秋水仙碱对胶质瘤细胞抑制作用的体外实验研究

目的 研究秋水仙碱对G422胶质瘤细胞生长增殖的抑制作用.方法 传代培养G422胶质瘤细胞,将其分为对照组、秋水仙碱处理组同时进行实验,秋水仙碱处理组的药物浓度分别为2、4、8、16μg/mL.分别在1、2、3d用MTT法测定肿瘤生存率.结果 秋水仙碱能明显抑制G422胶质瘤细胞的生长,而且随着秋水仙碱的浓度增大及时间延长,肿瘤细胞的生存率也降低.秋水仙碱的浓度在64μg/mL,作用3d时,肿瘤细胞的生存率仅(16.97±1.32%.结论 秋水仙碱对G422胶质瘤细胞的生长增值有明显的抑制作用,并表现为浓度和时间依赖性.     

丹参酮ⅡA磺酸钠对大剂量电离辐射小鼠生存率的影响

目的探讨丹参酮ⅡA磺酸钠（STS）对大剂量电离辐射小鼠生存率的影响。方法小鼠一次性接受11Gy的60Co照射,分为生理盐水对照组和50 mg/kg、75 mg/kg和100 mg/kg3个STS剂量组,于照射前1 h和照射后0.5 h和24 h腹腔注射生理盐水或STS。结果照射后小鼠停止生长,照射后第7天75 mg/kg组小鼠体质量（20.3±2.2 g）显著高于对照组（17.6±1.8 g）（P〈0.05）。小鼠的存活天数随STS注射剂量的增加依次为（9.5±1.5）d、（10.1±1.1）d、（10.5±1.2）d和（11.5±1.0）d。生存曲线分析显示,100 mg/kg组小鼠的生存率显著高于对照组和50 mg/kg组（均P〈0.01）。结论 100 mg/kg STS注射后明显提高了大剂量电离辐射暴露后小鼠的生存质量和生存率。     

热休克蛋白70肿瘤多肽复合物抗胶质瘤免疫效应的研究

目的探讨从小鼠胶质瘤组织中提取的热休克蛋白70肿瘤肽复合物(HSP70-PC)及其抗胶质瘤免疫保护效应.方法自小鼠胶质母细胞瘤G422肿瘤组织提取HSP70-PC,小鼠分别以HSP70-PC(10μg/只)、细胞裂解液(10μg/只)免疫后分别在其颅内和皮下接种肿瘤,比较颅内荷瘤组与未免疫组的成瘤率及生存时间;皮下荷瘤组与未免疫组的成瘤率、肿瘤重量,并应用流式细胞仪技术测定小鼠心腔血中淋巴细胞百分比、CD3 CD8 和CD3 CD4 T淋巴细胞的百分比.结果颅内荷瘤组小鼠成瘤率为100%、100%、83.3%,平均生存期为(16.00±0.58)d、(18.70±1.33)d、(25.33±1.86)d;皮下荷瘤组小鼠成瘤率为100%、100%、33.3%,肿瘤重量为(6.00±1.67)g,(2.30±1.23)g,(0.12±0.20)g,流式细胞仪检测小鼠淋巴细胞群为(32.65±9.06)%、(51.30±7.72)%、(67.42±6)%;CD3 CD8 T淋巴细胞为(4.30±1.97)%、(7.06±2.20)%、(11.75±3.57)%;CD3 CD4 T淋巴细胞为(14.28±6.75)%、(17.17±5.04)%、(22.5±5.18)%.结论热休克蛋白70肿瘤肽复合物可诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应,延长小鼠生存期,具有明显的抗胶质瘤免疫保护作用.     

T细胞疫苗诱导异种胰岛移植免疫耐受的实验研究

目的体外制备供体特异性T细胞疫苗（T cell vaccine）,探讨T细胞疫苗免疫（T cell vaccination）诱导异种胰岛细胞移植免疫耐受的作用。方法腹腔注射链脲佐菌素诱导建立Balb／c小鼠Ⅰ型糖尿病模型,用酶消化法和密度梯度离心法无菌分离纯化Wistar大鼠胰岛细胞。制备Balb／c小鼠针对Wistar大鼠的T细胞疫苗：实验随机分为三组,G1：糖尿病小鼠对照组;G2：胰岛细胞移植组,糖尿病小鼠＋胰岛细胞移植＋1640培养液（对照组）;G3：胰岛细胞移植加T细胞疫苗免疫组,糖尿病小鼠＋胰岛细胞＋T细胞疫苗（实验组）,于d1,d7,d14,d21实验组Balb／c小鼠接种TCV（1×107／mL）,对照组用1640替代。接种前和每次接种后第5d分别进行混合淋巴细胞反应。胰岛细胞移植：将Wistar大鼠的胰岛按1200。1500IEQ／kg经肝门静脉导入小鼠体内,移植后观测血糖和体重变化。结果异种胰岛细胞移植可以诱导I型糖尿病小鼠血糖降至正常水平且维持一段时间,对照组小鼠移植后（5．12±1．36）d即发生排斥,实验组移植物存活时间达（20．25±3．45）d。结论TCV能够有效延长异种胰岛移植物的存活时间,是一种潜在诱导异种胰岛移植免疫耐受的方法。     

硫代乙酰胺致小鼠肝性脑病模型的建立及评估

目的：探讨应用硫代乙酰胺（TAA）和C57/BL6小鼠制备肝性脑病模型的方法。方法100只小鼠分成4组,对照组（A组）、实验组B、C、D组,每组25只,分别予生理盐水和TAA 100、200、300 mg/（kg·d）腹腔内注射。注射药物后每24小时通过旷场实验、ROTA ROD实验及神经功能学评分检测神经功能,观察肝组织病理变化。结果旷场试验中,与对照组相比,从造模第1天开始,各实验组小鼠均出现运动总路程和总时间明显下降（P 〈0.05）,而各实验组之间无明显差异。 ROTA ROD实验中,与对照组相比,造模第3天实验D组小鼠运动时间明显下降（P =0.036）;第4天,各实验组小鼠均明显下降（P =0.000）,而实验组内无明显差异。造模第4天,实验C、D组小鼠神经功能学评分平均值分别为6.3和5.1分,与对照组比较,差异有统计学意义（P 〈0.05）。造模第4天实验B、C、D 3组小鼠的累积生存率分别为71.4%、71.4%和42.9%。3组实验组小鼠肝组织病理改变均符合急性肝衰竭改变。结论 C57/BL6小鼠采用TAA可成功制备肝性脑病动物模型,200 mg/（kg＆#183;d）TAA腹腔注射,连续4 d,为推荐方法。     

沙利度胺抑制小鼠T淋巴瘤的实验研究

目的观察沙利度胺对小鼠T淋巴瘤的抑制作用。方法 32只BALB/C小鼠皮下接种鼠T淋巴瘤白血病细胞（EL-4细胞）建立模型,第2天随机分成4组,每组8只：①阴性对照组：小鼠8只,生理盐水灌胃25 mL/（kg.d）;②低剂量组：小鼠8只,沙利度胺灌胃50 mg/（kg.d）共14 d;③中剂量组：小鼠8只,沙利度胺灌胃200 mg/（kg.d）共14 d;④高剂量组：小鼠8只,沙利度胺灌胃400 mg/（kg.d）共14 d。每2日测肿瘤直径,计算体积,用药后15 d处死小鼠,分离肿瘤,计算抑瘤率。第2批小鼠同样方法处理,记录平均生存期。用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡指数。RT-PCR法测TNF-αmRNA表达。结果各组瘤重较阴性对照组减小,抑瘤率分别为17.75%,36.73%,42.04%,差异有统计学意义（P〈0.05）。各组生存期与阴性对照组相比延长,差异有统计学意义（P〈0.05）。沙利度胺各组肿瘤坏死因子表达下调,凋亡细胞增多,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论沙利度胺能抑制小鼠T淋巴瘤生长,延长荷瘤小鼠平均生存期,而抑制TNF-α的表达,诱导凋亡可能是其机制之一。     

利血平致肝郁脾虚动物模型的探讨

目的：观察利血平致肝郁脾虚模型鼠（包括大、小鼠）的行为学表现,选择该法制备肝郁脾虚模型的合适鼠种。方法：大、小鼠各20只,随机分为实验组和对照组,实验组小鼠0.1 mg/kg利血平皮下注射,1次/d,连续14 d;实验组大鼠4mg/kg利血平腹腔注射,1次/d,连续2 d。对照组注射等量生理盐水。结果：与对照组比较,实验组大、小鼠体重、摄食量、自主活动、胸腺指数、脾脏指数均降低,蔗糖水偏爱度上升,强迫游泳不动时间延长（P〈0.05,P〈0.01）。结论：大鼠情绪反应敏感,可在较短时间复制成肝郁脾虚证模型,是研究肝郁脾虚证模型适宜的实验动物。     

胚胎干细胞治疗博来霉素诱导的小鼠肺纤维化的研究

 目的 研究静脉注射胚胎干细胞（ESC）对肺纤维化小鼠的治疗作用。方法 气管内滴注博来霉素8.5mg/kg制作C57/BL6雌性小鼠的肺纤维化模型。治疗组(n=20)静脉注射S8小鼠ESC，对照组(n=10)注射生理盐水。治疗组又分为单次治疗(n=10)和重复治疗(n=10)，两者均在造模后1h静脉注射ESC，重复治疗组在造模后3d再次静脉注射ESC。记录小鼠的生存时间，测定小鼠肺组织的羟脯氨酸含量，肺脏病理学观察炎症状态。利用秩和检验统计3组小鼠生存时间，方差分析3组小鼠肺羟脯氨酸含量的差异。结果 接受干细胞治疗后，肺纤维化模型小鼠的生存时间(d)延长，重复治疗组更加明显（对照组、单次治疗组、重复治疗组分别为7.8±2.8、8.4±3.8、13.5±5.6，P<0.01）；肺羟脯氨酸含量(μg/mL)降低 [对照组、单次治疗组、重复治疗组分别为（8.59±1.14）、（8.23±1.09）、（5.51±0.39），P<0.01）]；肺脏病理检查显示肺组织炎症程度降低，结构破坏减轻。结论 静脉注射胚胎干细胞可以减轻博来霉素诱导的小鼠肺部炎症和肺纤维化，延长肺纤维化小鼠的生存时间。     

白花丹醌对白血病小鼠生存期的影响

目的 探讨白花丹醌对白血病小鼠生存期的影响,为临床应用提供实验依据.方法 采用急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4、尾静脉接种非肥胖型糖尿病/重症联合免疫缺陷(NOD/SCID)小鼠建立急性白血病模型.腹腔给予白花丹醌2 mg/kg/d共7d,观察小鼠的生存期.结果 治疗组小鼠的生存期为(33.96±5.18)d,比对照组(27.55±4.01)d明显延长,差异有统计学意义(P＜0.01);白花丹醌治疗过程中无明显的毒副作用.结论 白花丹醌能在NOD/SCID小鼠体内起到抗白血病,延长生存期的作用.     

氨磷汀对抗百草枯急性中毒的初步研究

目的 探讨氨磷汀对抗百草枯急性中毒的作用.方法 NIH小鼠经口染毒百草枯200 mg/kg,于染毒后0、15、30、45、60、75、90、105 min和7 h分次腹腔注射20 mg/kg的氨磷汀,第2、3天(d2～d3)再每12 h一次腹腔注射氨磷汀20mg/kg,共给药13次,累计剂量260mg/kg;对照组同样注射等容量生理盐水.结果 氨磷汀组小鼠平均存活时间为(74.5±23.6)h,较生理盐水组(53.1±26.0)h明显延长(t=3.497,P=0.001<0.01).Kaplan-Meier生存曲线分析也显示2组小鼠的存活时间具有显著性差异(P=0.003<0.01).结论 氨磷汀可延长百草枯急性中毒小鼠的存活时间.     

血清胰岛素样生长因子-Ⅰ水平对癌性恶病质的影响

目的 通过癌性恶病质动物模型探讨血清中胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）水平在癌性恶病质中的作用。方法 将小鼠结肠腺癌26细胞悬液接种于肝脏特异性IGF-Ⅰ基因缺失（LID）组鼠和对照组鼠皮下，各30只接受了肿瘤细胞接种。接种后监测两组小鼠的一般情况、体重和皮下肿瘤大小以及自然生存时间。结果 LID鼠和对照鼠进入恶病质的时间分别为（14．6±1．3）d、（24．1±2．5）d；生存时间分别为（19．3±1．3）d、（31．9±2．7）d，两者差异有极显著性意义（P〈0．01）。结论血清中低水平的IGF-Ⅰ虽然可以延缓肿瘤的生长，但是却促进了癌性恶病质的发生和发展。     

17a α-D-高炔雌二醇-3-乙酯联合放、化疗抗肿瘤作用的研究

目的 观察17a α-D-高炔雌二醇-3-乙酯（DHEA）联合放、化疗对EC109食管癌移植小鼠的抑制作用及放化疗对荷瘤小鼠造血系统的防护作用.方法 每只小鼠右侧腋窝下接种0.1 mL EC109细胞悬液,接种当天计为第1天.在接种后3d,将30只接种EC109的裸鼠随机分为对照组、照射组、5-Fu组（25 mg/kg）、DHEA组、DHEA联合照射组、DHEA联合5-Fu组,每组5只.DHEA按照7.5 mg/kg剂量腹腔注射给药,0.2 mL/只,1次/d,连续9d共给药9次.分别于第4天和第8天对照射组及DHEA联合照射组小鼠的肿瘤进行2 Gy局部照射.5-Fu按照25 mg/kg的剂量进行腹腔注射,0.2 mL/只,隔日1次,共给药4次.12d后分别检测肿瘤抑制率、外周血细胞数、骨髓有核细胞数等指标.结果 DHEA、DHEA联合照射组及DHEA联合化疗组瘤重均显著低于对照组[（0.34±0.02）g、（0.30±0.02）g、（0.23±0.02）g比（0.90±0.02）g,P＜0.01],DHEA联合照射组瘤重低于单照组[（0.30±0.02）g比（0.70±0.03）g,P＜0.05）].DHEA、DHEA联合照射及DHEA联合化疗组单个核细胞数均高于照射组[（18.3±1.7）×106、（19.3±0.5）×106、（19.2±2.0）×106比（9.4±2.4）×106,P＜ 0.05].结论 DHEA联合照射或化疗对食管癌移植小鼠具有较好的协同抗瘤效果,DHEA对照射和化疗后荷瘤小鼠造血系统具有一定的防护作用.     

硼替佐米对U87胶质瘤放射增敏及细胞周期分布的影响

目的探讨硼替佐米(bortezomib,BTZ)对放射治疗U87胶质瘤裸鼠移植瘤的增敏作用和细胞周期分布的影响。方法建立裸鼠U87胶质瘤模型。造模成功的裸鼠随机分为4组:空白组(C)、照射组(RT)、硼替佐米组(BTZ)和联合组(BTZ+RT),裸鼠经8 MeV-β线照射治疗,联合组在照射基础上分别经腹腔注射BTZ,剥离瘤组织,称量计算抑瘤率,测定细胞周期分布、肿瘤生长延迟时间(TGD)、放射增敏比(SER),并比较各组裸鼠平均生存时间。结果 BTZ+RT组抑瘤率为46.5%,优于RT组的31.5%(F=25.6,P<0.01);BTZ+RT组生长延迟时间(TGD)长于RT组(59 d vs 38 d,P<0.01),BTZ+RT使单独放疗的敏感性提高1.44倍;RT联合应用BTZ后,G0/G1期细胞比例下降(79.9%vs 66.0%,P<0.01),G2/M期细胞比例显著提高(3.2%vs 16.4%,P<0.01);BTZ联合RT对小鼠生存时间也有较大改善。结论BTZ对放射治疗U87胶质瘤具有明显的增敏效应,能够有效逆转放射所致细胞G0/G1期进程阻滞,提高G2/M期细胞比例,延长带瘤小鼠生存时间。     

苯乙酸对大鼠胶质瘤C6细胞凋亡的影响

目的观察苯乙酸（Phenylacetate,PA）对大鼠胶质瘤C6细胞凋亡的影响。方法建立胶质瘤大鼠动物模型20个,其中治疗组10个给予腹腔注射PA治疗,对照组10个给予生理盐水注射,分别观察至濒死期获取标本,HE染色,TUNEL检测细胞凋亡。结果治疗组大鼠平均生存时间（31.3±3.1）d比对照组平均生存时间（23.4±3.8）d增加,TUNEL检测治疗组细胞凋亡率（27.1±2.6）%比对照组凋亡率（1.8±0.3）%增加。结论在体内PA能够抑制肿瘤生长,诱导胶质瘤C6细胞凋亡。     

磁共振弥散张量成像技术在高级别胶质瘤导航术中的应用价值

目的探讨磁共振弥散张量成像技术在高级别胶质瘤导航术中的应用价值。方法2009年10月～2013年10月在汕头大学医学院第一附属医院住院治疗的27例高级别胶质瘤患者,术前均行常规的MR和磁共振弥散张量成像（DTI）技术检查,并对患者行显微外科手术治疗,皮层切口根据术前DTI显示的肿瘤与功能传导束的关系,选择避开传导束的脑沟进行。观察患者不同病变部位DTI的平均弥散系数（MD）值、部分各向异性指数（FA）值及肿瘤全切除率及患者的生存时间。结果27例高级别胶质瘤患者肿瘤病灶区、灶周水肿区及正常白质区的MD值分别为（1．260±0．268）×10^-9、（1．129±0．143）×10^-9、（0．830±0．091）×10^-9mm^2／s,与正常白质区的MD值比较,肿瘤病灶区、灶周水肿区均升高,差异均有统计学意义（P〈0．05）;27例高级别胶质瘤患者肿瘤病灶区、灶周水肿区及正常白质区的FA值分别为（0．177±0．026）、（0．221±0．034）、（0．401±0．047）,3个不同部位两两比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。27例患者全切25例,近全切除2例,全切除率为92．6％（25,27）。术后患者临床症状改善不明显。27例患者中位生存时间为10．0个月。结论DTI能很好地显示白质纤维的走行,可区分高级别胶质瘤患者肿瘤病灶区、灶周水肿区及正常白质区,为术者提供合理的手术入路,为术中精确的影像导航提供充分的保证,使术者在不损伤脑功能结构的前提下尽可能的切除肿瘤组织,延长患者的生存期。     

放化疗对IRM-2小鼠不同肿瘤模型治疗作用的研究

目的观察IRM-2小鼠的肿瘤易感性,探讨放化疗对IRM-2小鼠不同肿瘤模型的抑制作用。方法利用120只IRM-2近交系小鼠,分别接种肺腺癌(LA795)、宫颈癌(U14)、黑色素瘤(B16)、肝癌(HepA)细胞,造模24 h后,将荷瘤鼠随机分为对照组、照射组、环磷酰胺组,每组各10只。照射组于第4天开始进行1 Gy全身照射,每日1次,连续5 d,共照射5次。环磷酰胺组(25 mg/kg)腹腔注射隔日1次,0.2 mL/只,共4次。对照组注射相同体积生理盐水。小鼠于第12天处死,解剖瘤块、胸腺和脾脏称重,骨髓有核细胞计数,计算抑瘤率、胸腺及脾重指数。结果①IRM-2小鼠皮下移植4种肿瘤的成瘤率均为100%。②环磷酰胺组、照射组LA795的抑瘤率分别为(31.8±27.3)%、(68.2±18.2)%,差异有高度统计学意义(P<0.01)。环磷酰胺组、照射组瘤重[(0.07±0.04)、(0.15±0.06)g]均低于对照组[(0.22±0.15)g],差异有统计学意义(P<0.05);环磷酰胺组瘤重低于照射组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。③环磷酰胺组、照射组U14的抑瘤率分别为(37.3±3.5)%、(70.8±8.2)%,差异有统计学意义(P<0.05)。环磷酰胺组瘤重[(0.50±0.14)g]低于对照组[(1.71±0.60)g]及照射组[(1.14±0.06)g],差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。④环磷酰胺组、照射组对黑色素瘤B16的抑瘤率分别为(17.7±15.8)%、(63.6±15.9)%,差异有高度统计学意义(P<0.01)。环磷酰胺组脾重指数、瘤重与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);环磷酰胺组瘤重[(0.72±0.31)g]低于照射组[(1.63±0.51)g],差异有高度统计学意义(P<0.01)。⑤环磷酰胺组、照射组对肝癌HepA的抑瘤率分别为(31.5±21.7)%、(69.6±25.0)%,差异有高度统计学意义(P<0.01)。环磷酰胺组、照射组瘤重[(0.28±0.23)、(0.63±0.20)g]均低于对照组[(0.92±0.16)g],差异均有高度统计学意义(P<0.01);环磷酰胺组瘤重低于照射组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论 IRM-2近交系小鼠对肺腺癌、宫颈癌、黑色素和肝癌均能有效接种,放疗对接种肿瘤有一定杀伤作用,环磷酰胺能有效抑制IRM-2小鼠肿瘤的生长,疗效更佳。     

雷帕霉素对符合米兰标准的肝细胞癌肝移植患者生存的影响

目的探讨雷帕霉素对符合米兰标准的肝细胞癌（HCC）肝移植患者生存的影响。方法回顾性分析2004年11月至2012年1月北京佑安医院移植中心收治的90例符合米兰标准的HCC肝移植患者的临床资料。按患者是否加用雷帕霉素分为两组。对照组45例,初始免疫抑制方案为：他克莫司（FK506）＋吗替麦考酚酯（MMF）＋甲泼尼龙（Pred）;维持期免疫抑制方案为：FK506＋/-MMF。雷帕霉素组45例,初始免疫抑制方案同对照组;维持期免疫抑制方案为：FK506＋雷帕霉素。比较两组患者术后生存时间、生存率、无瘤生存率和肿瘤复发率。结果至随访结束时,对照组45例,死亡11例,其中因肿瘤复发死亡9例;雷帕霉素组45例,死亡4例,其中因肿瘤复发死亡2例。对照组术后平均生存时间（72.6±5.8）月,明显低于雷帕霉素组[（84.0±4.0）月,差异有统计学意义（P〈0.05）。对照组和雷帕霉素组术后1、2、3、5年的生存率分别为86.5%和97.8%（P=0.11）,76.5%和97.8%（P〈0.05）,73.6%和91.2%（P=0.06）,73.6%和87.0%（P=0.20）;术后1、2、3、5年的无瘤生存率分别为81.6%和97.7%（P〈0.05）,73.7%和97.7%（P〈0.05）,73.7%和88.1%（P=0.15）,73.7%和88.1%（P=0.15）;术后1、2、3、5年的肿瘤复发率分别为13.3%和2.2%（P=0.11）,18.6%和2.2%（P〈0.05）,21.6%和2.2%（P〈0.05）,21.6%和6.8%（P=0.06）。结论雷帕霉素能够显著提高符合米兰标准的HCC患者肝转移术后生存时间,降低肿瘤复发率并提高其术后生存率。     

党参粗多糖抗S180腹水瘤小鼠肿瘤的初步研究

目的：观察党参粗多糖的急性毒性及体内抗肿瘤活性。方法：观察供试小鼠以党参粗多糖最大浓度0.5 g/mL（20 g/kg）每日3次灌胃给药的生存情况;研究党参粗多糖0.5 g/（kg.d）,1 g/（kg.d）和2 g/（kg.d）三个剂量对接种S180腹水瘤小鼠存活时间的影响。结果：供试小鼠以党参多糖最大浓度0.5 g/mL（20 g/kg）每日3次灌胃给药,对小鼠的体重、活动情况、进食量、外表体征等均无不良影响,给药后7 d,小鼠全部健康存活;对腹腔荷S180腹水瘤细胞小鼠灌胃1 g/（kg.d）党参多糖的生命延长率为34.29%。结论：党参多糖具有一定的抗肿瘤作用。