验。方法血浆样品经固相萃取后,以10mmol·L^-1的甲酸铵溶液-含0.5‰甲酸的乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,经Symmetry C₁₈色谱柱(2.1mm×150mm,5μm)分离。通过电喷雾离子源,以多反应离子监测(MRM)方式进行检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z 386→121.7(丁螺环酮)和409→237.7(内标,氨氯地平)。结果LC-MS/MS测定人血浆中丁螺环酮的线性范围为0.025～12.8μg·L^-1,r=0.9993。该方法的绝对回收率为74.97%～77.83%,相对回收率为93.67%～102.0%,日内、日间精密度(RSD)分别为0.9%～5.1%和1.9%～6.7%。在临床药动学研究中,应用此法测试了10名受试者口服盐酸丁螺环酮缓释胶囊后血浆中丁螺环酮的浓度。结论本法快速、准确,灵敏度高,重现性好,可以满足本试验低浓度药物测定及药动学研究要求。     

HPLC-MS/MS测定大鼠血浆中谷氨酰胺的浓度及其应用

 目的 建立EZ:faast^TM氨基酸分析试剂盒联合高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定大鼠血浆中谷氨酰胺的浓度,并用此方法对谷氨酰胺在大鼠体内的药动学进行研究。方法 大鼠血浆用EZ:faast^TM氨基酸分析试剂盒进行样品处理,而后采用API 3000 HPLC-MS/MS进行分析。色谱柱采用Phenomenex, EZ:faast 4 μ AAA-MS(3.0 mm× 250 mm, 4 μm),柱温为20 ℃,流动相由0.2%甲酸水溶液(含5 mmol·L^-1乙酸铵)-甲醇进行梯度洗脱,流速0.4 mL·min^-1。质谱采用多反应离子监测(MRM)的扫描模式,以电喷雾离子源(ESI)在正离子电离模式下进行测定。结果 本方法在3.003~150.2 μg·mL^-1内线性良好(r=0.996 6),最低定量限为3.003 μg·mL^-1,日内、日间精密度均小于15%,准确度在85%～115%之间,萃取回收率约90%,稳定性考察结果表明,谷氨酰胺在室温放置、处理后放置、反复冻融及长期冷冻条件下稳定性良好。结论 本方法专属性强、灵敏、准确,样品处理操作简便、快速,适用于谷氨酰胺在大鼠体内的药动学研究。