结核丸联合常规西药治疗阴虚火旺型耐药结核病临床研究

目的：观察结核丸联合常规西药治疗耐阴虚火旺型耐药结核病的临床疗效及对微小核糖核酸-30a- 5p（miR-30a-5p）、微小核糖核酸-431（miR-431） 表达的影响。方法：采用随机数字表法将98例阴虚火旺型 耐药结核病患者分为治疗组、对照组各49例。对照组予以常规西药治疗,治疗组予以结核丸联合常规西药治 疗,2组均治疗6个月。比较2组治疗前后中医证候积分、T细胞亚群、炎症因子[白细胞介素-4（IL-4）、C-反 应蛋白（CRP）、干扰素-γ（INF-γ） ]、miR-30a-5p、miR-431水平,评估2组临床疗效及不良反应发生情况。 结果：治疗后,治疗组总有效率97.96%,对照组总有效率85.71%,2组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。 治疗后,2组miR-30a-5p、CD3+、CD4+、INF-γ水平及CD4+/CD8+较治疗前升高（P＜0.05）,中医证候积分及 CD8+、miR-431、IL-4、CRP水平降低（P＜0.05）;治疗组治疗后miR-30a-5p、CD3+、CD4+、INF-γ水平及 CD4+/CD8+高于对照组（P＜0.05）,中医证候积分及CD8+、miR-431、IL-4、CRP水平低于对照组（P＜0.05）。 2组不良反应发生率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：结核丸联合常规西药治疗阴虚火旺型耐药结 核病疗效显著,能调节患者miR-30a-5p、miR-431水平,提高免疫功能,减轻炎症反应,安全性较高。     

基于外泌体miRNA测序探讨肝癌在脾虚状态下转移增强机制

目的?探索脾虚状态下外泌体促肝癌转移的机制。方法?使用随机数字表法将C57BL/6小鼠随机分为4组：正常对照组、脾虚组、肝癌组、脾虚肝癌组，每组10只，正常对照组腹腔注射生理盐水，脾虚组腹腔注射利血平，肝癌组采用肝癌原位移植术，脾虚肝癌组采用腹腔注射利血平加肝癌原位移植术。利血平腹腔注射共持续21天，确定脾虚模型建立后再行肝癌原位移植术，术后14天取材。基于模型血浆提取小鼠外泌体并使用电镜、颗粒分析及纳米流式鉴定。以外泌体为变量使用划痕实验、Transwell迁移与侵袭实验、尾静脉肺转移裸鼠模型验证脾虚状态下外泌体促肝癌转移的表型。随后对肝癌组和脾虚肝癌组外泌体进行miRNA测序鉴定差异miRNAs，并分析miRNAs靶向的mRNAs的通路富集结果。结果?与肝癌组比较，脾虚肝癌组小鼠的脾虚积分更高（P<0.0001）及肿瘤体积更大。电镜、颗粒分析及纳米流式结果成功鉴定外泌体。划痕实验、Transwell迁移及侵袭实验结果表明脾虚肝癌组外泌体在体外促进了肝癌细胞的转移能力（P<0.0001）。尾静脉肺转移裸鼠模型的活体成像结果表明脾虚肝癌组外泌体在体内促进了肝癌细胞的转移能力。外泌体miRNA测序结果表明15个miRNAs在脾虚肝癌组差异表达，其中9个上调（miR-183-3p，miR-1247-5p，miR-543-3p，miR-495-3p，miR-466i-5p，miR-540-5p，miR-125b-5p，miR-214-3p，miR-499-5p），6个下调（miR-6516-5p，miR-450a-3p，let-7g-3p，miR-103-5p，miR-5129-3p，miR-301b-3p）。差异表达miRNAs靶向的mRNAs富集的通路与转移相关（Wnt signaling pathway）。结论?脾虚内环境来源的状态下外泌体通过miRNA-mRNA轴促进肝癌转移。     

基于外泌体miRNA探讨针刺“内迎香”穴治疗变应性鼻炎的作用机制

目的：筛选针刺内迎香穴治疗变应性鼻炎(AR)大鼠血浆外泌体中差异表达的miRNA,并对其进行生物信息学分析,探讨针刺内迎香穴治疗AR的可能作用机制。方法：将30只SPF级SD大鼠随机分为空白组(Ko组)、模型组(Mu组)和针刺组(Zh组),每组各10只。模型组和针刺组采用卵清蛋白腹腔注射及鼻黏膜刺激法建立变应性鼻炎大鼠模型,造模后对针刺组大鼠予针刺内迎香穴进行干预,每周2次,连续3周。HE染色观察鼻黏膜病理形态改变;超速离心法提取大鼠血浆外泌体,透射电镜(TEM)和粒径分析(NTA)检测外泌体形态和粒径浓度;高通量测序以P<0.05的标准筛选大鼠血浆外泌体中显著差异表达的miRNA;利用miRanda和Targetscan得出差异表达miRNA靶基因,进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。结果：针刺作用关键miRNA共有10个,其中5个上调,5个下调,共得出7 408个靶基因,涉及1 130个生物过程、158个细胞组分、166个分子功能,KEGG信号通路有31条(P<0.05)。结论：针刺内迎香穴可明显改善AR大鼠鼻黏膜组织炎性细胞浸润情况,其机制可能与通过调节rno-miR-92a-3p、rno-let-7d-3p、rno-miR-328a-3p、rno-miR-223-3p、rno-miR-23a-3p、rno-miR-451-5p、novel＿314、rno-miR-144-5p、rno-miR-23b-3p及rno-miR-144-3p的表达,进而调控MAPK信号通路有关。     

化痰散结方含药血清作用胃癌细胞系MGC803后差异表达miRNAs筛选及生物信息学分析

目的:筛选化痰散结方含药血清处理胃癌细胞系MGC803后差异表达的微小RNA(miRNAs),并进行生物信息学分析。方法:应用"下一代"测序技术(即高通量测序技术)对MGC803细胞和化痰散结方含药血清处理后的MGC803细胞进行miRNAs差异表达谱分析;结合文献报道确定4个与肿瘤相关的miRNAs,对其进行靶基因预测及信号转导通路的分析。结果:经化痰散结方含药血清处理后,miR-424～3p和miR-494～3p的表达水平明显上调,miR-33b-3p和miR-27a-5p的表达水平明显下调;生物信息学方法分析结果显示miR-424～3p、miR-494～3p、miR-27a-5p和miR-33b-3p及其靶基因参与细胞迁移、细胞周期和凋亡等通路。结论:化痰散结方含药血清可能通过调控miR-27a-5p、miR-33b-3p、miR-424～3p、和miR-494～3p的表达抑制胃癌的发生发展。     

荣气理论指导下的祛瘀活血荣络方辅助治疗急性脑梗死的效果及其对脑血流动力学、血清miR-27-3p和miR-409-3p表达的影响

目的：评价荣气理论指导下的祛瘀活血荣络方辅助治疗急性脑梗死（ACI）的效果及其对脑血流动力学、血清微小RNA-27-3p(miR-27-3p)和微小RNA-409-3p(miR-409-3p)表达的影响。方法：择取我院收治的128例ACI患者作为研究对象,采用随机数表法分为两组,各64例。基础组给予常规治疗,研究组增加荣气理论指导下的祛瘀活血荣络方。对比两组临床疗效、中医证候积分、脑血流动力学指标、神经因子水平、不良反应。结果：研究组总有效率（93.75%,60/64）高于基础组（81.25%,52/64）(P<0.05);研究组大脑中动脉（MCA）、大脑前动脉（ACA）、大脑后动脉（PCA）血流速度均高于基础组（P<0.05）;研究组视锥蛋白样蛋白-1(VILIP-1)、陷窝蛋白-1(Cav-1)水平,miR-27-3p、miR-409-3p表达均低于基础组（P<0.05）;两组均未出现明显不良反应。结论：荣气理论指导下的祛瘀活血荣络方联合常规治疗能够有效减轻ACI患者临床症状,改善大脑血液循环,调节神经因子水平,提高治疗效果,且安全性高。     

miR-27a-3p/RCBTB1/β-catenin轴与胃癌临床特征的关联性及益气化瘀解毒方抑制上皮间质转化的机制

目的：明确miR-27a-3p/RCBTB1/β-catenin与胃癌临床特征的关系,探讨益气化瘀解毒方抑制胃癌上皮间质转化（EMT）的作用机制。方法：生物信息学分析miR-27a-3p、RCBTB1在胃癌中的表达与临床意义;高通量测序检测小鼠肝转移瘤组织内mRNA表达差异;质粒转染构建沉默或过表达miR-27a-3p、RCBTB1的稳定细胞株;Transwell、划痕实验检测胃癌细胞侵袭迁移能力的改变;脾脏注射MFC细胞建立小鼠胃癌肝转移模型并以益气化瘀解毒方干预,检测肝转移瘤数量,苏木精-伊红染色（HE）染色法检测胃癌细胞肝脏浸润情况;RT-PCR、Western Blot检测miR-27a-3p、RCBTB1、β-catenin、E-cadherin、Snail的表达。结果：miR-27a-3p在胃癌组织中较正常组织升高（P<0.01）,且Ⅳ期胃癌组织中miR-27a-3p表达较Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期增高（P<0.05）。与对照组比较,miR-27a-3p过表达组胃癌细胞侵袭迁移能力增强,miR-27a-3p沉默组细胞侵袭性减弱（P<0.01）。高通量测序显示,益气化瘀解...     

熊果酸调控外泌体介导的miR-155-5p保护脓毒症大鼠心肌组织的作用研究＊

目的 研究熊果酸通过外泌体介导微小核糖核酸-155-5p（micro ribonucleic acid-155-5p，miR-155-5p）对脓毒症大鼠心肌的保护作用。方法 从60只SD雄鼠中随机挑出50只为建模大鼠，通过腹腔注射内毒素（lipopolysaccharide，LPS）法建立脓毒症大鼠模型。余下10只为正常对照组。将建模成功大鼠随机分为5组，熊果酸高、中、低剂量组、GW4869组、模型组。熊果酸高、中、低剂量组腹腔注射5 mg/kg LPS+50%二甲基亚砜（dimethylsurfoxide，DMSO）后立即尾静脉注射熊果酸120、80、40 mg/kg+50% DMSO混合液；GW4869组腹腔注射5 mg/kg LPS+50% DMSO后立即尾静脉注射鞘磷脂酶抑制剂GW4869 2.5 μg/g+50% DMSO混合液；模型组大鼠腹腔注射5 mg/kg LPS+50% DMSO后，尾静脉注射等体积生理盐水；正常对照组仅腹腔注射等体积生理盐水后，尾静脉注射等体积生理盐水。另将各组外泌体与原代培养乳鼠心肌细胞共培养，设置未加外泌体仅加入等体积PBS的心肌细胞为PBS对照组；通过脂质体转染技术将miR-155-5p minic转染至大鼠心肌细胞，将转染miR-155-5p心肌细胞与动物实验中各组外泌体共培养24 h，另设置未转染miR-155-5p minic且不加外泌体仅加入等体积PBS的心肌细胞为PBS对照组，仅转染miR-155-5p minic且不加外泌体的心肌细胞为miRNA-155-5p minic转染组和GW4869+熊果酸+miR-155-5p minic组（其中熊果酸分别设置低、中、高剂量）。结果 模型组和GW4869组大鼠心肌细胞出现明显空泡样变、核肿胀，组织水肿明显，可见明显炎性浸润，熊果酸3剂量组大鼠心肌组织病变均出现好转；各组均从外周血中分离出外泌体；模型组和熊果酸3剂量组外泌体中miR155-5p表达水平均高于正常对照组（P<0.05），GW4869组外泌体中miR155-5p表达水平低于正常对照组（P<0.05）；经培养鉴定证实所取细胞为乳鼠心肌细胞；模型组、GW4869组、熊果酸3剂量组白介素1β（interleukin-1β，IL-1β）、白介素6（interleukin-6，IL-6）水平均高于磷酸盐缓冲液（phosphate buffered saline，PBS）对照组和正常对照组（P<0.05），熊果酸3剂量组上述指标水平均低于模型组和GW4869组（P<0.05）；miR-155-5p minic转染乳鼠心肌细胞后miR-155-5p minic转染组细胞中miR-155-5p表达水平升高（P<0.05）。将各组外泌体与miR-155-5p minic转染后细胞共孵育，GW4869组细胞培养基中IL-1β、IL-6浓度均高于其余各组（P<0.05），模型组+miR-155-5p minic均高于miR-155-5p minic转染组（P<0.05），GW4869+熊果酸高剂量+miR-155-5p minic组与miR-155-5p minic转染组差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 熊果酸可改善脓毒症大鼠心肌病变，且可通过抑制外泌体中miR-155-5p表达水平，抑制心肌细胞炎症反应。     

化痰消瘀方逆转胃癌前病变效果及对胃液外泌体miRNA表达的影响

目的观察化痰消瘀方对胃癌前病变的逆转效果及对患者胃液外泌体miR-133a和miR-421表达水平的影响,探讨其作用机制。方法选择2019年1月—2020年5月在南京医科大学第一附属医院就诊的62例萎缩性胃炎伴肠化生患者,采用随机数字表法将患者分为对照组和观察组各31例。对照组给予维酶素片治疗,观察组在对照组治疗基础上给予化痰消瘀方治疗,疗程3个月。观察2组患者治疗前后胃液外泌体miR-133a和miR-421表达水平、中医症状积分和内镜检查结果变化。结果治疗后2组患者胃液外泌体miR-133a表达水平均较治疗前显著升高(P均0.05),且观察组miR-133a表达水平显著高于对照组(P0.05);治疗后2组患者胃液外泌体miR-421表达水平、中医症状积分和胃黏膜萎缩严重程度分度、胃炎伴肠上皮化生、异型增生得分均较治疗前显著降低(P均0.05),且观察组上述指标均显著低于对照组(P均0.05)。结论化痰消瘀方可逆转胃癌前病变,减轻症状,调控miR-133a和miR-421表达可能是其重要作用机制。     

外泌体在中医药防治糖尿病肾病中的研究进展

外泌体是糖尿病肾病潜在的病理介质、标志物和治疗靶点,具有广泛性、组织源性、靶向性和生物功能性等特点。目前发现尿液外泌体中miR-145、miR-15b、miR-34a和miR-636等miRNA可作为糖尿病肾病早期诊断标志物;尿液外泌体中的miR-29c以及参与TGF-β1信号通路相关外泌体表达的改变可为糖尿病肾病中医证候提供更加客观的指标参考。外泌体的发现,不仅可为今后中医药在糖尿病肾病预防诊断、证候研究、治疗、药物载体等方面提供新的切入点,也会成为今后糖尿病肾病中医药诊疗的重要研究方向。其中,中药单体及复方均可通过改变miR-192等外泌体表达来介导包括TGF-β1在内的多条信号通路以延缓糖尿病肾病病变进展。     

温阳方改善心衰心阳虚患者心功能及神经内分泌指标临床观察

目的：观察温阳方对心衰（heart failure,HF）心阳虚患者心功能水平、中医证候积分及神经内分泌指标的改善作用。方法：采用随机、对照、单盲试验,选取心衰心阳虚患者80例,随机分成治疗组与对照组各40例;两组均予常规西药治疗,治疗组加用温阳方;疗程5d。分别于治疗前后评定两组总有效率、心功能状况（NYHA心功能分级标准）与中医证候积分及神经内分泌指标AngⅡ、ET、肌红蛋白（Mb）、TNF-α、NT-proBNP,比较治疗前后两组各项观察指标差异。结果：治疗后两组的观察指标均有改善,且温阳方治疗组患者的心功能、中医证候积分及神经内分泌指标症状改善优于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：温阳方能较好地改善心衰心阳虚患者的心功能水平及中医证候积分,并改善神经内分泌指标,从而改善心衰心阳虚患者的临床症征。     

麻杏石甘汤通过外泌体miR-1249-5p靶向SLC4A1抑制流感病毒细胞级联损伤效应研究

目的 探究麻杏石甘汤通过外泌体miR-1249-5p靶向溶质载体家族4成员A1(solute carrier family 4 member 1,SLC4A1)抑制流感病毒诱导的肺上皮细胞损伤-巨噬细胞极化的级联损伤效应的作用机制。方法 以肺上皮细胞为研究对象,采用CCK-8检测麻杏石甘汤含药血清的安全剂量和对流感病毒刺激肺上皮细胞治疗剂量,NanoSight鉴定肺上皮细胞源外泌体的粒径和浓度,qRT-PCR检测外泌体中miR-1249-5p基因表达。以与肺上皮细胞源外泌体共培养的巨噬细胞为研究对象,采用qRT-PCR检测巨噬细胞中miR-1249-5p、SLC4A1和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路相关基因表达;Western blotting检测巨噬细胞中SLC4A1和NF-κB通路相关蛋白表达;流式细胞术和qRT-PCR检测巨噬细胞M1/M2极化表型。结果 CCK-8结果显示,10%和20%的麻杏石甘汤含药血清对肺上皮细胞无细胞毒性,显著抑制流感病毒诱导的肺上皮细胞损伤(P<0.05、0.01);NanoSight检测各组肺上皮细胞源外泌体...     

温阳振衰颗粒对慢性心力衰竭大鼠干预机制研究

目的:研究温阳振衰颗粒对慢性心力衰竭(CHF)大鼠外泌体微小RNA-21(miR-21)、心肌p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的影响。方法:取40只清洁级SD雄性大鼠作为研究对象,随机分为正常组、模型组、依那普利组、温阳振衰组,每组10只。正常组正常喂养,其他三组采用阿霉素诱导建立CHF模型。模型组、依那普利组、温阳振衰组分别给予0.9%氯化钠溶液、依那普利及温阳振衰颗粒灌胃处理。分别在灌胃前、灌胃完成后采血,提取外泌体,检测外泌体miR-21水平。在灌胃结束后4周处死大鼠,取心肌组织,检测p38MAPK和p-p38MAPK水平。结果:灌胃前,模型组、依那普利组、温阳振衰组LVEF低于正常组,E/A、LVDD、LVPW水平高于正常组,差异有统计学意义(均P<0.05)。灌胃后,温阳振衰组、依那普利组LVEF高于模型组,差异有统计学意义(均P<0.05)。灌胃后,温阳振衰组、依那普利组血清外泌体miR-21、心肌miR-21 mRNA高于模型组,差异有统计学(均P<0.05)。温阳振衰组、依那普利组p38MAPK和p-p38MAPK mRNA和蛋白水平低于模型组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:温阳振衰颗粒治疗CHF效果较好,其机制可能与上调外泌体miR-21,抑制p38MAPK信号通路活性有关。     

温阳振衰颗粒对心肾综合征模型大鼠血浆外泌体及心、肾组织p38MAPK表达的影响

目的探讨温阳振衰颗粒对心肾综合征大鼠心功能、肾功能的影响及可能作用机制。方法 40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、温阳振衰组、依那普利组,每组10只。除空白组外其余各组大鼠采用阿霉素3mg/kg腹腔注射,每周1次,共6周建立心肾综合征大鼠模型。造模3周后空白组和模型组大鼠给予生理盐水每次1ml/100g灌胃,温阳振衰组每次给予0.72g/kg温阳振衰颗粒灌胃,依那普利组每次给予0.9mg/kg依那普利片灌胃。每天给药2次,连续4周。HE染色观察肾组织病理改变,TUNEL法检测心肌及肾组织细胞凋亡阳性率,检测心功能、肾功能及血清N端前脑钠素(NT-pro BNP)、肾损伤分子1(KIM-1)含量,检测心脏和肾脏p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)和磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)蛋白及mRNA表达,检测血浆外泌体定量,心脏、肾脏组织及血浆外泌体miR-155表达。结果与空白组比较,模型组大鼠心功能、肾功能损伤,心肌及肾组织细胞凋亡阳性率增加,血清NT-pro BNP、KIM-1含量升高,心脏和肾脏p-p38MAPK蛋白、p38MAPK mRNA表达均升高,心脏、肾脏和血浆外泌体miR-155均降低(P0.05或P0.01);与模型组比较,温阳振衰组和依那普利组上述指标均不同程度改善(P0.01)。结论温阳振衰颗粒可改善心肾综合征模型大鼠心功能、肾功能,其作用可能与增加外泌体miR-155抑制p-p38MAPK表达,从而抗细胞凋亡有关。     

益心舒胶囊对心力衰竭患者神经内分泌因子的影响

目的评价益心舒胶囊对心力衰竭患者的临床疗效及神经内分泌因子的影响。方法将160例心力衰竭患者随机分为对照组（60例）与治疗组（100例）。对照组予西医基础治疗,治疗组在西医基础治疗上加用益心舒胶囊治疗,均治疗8周。观察两组患者治疗前后的中医证候计分、Lee氏心力衰竭积分、纽约心脏病学会（NYHA）分级、心脏彩超指标及血浆超敏C反应蛋白（hs—CRP）、肌钙蛋白I（cTnI）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、血管内皮生长因子（VEGF）等指标的变化。结果治疗组改善中医证候积分与Lee氏心力衰竭积分优于对照组（P〈0．01）;两组治疗后均可明显降低血浆AngⅡ、hs—CRP水平（P〈0．01）,治疗组优于对照组（P〈0．05）治疗后两组的NYHA分级及血浆VEGF水平均有所升高,但组间无统计学意义（P〉0．05）。结论在慢性心力衰竭治疗中加用益心舒胶囊能有效干预神经内分泌因子的表达,改善患者临床症状。     

基于miRNA组学探讨慈菇消脂方调控TGF-β1诱导LX2细胞活化的作用机制北大核心CSCD

目的:运用生物信息学方法筛选慈菇消脂方干预人肝星状LX2细胞中差异表达微小RNA(micro RNA,miRNA),并进一步探讨差异miRNA对活化LX2细胞刺猬(Hedgehog, Hh)信号通路的影响及慈菇消脂方含药血清的干预机制。方法:CCK-8法检测不同浓度含药血清,不同时间处理对细胞活性影响,筛选最佳作用时间和作用浓度。6%慈菇消脂方含药血清干预LX2细胞72 h,以空白血清组作为正常对照,进行总RNA提取、RNA质检、文库构建,使用测序平台为illumina HiSeqTM2500进行高通量测序,以P<0.05的标准筛选差异miRNA,利用miRanda和RNAhybrid两个软件进行miRNA靶基因预测,得到miRNA和靶基因间的对应关系。对差异miRNA靶基因分别进行Gene Ontology和KEGG富集分析,筛选Hh信号通路差异表达miRNA。转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导建立LX2细胞活化模型。试验随机分为正常对照组、模型对照组、6%慈菇消脂方含药血清组、环靶明脂组、微小RNA-199a-5p(miR-199a-5p)过表达组及其阴性对照组。CCK-8法检测细胞增殖情况;Q-PCR和Western-blot技术检测细胞中miR-199a-5p、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型-胶原(Col-I)及Hh信号通路相关蛋白表达,以此探究miR-199a-5p对活化LX2细胞Hh信号通路的影响及慈菇消脂方含药血清的干预机制。结果:与正常对照组比较,模型对照组细胞活力显著升高(P<0.01),miR-199a-5p表达上调(P<0.01),Sonic刺猬信号通路(Sonic Hedgehog, Shh)、脑胶质瘤相关癌基因1(Glioma related oncogene homology-1,Gli-1)、Gli-2、Col-I、α-SMA蛋白及mRNA表达显著上调(P<0.01);与模型对照组比较,6%慈菇消脂方含药血清组细胞活力显著降低(P<0.01),miR-199a-5p表达显著下调(P<0.01),Gli2、α-SMA蛋白表达显著下调(P<0.05)。结论:慈菇消脂方含药血清可以抑制TGF-β1诱导的LX2细胞活化,其机制可能通过下调miR-199a-5p进而抑制Hh信号通路蛋白表达发挥作用。     

糖络宁减轻大鼠背根神经节细胞炎症反应的作用机制研究

目的：以施万细胞外泌体为切入点,观察糖络宁含药血清对体外高糖诱导的大鼠背根神经节细胞炎症反应的影响。方法：采用糖络宁含药血清干预高糖培养的施万细胞,分为正常组、高糖组、糖络宁组,干预48 h后,提取各组细胞上清液中外泌体,将各组外泌体分别干预正常糖和高糖条件培养的大鼠背根神经节细胞,分为无外泌体-正常糖组,正常外泌体-正常糖组、高糖外泌体-正常糖组、糖络宁外泌体-正常糖组、无外泌体-高糖组、正常外泌体高糖组、高糖外泌体-高糖组、糖络宁外泌体-高糖组8个组,48 h后,收集各组细胞并进行相关检测。CCK-8法检测各组细胞活力,酶联免疫法检测各组细胞上清液中炎症介质（TNF-α、IL-6、IL-1β）的蛋白表达情况,实时荧光定量PCR检测各组细胞炎症介质的表达情况。结果：与正常外泌体-正常糖组比较,高糖外泌体-正常糖组细胞活力下降（P<0.05）,炎症介质的基因和蛋白表达均增加（P<0.05）;而与高糖外泌体-正常糖组比较,糖络宁外泌体-正常糖组细胞活力有所升高（P<0.05）,各炎症介质的基因和蛋白表达均有所下调（P<0.05）。高糖条件培养的背根神经节细胞中,不同组外泌体干预表现出类似的作用效果;结论：糖络宁能通过调控施万细胞外泌体减轻大鼠背根神经节细胞炎症反应。     

循环microRNA在急性冠脉综合征血瘀证轻重判别及预后评估中的意义

目的研究循环microRNA在急性冠脉综合征(ACS)血瘀轻重判别、预后评估中的作用和意义。方法将60例ACS患者按血瘀证计分标准分为ACS血瘀轻证组(31例)和血瘀重证组(29例),另选30例健康志愿者为健康对照组。采用荧光定量qRT-PCR技术,比较各组4种循环microRNA(miR-208a-3p、miR-222-3p、miR-16、miR-198)表达水平及患者全球急性冠脉事件注册(GRACE)危险分层有无差异,并对microRNA表达水平、血瘀证计分与患者全因死亡GRACE预测积分进行相关性分析。结果与健康对照组比较,血瘀轻证组和血瘀重证组miR-208a-3p相对表达量上调,血瘀重证组miR-222-3p相对表达量下调、miR-198相对表达量上调(均P0.05);与血瘀轻证组比较,血瘀重证组miR-222-3p相对表达量下调(P0.05)。血瘀轻证和重证组6个月全因死亡GRACE危险分层比较,差异有统计学意义(P0.05)。4种循环microRNA的表达水平与患者全因死亡GRACE预测积分无明显相关性;在院全因死亡GRACE预测积分、6个月全因死亡GRACE预测积分与血瘀证计分呈正相关(r=0.31、0.33,P0.05)。结论 miR-208a-3p可作为ACS血瘀证与健康志愿者的判别,但不能用于判别血瘀轻重。miR-222-3p、miR-198可能在协助判别血瘀轻重方面具有一定意义。血瘀证计分越高,则GRACE预测积分越高,预后越差。     

固本化痰祛瘀汤治疗COPD缓解期的临床疗效及其对NO、ET的调节作用和意义

目的探讨固本化痰祛瘀汤对COPD缓解期患者的治疗作用及其对血浆一氧化氮(NO)、内皮素(ET)水平的影响和意义.方法将52例COPD缓解期患者随机分为治疗组及对照组,观察固本化痰祛瘀汤对COPD缓解期患者临床症状及血浆NO、ET水平的影响,并与单纯的补益固本汤对照组进行对比研究.结果两组治疗后临床症状积分均显著下降,并且固本化痰祛瘀汤治疗组的证候积分改善程度明显优于对照组(P＜0.05).与治疗前比较,两组的血浆NO水平显著上升,ET水平显著下降(P<0.01或0.05),而且治疗组ET水平下降幅度明显大于对照组(P＜0.01).     

基于miRNA表达谱的针刺治疗中重度变应性鼻炎疗效预测研究

目的：分析针刺治疗中重度变应性鼻炎（AR）不同疗效患者血浆微小核糖核酸（mi RNA）表达谱差异特征,为筛选针刺疗效可能生物标志物提供依据。方法：从33例接受针刺治疗的中重度AR患者中选择优效患者（优效组）与劣效患者（劣效组）各3例,采用人mi RNA芯片检测技术分析两组患者治疗前后血浆mi RNA的表达差异。另选择接受相同针刺治疗的中重度AR患者优效、劣效各10例,采用实时荧光定量PCR对芯片检测中差异表达的mi RNA进行验证。对表达差异显著的mi RNA进行生物信息学分析,预测其可能作用的靶基因,并利用基因本体（GO）及京都基因与基因组百科全书（KEGG）数据库对预测的靶基因进行注释。结果：共筛选出治疗前两组患者间存在差异表达的mi RNA 51个,其中26个mi RNA表达上调,25个mi RNA表达下调;与治疗前比较,优效组治疗后有33个mi RNA存在差异表达;实时荧光定量PCR验证结果示hsa-mi R-126-3p、hsa-mi R-15a-5p、hsa-mi R-494-3p、hsa-mi R-574-5p的表达与芯片检测结果趋势一致。GO/KEGG分析显示,两组间表...     

肺肠同治法辅助治疗呼吸机相关性肺炎（肺热腑实证）临床研究

目的 观察肺肠同治法辅助治疗呼吸机相关性肺炎（VAP）（肺热腑实证）的临床疗效。方法 选取浙江中医药大学附属第三医院呼吸与危重症医学科及ICU住院VAP患者56例,采用随机数表法分为对照组与治疗组各28例。对照组予西医常规治疗,治疗组在对照组的基础上加用肺肠同治方,疗程10 d,观察两组患者炎症相关指标[C反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）、白细胞计数（WBC）、肝素结合蛋白（HBP）、白细胞介素-6(IL-6)]、便秘症状及疗效积分、中医证候积分、体征积分、临床肺部感染评分（CPIS）、退热时间、抗生素疗程及病程等。结果 与本组治疗前比较,对照组治疗后各项炎症指标、CPIS评分、中医证候（发热、咳嗽、口干欲饮）与体征积分及总分改善（P <0.05）;便秘症状及疗效积分与中医证候（咯痰、腹胀便秘）积分无明显变化（P>0.05）。治疗组治疗后各项炎症指标,便秘症状及疗效积分,CPIS评分,中医证候（发热、咳嗽、口干欲饮、腹胀便秘）与体征积分及总分均改善（P <0.05）,中医证候（咯痰）积分无明显变化（P> 0.05）。组间比较,治疗组在炎症指标（CRP、WB...