抗糖尿病新药——人胰高血糖素样肽类似物利拉鲁肽

2010年1月,美国FDA批准了诺和诺德公司用于治疗糖尿病的新药利拉鲁肽(Liraglutide,商品名Victoza)上市。利拉鲁肽是一种生物合成的人胰高血糖素样肽(GLP-1)类     

中医药对胰高血糖素样肽-1的干预研究进展

胰高血糖素样肽-1(GLP-1)因其多途径降糖作用,成为目前糖尿病治疗领域的研究热点。本文总结了近年来一些中药有效成分、单味中药及中药复方对GLP-1的相关干预研究进展。参考文献24篇。     

胰高血糖素样肽1受体激动的高通量筛选及作用机制研究

 目的筛选胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂,并进行初步的作用机制研究。方法建立稳定的GLP-1受体激动剂高通量筛选模型,从天然药物中筛选活性成分;在PC12细胞中验证GLP-1受体激动剂的功能及作用机制。结果经过筛选、鉴定,京尼平苷是一种新的GLP-1受体激动剂,能够通过MAPK信号通路诱导PC12细胞分化,对抗过氧化氢诱导的PC12细胞氧化损伤,提高神经细胞活力。结论京尼平苷具有与GLP-1受体激动剂类似的神经营养和神经保护功能。     

胰高血糖素样肽-1类似物对高糖诱导下肾小管上皮细胞Toll样受体4、骨桥蛋白表达的影响

目的研究胰高血糖素样肽-1（GLP-1）类似物对高糖诱导下的肾小管上皮细胞中Toll样受体4（TLR4）、骨桥蛋白（OPN）表达的影响。方法体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,将其分为低糖组、高糖组、高渗透压组、低剂量干预组、中剂量干预组、高剂量干预组。干预48h后采用细胞免疫化学法、RT-PCR法分别检测各组细胞中TLR4、OPN蛋白和mRNA的表达情况。结果低糖组和高渗透压组TLR4、OPN蛋白和mRNA呈低表达,且表达无明显差异;高糖组TLR4、OPN蛋白及mRNA表达较低糖组明显增高;Exendin-4干预后TLR4、OPN的蛋白及mRNA的表达明显降低,且呈剂量依赖性,明显低于高糖组,但仍高于低糖组。结论 GLP-1类似物可通过抑制TLR4、OPN的表达来抑制免疫炎症反应对肾脏的损害,且GLP-1类似物的这种保护作用呈剂量依赖性。     

肠抑胃肽和胰高血糖素样肽1的研究进展

 目的 综述比较两种肠促胰岛素肠抑胃肽(GIP)和胰高血糖素样肽1(GLP-1)的研究进展。方法 通过查阅国内外最新文献,对肠抑胃肽和胰高血糖素样肽1在其分泌代谢、刺激葡萄糖依赖的胰岛素分泌及在很多表达有其受体的组织和器官中（胰腺、脂肪、骨骼、大脑、胃）参与的重要的生物学过程的研究现状和最新进展进行总结、分析和比较。结果 两种肠促胰岛素肠抑胃肽和胰高血糖素样肽1虽然在胰腺、大脑组织中具有部分相似的作用,均能促进β细胞增殖、刺激胰岛素分泌、调节食欲,但是在对胰腺中的胰高血糖素、脂肪组织、骨骼及胃的调节中表现出不同甚至相反的作用。结论 利用肠促胰岛素治疗2型糖尿病已成为今后糖尿病药物研究中重要的发展方向,科学地应用肠抑胃肽和胰高血糖素样肽1的生理特性及积极寻找新型的、长效的类似物成为治疗或缓解2型糖尿病的关键。     

基于调节胰高血糖素样肽-1机制论中医药从脾胃论治糖尿病的研究进展

目前我国糖尿病(DM)发病率已超过10%,其防治工作对于社会经济发展而言意义深远。近年来一种由肠道L细胞分泌的多肽类激素胰高血糖素样肽-1(GLP-1)成为降糖药研发领域的新热点。GLP-1是一种肠促胰素,GLP-1受体(GLP-1R)广泛分布于肠胃及心、肺、肾等部位,二者结合后可呈葡萄糖依赖性地促进胰岛素(INS)分泌、抑制胰高血糖素(GC)分泌,保护胰岛β细胞,延缓胃肠排空、抑制食欲[1]。     

清化颗粒对db/db小鼠胰高血糖素样肽-1合成和分泌的影响

目的:探讨清化颗粒对db/db小鼠肠道胰高血糖素样肽-1(GLP-1)合成和分泌的影响。方法:选取db/m小鼠为空白对照组,db/db糖尿病小鼠随机分为模型对照组和清化颗粒(低、中、高剂量)组,干预4周,观察小鼠糖代谢变化;ELISA法分析小鼠血清GLP-1的水平;qRT-PCR法检测小鼠回肠胰高血糖素原和激素原转化酶1/3(PC1/3)的mRNA水平;Western blot法检测小鼠回肠PC1/3的蛋白表达水平;组织病理学观察小鼠回肠组织形态变化。结果:与模型对照组比较,清化颗粒降低db/db糖尿病小鼠的空腹血糖(FBG)(P0.01);提高血清GLP-1的浓度(P0.01);上调小鼠回肠组织胰高血糖素原和PC1/3酶的mRNA水平(P0.01);上调小鼠回肠组织PC1/3的蛋白表达水平(P0.01);并具有剂量依赖效应。另外,清化颗粒明显改善db/db糖尿病小鼠回肠组织形态。结论:清化颗粒能够降低db/db糖尿病小鼠的血糖水平,提高血清GLP-1水平,上调胰高血糖素原和PC1/3的mRNA水平,促进肠道GLP-1的合成和分泌,改善回肠组织形态。     

胰高血糖素样肽-2对小鼠小肠黏膜作用及其受体在体内的分布

目的观察胰高血糖素样肽-2(GLP-2)对小鼠小肠黏膜的作用效果;检测胰高血糖素样肽-2受体(GLP-2R)在小鼠不同脏器的分布和表达。方法选用5~6周龄的雄性健康BALB/C小鼠,体质量17~20 g。随机分为3组,腹腔注射组9只,脑内注射组9只,对照组8只,分别给予相应处理,3 d后处死小鼠,做组织切片进行HE染色,观察小鼠小肠黏膜的组织学变化,用免疫组化方法检测GLP-2R在不同脏器的表达和分布。结果①小鼠经腹腔注射GLP-2后,小肠不同肠段黏膜的绒毛高度较对照组明显增加(P均0.05);脑内注射组的肠黏膜无明显形态学变化。②GLP-2R在小鼠胃、空肠、结肠、气管等部位均有表达,而食管、肝、肺、肾与膀胱显阴性。③腹腔注射组的GLP-2R表达较对照组显著下调(P0.05),而脑内注射组的GLP-2R表达无变化。结论 GLP-2能刺激小肠黏膜上皮增厚,增加小肠不同肠段黏膜的绒毛高度;小鼠的胃、空肠、结肠、气管均有GLP-2R的表达,食管、肝、肺、肾与膀胱无GLP-2R的表达。     

针刺对2型糖尿病模型大鼠胰高血糖素样肽-1的影响

目的:观察针刺对2型糖尿病大鼠血清中胰高血糖素样肽-1(GLP-1)含量和小肠GLP-1原基因及胰腺GLP-1受体基因表达的影响,探讨针刺治疗2型糖尿病的机制。方法:选用造模成功的2型糖尿病大鼠,随机分为模型组、针刺组,同系非糖尿病大鼠作为正常组。针刺组大鼠取足三里、三阴交、胰俞穴治疗。采用实时定量聚合酶链反应技术测定小肠GLP-1原基因及胰腺GLP-1受体基因表达,酶联免疫吸附法测定血清中GLP-1含量。结果 :针刺组大鼠血清GLP-1浓度高于模型组(P=0.000),低于正常组(P=0.000),差异具有统计学意义(P0.01);小肠GLP-1原基因相对表达量,针刺组明显高于正常组,而正常组高于模型组;胰腺GLP-1受体基因相对表达量,针刺组明显低于正常组,高于模型组。结论:针刺能提高2型糖尿病大鼠血清GLP-1的浓度以及小肠GLP-1原基因和GLP-1受体基因的表达,可能是针刺治疗糖尿病的细胞分子机制。     

振腹法对2型糖尿病大鼠血糖和胰高血糖素样肽-1分泌的影响

目的：研究振腹法对2型糖尿病（Type 2 Diabetes Mellitus,T2DM）大鼠血糖及胰高血糖素样肽-1（Glucagon-like Peptide-1,GLP-1）分泌的影响,初步探讨振腹法对T2DM的效应机制。方法：将Wistar大鼠随机分为对照组和造模组。造模组采用饮食联合腹腔一次性快速注射链脲佐菌素（Streptozotocin,STZ）的方法制备T2DM模型,造模成功后随机分为模型组和振腹组。振腹组进行振腹干预,检测大鼠治疗前后的血糖、口服糖耐量试验（Oral glucose tolerance test,OGTT）和GLP-1。结果：1）治疗后,振腹组与模型组比较空腹血糖（Fasting blood glucose,FBG）水平显著性降低,有统计学意义（P<0.05）,口服糖耐量能力显著性提高,有统计学意义（P<0.05）。2）治疗后,模型组、振腹组与对照组比较葡萄糖灌胃后0～30 min GLP-1变化量（△差量）显著性降低,有统计学意义（P<0.05）,0 min、30 min 3组GLP-1血清含量无统计学意义（P>0.05）。结论：1）振腹法有降低T2DM大鼠血糖和提高其口服糖耐量能力的作用。2）未能说明振腹法可通过GLP-1通路降低血糖,关于振腹法对T2DM的效应机制和GLP-1通路还需做更进一步的研究。     

参麦注射液联合重组人脑利钠肽治疗急性心力衰竭的临床研究

目的:观察参麦注射液和重组人脑利钠肽(rhBNP)联用治疗急性心力衰竭(AHF),较之单用rhBNP,其临床症状、血浆脑钠肽(BNP)水平以及肾功能、低血压等指标的变化。方法:将52例AHF患者随机分为两组,对照组在常规治疗的基础上加用rhBNP,治疗组在对照组的基础上加用参麦注射液。观察两组的临床疗效、血浆BNP水平、肾功能和低血压反应的变化,并进行组内和组间的比较。结果:两组在临床疗效上差异无统计学意义(P0.05),但治疗组的血浆BNP水平较之对照组降低更加显著(P0.05)。治疗组治疗后的血肌酐水平较治疗前有显著降低(P0.05),与对照组比较有显著优势(P0.05)。治疗组低血压发生率明显少于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:参麦注射液联用rhBNP能进一步增强后者的抗心衰作用,并能避免rhBNP引发的肾功能损害和低血压反应,值得临床推广应用。     

重组人Cu,Zn-SOD包含体的复性、纯化及复性蛋白稳定性研究

 目的通过体外复性和纯化技术获得具有高纯度、高生物活性的重组人铜锌超氧化物歧化酶(rhCu,Zn-SOD),并研究复性蛋白的稳定性。方法以透析法对在大肠杆菌中以包含体形式表达的rhCu,Zn-SOD进行复性,采用金属螯合亲和层析对复性样品进行纯化,通过酶活性测定考查复性和纯化的rhCu,Zn-SOD的热稳定性、pH稳定性和对变性剂的稳定性。结果建立了体外透析复性的基本条件,其比活可达2 380 U·mg^-1。该复性样品经金属螯合亲和层析纯化后,结果得到纯度大于95%、比活5 000 U·mg^-1、活性回收率大于100%的目的蛋白。复性和纯化蛋白在温度25～70℃和pH 5.0～10.5内活性稳定,并可耐受2～10 mol·L^-1的尿素和2%～8%的十二烷基硫酸钠(SDS),对更强烈的变性剂盐酸胍稳定性较弱。结论确定了重组人Cu,Zn-SOD包含体的体外复性条件和复性蛋白纯化方法,且复性蛋白表现出很好的稳定性,为重组人Cu,Zn-SOD的生产奠定了良好基础。     

重组人睫状神经营养因子对糖尿病大鼠胃肠功能的影响

 目的评价重组人睫状神经营养因子(rhCNTF)对糖尿病大鼠胃肠道功能的作用。方法采用链脲佐菌素(strepto- zocin,STZ)诱发的糖尿病大鼠胃肠神经功能紊乱模型,肌注rhCNTF 0.1,0.3,0.9mg·kg^-1,测定了rhCNTF对血糖、胃肠慢波电位、小肠壁内神经蛋白含量,观察了rhCNTF对胃肠推进功能的影响以及胃肠对乙酰胆碱(Ach)、阿托品敏感性的影响。结果肌内注射rhCNTF对血糖无明显影响,也未见rhCNTF改善十二指肠对Ach、阿托品的敏感性。肌注RhC- NTF可改善糖尿病大鼠胃肠慢波电位、提高了胃肠推进功能、增加了胃肠壁内神经蛋白含量。结论糖尿病导致的胃肠神经功能紊乱可以通过肌注rhCNTF而改善,其重要机制是rhCNTF对抗糖尿病引起的胃肠神经病变。     

冻干重组人脑利钠肽治疗慢性心力衰竭的疗效

〔摘 要〕 目的：探讨冻干重组人脑利钠肽治疗慢性心力衰竭的疗效,并分析其作用机制。方法：选择 2020 年 2 月 至 2021 年 2 月来新乡医学院第一附属医院接受诊治的 108 例慢性心力衰竭患者进行研究。采用双色球法将患者分为 两组,各 54 例。对照组行常规治疗,观察组在对照组基础上加以冻干重组人脑利钠肽治疗。比较两组患者的临床疗效、 心功能指标、可溶性生长刺激表达基因 2 蛋白（sST2）、半乳糖凝集素 3（Gal–3）及不良反应发生率。结果：治疗后, 观察组患者的总有效率为 92.60 %,高于对照组的 77.78 %,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）;两组患者的心功能指 标均较治疗前改善,观察组患者心房内径、左心室收缩末径及左心室舒张末径均低于对照组,差异均具有统计学意义 （P ＜ 0.05）;两组患者的 sST2、Gal–3 均低于治疗前,观察组患者 sST2、Gal–3 均低于对照组,差异均具有统计学 意义（P ＜ 0.05）。两组患者治疗期间的不良反应发生率比较,差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。结论：慢性心力衰 竭患者在常规治疗的基础上加以冻干重组人脑利钠肽治疗,疗效较单纯常规治疗更好,其作用机制可能与冻干重组人 脑利钠肽能改善心功能指标,降低 sST2、Gal–3 水平有关。     

丹参二萜合酶基因CPS4的原核表达体系优化及活性蛋白纯化

目的:优化丹参柯巴基焦磷酸合酶基因家族新基因CPS4的原核表达体系并对重组蛋白进行纯化。方法:对2种原核表达菌株进行比较。对诱导条件,包括异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导浓度、诱导时宿主菌的密度(A600)和诱导时间进行正交试验。利用HisTrap HP蛋白纯化柱对重组蛋白进行纯化。结果:Escherichia coli Tuner(DE3)表达菌株能诱导产生更多的可溶重组蛋白。最佳诱导表达条件为诱导时宿主菌的A600值0.7,IPTG浓度0.2 mmol·L-1,诱导表达时间10 h。HisTrap HP蛋白纯化柱纯化时梯度洗脱能得到纯度高的重组蛋白。结论:利用此优化体系可得到足量用于后续研究的重组蛋白,为其他二萜类合酶基因的原核表达提供参考。     

重组葡萄球菌肠毒素B突变体蛋白D9N的表达、纯化及生物学活性的研究

 目的表达、纯化重组葡萄球菌肠毒素B突变体蛋白D9N(rSEB-D9N),了解表达产物rSEB-D9N的细胞毒性、促淋巴细胞增殖和肿瘤生长抑制作用。方法不同浓度IPTG诱导SEB-D9N突变体原核表达系统pET32a-SEB-D9N-E.coliBL21DE3表达rSEB-D9N,经Ni-NTA亲和层析法纯化rSEB-D9N,10%SDS-PAGE和高效液相色谱检测其纯度。以Vero细胞为靶细胞,进行rSEB-D9N的细胞毒性作用,并计算TCID₅₀值。采用MTT法分别检测不同浓度的rSEB-D9N促人淋巴细胞增殖及抑制KB及MCF-7癌细胞株生长的作用。流式细胞术检测rSEB-D9N刺激人淋巴细胞后CD3、CD4、CD8的表达。结果rSEB-D9N表达产量约占细菌总蛋白30%,纯化后获得纯度为90.48%的rSEB-D9N。rSEB和rSEB-D9N对Vero细胞的TCID₅₀值分别为3.12,8.85μg,10.0,20.0mg·L^-1的rSEB-D9N具有显著的促PBMC增殖的作用(P<0.05),且主要上调CD3,CD4和CD8的表达。5.0～20.0mg·L^-1rSEB-D9N作用的PBMC上清对KB和MCF-7细胞生长均可产生明显抑制作用(P<0.05)。结论获得并纯化了重组葡萄球菌肠毒素B突变体蛋白(rSEB-D9N),其细胞毒性作用有所降低,但促人淋巴细胞增殖和抑制肿瘤细胞生长作用仍较强,可作为研制升白细胞、抗肿瘤相关药物的候选突变体。     

数字人体与中医药现代化

首先概述了数字人体与中医药现代化的意义和作用；然后结合中医药工程和医学领域阐述了数字人体的基本概念、研究对象和研究内容；在此基础上，概述了数字人体与虚拟人的区别；详细论述了数字人体理论，包括人体系统的连续动态系统、人体系统的离散动态系统、人体系统的随机性、人体系统的自组织、人体系统的简单巨系统和人体系统的复杂巨系统；数字人体原型与模型，包括数字人体原型、数字人体物质模型、数字人体力学模型、数字人体数学模型和数字人体信息模型；数字人体技术，包括数字人体信息采集技术、数字人体信息处理技术和数字人体信息表达技术；以及数字人体标准化；最后以经络为例，简迷了数字人体研究示范。为数字人体与中医药现代化研究提供了理论基础。     

重组人脑利钠肽联合益气强心中药治疗急性左心衰竭临床疗效

〔摘 要〕 目的：探讨重组人脑利钠肽联合益气强心中药治疗急性左心衰竭疗效及安全性。 方法：选择漳州市长泰区医院 2020 年 1 月至 2022 年 1 月诊治的 80 例急性左心衰竭患者为研究对象,采用随机数字表法分为观察组（40 例,重组人脑钠肽联合益气强心中药治疗）及对照组（40 例,重组人脑钠肽治疗）。比较两组患者疗效、并发症、心功能、心肌酶谱、心力衰竭标志物的差异。 结果：观察组患者治疗总有效率为 92.5 %,高于对照组的 72.5 %,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。两组患者的并发症情况比较,差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。治疗后观察组患者左心室舒张末期内径（LVEDD）、Tei 指数、肌酸激酶同工酶（CK–MB）及超敏肌钙蛋白 I（hs–cTnI）均显著低于对照组,左心室射血分数（LVEF）显著高于对照组,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。治疗后观察组患者 N 末端脑钠肽前体（NT–proBNP）均显著低于对照组,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。 结论：重组人脑利钠肽联合益气强心中药可显著改善急性左心衰竭患者心功能,降低心力衰竭标志物水平而不明显增加并发症发生率,其疗效显著高于重组人脑利钠肽。     

茶多酚联合重组人血管内皮抑制素（恩度）对人肺腺癌A549抑制作用研究

目的观察茶多酚联合重组人血管内皮抑制素对人肺腺癌生长抑制作用，为进一步深入研究茶多酚抗肿瘤血管生成机制提供依据。方法人肺腺癌（A549）细胞系经传代培养后，移植于BALB／c-nu裸鼠，以茶多酚、重组人血管内皮抑制素（恩度）及其联合用药干预治疗，通过观察肿瘤抑制率评价单用与联合用药对A549生长抑制作用。结果茶多酚、恩度以及茶多酚联合不同剂量恩度的肿瘤抑制率分别为40．2％、35．8％、41．9％和44．2％，与模型组比较，具有统计学意义（P〈0．01）；治疗各组间比较，无统计学意义（P〉0．05）。结论荼多酚、恩度及其联合用药对A549均有明显的抑制效果；荼多酚与恩度联合使用增效作用不明显。     

炙甘草汤加味联合冻干重组人脑利钠肽治疗慢性心力衰竭68例

目的:观察炙甘草汤加味联合冻干重组人脑利钠肽治疗慢性心力衰竭的临床疗效。方法:将136例慢性心力衰竭患者按照随机数字表法分为对照组和观察组,每组各68例。对照组予以冻干重组人脑利钠肽治疗,观察组在对照组的基础上联合炙甘草汤加味治疗。比较两组患者治疗前后左心室功能[左心室舒张末期内径(left ventricle end diastolic diameter,LVEDD)、左心室收缩末期内径(left ventricular end systolic diameter,LVESD)及左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)]、血清基质金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)、人心型脂肪酸结合蛋白(human heart type fatty acid binding protein,H-FABP)水平、24 h平均心率、6分钟步行距离以及健康调查简表(short from health survey,SF-36)评分的变化情况。结果:两组患者治疗后LVEDD...