低压缺氧大鼠肺外动脉胶原分布的变化

观察模拟５０００ｍ连续低压缺氧７ｄ肺动脉高压大鼠肺外动脉形态学的变化及Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维分布的变化，并观察川芎嗪、７６４－３两种中药的疗效。结果显示，低压缺氧在鼠肺外动脉以中、外膜增厚为主。苦味酸天狼星红－偏振光法观察表明肺外动脉主干事 膜浅黄色、黄色、约色Ｉ型和绿色Ⅲ型胶原纤维均增多，外膜以Ⅲ型胶原纤维增多最显著。川芎嗪治疗能部分缓解肺动脉主干和肺外分支增厚，并对主干的Ｉ、Ⅲ型胶原纤维的增加具有一     

肺动脉高压时腺泡内肺动脉壁胶原相对含量的改变

以野百合碱引起的大鼠肺动脉高压作为模型，应用免疫组化和形态定量的方法，并结合超微结构的变化，动态观察肺动脉高压时腺泡内肺动脉壁Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的改变。结果表明，在肺动脉高压发生过程中，腺泡内肺动脉壁Ⅰ、Ⅲ型胶原明显增多。其机制可能与血管平滑肌细胞发生表型变化以及平滑肌前体细胞在向平滑肌转变过程中胶原的合成分泌增多有关。     

慢性缺氧性小鼠肺血管结构重建模型的建立

建立一种新缺氧动物模型，为保健品抗缺氧实验提供新筛选方法。方法：选用初成年雄性昆明种小鼠，随机分为对照组和缺氧组。对照组动物在常压环境条件下喂养，缺氧组动物在常压缺氧舱中喂养。结果承缺氧时间延长，缺氧组ＭＡ、ＰＭＡ的比例较对照组明显增大，而ＮＭＡ的比例较对照组明显减少。     

缺氧时肺动脉平滑肌细胞血红素氧合酶/一氧化碳系统的变化及其对Ⅰ型胶原的影响

目的 :研究缺氧时大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)诱导型血红素氧合酶 (HO 1 ) /一氧化碳 (CO)系统的变化及其对胶原合成的影响 ,探讨血红素氧合酶 /一氧化碳 (HO/CO)系统对缺氧性肺血管重建中胶原代谢的作用及其机制。方法 :原代培养的大鼠PASMC ,用分光光度计检测PASMC培养液中CO相对含量的变化 ,Westernblot检测PASMCHO 1和转化生长因子 β3 (TGF β3 )表达的变化 ,用免疫细胞化学法分别观察PASMCHO 1、TGF β3 、Ⅰ型胶原蛋白表达的变化 ,原位杂交法检测Ⅰ型前胶原mRNA表达的变化。结果 :缺氧 2 4h诱导PASMC表达TGF β3 、Ⅰ型胶原蛋白和mRNA ,与对照组比较缺氧使HO 1蛋白表达增加 6 7.4 5 % (P <0 .0 1 )、CO含量增加35 .4 1 % (P <0 .0 5 )。ZnPP(HO 1抑制剂 )使缺氧 2 4h大鼠PASMC的CO含量降低 7.88% (P <0 .0 1 )、HO 1蛋白表达减少 2 3.9% (P <0 .0 5 )、TGF β3 蛋白表达增高 393% (P <0 .0 1 )、Ⅰ型胶原蛋白和mRNA表达均增加。Hemin(HO 1诱导剂 )使缺氧 2 4h大鼠PASMC的CO含量增加 8.83% (P <0 .0 1 )、HO 1表达增高 1 0 5 % (P <0 .0 5 )、TGF β3 蛋白表达降低 6 8.1 2 % (P <0 .0 1 ) ,Ⅰ型胶原蛋白和mRNA表达均减少。结论 :缺氧刺激下大鼠PASMCHO/CO系统上调 ,内源性CO能够抑制Ⅰ型胶原     

室间隔缺损合并肺动脉高压的肺血管结构重建特点

目的 探讨室间隔缺损合并肺动脉高压的肺血管结构重建,分析肺血管结构重建与血流动力学指标之间的关系。方法 电镜观察肺血管超微结构变化,测定肺小动脉中层厚度百分比。结果 肺血管改变为Ｈｅａｔｈ ＆ ＥｄｗａｒｄｓⅢ级组与Ⅰ级组之间ＰＭＴ差异有非常显著意义,〉Ⅲ级组与Ⅰ级组之间ＰＭＴ差异有显著意义,而在其他组别之间,差异无显著意义。结论室间隔缺损合并肺动脉高压肺血管结构重建过程中,肺血管的改变以肺小动脉     

急性缺氧时肺微循环的变化

于家兔右侧胸壁第4或第5肋间开窗,保留胸膜,作为观察窗。在冷光源照明下,用普通显微镜动态观察急性缺氧时肺微循环的变化。结果:肺微血管数目增多,大约缺氧30分钟后渐变模糊,50分钟后有出血。肺系数增大。     

肺动脉高压肺血管重建大鼠基质金属蛋白酶3基因表达

目的 探讨基质金属蛋白酶3（MMP－3）mRNA转录在肺动脉高压肺血管重建中的可能作用。方法 利用野百合碱（MCT）诱导的大鼠肺动脉高压埃,药右心导管介入测定大鼠肺动脉平均压,RT－PCR法检测不同时间点大鼠肺组织MMP－3mRNA表达水平以及比色法测定主肺动脉段羟脯氨酸含量。结果 实验第21d肺动脉压力已明显升高,以第28d为最高,而大鼠肺组织MMP－3mRNA表达水平以第7d最高,第14、21、28d依次逐渐下调,第21d已接近正常水平,而主肺动脉段羟脯氨酸含量第14d异常降低,以后随肺动脉压力的升高而升高。结论 MMP－3早期转录水平升高可能与肺血管基底膜降解有关,参与对肺血管重建的触发作用,实验后期转录水平下调可能是导致细胞外基质积聚的重要原因之一。     

大鼠高肺血流性肺动脉高压形成中肺血管结构的变化

目的探讨大鼠高肺血流性肺动脉高压形成中肺血管结构的动态变化规律.方法80只雄性SD大鼠,随机分为分流组和对照组,每组40只.分流组大鼠经腹主动脉-下腔静脉穿刺术建立高肺血流动物模型,对照组大鼠除不作穿刺术外,其余手术过程同分流组.两组分别在术后1、3 d及1、4、8周经右心插管法测量肺动脉收缩压(SPAP)、肺动脉平均压(MPAP);取心脏组织,称量右心室与左心室 室间隔重量之比[RV/(LV SP)];取肺组织制作光学显微镜及电子显微镜标本,在光镜下观察肺小动脉中肌型动脉(MA)、部分肌型动脉(PMA)及非肌型动脉(NMA)构成比例及MA的相对中膜厚度(RMT)和相对中膜面积(RMA)的变化,电镜下观察肺小动脉超微结构的变化.结果与对照组比较,SPAP和MPAP在分流组术后1、3 d及4周时差异无显著性,分流术后1、8周时,SPAP、MPAP均显著高于对照组(P＜0.01);分流术后8周,RV/(LV SP)显著升高(P＜0.05);与对照组比较,分流术后1、3 d及1周时MA、PMA、NMA占肺小血管总数的百分比在两组之间差异无显著性,分流术后4、8周时大鼠MA、PMA占肺小血管总数的百分比明显增高(均P＜0.01),而NMA百分比明显降低(均P＜0.01);RMT、RMA在分流术后1、3 d及1、4周与对照组比较差异无显著性;分流术后8周时明显增高(P＜0.05).肺小动脉超微结构在分流术后3 d时仅为内皮细胞肿胀、体积增大;分流术后1周时,除内皮细胞结构改变外平滑肌细胞增大、内弹力层厚薄不均;分流术后4周时平滑肌细胞与内弹力层呈垂直生长,由收缩表型向合成表型转化;分流术后8周时细胞间见胶原纤维堆积.结论肺血管结构重建呈现明显的时间依赖性,内皮细胞肿胀出现最早,平滑肌结构改变次之,最后出现细胞外基质异常堆积.     

DDPH对肺动脉高压大鼠肺血管构形重建的影响

用测右心室收缩压（ＲＶＳＰ），右心室肥大指数（ＲＶＨＩ），Ｆｅｕｇｅｎ与弹力纤维复染，图像分析等方法，观测１－（２，６－二甲苯氧基）－２－（３，４－二甲氧基乙胺基）丙烷盐酸盐（ＤＤＰＨ）对野百合碱（Ｍ）诱发大鼠肺动脉高压和肺血管构形重建的影响，结果：（１）ＤＤＰＨ对Ｍ引起大鼠ＲＶＳＰ升高的抑制作用达３８．９５％，（２）ＲＶＨＩ和肺小动脉中膜厚度，Ｍ加ＤＤＰＨ（ＭＤ）组较Ｍ组分别低３３．４９％和４７     

764-3对慢性缺氧性肺动脉高压大鼠肺血管壁胶原沉积的防治作用

目的 观察７６４－３对慢性缺氧性肺动脉高压大鼠肺血管壁胶原沉积的防治作用,并探讨其可能的作用机制。方法 将雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为１０组。缺氧大鼠置于５０．７ｋＰａ低压氧舱内２或４周。给７６４－３大鼠按２０ｍｇ／ｋｇ皮下注射,１次／ｄ,给β－氨基丙腈（ＢＡＰＮ）大鼠按１５０ｍｇ／ｋｇ腹腔注射,２次／ｄ观察终点行血流动力学、形态学生化指标测定。结果 缺氧大鼠肺外肺动脉（ＥＰＡ）羟脯氨酸（ＨＹＰ）     

不同抗炎药物对缺氧所致大鼠离体肺血管环张力变化的影响

为研究离体大鼠肺血管在缺氧时张力的变化,以及甾体、非甾体类抗炎药物对此变化影响的异同性,采用等长收缩技术,测定加入消炎痛或地塞米松前后张力改变的特点及两药作用的差异。结果发现Wistar大鼠与Sprague-Dawley大鼠肺血管环对缺氧的反应不同,后者仅出现收缩反应,而Wistar大鼠在收缩前出现一内皮依赖的舒张;COX非特异性抑制剂消炎痛对缺氧所致的舒张和收缩均有增强作用;COX-2特异性抑制剂地塞米松则在明显抑制舒张的同时轻度增强收缩反应。结果表明不同种属大鼠的肺血管缺氧反应可能存在差异;缩管性PGs和扩管性PGs分别调节急性肺血管缺氧的舒张和收缩反应,这一过程呈一定的内皮依赖性;非选择性和选择性的COX抑制剂对肺血管缺氧反应的作用不尽相同。     

缺氧与高碳酸对离体家兔脑、肺动脉生成NO及对NO反应性的影响

在缺氧和高碳酸条件下测定肺、脑动脉对乙酰胆碱（Ａｃｈ）、硝普钠（ＳＮＰ）、硝酸甘油（ＮＴＧ）的反应性（ＥＣ＿（５０）），以研究其生成一氧化氮（ＮＯ）及对ＮＯ反应的改变。结果：缺氧和高碳酸都降低肺动脉对ＳＮＰ、ＮＴＧ、Ａｃｈ的反应性，缺氧提高脑动脉对ＳＮＰ、ＮＴＧ的反应性，而高碳酸降低其对ＳＮＰ的反应性；提示缺氧可能降低肺动脉对ＮＯ的反应性并抑制Ａｃｈ诱发其内皮细胞产生ＮＯ，但提高脑动脉对ＮＯ反应性，而不影响Ａｃｈ诱导其内皮产生ＮＯ；高碳酸则抑制二者对ＮＯ的反应性，但抑制Ａｃｈ诱发肺动脉内皮产生ＮＯ而不影响Ａｃｈ诱发脑动脉内皮产生ＮＯ。     

miR-34a在低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用

【目的】观察miR-34a在低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用并探讨其可能的机制。【方法】原代分离和培养大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMC）,并给予3%低氧处理后,用Real-time PCR法检测miR-34a和Notch1mRNA在大鼠PASMC中的表达;低氧条件下用细胞转染法过表达和抑制miR-34a、沉默Notch1基因的表达后用EDU法观察细胞增殖情况,并用Real-time PCR和Western blot法检测细胞核增殖抗原PCNA的表达。【结果】分离和培养大鼠PASMC并给予3%低氧处理后,大鼠PASMC中miR-34a表达明显降低,且低氧48h降低较明显,组间差异有统计学意义（P<0.05）。而Notch1的表达明显增高,且48h增高较明显,组间差异有统计学意义（P<0.05）。此外,过表达miR-34a和沉默Notch1后会显著抑制低氧引起的细胞增殖,抑制miR-34a的表达后则会促进细胞增殖,且组间差异有统计学意义（P<0.05）。【结论】在低氧诱导的PASMC细胞增殖过程中miR-34a参与了PASMC的增殖过程,且可能是通过上调Notch1引起了细胞增殖。     

慢性缺氧对乙酰胆碱和硝普钠舒张肺动脉的抑制作用

本实验观察模拟海拔5000m连续缺氧20d和模拟海拔8000m连续缺氧4d对大鼠肺动脉内皮依赖性和非内皮依赖性舒张反应的影响。结果表明慢性缺氧显著抑制肺内和肺外动脉对乙酰胆碱和硝普纳舒张反应的敏感性和反应性。其机理很可能是由于缺氧抑制鸟苷酸环化酶,从而减低肺动脉对乙酰胆碱和硝普钠舒张反应的敏感性和反应性。     

异搏定对缺氧和缩血管物质促肺动脉平滑肌细胞增生的影响

采用~３Ｈ－ＴｄＲ掺入、结晶紫染色以及ＰＣＮＡ免疫细胞化学方法观察异搏定对缺氧和４种缩血管物质促肺动脉平滑肌细胞增生的影响。结果发现：①４种缩血管物质（ＥＴ－１、ＡＴⅡ、Ａ_（２３１７８）、ＫＣｌ）均有不同程度的促肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）ＤＮＡ合成的作用,其作用可被Ｃａ~（２＋）通道阻滞剂异搏定阻断;②缺氧所致ＰＡＳＭＣ增殖的３项指标变化同样可被异搏定阻断。表明［Ｃａ~（２＋）］ｉ升高可能为缺氧和缩血管物质引起肺血管ＳＭＣ收缩和增生的信息传递的共同途径。     

缺氧时肺腺泡内动脉中膜平滑肌细胞表型变化

观察了减压缺氧不同时间Ｗｉｓｔａｒ大鼠肺腺泡内动脉中膜平滑肌细胞（ＳＭＣ）表型情况。主要发现：（１）缺氧３～４０ｄ组，肺动脉压（ＰＡＰ）持续显著升高，右心肥厚程度逐渐加重。（２）缺氧１～５ｄ组，中膜ＳＭＣ仍为收缩表型，胞间胶原分布略有所增加；缺氧７ｄ组，于近内弹力层处少数ＳＭＣ转变为合成表型，还有些细胞向合成表型部分转化，胞间胶原增多；缺氧１４～４０ｄ组，与合成分泌功能有关细胞器及胶原分布仍较缺氧１～５ｄ组ＳＭＣ为多，少数ＳＭＣ仍呈部分合成表型，大多数ＳＭＣ又出现收缩表型的特征。提示：随缺氧时间延长，ＩＡＡ中膜ＳＭＣ表型可能存在动态变化，但与ＰＡＰ的变化不呈平行关系。原因有待探讨。     

急性缺氧对肺动脉内皮细胞血栓素合酶基因表达及PGI2、TXA2代谢产物的影响

为进一步研究PGI2和TXA2在慢性缺氧性肺动脉高压和机体对慢性缺氧习服过程中的作用,动态观察了慢性缺氧进程中肺动脉内皮细胞(PAEC)血栓素合酶(TXS)基因表达及PGI2、TXA2代谢产物的变化.结果显示常氧培养的PAEC,急性缺氧后TXS、6-酮-PGF1αTXB2均增加,以6-酮-PGF1.增加更明显,TXA2/PGI2比值降低;慢性缺氧[PO2(5.3±0.7)kPa]培养的PAEC TXS、6-酮-PGF1α、TXB2均高于同代常氧组,复氧再急性缺氧.6酮-PGF.在第2、4代减少,第6代不变,TXS、TXB2在第4代增加,第6代减少;TXA2/PGI2在第2、4代增加,第6代减少.提示在慢性缺氧的不同阶段,由急性缺氧所致TXS、6-酮-PGF1α、TXB2及TXA2/PGI2的变化不同.     

一氧化氮在慢性缺氧大鼠肺血管低反应机制中的作用

目的　探讨一氧化氮 ( NO)在慢性缺氧大鼠肺血管低反应机制中的作用。方法　采用离体肺动脉环实验。结果　 1用 L-单甲基精氨酸 ( L- NMMA)阻断 NO合成后 ,慢性缺氧鼠肺血管张力增值明显小于正常大鼠 [( 8.7±2 .4) m g vs( 18.2± 3 .1) m g,P<0 .0 5 ];而用 L- arginine促进 NO合成后 ,其张力下降值明显大于正常对照组 [( 9.6± 2 .4) m g vs( 4.8± 1.3 ) mg;P<0 .0 1];2用 L- NMMA阻断 NO的生成 ,可使正常大鼠离体肺动脉环缺氧性肺血管收缩反应 ( HPV)强度几乎减半 ;而对慢性缺氧鼠 HPV无明显变化 ;3 L- arginine可轻度增强正常鼠及慢性缺氧鼠HPV,但两者变化无显著差异。结论　 1慢性缺氧可能使肺动脉 NO生成减少 ,从而降低 NO在维持肺血管低张力中的作用 ;2急性缺氧使肺动脉 NO生成减少 ,从而介导 HPV;3慢性缺氧鼠肺动脉 NO生成减少 ,因而降低 NO在介导HPV中的作用。后者可能是慢性缺氧致离体肺动脉环 HPV钝化的一个重要机制     

慢性缺氧大鼠肺动脉蛋白激酶C表达变化的免疫组织化学研究

为了观察慢性缺氧对大鼠肺动脉蛋白激酶C（PKC）表达的影响，将24只大白鼠分为4组，每组6只：正常对照组，缺氧1周组，缺氧2周组，缺氧4周组；应用免疫组织化学技术及计算机图像分析。结果发现：缺氧组肺动脉PKC阳性杂色较对照组增强，积分吸光度值增加（P＜0．05）。提示缺氧时大鼠肺动脉PKC表达上调可能参与慢性缺氧性肺动脉高压的发病过程。