核糖体蛋白及其在疾病中的作用

核糖体蛋白（RP）是核糖体的重要组成部分,在核糖体生物合成和蛋白质翻译中起关键作用。除此之外,核糖体蛋白还具有许多核糖体外功能,如调控基因表达、细胞增殖、分化、凋亡、DNA修复和其他多种细胞过程。RP的功能紊乱与包括血液、代谢、心血管疾病以及肿瘤在内的多种疾病的发生、发展密切相关,是多种疾病潜在的治疗靶点。本文将对RP的研究进展,包括RP的基本功能、核糖体外特性以及与人类疾病的联系进行综述,并探讨其作为生物标记物及在疾病治疗中的潜力。     

核糖体展示小分子抗体的研究进展

核糖体展示技术是由Plückthun实验室[1]在多聚核糖体展示技术[2]的基础上改进而来的一种利用功能性蛋白相互作用进行筛选的新技术,它将正确折叠的蛋白及其mRNA同时结合在核糖体上,形成mRNA-核糖体-蛋白质三聚体,使目的蛋白的基因型和表型联系起来,可用于抗体及蛋白质文库选择、蛋白质体外改造等。运用此技术已成功筛选到一些与靶分子特异结合的高亲和力蛋白质,包括抗体、多肽、酶等,是蛋白质筛选的重要工具。1核糖体展示技术的基本原理及特点核糖体展示技术通过聚合酶链反应(PCR)扩增DNA文库,同时引入T7启动子、核糖体结合位点及茎-…     

核糖体蛋白S3a在肿瘤细胞增殖分化和凋亡调控作用的研究概况

目的综述核糖体蛋白S3a在肿瘤细胞增殖分化和凋亡调控作用的研究进展。方法参阅近几年国内外相关文献,对核糖体蛋白S3a的结构、功能及其异常表达对肿瘤细胞增殖分化和凋亡的调控等方面的进展进行归纳总结。结果与结论核糖体蛋白S3a除了在蛋白质合成中起重要作用外,还有独特的核糖体外功能。其在多种肿瘤细胞中高表达,通过调控癌基因和抑癌基因的表达可影响肿瘤细胞的增殖分化与凋亡。     

电离辐照损伤对小鼠脾脏组织核糖体信号通路的影响

目的从比较蛋白质组学的角度,分析电离辐照损伤组小鼠与正常组小鼠脾脏组织差异蛋白质的表达情况,对差异蛋白所涉及的信号通路进行分析,从而阐明电离辐照对小鼠脾脏组织的损伤机制。方法采用5 Gy ~(60)Coγ射线照射小鼠,构建小鼠电离辐照损伤模型,提取电离辐照组小鼠和正常组小鼠的脾脏组织,利用ITRAQ联合LC-MS/MS技术,筛选出两组小鼠脾脏组织的差异蛋白质。结果 KEGG Pathway富集分析共鉴定到17条生物信号通路(P <0. 05),其中富集在核糖体信号通路的差异蛋白质有37个,其中有36个差异蛋白质表达下调,1个差异蛋白质表达上调。这些通路涉及核糖体蛋白、60S核糖体蛋白、40S核糖体蛋白等的多个亚基蛋白,这些蛋白主要参与蛋白质的翻译及核糖体的结构组成等生物过程。结论电离辐照导致小鼠脾脏组织核糖体信号通路所涉及的37个差异蛋白中,有36个差异蛋白表达下调,1个差异蛋白表达上调,导致脾脏组织蛋白质合成障碍是电离辐照损伤的重要机制。     

麻疯树核糖体失活蛋白抗肿瘤作用

目的：研究麻疯树核糖体失活蛋白的抗肿瘤作用。方法：抗肿瘤活性、N-糖苷酶活性和蛋白合成抑制活性分别用MTT法、苯胺裂解法和兔网织红细胞系统测定;用计算机软件分析比较麻疯树核糖体失活蛋白N-糖苷酶的活性结构域。结果：麻疯树核糖体失活蛋白具有抑制胃癌细胞（SGC-7901）,小鼠骨髓瘤细胞（Sp2/0),人肝癌细胞体外增殖的能力,其IC50值分别为0.23(0.15-0.32)mg/L,0.66(0.35-0.97)mg/L和3.16（2.74-3.58)mg/L,但对Hela细胞和正常细胞（MRC）无抑制作用。结论：麻疯树核糖体失活蛋白具有较强的抗肿瘤活性,其作用机制与其具有的N-糖苷酶活性相关。     

非核糖体肽合成酶结构研究进展

非核糖体肽合成酶(nonribosomal peptide synthetases,NRPS)是一类多功能蛋白质复合体,能识别、激活、转运氨基酸底物并按特定顺序合成非核糖体肽(NRPS)。NRPS构成天然生物活性产物的一大类,是细菌和霉菌等的次级代谢产物,具有结构多样性和重要的药用价值。目前发现的NRPS在微生物体内可能作为抗生素、铁载体、毒素、含氮物质的储存场所及调节生长等的信号分子等发挥各种功能[1],而其医药方面的开发应用主要集中于抗生素(如达托霉素)、抗癌药物(如博来     

苦瓜籽核糖体失活蛋白的分离纯化及抗氧化活性的研究

目的改进苦瓜籽核糖体失活蛋白的提取工艺 ,并对其抗氧化活性进行研究。方法苦瓜籽经粉碎 ,50mmol/L乙酸抽提 ,硫酸铵沉淀 ,经阳离子交换及凝胶柱色谱等步骤进一步纯化后 ,测定所得两种核糖体失活蛋白的理化性质。结果纯化后得到一种分子量为 2 9.6kD的蛋白质和一种小分子量蛋白质 ,两者在无细胞系统中抑制50 %蛋白质合成浓度分别为 4 .3× 1 0 - 6 、1 .4× 1 0 - 6 mol/L ,含糖量分别为 4 .83 %、1 .82 % ,类超氧化物歧化酶 (SOD)活性分别为 79.0 5、1 7.2 5u/mg。阳性对照纯品SOD活性为 1 2 67u/mg。结论从苦瓜籽中分离纯化出两种不同分子量的核糖体失活蛋白均为糖蛋白质 ,且具有一定的抗氧化活性     

核糖体失活蛋白抗血液病肿瘤的研究

核糖体失活蛋白是广泛存在于高等植物中能抑制核糖体翻译功能的一类毒蛋白。它能够对哺乳动物拔糖体大亚基上的28SrRNA进行脱嘌呤作用。从而破坏技糖体的结构。抑制蛋白质的生物合成。本文就核糖体失活蛋白的生物学活性以及近年来在抗血液病肿瘤方面的研究进展做一综述。     

酸性核糖体磷酸化蛋白PO的研究进展

原核生物和真核生物的核糖体大亚基上都存在着一类与蛋白质翻译密切相关的酸性核糖体磷酸化蛋白。在真核生物它们是酸性核糖体磷酸化蛋白P0,P1,P2（acidic ribosomal phosphoproteins PO。P1andP2）,而在原核生物如Escheriehiacoli体内,它们分别为LIO和L7／L12蛋白．其中与P0蛋白相对应的蛋白为LIO,与P1、P2蛋白相对应的蛋白为L7／L12。原核生物和真核生物的酸性核糖体磷酸化蛋白在结构和功能上具有高度的同源性,所不同的是在原核生物,L7／L12蛋白是由同一基因编码的,     

非核糖体肽类化合物的组合生物合成策略研究进展

很多微生物能够利用非核糖体肽合酶合成结构复杂、种类繁多、生物活性多样的小分子肽类化合物.组合生物合成是对控制抗生素生物合成的基因簇进行阻断、置换、重组或异源表达等遗传操作,从而达到利用生物技术和环境友好的手段构建化合物衍生物库的目的.组合生物合成在增加天然活性化合物的数量,改良天然化合物的生物学活性,提高天然化合物的产量,开发创新药物和酶制剂等领域都具有重要应用价值.近年来,非核糖体肽的组合生物合成研究取得了重要进展.本文就非核糖体肽合酶的组合生物合成研究策略,从模块定点突变、替换、插入、删除、模块“洗牌”与异源表达等角度进行了综述.     

程序性核糖体移码与抗病毒药物筛选

程序性核糖体移码是一种蛋白质翻译调节机制,主要出现在病毒中,用来调节酶和结构蛋白的产生。如果病毒的移码效率被改变,就会引起病毒的死亡或数量下降。根据病毒这一特点,把它作为芗作用的靶位应用到抗病毒药物的研究领域具有良好的前景。     

应用核糖体展示技术高效筛选人源抗IgE单链抗体

本研究从哮喘患者外周血分离淋巴细胞、提取总mRNA,采用RT-PCR技术分别构建重链可变区VH(variable region of heavy chain)和轻链可变区VL(variable region of light chain)cDNA库,然后通过连接肽(Gly4Ser)3和特定引物将VH和VL cDNA基因组装成人源单链抗体(scFv)核糖体展示模板基因库。应用兔网织红细胞核糖体展示技术,单引物原位反转录技术,经3轮展示富集并回收针对人源IgE蛋白(免疫球蛋白E)的目的单链抗体基因;回收的抗体基因经双酶切后与pET22b(+)载体连接,转化至E.coli Rosseta(DE3)宿主细胞,应用菌落PCR结合Dot blotting技术快速鉴定阳性克隆,抗原ELISA法进一步鉴定阳性克隆。VH和VL基因库得到正确的构建,长度分别为400和710 bp,库容为1013。核糖体展示模板构建正确,长度为1 100 bp。该基因库经过3轮针对IgE蛋白的核糖体展示,目的基因得到了有效富集和回收。经过高效克隆、表达和鉴定,确定1株针对人IgE蛋白显示最强亲和力的阳性克隆菌pET-IgE-6。经测序和序列分析证实该单链抗体为人源抗体,序列未见国内外报道。结果表明,采用患者外周血构建人源抗体基因库,结合核糖体展示技术,可以成功获得高亲和力的人源单链抗体分子。该技术路线为快速获得具有药用价值的人源抗体提供了参考。     

天花粉蛋白的核糖体灭活活体部位

目的：天花粉蛋白核糖体灭活活性部位的定位。方法：羟胺特异裂解天花粉蛋白唯一Ａｓｎ－Ｇｌｙ肽键。制备性凝胶电泳获ＨＡＴｆ１和ＨＡＴｆ２二片段。免疫印迹确定天花粉蛋白上不同表位并筛选抗体。兔网织红无细胞系统测定天花粉蛋白及片段对蛋白合成的抑制活性。结果：ＨＡＴｆ１和ＨＡＴｆ２纯度各达９６．６％和８０．５％。ＨＡＴｆ１和ＨＡＴｆ２纯度各达９６．６％和８０．５％。ＨＡＴｆ１保留完整天花粉蛋白的抑制活性。第     

细胞凋亡过程中核糖体蛋白质S3a水平变化的研究(一)——应用GST基因融合蛋白系统制备核糖体蛋白质S3a(RPS3a)

目的应用GST基因融合蛋白系统制备核糖体蛋白质S3a(RPS3a)。方法将S3acDNA序列插入到pGEX-4T-2质粒中,制备GST/S3a融合蛋白及其抗体。结果S3acDNA序列在XhoI位点上插入到pGEX-4T-2质粒中,形成重组的pGEX-4T-2/S3a质粒。结论pGEX-4T-2质粒编码GST蛋白基因,在IPTG的诱导下可以表达GST/S3a融合蛋白。为下一步实验奠定了基础。     

抗生素产生菌核糖体相关基因改变与次级代谢产物的生物合成

利用抗生素抗性筛选方法及定点突变方法可以得到引起抗生素产生菌核糖体相关基因改变的突变株,这些突变对次级代谢产物的生物合成产生深刻影响,如能够显著地提高抗生素的产量也能够产生一些新的次级代谢产物。这种方法不仅对抗生素产生菌的菌种选育具有重要的意义,且为获得新的抗生素提供了新的途径。本文就抗生素产生菌核糖体蛋白基因、核糖体RNA基因、核糖体修饰相关基因及核糖体相关蛋白基因的改变引起次级代谢改变研究进展做简要综述。     

p70核糖体蛋白S6激酶抑制剂的研究进展

p70核糖体蛋白S6激酶(p70 ribosomal protein S6 kinase,p70S6K)是一种多功能的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,是AGC家族的重要成员,在m TOR信号通路中起着非常重要的作用。p70S6K与蛋白质的合成、m RNA的加工、葡萄糖的体内平衡以及细胞的生长和凋亡等进程密切相关。研究表明,肿瘤的发生与p70S6K的过度激活有关,因此,p70S6K已成为抗癌药物研发的重要潜在靶点之一。本文对p70S6K的生物学功能、作用机制及相关p70S6K抑制剂结构和研究思路做一综述。     

连翘核糖体蛋白FsRS15基因的克隆与序列分析

<正>连翘[Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl]为木犀科连翘属植物,属常用大宗药材,主产于山西、陕西、河南和安徽等地。连翘的根皮和果实均可入药,常用部位为果实。核糖体是细胞内参与蛋白质合成的重要细胞器,在植物中,核糖体蛋白基因的突变影响胚的生存和植物发育[1,2]。     

微生物核糖体疫苗

结构特性核糖体是一种胞浆颗粒,其功能是将信使RNA(mRNA)转译成多肽。原核细胞的核糖体约含60%RNA和40%蛋白质,沉降系数为70S;而真核细胞核糖体含55% RNA和45%蛋白质,沉降系数为80S。此外,脊椎动物线粒体中含有不同的核糖体,其沉降系数为55～60S。因对大肠杆菌核糖体的研究比其他微生物更为深入,故下述资料大部分是关于大肠杆菌核糖体的研究。核糖体的典型大小,     

细胞凋亡过程中核糖体蛋白质S3a水平变化的研究（一）：—应用GST基因融合蛋白系统制备核糖体蛋白质S3a（PPS3a）

目的：应用GST基因融合蛋白系统制备核糖体蛋白质S3a(PPS3a）。方法：将S3acDNA序列插入到pGEX-4T-2质粒中,制备GST／S3a融合蛋白及其抗体。结果：S3acDNA序列在Xho Ⅰ位点上插入到pEGX-4T02质粒中,形成重组的pGEX-4T-2/S3a质粒。结论：pGEX-4T-2质粒编码GST蛋白基因,在IPTG的诱导下以表达GST／S3a融合蛋白,为下一步实验奠定了基础。     

Ⅰ型核糖体失活蛋白（RIPs）抗肿瘤作用的研究进展

目的介绍Ⅰ型核糖体失活蛋白抗肿瘤作用的研究概况及展望。方法总结核糖体失活蛋白抗肿瘤作用及机制。结果Ⅰ型核糖体失活蛋白具有明显的抗肿瘤作用。结论Ⅰ型核糖体失活蛋白是很有发展前景的抗肿瘤植物药。