瘢痕形成对成纤维细胞生长因子生物学行为的影响

目的 探讨成纤维细胞生长因子(FGF)对瘢痕生物学行为的影响及其对瘢痕形成和增生的作用机制.方法 对28个瘢痕成纤维细胞及正常皮肤成纤维细胞标本进行体外培养,采用倒置显微镜、噻唑蓝(MTT)测定、流式细胞术等方法进行观察、分析,探讨FGF对瘢痕生物学行为的影响.结果 测定结果显示,与相应的对照组比较,加入FGF后均对细胞起明显的促增殖作用(P＜0.05).结论 FGF对成纤维细胞的生长趋势与增殖活性有明显的促进作用,刺激了胶原纤维的合成、增生和沉积.     

血小板源生长因子对瘢痕成纤维细胞的影响

目的探讨血小板源生长因子（platelet derived growth factor,PDGF）对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响,及其对瘢痕形成和增生的作用机制,为临床预防和治疗瘢痕提供分子及病理学水平的理论依据。方法对瘢痕成纤维细胞及正常皮肤成纤维细胞进行体外培养,采用倒置显微镜、四甲基偶氮唑盐（MTT）测定、流式细胞术等方法进行观察、分析,以研究细胞因子PDGF对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响。结果测定结果显示,与相应的对照组相比,加入细胞因子PDGF后,均显示对细胞起明显的促增殖作用。结论细胞因子PDGF对成纤维细胞的生长趋势与增殖活性有明显的促进作用,刺激了胶原纤维的合成、增生和沉积。     

人重组干扰素-α及白细胞介素-2对病理性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

目的　观察人重组干扰素- α(rhIFN-α)及白细胞介素-2 (rhIL-2 )对病理性瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响 ,探讨细胞因子对病理性瘢痕的作用机制。方法　对 5例临床病理性瘢痕标本进行成纤维细胞体外培养 ,采用流式细胞术方法进行观察、分析 ,以研究细胞因子rhIFN-α及rhIL-2 (浓度分别为 2 5 0 ,5 0 0 ,75 0U/ml ,每组数n =6)对病理性瘢痕成纤维细胞增殖、细胞周期、Fas、Bcl-2表达量的影响。结果　加入rhIFN-α 72h后检测 ,S-G2-M期细胞百分数降低 (P <0 .0 5 ) ,Fas、Bcl-2蛋白表达量 ,分别显示升高 (P <0 .0 5 )和降低 (P <0 .0 5 ) ;加入rhIL-2后S-G2-M期细胞百分数明显升高 (P <0 .0 1) ,Fas、Bcl-2蛋白表达量 ,两者均有升高 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。结论　rhIFN-α是成纤维细胞负性调节因子 ,对成纤维细胞的生长趋势及增殖活性有明显抑制作用。rhIL-2作为成纤维细胞正性调节因子 ,促进成纤维细胞的生长增殖。     

干扰素α-2b对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡及端粒酶活性的影响

目的 观察干扰素α-2b（IFNα-2b）对瘢痕疙瘩成纤维细胞生长增殖、端粒酶活性及凋亡的影响，探讨其在瘢痕疙瘩治疗中的作用机制。方法 进行成纤维细胞原代培养，细胞分别来自8例瘢痕疙瘩标本和8例正常皮肤标本。第3到4代的细胞用于实验。以干扰素α-2b作用于体外培养的瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞，噻唑蓝（MTF）法检测成纤维细胞生长增殖情况，聚合酶链反应-酶联免疫吸附法（PCR-ELISA法）检测不同时间成纤维细胞端粒酶活性，应用流式细胞仪观察处理后成纤维细胞凋亡。结果 IFNα-2b对瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞有生长抑制作用，可明显下调成纤维细胞端粒酶活性，和对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05），并呈现出明显的时间-效应关系。体外培养的瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞经10000U／ml IFNα-2b处理后，能诱导成纤维细胞凋亡发生，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01），且具有明显的时间依赖性。结论 作为一个负性调节因子，IFNα-2b能抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的生长增殖并诱导成纤维细胞发生凋亡，降低成纤维细胞端粒酶活性是其作用机制之一。     

α-2b干扰素对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡及端粒酶逆转录酶、bcl-2 mRNA表达的影响

目的 观察α-2b干扰素(IFNα-2b)对瘢痕疙瘩成纤维细胞生长增殖、凋亡及端粒酶逆转录酶(hTERT)、bcl-2 mRNA表达的影响,探讨其在瘢痕疙瘩治疗中的作用机制.方法 进行成纤维细胞原代培养,细胞分别来自8例瘢痕疙瘩标本和8例正常皮肤标本.第3～4代的细胞用于实验.以IFNa-2b作用于体外培养的瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞,MTT法检测成纤维细胞生长增殖情况,应用流式细胞仪观察处理后成纤维细胞凋亡,RT-PCR法检测成纤维细胞hTERT和bcl-2mRNA的表达.结果 IFNα-2b对瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞生长有抑制作用,体外培养的瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞经10 000 U/ml IFNα-2b处理后,能诱导成纤维细胞凋亡发生,RT-PCR检测hTERT和bcb2 mRNA表达降低,和对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01),且具有明显的时间依赖性.结论 作为一个负性调节因子,IFNα-2b能抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的生长增殖并诱导成纤维细胞发生调亡,下调成纤维细胞端粒酶活性是其重要作用机制之一.通过抑制端粒酶活性进行抗瘢痕疙瘩治疗可能是一个新途径.     

PDGF对瘢痕成纤维细胞影响的动物实验

目的 探讨细胞因子PDGF对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响、病理改变,及其对瘢痕的作用机制,为临床预防和治疗瘢痕提供分子及病理学水平的理论依据.方法 对大鼠动物创伤模型进行体内实验,采用倒置显微镜、HB染色、Cason氏改良三色染色,Hamason-Lush-bangh氏染色法、透射电镜等方法进行观察、分析,以研究细胞因子PDGF对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响以及病理改变.结果 大鼠动物创伤模型病理染色与透射电镜观察显示,与对照组相比,实验组局部注射细胞因子PDGF后,促进了成纤维细胞的生长增殖,刺激了胶原纤维的合成、增生和沉积.结论 细胞因子PDGF对成纤维细胞的生长趋势与增殖活性有明显的促进作用,刺激了胶原纤维的合成、增生和沉积.     

γ干扰素对瘢痕成纤维细胞的生物学作用

目的探讨瘢痕成纤维细胞生物学活动的调控因素。方法以瘢痕成纤维细胞为研究对象,观察基因重组γ干扰素(下简称IFN-γ)对瘢痕组织中成纤维细胞的生长增殖、胶原合成及其重构等生物学活动的影响。结果 IFN-γ可以抑制瘢痕成纤维细胞的生长增殖、胶原合成以及胶原纤维凝胶的收缩。结论表明IFN-γ是创伤修复与瘢痕形成过程中的一种负性调节因子,有望在病理性瘢痕的防治中发挥重要作用。     

γ干扰素对瘢痕成纤维细胞的生物学作用

目的探讨瘢痕成纤维细胞生物学活动的调控因素。方法以瘢痕成纤维细胞为研究对象，观察基因重组γ干扰素（下简称ＩＦＮ－γ）对瘢痕组织中成纤维细胞的生长增殖、胶原合成及其重构等生物学活动的影响。结果ＩＦＮ－γ可以抑制瘢痕成纤维细胞的生长增殖、胶原合成以及胶原纤维凝胶的收缩。结论表明ＩＦＮ－γ是创伤修复与瘢痕形成过程中的一种负性调节因子，有望在病理性瘢痕的防治中发挥重要作用。     

抑癌基因MTS1对人瘢痕疙瘩成纤维细胞的生物学影响

目的：探讨多肿瘤抑制基因1（MTS1）对人瘢痕疙瘩成纤维细胞在生长增殖、DNA合成代谢及胶原合成量等方面的影响。方法：将外源性MTS1基因导入人瘢痕疙瘩成纤维细胞后，通过MTT法测定细胞的生长曲线，通过^3H-胸腺嘧啶核苷（^3H-TdR）及^3H-脯氨酸掺入的方法测定细胞的DNA合成量及胶原合成量，来分别比较转染前后细胞的生物学变化。结果：在转染MTS1后瘢痕疙瘩成纤维细胞的生长增殖受到明显的抑制，同时其DNA合成量及胶原合成量也明显降低，而转染空载体组及正常组细胞均未出现上述变化。结论：外源性多肿瘤抑制基因1(MTS1）能明显抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞在生长增殖、DNA合成及胶原合成等方面生物学功能，为瘢痕疙瘩的临床治疗提供了新的思路。     

γ干扰素对瘢痕成纤维细胞的生物学作用

目的 探讨瘢痕成纤维细胞生物学活动的调控因素。方法 以瘢痕成纤维细胞为研究对象，观察基因重组γ干扰素（下简称ＩＦＮ－γ）对瘢痕组织中成纤维细胞的生长增殖、胶原合成及其重构等生物学活动的影响。结果 ＩＦＮ－γ可以抑制瘢痕成纤维细胞的生长增殖、胶原合成以及胶原纤维凝胶的收缩。结论 表明ＩＦＮ－γ是创伤修复与瘢痕形成过程中的一种负性调节因子，有望在病理性瘢痕的防治中发挥重要作用。     

Regulation of collagen synthesis and messenger RNA levels in normal and hypertrophic scar fibroblasts in vitro by interferon alfa-2b

Hypertrophic scars, which commonly occur after thermal and traumatic injury of the skin, are a fibroproliferative disorder of the dermal matrix wherein components of the inflammatory process, including the fibrotic growth factor, transforming growth factor-beta, appear to activate dormant fibroblasts leading to cellular proliferation and excessive matrix synthesis. To investigate the potential beneficial role and mechanism of interferon alfa-2b in controlling excessive collagen production in hypertrophic scar, we measured dose response, time of onset, and duration of action in hypertrophic scar fibroblasts in vitro and compared them with those of site-matched normal fibroblasts obtained from four patients after thermal injury. Interferon alfa-2b reduced collagen protein synthesis and type I messenger RNA levels in both hypertrophic scar and normal fibroblasts after treatment, but these changes were apparent only after approximately 72 hours. Significant reductions in collagen synthesis occurred in four pairs of normal and hypertrophic scar fibroblasts (p < 0.05), accompanied by significant reductions in type I (p < 0.05) but not type III procollagen messenger RNA. Hypertrophic scar fibroblasts recovered completely from the effects of interferon alfa-2b on procollagen type I messenger RNA within 48 hours of cessation of treatment in contrast to normal skin fibroblasts, in which the reduction in type I procollagen messenger RNA by interferon alfa-2b persisted beyond 72 hours after treatment. These data suggest that interferon alfa-2b reduces collagen synthesis in both normal and hypertrophic fibroblasts but the hypertrophic fibroblast may remain less sensitive to its effects.     

两种术式对大龄腭裂患儿术后瘘发生率及语音清晰度改善的影响

目的探讨腭帆单纯提肌重建以及腭帆提肌重建联合带蒂颊脂垫瓣和咽后壁瓣两种术式,对大龄腭裂患儿术后瘘发生率及语音清晰度的影响。方法 60例大龄腭裂患儿(4~9岁),随机分为2组,分别予以单纯腭帆提肌重建(A组)及腭帆提肌重建联合颊脂垫瓣和咽后壁瓣修复(B组),观察并比较术后腭瘘的发生率及语音清晰度情况。结果术后A组瘘发生率明显高于B组(P<0.05);两组术后语音清晰度均较术前提高(P<0.05),且B组优于A组(P<0.05);腭部瘢痕情况B组优于A组(P<0.05)。结论对于大龄腭裂患儿,腭帆提肌重建联合咽后壁瓣及带蒂颊脂垫瓣的术式有效降低了腭瘘的发生率,可获得更好的语音清晰度,并可避免裸露骨面,减少腭部瘢痕形成及对上颌骨生长发育的影响,是一种值得推荐的功能性腭裂修复术式。     

Suppression of in vitro proliferative scar fibroblast contraction by interferon alfa-2b

Increased fibroblast activity and collagen production have been observed frequently in proliferative scars. Previous studies have demonstrated that interferons suppress collagen production by means of normal, keloid, and hypertrophic scar-derived fibroblasts. The fibroblast-populated collagen lattice is an in vitro model used to study fibroblast function. We used fibroblast-populated collagen lattices to evaluate the effect of interferon on fibroblasts harvested from normal human skin, human keloid, and hypertrophic scar tissues. Human recombinant interferon alfa-2b (1000 IU/ml) was added to the culture media. The collagen gel, prepared from rat tail tendon bundles, was overlaid with 5 x 10(4) fibroblast cells. Keloid fibroblast-populated collagen lattices showed the highest contraction. Contraction in all the groups appeared suppressed by interferon alfa-2b during the first 72 hours of study (p < 0.05). The reduction in fibroblast-populated collagen lattice contraction by interferon alfa-2b was similar among the groups. The contractile properties of fibroblasts taken from normal human skin, keloids, and hypertrophic scars in this in vitro study were suppressed by interferon alfa-2b. This suggested that interferon alfa-2b may be beneficial for the treatment of proliferative scars.     

5-氨基酮戊酸光动力疗法对体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞生长和增殖影响的初步研究

目的：探讨5-氨基酮戊酸光动力疗法（ALA-PDT）对体外培养的增生性瘢痕组织的成纤维细胞生长和增殖的影响,观察细胞的形态学及超微结构的变化,并探讨可能的机制。方法：采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测ALA,激光照射对体外培养的成纤维细胞增殖的影响;lmmol／L的ALA接受在不同的时间激光照射对成纤维细胞增殖的影响;在光镜和电镜下观察ALA-PDT对细胞形态和超微结构的影响;用分光光度法检测ALA-PDT对细胞氧自由基含量、超氧化物歧化酶活性的影响。结果：单一的激光照射对成纤维细胞的生长没有影响;1、10、10。和103mmol／L的ALA对细胞生长有一定的抑制作用（P〈O．05;lmm01／L的ALA接受20min、40min和60min激光照射后细胞的增殖明显下降（P〈0．05）,呈时间依赖关系;ALA-PDT作用于细胞后,细胞体积变大,正常的细胞连接消失,细胞内的线粒体减少、体积增大,内质网呈空泡化;ALA—PDT作用于细胞后,细胞ROS含量升高,SOD活性降低（P〈0．05）。结论：ALA—PDT对体外成纤维细胞具有明显的损伤作用,对细胞的增殖和生长有一定的抑制作用;其作用机制可能与ALA-PDT对细胞的氧化损伤有关。     

瘢痕成纤维细胞培养及其生物学行为的实验研究

为探讨不同瘢痕在体外培养情况下，其成纤维细胞生物学特性，切取正常皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩分别行体外成纤维细胞原代和传代培养，观察成纤维细胞形态学和生长动力学变化。结果发现，三类细胞的形态学方面没有明显差异，但瘢痕疙瘩成纤维细胞排列更加紊乱，极性消失，有交叉重叠现象。在接种相同的细胞密度和相同的培养条件下，其细胞生长率、分裂指数、克隆形成及ＤＮＡ含量无明显差别。认为，三类细胞在体外培养状态下，其形态学和生长动力学无显著差异，且具有相似的生物学特性。     

应用单侧岛状颊肌黏膜瓣和双反向双Z成形术修复宽大腭裂

目的应用单侧岛状颊肌黏膜瓣加双反向双Z成形术修复较宽大的腭裂,延长软腭,不做牙槽弓内侧松弛切口,腭部无骨性创面裸露和瘢痕形成,以减少或避免对上颌骨和牙槽弓生长发育的影响。方法应用改良的双反向双Z成形术延长软腭,裂缘蒂的口腔侧黏骨膜瓣翻转关闭鼻腔侧的裂隙,一侧岛状颊肌黏膜瓣修复腭部口腔侧创面,牙槽弓内侧不做松弛切口。结果应用该法共治疗36例,2例出现了腭瘘,其余伤口愈合良好,软腭延长显著,无组织瓣坏死、伤口感染、张口困难、面神经损伤等并发症发生。随访8例患者,均获得完善的腭咽闭合功能。结论一侧岛状颊肌黏膜瓣与双反向双Z成形术联合应用修复较宽大的腭裂,既延长了软腭,又避免了腭部骨性创面裸露、瘢痕形成而影响上颌骨和牙槽弓生长发育,是一项安全可靠的手术。     

In vitro migration and adhesion of fibroblasts from different phases of palatal wound healing

Cleft palate patients often show mid-facial growth impairment after surgical closure of the defect. This is a consequence of palatal wound healing, and more specifically of wound contraction and scar tissue formation. Cells of the fibroblast lineage are responsible for these processes and they display different phenotypes in the course of the wound healing process. The aim of this study was to analyze the in vitro adhesion and migration of wound fibroblasts, isolated during the palatal wound healing process in the rat. Additionally, we analyzed the expression of beta1 integrins and vinculin, the key players in adhesion and migration. Palatal fibroblasts from age-matched controls were analyzed to measure the effects of normal aging. Palatal fibroblasts from unwounded tissue showed a low migratory behavior (<25 microm), a strong capability to adhere (>80%) and a low expression of beta1 integrins and vinculin. In contrast, fibroblasts obtained from healing palatal wounds were highly migratory (>200 microm) coupled to a weak capability to adhere (<65%) and a high expression of vinculin and beta1 integrins. These data show that the palatal wound healing process induces a change in fibroblast phenotype from "quiescent" to "activated," which persists in vitro.     

几丁糖对不同来源成纤维细胞生物学特性的影响

目的　探讨医用几丁糖 (以下简称几丁糖 )对病理性瘢痕成纤维细胞生物学活性的作用。方法　以瘢痕疙瘩及增生性瘢痕成纤维细胞为研究对象 ,正常皮肤成纤维细胞为对照 ,用组织块法进行不同标本成纤维细胞体外培养。分别观测不同浓度的几丁糖作用后 ,不同来源成纤维细胞吸光度A、形态结构、合成及分泌胶原的量以及细胞因子TGF β1 、b FGF、IL 8等的变化。结果　几丁糖对不同来源成纤维细胞增殖及胶原、TGF β1 、b FGF、等的分泌均呈剂量依赖性抑制 ,对IL 8则促进 ;且对各组的影响差异无显著性意义。结论　几丁糖可以抑制瘢痕疙瘩和增生性瘢痕成纤维细胞的生长、增殖、合成及分泌胶原功能 ,有望在病理性瘢痕的防治中发挥重要作用。     

维甲酸对成纤维细胞作用的体外观察

目的探讨维甲酸治疗瘢痕的作用机理及其用于临床的可能性。方法采用成纤维细胞体外培养技术，并将３ＨＴｄＲ（胸腺嘧啶核苷）掺入成纤维细胞ＤＮＡ中，研究维甲酸对体外培养成纤维细胞生长增殖，ＤＮＡ合成及超微结构的影响。结果维甲酸对成纤维细胞生长增殖，ＤＮＡ合成有不同程度的抑制作用，呈剂量效应关系；扫描电镜和透射电镜观察显示，维甲酸对成纤维细胞合成胶原有抑制作用。结论维甲酸治疗瘢痕的作用机理可能与抑制成纤维细胞生长增殖，阻抑成纤维细胞ＤＮＡ合成及影响成纤维细胞胶原合成有关