环孢素A对异种脱细胞神经移植的影响

目的 研究脱细胞异种面神经移植中环孢素A(cyclosporin A,CSA)的作用效果.方法 48只W istar 大鼠随机选择一侧作为实验侧,解剖面神经后于颊支制造lcm的神经缺损.按神经移植的种类分为4组,A组:异种面神经移植组;B组:异种面神经移植应用CSA免疫抑制组;C组:异种脱细胞神经移植组;D组:异种脱细胞神经移植应用CSA免疫抑制组.各组实验动物分别于术后5周,12周进行电生理学测试(潜伏期、运动神经传导速度),并进行光镜、电镜观察形态学变化.结果 术后5周和12周时,C,D组动物在电生理指标及光镜、电镜指标上均优于A,B组,术后5周和12周,D组面神经颊支传导速度均高于其它各组.结论 1.0 cm缺损的异种脱细胞面神经移植动物实验中,应用CSA5mg/(hg·d)5周可以降低排斥反应,提高神经再生能力.     

谷氨酰胺对人外周血单个核细胞细胞因子表达的影响

目的 探讨谷氨酰胺(Gln)对内毒素(LPS)刺激下健康人外周血单个核细胞(PBMC)细胞因子表达的影响.方法 取健康志愿者新鲜外周血,利用密度梯度离心法提取单个核细胞,观察内毒素刺激单个核细胞表达肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素(IL)系列(IL-1β、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10),酶联免疫吸附法(ELISA)检测上清中细胞因子的表达,SuperArray基因芯片技术检测细胞中细胞因子mRNA的表达,同时分别使用1、8、10和15 mmol/L Gln预处理单个核细胞0.5 h和2 h后观察细胞因子在蛋白以及基因水平的表达.结果 LPS刺激PBMC后观察部分细胞因子表达明显增强;1 mmol/L Gln组细胞因子表达无变化,8 mmol/L Gln预处理后TNF-α、IL-1β、IL-8和IL-10表达下降(P＜0.05),15 mmol/L Gln组炎症介质表达均有显著下降(P＜0.01).但与未受LPS刺激组相比炎症介质表达仍有增高(P＜0.05).Gln预处理2 h组细胞因子表达的抑制较0.5 h明显增强(P＜0.05),并且存在时间和剂量的依赖性.结论 Gln能够下调LPS刺激下PBMC细胞因子的过表达.     

甲泼尼龙和环磷酰胺冲击治疗及环孢素A对肾移植受者淋巴细胞免疫基因的影响

甲泼尼龙(MP)、环磷酰胺(CTX)冲击治疗是目前国内同种异体肾移植术术中及术后2d主要的免疫抑制治疗，它同时还是临床逆转移植肾急性排斥的常用疗法。环孢素A(CsA)是目前同种异体肾移植术术后主要的免疫抑制药物，其免疫药理作用的研究集中于蛋白水平。本研究利用基因芯片技术分析MP CTX冲击治疗及CsA对移植肾受者淋巴细胞免疫相关基因的影响，     

环孢素A对人胃癌BGC823细胞增殖与凋亡的影响

目的 研究环孢素A(CsA)对人胃癌BGC823细胞的生长增殖以及凋亡的影响.方法 MTT法检测不同浓度CsA处理24、48、72 h后对BGC823细胞增殖抑制率;流式细胞术(FCM)检测细胞周期、活性氧(ROS)含量及细胞线粒体膜电位(△Ψm)改变;Annexin-V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率.结果 CsA在5～20 μmol/L浓度范围内和24 ～ 72 h时间范围对BGC823细胞增殖有显著抑制作用,与药物剂量、作用时间呈现量效和时效的依赖性;FCM结果显示CsA浓度依耐性使细胞周期阻滞于G0/G1期,与对照组相比差异有统计学意义(F=33.45,P＜0.05,P＜0.01);细胞凋亡率随CsA作用浓度增加而增加;5～ 20μmol/L CsA浓度范围细胞内ROS含量显著增加(F =46.17,P＜0.01),细胞线粒体膜电位明显降低.结论 CsA对BGC823细胞有抑制增殖和诱导凋亡作用,其机制可能与阻滞细胞生长周期、细胞内ROS含量增加以及线粒体膜电位下降相关.     

环孢素A联合淋巴细胞主动免疫对URSA患者血清T细胞亚群、激素水平及ACA抗体水平的影响

目的 探究环孢素A(CsA)联合淋巴细胞主动免疫(LIT)对原因不明复发性流产(URSA)患者血清T细胞亚群、激素水平及抗心磷脂抗体(ACA)水平的影响.方法 选取我科2017年10月-2019年10月期间87例URSA患者,根据随机数字表法分组.基础治疗采用低分子肝素钙,对照组43例给予LIT治疗,观察组44例增加C...     

环孢素A对肾小管上皮细胞转分化及CTGF表达的影响

目的 观察环孢素A(CSA)对人近端肾小管上皮细胞(HK-2)细胞转分化(EMT)及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,探讨其致肾间质纤维化作用的可能机制.方法 用相差显微镜观察不同浓度(0.5～25.0mg/L)CsA作用下HK-2细胞形态的变化;免疫荧光、RT-PCK、Western Blot分别检测5mg/LCsA刺激细胞不同时间(24～72h)α-SMA在细胞内的表达和分布以及α-SMA、CTGF mRNA和蛋白的表达.结果 显微镜下可见,HK-2细胞随CsA刺激浓度的增加由立方形铺路石样逐渐转变为梭形长条样.免疫荧光显示,随CsA刺激时间的延长细胞质中α-SMA表达逐渐增强.RTPCR和Western Blot显示,CsA呈时间依赖性上调α-SMA、CTGF mRNA和蛋白的表达,24h表达即明显增加,72h增加更为显著(P<0.01);CTGF与α-SMA表达的时间效应一致.结论 环孢素A可上调CTGF的表达、诱导肾小管上皮细胞转分化,进而促进肾间质纤维化.     

环孢素A对肾小球疾病的治疗作用

环孢素A(CsA)是一种选择性的强力免疫抑制剂 ,主要用于肾移植及其他器官移植 ,疗效确切。近几年来文献报告其对免疫损伤性肾小球疾病有较好的治疗作用〔1〕,尤其适合激素抵抗或因长期大剂量服用激素而招致明显副作用的病例 ,具有一定的临床疗效〔2〕。但CsA并不是治疗肾小球疾病的一线药物 ,临床上通常作为二线或三线药物应用。现把CsA对肾小球疾病的治疗作用综述如下。1　CsA对肾小球疾病的作用机理1 1　在细胞水平上 ,主要是同T淋巴细胞膜上的高亲和力受体蛋白结合 ,通过这些蛋白被动弥散通过细胞膜 ,抑制辅助性T细胞产生IL 2、IL 3…     

环孢素A对大鼠急性脊髓损伤后iNOS表达及细胞凋亡的影响

目的探讨急性脊髓损伤后应用环孢素A（CsA）对诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达及细胞凋亡的影响。方法108只SD大鼠随机分为对照组、损伤组和CsA治疗组。使用免疫组织化学EnVision法检测急性脊髓损伤大鼠损失节段iNOS表达,原位末端标记法（TUNEL法）标记细胞凋亡并计算凋亡指数。结果损伤组、CsA治疗组及对照组iNOS表达及凋亡指数经单因素方差分析,差异有统计学意义。结论CsA能抑制大鼠脊髓损伤后iNOS的表达及细胞凋亡,减轻脊髓继发性损伤。     

环孢素A及其联合用药对人和大鼠肝CYP3A活性的影响

目的：探讨环孢素A(CsA)及其与甲基强的松龙(MP)、氟康唑(Flu)合用时对大鼠和我国正常成人肝脏CYP3A活性的影响。方法：制备大鼠和人肝微粒体，用不同浓度的CsA作用、加或不加MP、Flu，以红霉素为底物，经过NADPH系统孵育后，利用分光光度法测定人和大鼠肝微粒体的红霉素N-脱甲基酶(ERD)活性。结果：CsA单独作用时，在人肝微粒体中，CsA40、20、40μmol／L剂量组与对照组相比具有显著性差异；在大鼠肝微粒体中，CsA除低剂量组外，各组与对照组相比亦具有显著性差异，总体上，随着CsA浓度增加，CYP3A活性下降。此外，在大鼠肝微粒体中，MP、Flu与CsA联合作用较CsA单独作用相比，CYP3A的活性有显著性降低；但在人肝微粒体中，只在Flu与CsA联合作用时，CYP3A的活性有显著性降低。结论：CsA是CYP3A的一种活性抑制剂；Flu与CsA合用时加强了CsA对CYP3A活性的抑制作用。     

洛伐他汀对人类肾小球系膜细胞增殖及细胞周期的影响

目的探讨洛伐他汀(LOV)对人类肾小球系膜细胞(HMC)增殖及细胞周期的影响。方法人类系膜细胞常规培养。实验分为3组:正常对照组(10%胎牛血清)、洛伐他汀组(10μmol/LLOV)、甲羟戊酸(MVA)干预组(10μmol/LLOV 100μmol/LMVA)。每组分别在干预因素作用24,48h时用MTT法检测HMC在490nm波长处的光吸收(A490nm)值,观察LOV对HMC增殖的影响。用流式细胞仪测定HMC的细胞周期G1(DNA合成前期)与S期(DNA合成期)的比率,观察LOV对HMC周期进展的影响。结果MTT法结果显示24,48hLOV抑制HMC增殖,A490nm值分别为0.108±0.010和0.216±0.009,与正常组比较P<0.05。100μmol/LMVA可逆转其作用。细胞周期结果显示24,48hLOV抑制HMC细胞周期进展,S/G1比例分别为0.150±0.009和0.301±0.010,与正常组比较P<0.05。100μmol/LMVA可逆转其作用。结论LOV抑制HMC增殖,阻止细胞周期进展,MVA可逆转其抑制作用。     

洛伐他汀对肾小球系膜细胞增殖及细胞周期时相的影响

目的探讨洛伐他汀对人肾小球系膜细胞（HMC）增殖和细胞周期时相的影响及机制。方法用３H-TdR掺入量法测定HMC增殖水平,以流式细胞术测定HMC的细胞周期。结果洛伐他汀剂量依赖性抑制HMC增殖,从细胞周期水平,洛伐他汀可使HMC由G１期向S期的进展受阻,这些抑制作用可被外源甲羟戊酸和法呢醇恢复。结论洛伐他汀是HMC增殖的抑制剂,本研究为重新认识和评价他汀类药物在治疗肾脏疾病中的作用提供了一定的理论及实验依据。     

反相高效液相色谱法测定全血环孢霉素A的含量

目的　探讨反相高效液相色谱法 (RP -HPLC)测定全血中环孢霉素A(CyA)的含量。方法　以液 -液提取法萃取、C8(4.6mm× 15 0mm)色谱柱 乙腈 甲醇 水 =6 4 10 2 6作流动相 ,在 6 5℃、2 14nm波长下、CyD为内标分离 ,检测全血中CyA的含量。 结果　在 4 5～ 10 0 3ng·ml-1范围内线性关系良好 ,回归方程及相关系数分别为 :cCyA=0 .5 75ACyA/ACyD+0 .0 12 6 ,r=0 .9998。结果的相对标准偏差 (RSD)均在 10 %以内 ,平均回收率为 99.9% ,最低检测浓度为 2 0ng·ml-1。结论　本方法简便、快速、准确 ,线性范围宽 ,可用于临床和科研工作中CyA浓度的快速检测。     

Lovastatin对HL-60细胞HMG-CoA还原酶mRNA表达及细胞增殖功能的影响

目的探讨胆固醇合成抑制剂洛伐他汀(10vastatin,LOV)对HL-60细胞HMG-CoA还原酶mRNA表达及细胞增殖功能的影响.方法采用MTT比色法、生长曲线测定、计算细胞生长抑制率、流式细胞仪分析、以及RT-PCR等技术方法,观察LOV对HL-60细胞体外增殖能力、细胞周期分布及HMG-CoA还原酶mRNA表达的影响.结果HL-60细胞经LOV处理后,生长减慢,细胞周期被阻滞在G0/G1期,LOV剂量越大,时间越长,增殖抑制作用越明显;LOV处理HL-60细胞1～3 d,低剂量组(4 lμmol/L)HMG-CoA还原酶mRNA表达上调;而中剂量组(8μnol/L)和高剂量组(16μmol/L)第1天有增加趋势,第2～3天明显降低.结论LOV能显著抑制HL-60细胞增殖,使细胞受阻于G0/G1期,该作用有明显剂量-效应和时间依赖关系;随洛伐他汀处理剂量和时间的不同,HL-60细胞HMG-CoA还原酶mRNA表达表现为上调或下调变化.     

环孢菌素A对体外NIT-1胰岛β细胞增殖及其增殖相关基因表达的影响

目的观察环孢霉素A(CsA)对体外培养的NIT-1胰岛β细胞增殖和pol α1 mRNA表达的影响。方法用MTT法检测不同浓度的CsA (0.05~10 μmol/L)作用48和72 h后NIT-1胰岛β细胞增殖的情况。利用半定量RT-PCR法检测10 μmol/L CsA处理NIT-1胰岛β细胞48 h后pol α1 在mRNA水平上的表达。结果CsA可抑制NIT-1胰岛β细胞的增殖,且与时间、剂量正相关。另外,CsA还下调了pol α1 mRNA的表达。结论CsA可抑制NIT-1胰岛β细胞增殖,其机制可能与下调pol α1 mRNA表达有关。     

抗淋巴细胞球蛋白联合环孢菌素A治疗重型再生障碍性贫血

目的:观察抗淋巴细胞球蛋白(ALG)和环孢菌素A(CsA)联合治疗重型再生障碍性贫血(SAA)的疗效. 方法: SAA患者13例,联合使用ALG 10 mg/(kg·d)静脉输注,1～5 d;CsA 3～5 mg/(kg·d)口服,31 d开始使用,疗程3 mo,根据血清肌酐及胆红素浓度调节剂量. 结果: 目前存活患者10例,死亡3例. 治疗1 mo内即有血液学反应,脱离红细胞以及血小板输注的中位时间分别为52 d和44 d. 治疗3 mo血象可以满足基本生活需要. 在治疗期间有少量并发症发生. 结论: ALG联合CsA治疗SAA疗效明显.     

RDP1258对人外周血单核细胞增殖能力及HO-1活性的影响

目的观察一种新型HLA衍生肽(RDP1258)针对人外周血单核细胞由丝裂原以及同种异体抗原刺激导致的增殖能力的影响,并探讨其机制.方法人工固相合成RDP1258, 3H-TdR掺入法观察其在体外对人外周单核细胞增殖反应的影响,以酶化学法观察其对淋巴细胞血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1, HO-1)活性的影响.结果 RDP1258可显著抑制人外周血单核细胞的转化及MLR增殖反应;该肽体外降低HO-1活性呈现出剂量依赖性.结论 RDP1258能够显著抑制人外周单核细胞经丝裂原或同种抗原刺激引起的增殖反应,这种作用可能是通过影响HO-1活性而达到的.     

卡介苗有效成分CpG-ODN 2006刺激人外周血单个核细胞表达细胞因子的研究

目的 探讨卡介苗(BCG)细胞核有效成分CpG-ODN 2006对人外周血单个核细胞(HPBMCs)细胞因子表达的作用。方法 获取正常人HPBMCs，采用不同浓度的CpG-ODN 2006体外刺激HPBMCs 72h，收集上清液培养，用亲和素双抗体夹心法(ELISA)检测上清液中白细胞介素4(IL-4)和白细胞介素12(IL-12)的含量。结果 CpG-ODN 2006能诱导HPBMCs产生较高水平的IL-12，并呈剂量依赖性；但对IL-4的产生没有影响。结论 卡介苗细胞核有效成分CpG-ODN 2006能有效诱导人外周血单个核细胞产生细胞因子IL-12，为膀胱肿瘤的免疫治疗提供了实验基础。