CpG-ODN2216刺激健康人外周血淋巴细胞TH1/TH2细胞因子的表达

目的 观察CpG-ODN2216对健康人外周血单个核细胞（PBMC）中TH1/TH2淋巴细胞的极化作用,以及培养上清液中TH1/TH2型细胞因子的水平.方法 取健康献血员外周血用淋巴细胞分离液分离PBMC,与CpG-ODN2216共培养24 h,流式细胞仪检测PBMC中TH1/TH2淋巴细胞的改变,ELISA法测定培养上清液中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的释放水平.结果 CpG-ODN2216能刺激淋巴细胞向TH1、Tc1转化,对TH2无明显的刺激作用.培养上清液中IFN-γ的表达水平显著增高（P＜0.01）,IL-2、IL-4和IL-10无明显改变（P＞0.05）.结论 CpG-ODN2216可以促进外周血淋巴细胞向TH1、Tc1极化,并诱导PBMC产生高水平的TH1型细胞因子IFN-γ,介导TH1型免疫应答.     

卵巢癌患者TH1／TH2型细胞因子的测定

[目的]探讨THl／TH2型细胞因子水平与卵巢癌患者发生、发展之间的关系。[方法]采用夹心酶联免疫吸附实验和逆转录PCR法,对36例卵巢癌及32例健康对照组外周血淋巴细胞中TH1／TH2型细胞因子的蛋白水平及其mRNA水平进行了测定。[结果]与健康对照组相比,卵巢癌患者外周血淋巴细胞培养上清中的IL-2、IFN-v水平显著降低,而IL-4、IL-6和IL-10则显著增高,具有统计学意义。相应的外周血淋巴细胞mRNA水平与蛋白水平相同。(结论]卵巢癌患者异常分泌的TH1／TH2型细胞因子水平与卵巢癌的发生、发展密切相关。     

流式细胞术检测TH1/TH2的方法探讨

1986年Mosm ann等[1]根据T辅助淋巴细胞(CD4 )分泌的细胞因子谱的不同,将CD4 细胞分为TH1和TH2亚群。测定TH1和TH2亚群的变化,可以了解机体的免疫状况,为临床调整TH1/TH2失衡提供正确的治疗措施。由于目前尚无区分TH1和TH2细胞的表面标志物,所以只能根据细胞亚群分泌细胞因子的不同,间接检测TH1和TH2细胞的数目和功能[2]。以往用流式细胞术(flow cytom etry,FCM)检测TH1/TH2细胞的方法主要有两种:一是用单标记法对细胞膜表面分子和胞内的细胞因子进行染色,以FCM分析通过群组信息来确定TH1/TH2细胞的表达水平[3];二是用三标…     

类风湿关节炎患者TH细胞亚群上CD137的表达变化

目的 探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血中TH1/TH2亚群细胞上CD137的表达变化特点及其临床意义.方法 应用流式细胞术检测32例RA患者及34名正常对照者外周血CD4+iFN-γ+(TH1)细胞和CD4+IL-4+(TH2)细胞上CD137的表达水平.结果 正常组中TH1+CD137+和TH2+CD137+细胞水平无明显差异;而在RA组中TH1+CD137+细胞水平明显高于TH2+CD137+水平.TH1+CD137+在RA活动组的水平明显高于稳定组和正常组(表达百分率分别为95.57±11.56、69.12±7.85和53.22±6.83,P＜0.01);而TH2+CD137+在RA稳定组的水平明显高于活动组和正常组(表达百分率分别为62.91±8.56、56.32±6.93和51.90±4.13.P＜0.01).RA活动期TH1+CD137+细胞百分率与急性期指标ESR、CRP及活动期指标Stroke指数正相关(r=0.865,P＜0.01;r=0.854,P＜0.01;r=0.103.P＜0.05);而稳定期TH2+CD137+也与RA活动期指标RF星正相关关系(r=0.306,P＜0.05).结论 RA患者外周血中TH1、TH2亚群细胞上CD137的表达存在异常.同时CD137的表达异常与RA患者不同病程和病情活动度相关.提示CD137参与了RA免疫反应的发展.尤其是在疾病的活动期,CD137有助于CD4+T细胞向TH1细胞的偏移,从而加速促炎性细胞因子IFN-γ的分泌.而在稳定期,CD137可能通过刺激体液免疫来维持免疫反应.     

体外阻断CD134对过敏性紫癜患者外周血单个核细胞TH1和TH2细胞因子表达的影响

目的探讨CD134/CD134L共刺激分子对TH1/TH2细胞因子表达的影响及在过敏性紫癜(HSP)发病机制中的可能作用。方法活动期HSP患者10例,分别采集外周静脉血,用密度梯度离心法制备新鲜外周血单个核细胞(PBMC),分成:(1)对照培养组;(2)单纯刺激组;(3)抗CD134组;(4)地塞米松(Dex)组。另选取10例健康体检者作为健康对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法分别测定培养上清液中干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)表达水平。结果 (1)在植物血凝素(PHA)刺激前,活动期HSP患者PBMC培养液上清分泌的IL-4水平明显高于健康对照组,而IFN-γ低于健康对照组;(2)在PHA刺激下,活动期HSP患者PBMC分泌的IL-4又较刺激前明显增加;(3)抗-CD134单抗可使经PHA刺激的HSP患者PBMC分泌IL-4水平显著下降,导致IFN-γ水平增高,免疫应答朝TH1方向偏离;(4)Dex能显著抑制PHA刺激的原代培养PBMC中IL-4、IFN-γ的分泌水平。结论糖皮质激素的抗炎机制具有多重性,对TH1、TH2细胞因子的作用并不均衡;抗-CD134单抗对减轻HSP患者PBMC的异常活化有一定作用。     

支气管哮喘患者外周血TH1、TH2、TH17及Treg细胞相关细胞因子的表达及意义

目的研究支气管哮喘患者T_H1、T_H2、T_H17及Treg细胞相关炎性因子的变化规律。方法采用多重蛋白定量技术(CBA法)检测支气管哮喘患者及健康对照人群血清中T_H1、T_H2、T_H17及Treg细胞相关细胞因子的蛋白质表达。结果在支气管哮喘患者血清中转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-6、IL-17A的表达水平明显高于健康对照人群,且差异有统计学意义(P0.05)。在支气管哮喘患者与健康人群血清中IL-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)的表达水平差异无统计学意义(P0.05)。结论支气管哮喘患者外周血中TGF-β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-17A的表达水平明显升高,推测存在TH1、TH2、TH17及Treg细胞的比列失衡。     

TH细胞检测研究的现状

T淋巴细胞是高度异质性的群体,根据发育过程中出现的分化抗原的不同,分为CD4^ 和CD8^ T细胞,这种分类对于区分T细胞的异质性有一定的价值。但随着对T细胞功能研究的深入,人们发现,T细胞的功能主要是由其分泌的细胞因子介导的。1986年Mosmann等根据小鼠的CD4^ T细胞克隆产生细胞因子类型的不同,将CD4^ T细胞分为TH1和TH2两种类型,随后Romagnani等人证实人体内也存在相应的TH1和TH2亚群。     

肺癌患者手术前后TH1、TH2细胞因子的变化

近几年来,Ⅰ类和Ⅱ类辅助T(TH1、TH2)细胞比例变化与肿瘤免疫的关系已越来越受到人们的重视。白细胞介素2(interleukin2,IL-2)、IFN-γ是由T辅助细胞亚群(TH1)细胞分泌的细胞因子,介导机体的细胞免疫。IL-8、IL-10是由T辅助细胞亚群(TH2)细胞分泌的细胞因子,介导机体的体液免疫     

TH17细胞及IL-17在原发性抗磷脂综合征中的表达及临床意义

目的观察T_H17细胞及相关细胞因子IL-17在原发性抗磷脂综合征(PAPS)中的表达水平,并初步探讨其临床意义。方法收集32例PAPS患者及33例健康对照者静脉血标本,分离外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术检测T_H17细胞百分率,ELISA法检测血浆IL-17的表达水平,并分析IL-17水平与PAPS患者临床病理特征及实验室指标[抗心凝脂抗体(a CL)、抗β2糖蛋白Ⅰ(β2GPⅠ)和狼疮抗凝物(LA)]的关系。结果 PAPS患者外周血T_H17细胞百分率为(1.98±0.78)%,血浆IL-17水平为(60.72±18.71)pg/m L,均显著高于健康人对照组(P均0.01),且T_H17细胞百分率与血浆IL-17水平呈正相关(r=0.586,P0.01)。PAPS患者血浆IL-17水平与患者a CL、抗β2GPⅠ抗体和LA均无明显相关性(P均0.05)。与近期(≥3月)无相关临床事件发生的PAPS患者相比,新近(≤1月)发生动脉血栓事件的患者血浆IL-17水平差异无统计学意义(P=0.074),静脉血栓和血小板减少的PAPS患者IL-17蛋白水平显著升高(P0.01)。结论 T_H17细胞及IL-17与PAPS血栓形成和血小板减少密切相关,提示T_H17细胞及IL-17参与了PAPS脉管症状的发病机制。     

强直性脊柱炎患者外周血TH细胞亚群和细胞因子的检测及其临床意义

目的探讨强直性脊柱炎(AS)患者外周血辅助性T细胞(TH)亚群和细胞因子的变化水平及其临床意义。方法用流式细胞术分析27例AS患者及30例体检健康者外周血TH1、TH2和TH17细胞亚群的比例;流式微球阵列技术(cytometric beadarray,CBA)检测血清IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF、IFN-γ和IL-17A的水平。结果 AS组TH1和TH17细胞的百分率显著高于健康人对照组(P均<0.01),而TH2细胞差异无统计学意义(P>0.05)。AS患者血清IL-2、IL-6、TNF和IFN-γ表达水平也明显高于健康人对照组(P均<0.01),但IL-4、IL-10和IL-17A无显著性差异(P均>0.05)。结论 AS患者TH细胞亚群失衡,表现为TH1和TH17细胞比例及IFN-γ、TNF、IL-2和IL-6水平升高。     

原因不明复发性流产患者血清IL-33水平与TH1、TH2、TH17及Treg细胞间的关系

目的探讨IL-33和T_H1、T_H2、T_H17及调节性T细胞(Treg细胞)在原因不明复发性流产(URSA)患者中的水平及其相关性。方法收集46例URSA患者及40例健康人对照者,流式细胞术检测外周血T_H1、T_H2、T_H17及Treg细胞比例;ELISA检测血清IL-33浓度。结果与健康人对照组相比,URSA患者血清IL-33浓度显著下降,此外,外周血T_H1和T_H17细胞比例更高,而T_H2和Treg细胞则低于健康人对照组(P0.05)。IL-33浓度与T_H1和T_H17细胞比例均显著负相关,而与T_H2细胞比例呈正相关性,但与Treg细胞间无显著相关性(P0.05)。结论 URSA患者外周血IL-33浓度显著下调,并与T_H1、T_H2和T_H17等免疫细胞比例相关,提示在URSA患者中IL-33可能与T_H1、T_H2和T_H17存在关联。     

硬性支气管镜在儿科气管及食管疾病中的应用

【目的】探讨硬性支气管镜技术在儿科气管及食管疾病诊断和治疗中的应用价值。【方法】回顾性分析湖南省儿童医院1998年9月至2012年6月6370例接受硬性支气管镜检查治疗的患儿资料。【结果】应用硬性支气管镜技术检查、治疗小儿疾病共6370例，其中男3623例（56．9％），女性2747例（43．1％）；年龄1个月至12岁，平均1．5岁。主要病因为气管或支气管异物（5475例），支气管肺炎（786例），支气管内膜结核（5例），急性喉气管支气管炎（15例），纤维素性支气管炎（12例），气管狭窄（13例），咯血（5例），食道狭窄（35例），食道异物取出（16例），气管食管瘘（3例），气管内肿瘤（3例），肺内真菌病（2例）。所有行支气管镜检患儿均接受全身麻醉。6171例一次手术成功，199例实施二次或二次以上手术。术后出现并发症363例，其中死亡病例2例。【结论】硬性支气管镜检查损伤小，方法简单，成功率高，是诊治儿童气管及食管疾病的有效方法。     

类风湿关节炎患者外周血TH17与Treg细胞的变化

目的 探讨外周血辅助性T细胞17（TH17）与调节性T细胞（Treg）在类风湿关节炎（RA）发生、发展中的变化。 方法 选取RA患者活动组25例、稳定组20例及健康人对照组25例,采用流式细胞术及定量PCR的方法,分别从蛋白质水平与mRNA水平检测其外周血CD4+T细胞IL-17及FoxP3的表达。 结果 活动组RA患者外周血CD4+T细胞IL-17蛋白质及mRNA表达水平显著高于稳定组（P<0.01）,稳定组又显著高于健康人对照组（P<0.01）。活动组RA患者外周血CD4+T细胞FoxP3蛋白质及mRNA表达水平显著低于稳定组及健康人对照组（P<0.01）,但稳定组FoxP3表达与健康人对照组差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 RA患者外周血中存在TH17/Treg细胞失衡,且这种变化与疾病的进程相关。     

双外周静脉同步换血治疗新生儿重度高胆红素血症

[目的]观察双外周静脉同步换血治疗新生儿重度高胆红素血症的疗效及对血细胞和生化指标的影响。[方法]回顾性研究2009年6月至2010年12月在本院新生儿重症监护室（NICU）行双外周静脉同步换血治疗的63例重度高胆红素血症患儿的相关指标。[结果]换血后总胆红素（TBIL）、间接胆红素（IBIL）、直接胆红素（DB）下降,差异有统计学意义（P＜0．05）,换出率分别为57．61％、56．56％和47．09％;换血后红细胞（RBC）、血红蛋白（Hb）、血细胞比容（HCT）上升,但差异无统计学意义（P＞0．05）,血小板（PLT）及WBC下降,差异有统计学意义（P＜0．05）,K＋浓度升高,差异有统计学意义（P＜0．05）,但均在正常范围,Ca2＋、血糖（BS）、pH变化不显著。[结论]双外周静脉同步换血治疗新生儿重度高胆红素血症快速、安全、有效。     

Ultrasound-Guided Carpal Tunnel Release Using Dynamic Expansion of the Transverse Safe Zone in a Patient With Postpolio Syndrome: A Case Report

The prevalence of carpal tunnel syndrome (CTS) in patients with postpolio syndrome occurs at a rate of 22%. Irrespective of those with CTS, 74% of postpolio patients weight bear through their arms for ambulation or transfers. As open carpal tunnel release is performed along the weight-bearing region of the wrist, their functional independence may be altered while recovering. This case demonstrates that ultrasound-guided carpal tunnel release was successfully performed in a patient with postpolio syndrome allowing him to immediately weight bear through his hands after the procedure so he could recover at home.

全反式维甲酸诱导小鼠碱性磷酸酶基因启动子区染色体重构

背景:碱性磷酸酶基因是成骨细胞分化和骨形成的重要标志。在C3H10T1/2细胞中,全反式维甲酸可通过核受体上调小鼠碱性磷酸酶的表达,与MAPK通路无关。目的:从染色体结构调控方面揭示全反式维甲酸上调碱性磷酸酶表达的分子机制。方法:10-6mol/L全反式维甲酸处理C3H10T1/2细胞0,1,6,12h,DNA酶Ⅰ超敏感实验确定全反式维甲酸调控区域的位置,染色质免疫共沉淀实验检验全反式维甲酸处理细胞后一系列转录相关因子与全反式维甲酸调控区域结合的量效关系以及时相分布。结果与结论:DNA聚合酶Ⅰ超敏感实验表明,小鼠碱性磷酸酶启动子转录起始位点上游约520bp附近为潜在的全反式维甲酸调控区域;染色质免疫共沉淀实验表明,全反式维甲酸对小鼠碱性磷酸酶的上调作用是通过一系列转录相关因子的时序性共同作用来实现。表明全反式维甲酸诱导小鼠碱性磷酸酶基因转录的过程中伴随着染色质重构和组蛋白的修饰作用。     

胶质瘤细胞中Th1/Th2类细胞因子漂移现象的研究

目的：研究Th1、Th2漂移与脑胶质瘤细胞的发生发展及治疗诊断中作用。方法：采用RT-PCR技术对10株脑胶质瘤细胞进行了IL-4、IL-6、IL-10和TNF-α检测。结果：在脑胶质瘤细胞株中Th2类细胞因子mRNA强势表达，IL-4、IL-5、IL-10和TNF-α的表达率分别为90％(9／10)，70％(70／10)，90％(9／10)，0％(0／10)。结论：肿瘤细胞发生明显的Th2／Tn1漂移现象，造成机体的免疫抑制，有利于肿瘤细胞的免疫逃逸。     

全血培养检测Th1/Th2细胞

目的建立全血培养刺激法检测外周血单核细胞(PBMC)Th1/Th2的方法.方法无菌抽取20名健康检体者静脉血,分别按叶氏和该法(先加入刺激剂全血培养5h后分离淋巴细胞,其余步骤按叶氏报道的免疫组化方法操作)检测Th1/Th2细胞.结果该方法与叶氏法相比,Th1/Th2阳性细胞稍高.结论该方法结果可靠,简便易行,适合临床实验室.     

眼内气体填充和硅油填充治疗增殖型糖尿病视网膜病变

[目的]探讨眼内气体填充和硅油填充治疗增殖型糖尿病视网膜病变（PDR）的疗效。[方法]回顾性分析玻璃体切割手术的PDR患者84例临床资料,气体填充患者36例（气体组）,硅油填充患者48例（硅油组）,比较两组术后恢复情况。[结果]气体组治疗后视力提高29例（80．6％）、治疗后发生白内障4例（11．1％）、玻璃体再出血4例（11．1％）、平均虹膜新生血管出现时间（6．1±2．6）个月、视网膜成功复位34例（94．4％）;硅油组治疗后视力提高29例（60．4％）、治疗后发生白内障14例（29．2％）、玻璃体再出血15例（31．3％）、平均虹膜新生血管出现时间（5．8±2．5）个月、视网膜成功复位37例（77．1％）,其中视力变化、白内障形成、玻璃体再出血、视网膜复位气体组优于硅油组（ P ＜0．05）。[结论]眼内气体填充治疗 PDR疗效满意,且安全可靠,值得临床推广应用。