慢性应激对大鼠海马神经元PKA和P-CREB蛋白表达的影响及抗抑郁剂的拮抗作用

目的：探讨慢性轻度不可预见应激对大鼠海马神经元内环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A（cAMP—dependent protein kinaseA，PKA）和磷酸化的环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（phosphorylated cAMP-responsive element binding protein，P—CREB）表达的影响以及抗抑郁剂（氟西汀）的拮抗作用。方法：将36只SD雄性大鼠随机均分为正常组、慢性应激模型组、氟西汀治疗组。选用慢性轻度不可预见性应激加孤养造模，应用免疫组织化学以及蛋白质印迹技术研究各组大鼠脑内PKA、磷酸化的CREB（P-CREB）在海马区域的分布以及表达量的差异。结果：免疫组织化学和蛋白免疫印迹结果显示模型组大鼠海马细胞内的PKA和P-CREB蛋白表达量明显低于正常组（P〈0．05）；氟西汀组大鼠海马细胞内PKA和P-CREB蛋白表达量明显高于模型组（P〈0．05）。结论：慢性轻度不可预见性应激可使大鼠海马神经元内的PKA和P—CREB蛋白表达水平下降，氟西汀具有一定的拮抗作用。     

不同时长应激对大鼠抑郁样行为及内侧前额叶皮层CB1及GluA1表达的影响

目的：探究不同时间内慢性不可预见性温和应激（CUMS）诱导的抑郁模型大鼠内侧前额叶皮层（mPFC）中大麻素受体CB1与AMPA受体亚基GluA1的变化。方法：将30只大鼠随机分为3组,3周模型组给予3周CUMS法造模,4周模型组给予4周CUMS造模,对照组不做任何处理。进行糖水偏爱、新颖抑制摄食和强迫游泳实验来检测各组大鼠行为学的变化,通过Western blot技术检测mPFC脑区突触体中CB1和GluA1蛋白表达。结果：与对照组相比,大鼠经历4周CUMS后糖水偏爱率降低、新颖抑制摄食测试中摄食潜伏期延长,强迫游泳测试中不动时间增加,而经历3周CUMS后大鼠行为学较对照组无明显差异,提示4周CUMS后抑郁大鼠造模成功。4周CUMS应激后可降低4周模型组mPFC脑区突触体中CB1及GluA1蛋白表达水平（P<0.05）,而3周模型组CB1及GluA1表达水平和对照组无明显差异。结论：4周应激后制备抑郁动物模型大鼠最为稳定,慢性应激导致的抑郁与mPFC脑区中CB1和GluA1表达密切相关。     

慢性应激大鼠抑郁症模型的建立

目的采用慢性不可预见性轻度应激建立大鼠抑郁症模型。方法选用SPF雄性大鼠,通过慢性不可预见性轻度应激制作抑郁症模型。观察大鼠体重和摄食量的变化,记录液体消耗实验和强迫游泳实验结果。结果与对照组比较,受到慢性不可预见性轻度应激的大鼠体重增长值、摄食量明显低于对照组(P<0.05),液体消耗试验中糖水消耗和糖水偏好指数明显下降(P<0.01),强迫游泳5min内静止不动时间明显延长(P<0.001)。结论慢性不可预见性轻度应激可以成功建立大鼠抑郁症模型。     

白松片对大鼠慢性应激抑郁模型的抗抑郁实验研究

目的：探讨慢性应激抑郁模型大鼠神经生化、神经内分泌的变化及白松片对其的干预作用。方法：60只SD雄性大鼠随机分为正常对照组（NC组）、模型对照组（MC组）、氟西汀对照组（FC组）和白松片治疗组（BST）,每组15只。采用长期轻度不可预见性应激＋孤养复制大鼠抑郁模型,用高效液相色谱仪法检测海马5-羟色胺（5-HT）、谷氨酸（Glu）、γ-氨基丁酸（GABA）含量;放射免疫方法测定大鼠血浆促肾上腺皮质素释放激素（CRH）、促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质醇（CORT）的水平;应用逆转录聚合酶联反应方法测定大鼠下丘脑和大脑皮质CRH mRNA表达水平;免疫组织化学法测定海马脑源性神经营养因子、酪氨酸羟化酶的表达。结果：与NC比较,模型大鼠海马5-HT,GABA含量显著降低;血浆CRH,ACTH,CORT及海马Glu含量增加;脑内CRH mRNA表达显著升高（P〈0．01）;与MC组比,BST组和FC组大鼠海马5-HT,GABA含量升高（P〈0.01,或P〈0.05）;血浆CRH,ACTH,CORT及海马Glu含量降低;脑内CRH mRNA表达下降（P〈0．01）。结论：慢性轻度不可预见性应激可使大鼠神经内分泌、神经生化发生异常改变,白松片对此具有一定调节作用。     

卡因酸对大鼠学习记忆及胆碱酯酶和S100β表达的影响

目的　 探讨卡因酸对大鼠学习记忆能力的影响,观察其基底前脑皮质及海马乙酰胆碱酯酶和S100β表达的变化。方法　大鼠腹腔注射卡因酸为实验组,注射磷酸缓冲生理盐水为对照组。用Y迷宫测试大鼠学习记忆,乙酰胆碱酯酶（acetylcholine esterase,AchE）化学染色法测定AchE表达水平的变化,免疫组化法检测S100β表达水平的变化。结果　 实验组大鼠的学习记忆能力明显低于对照组（P＜0.05）,AchE表达水平明显低于对照组（P＜0.01）,S100β表达水平明显高于对照组（P＜0.01）。结论　 腹腔注射卡因酸可以损害大鼠的学习记忆能力,减少AchE的表达;过高浓度的S100β可能参与卡因酸导致学习记忆受损的发病机制。     

不同应激时间对大鼠抑郁样行为及脑内神经炎症的动态变化

目的 研究不同应激时间后大鼠相关脑区内神经炎症及脑区代谢的动态变化以及两者的相关性。方法 将20只SD大鼠随机分成模型组(n=10)和对照组(n=10)。模型组采取孤养与慢性不可预见性轻度应激(chronic unpredictable mild stress, CUMS)相结合的方法建立应激模型,持续6周。实验前及第2、4、6周末对大鼠测定体质量及行为学指标,同时采用¹⁸氟标记的吡唑并嘧啶类的TSPO配体(¹⁸F-translocator protein radioligand of pyrazolopyrimidines,¹⁸F-DPA-714)及¹⁸氟标记的氟代脱氧葡萄糖(¹⁸F-fluorodeoxyglucose,¹⁸F-FDG)扫描检测相关脑区内神经炎症及脑区代谢的动态变化。结果 在给予应激后,第4周、第6周模型组大鼠与对照组比较,体质量增加减少,不动时间延长,糖水偏好百分比减少(P<0.05)。应激2周后,海马、前额叶¹⁸     

卡因酸对大鼠学习记忆及胆碱酯酶和S^100β表达的影响

目的 探讨卡因酸对大鼠学习记忆能力的影响,观察其基底前脑皮质及海马乙酰胆碱酯酶和S^100β表达的变化。方法 大鼠注射卡因酸为实验组,注射磷酸缓冲生理盐水为对照组。用Y迷宫测试大鼠学习记忆,乙酰胆碱酯酶（acetylcholine esterase,AchE)化学染色法测定AchE表达水平的变化,免疫组化法检测S^100β表达水平的变化。结果 实验组大鼠的学习记忆能力明显低于对照组（P＜0．05）,AchE表达水平明显低于对照组（P＜0．01）,S^100β表达水平明显高于对照组（P＜0．01）。结论 腹腔注射卡因酸可以损害大鼠的学习记忆能力,减少AchE的表达;过高浓度的S^100β可能参与卡因酸导致学习记忆受损的发病机制。     

慢性应激大鼠抑郁模型的建立及其评价

目的探讨建立慢性应激抑郁大鼠模型的实验方法及模型的有效性。方法利用慢性轻度不可预见性应激(CUMS)制作抑郁模型,观察动物的体重和摄食量的变化,用敞箱试验及液体消耗实验测定动物行为。结果大鼠抑郁模型在第27天建立成功。抑郁组大鼠敞箱试验得分、液体消耗试验中糖水消耗和糖水偏爱百分比均明显下降。结论慢性轻度不可预见性应激可以成功建立大鼠抑郁模型。     

音乐治疗对慢性应激大鼠脑内5-羟色胺及微管蛋白的影响

目的 探讨音乐治疗对慢性轻度不可预测性应激（CUMS）大鼠脑内前额叶、海马、下丘脑等脑区5-羟色胺及微管蛋白的水平及可能作用机制.方法 随机将24只SD雄性大鼠分为音乐治疗应激组（n=8）、应激组（n=8）和正常对照组（n=8）.采用慢性轻度不可预测性应激（CUMS）模型连续刺激大鼠21 d,音乐治疗应激组在应激的同时给予音乐治疗.实验结束后对每组大鼠进行行为学观察,然后处死大鼠,检测下丘脑、海马和前额叶皮质中5-羟色胺（5-HT）及其代谢产物5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）的含量和微管蛋白的表达.结果 旷场试验的中央格停留时间比较,应激组大鼠显著低于对照组（P＜0.01）,而音乐治疗应激组与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）.与应激组相比,对照组和音乐治疗应激组的海马、前额叶中5-HT及5-HIAA含量均显著升高（P＜0.01）;但三组下丘脑中5-HT及5-HIAA含量差异无统计学意义（P＞0.05）.与应激组相比,对照组和音乐治疗应激组的海马中乙酰化微管蛋白表达均显著降低（P＜0.01）,酪氨酸化微管蛋白表达均显著升高（P＜0.01）;但三组的前额叶和下丘脑中乙酰化微管蛋白、酪氨酸化微管蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 音乐治疗能改善应激所致的前额叶、海马5-羟色胺水平的低下和海马微管蛋白的降低.     

针刺对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马内乙酰胆碱酯酶含量的影响

目的复制拟血管性痴呆（vascular dementia,VD）模型,探讨针刺百会、人中、大椎穴对大鼠学习记忆能力及血清和海马内乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase,AchE）含量的影响。方法用双侧颈总动脉缺血再灌注法复制VD大鼠模型,将VD大鼠随机分为模型组、针刺组和西药组。采用大鼠跳台试验检测学习记忆能力;采用酶联免疫法检测血清和海马组织AchE含量。结果针刺组大鼠跳台反应期时间比模型组显著缩短（P〈0.05）;针刺组大鼠血清和海马AchE含量显著低于模型组（P〈0.05）。结论降低VD大鼠血清和海马内AchE含量是针刺的作用机制之一。     

正常中老年人群颅脑表观弥散系数特点分析

目的：探讨40～70岁年龄段正常汉族人颅脑各区域磁共振表观弥散系数（ADC）变化特点,建立正常中老年人群颅脑ADC值变化趋势的基准。方法选择30例无阳性颅脑病征的正常汉族受试者,按年龄段分为3组,使用GE Medical System 3.0 T超导磁共振扫描仪进行头部平扫及弥散加权成像,测量额叶灰质、白质、壳核、丘脑及小脑感兴趣区ADC值,分析各年龄组不同区域脑组织ADC值的关系。结果同一年龄的正常中老年人不同部位的脑组织ADC值不同,其中以额叶灰质最高,其次为壳核、额叶白质与丘脑,小脑最低（均P＜0.05）。不同部位脑组织左右两侧间ADC值均无统计学差异（均P＞0.05）。不同年龄段的正常中老年人额叶灰质、额叶白质、壳核、丘脑与小脑ADC值间均无统计学差异（均P＞0.05）;不同部位脑组织的ADC值随着年龄的增长均呈上升趋势,且40-60岁上升趋势较缓,60岁之后除小脑外,额叶灰质、额叶白质、壳核、丘脑上升趋势加快。结论正常中老年人群同一部位脑组织的ADC值随年龄增长而上升,60岁之后总体上升趋势加快。     

电针对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆和抗氧化能力的影响

目的 观察电针对β淀粉样蛋白25～35片段（Aβ25～35）所致阿尔茨海默病（Alzheimer＇s diseases,AD）模型大鼠学习记忆能力和脑组织自由基代谢的影响.方法 48只健康雌性SD大鼠随机分为AD模型组、假手术组、正常对照组和电针组,每组12只,采用Aβ25～35建立AD模型,Morris水迷宫观察大鼠学习记忆能力,同时检测脑组织匀浆中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）等抗氧化指标的水平和乙酰胆脂酶（AcbE）、单胺氧化酶（MAO）、一氧化氮（NO）、过氧化氢酶（Cata-lase,CAT）、乳酸脱氢酶（LDH）的活性.结果 与AD模型组相比,电针组能缩短大鼠的逃避潜伏期（P＜0.01）,明显增加大鼠的平台跨越次数（P＜0.01）,延长大鼠在目标象限的停留时间并增高平台象限停留路程占总路程的百分比（P＜0.05）,同时,电针组能明显升高脑组织匀浆中SOD、CAT、GSH、GSH-Px的含量（P＜0.01）,降低MDA、AchE、MAO、LDH、NO的活性（P＜0.01）.且假手术组和正常对照组分别与AD模型组比较,除假手术组平均速度差异无统计学意义外,其余各指标差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 电针可改善AD模型大鼠的学习记忆能力,同时还能增强机体的抗氧化能力,对脑组织中自由基的代谢起到积极的作用.     

阿尔茨海默病11C-PIBPET连续动态显像结果分析

目的探讨11C—PIBPET脑内老年斑显像的显像条件;研究健康老年人（HC）与阿尔茨海默病（AD）的11C—PIBPET脑显像特点。方法严格筛选2组受试者,阿尔茨海默病（AD）患者组6例,健康对照（HC）组7例。每位受试者均采用连续动态采集程序采集脑PET图像。两名核医学医师视觉分析各组受试者的图像,总结成像特点。感兴趣方法（ROI）划取大脑皮层各叶和皮层下核团,得出各个脑区不同时间点的SUV值。并选取45min时间点的SUV值,计算出45min时各脑区与小脑的SUV比值。将计算得到的2组脑区／小脑比值进行统计学分析。结果11C—PIB能快速通过血脑屏障,且之后能很快从健康脑组织内洗脱。时间-放射性曲线显示AD患者脑内放射性清除较HC减慢。脑区／小脑比值AD与HC比较,除脑桥／小脑及白质／小脑外其余脑区与小脑的比值两组之间差异均具有统计学意义（t=4．06—7．28,P〈0．05）。结论11C—PIBPET脑显像是有效诊断AD的神经影像学工具。     

牛磺酸对大鼠急性肺损伤的保护作用与分子机制

目的：复制脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的大鼠急性肺损伤（acute lung inj ury,ALI）模型,探究牛磺酸（taurine,Tau）对大鼠ALI的保护作用机制。方法：将54只大鼠随机分为3组,每组18只：正常对照组、LPS组和LPS＋Tau 干预组。腹腔注射 LPS（5 mg/kg）建立 ALI 模型,腹腔注射 Tau（5 mg/kg）干预,各组动物分别于注射后3、6、9 h 检测肺组织超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性和丙二醛（malonaldehyde,MDA）含量的改变,蛋白印迹法检测 p-p38蛋白在肺组织中的表达变化并在光镜下观察肺组织形态学改变。结果：LPS 组与对照组相应时间点比较,肺组织中的 MDA 含量和 p-p38蛋白表达显著升高（P〈0.01）,而 SOD 活性显著降低（P 〈0.01）;LPS＋Tau 干预组与 LPS 组比较,肺组织MDA含量（P〈0.01）及p-p38蛋白表达明显降低（P 〈0.05,P 〈0.01）,而 SOD 活性明显升高（P〈0.01）,且肺组织的病理改变显著减轻。结论：Tau对大鼠ALI时的肺脏起明显的保护作用,保护机制可能与其抗氧化作用及抑制p38MAPK信号通路的过度激活有关。     

螺旋CT一站式检查对缺血性脑卒中的诊断价值

目的探讨16排螺旋CT灌注成像联合血管成像对缺血性脑卒中的诊断价值。方法使用西门予16排螺旋CT对40例临床诊断为缺血性脑卒中患者行NNCT＋CTP＋CTA检查,所有患者入院24h内完成该“一站式”检查。经西门子后处理软件进行评估。结果灌注异常区的CBF（t=2．45）、CBV（t=3．07）、MTT（t=2．89）三组参数值与对侧相比差异有统计学意义（P〈0．05）;颈内动脉狭窄12处：中度狭窄4处,重度狭窄及闭塞8处;颅内动脉狭窄25处：中度8处,重度狭窄及闭塞17处。颈内动脉及颅内动脉均狭窄6例。灌注异常区的灌注参数仅MTT值异常与颈内动脉狭窄程度具有低的正相关性,Pearson相关系数r值=0．523〉0．5,P=0．012。供血动脉狭窄程度与脑组织缺血程度不成正比。结论“一站式”CT检查能灵敏而准确地反映脑组织血流动力学变化及有效地判断头颈动脉系统是否存在狭窄和闭塞、确定病变部位和测量狭窄程度。     

肉苁蓉苯乙醇苷对东莨菪碱致记忆障碍小鼠保护作用的研究

目的：探讨肉苁蓉苯乙醇苷对东莨菪碱致学习记忆障碍小鼠的保护作用。方法：用高、低剂量（100 mg/kg、50 mg/kg）的肉苁蓉苯乙醇苷对东莨菪碱致记忆障碍模型小鼠进行灌胃,4周后用方形水迷宫检测学习和记忆能力,并测定脑组织内胆碱乙酰化酶（ChAT）及胆碱酯酶（AChE）含量、血清和脑组织中SOD含量、血清和肝组织中MDA含量。结果：与模型组比较,肉苁蓉苯乙醇苷组小鼠在方形水迷宫中的碰壁次数以及找到终点所需的时间都明显缩短,显示学习、记忆的错误次数降低,学习反应期缩短,记忆潜伏期延长;肉苁蓉苯乙醇苷能提高小鼠脑组织内ChAT和AChE的含量、改善胆碱能神经系统功能,提高小鼠血清和脑组织中的SOD含量以及降低血清和肝组织的MDA含量。结论：肉苁蓉苯乙醇苷具有提高学习、记忆能力。     

脑缺血大鼠HGF及VEGF的表达及其相关性

目的研究脑缺血大鼠肝细胞生长因子（HGF）及血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达情况及其相关性。方法48只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组及大脑中动脉线栓法制作局灶性脑缺血大鼠模型组,分别于2h、6h、12h、24h、3d、7d、14d处死动物,采用免疫组织化学法观察各组脑组织HGF和VEGF的表达。结果HGF在假手术组几乎无表达,缺血2hHGF表达增加,并随时间延长表达逐渐上升,缺血组与对照组比较均有统计学差异（P〈0．01）。VEGF假手术组即有表达,缺血6h表达明显增加,在3-14d时表达增高达高峰,缺血组与对照组比较均有统计学差异（P〈0．01）。结论脑缺血后HGF及VEGF表达增高,两者可能起相互协同促进作用,共同参与缺血灶周围血管新生及脑保护作用。     

细胞外信号调节激酶在缺血大鼠各脑区的表达及干预的实验研究

目的:通过研究大鼠局灶性脑缺血再灌注(CIR)后细胞外信号调节激酶(ERK)在不同时间大脑各区的表达特点,采用人尿激肽原酶(Hk-1)干预后ERK在不同时间大脑缺血区的表达变化及特点,探讨ERK与脑缺血的关系。方法:通过线拴法制作大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)再灌注模型,采用免疫组化方法观察急性缺血不同时间脑区及干预后的ERK阳性神经元的动态改变。结果:①在纹状体平面,CIR 6 h后梗死中心ERK阳性神经元数量急剧下降,CIR24 h组中完全消失。半暗带皮质和海马平面,ERK阳性神经元均有先升后降的趋势。②Hk-1干预后从CIR 6 h始ERK活性均较同期CIR组高。结论:CIR的ERK早期活性升高与随后的下降在用药干预后其ERK活性均较模型组高,可能与人尿激肽原酶促进了ERK生存通路有关。     

依达拉奉对大鼠缺血脑组织NGF及BDNF表达的影响

目的研究依达拉奉对大鼠缺血脑组织中脑源性神经生长因子（BDNF）和神经生长因子（NGF）表达的影响。方法健康雄性Wistar大鼠,采用改良的Zea-Longa法建立大脑中动脉局灶缺血模型（MCAO）。实验分为模型对照组和依达拉奉组,每组各20只大鼠。依达拉奉组予以腹腔内注射依达拉奉,1次/d,每次3mg/kg;模型对照组每天注射等量生理盐水。72h后行神经功能评分,然后处死,分别取脑梗死周围、海马区和梗死区脑组织作免疫组化染色检测BDNF、NGF蛋白表达变化,原位杂交检测BDNFmRNA、NGFmRNA的表达。结果依达拉奉组神经功能缺损评分低于模型对照组（p〈0.05）。依达拉奉治疗组BDNF和NGF蛋白BDNFmRNA和NGFmRNA在梗死区周围和海马区表达均高于模型对照组,差异有统计学意义（p〈0.05）,在梗死区差异均无统计学意义（p〉0.05）。结论依达拉奉可上调大鼠梗死区周围和海马区缺血脑组织中BDNF和NGF的表达,并可能通过此机制起到保护作用。     

z-DEVD-fmk对甲基苯丙胺依赖大鼠脑海马组织caspase-3活性及其蛋白表达的影响

目的：观察z-DEVD-fmk（caspase-3抑制剂）对甲基苯丙胺（methamphetamine,MA）依赖大鼠海马组织caspase-3活性及其蛋白表达的影响.方法：选取健康Wistar大鼠40只,随机分为空白对照组、MA依赖组、MA＋ z-DEVD-fmk干预组和z-DEVD-fmk组,各10只.参考文献建立MA依赖大鼠实验动物模型,经侧脑室注射z-DEVD-fmk干预治疗,采用酶标仪法检测caspase-3活性,采用免疫组化法检测Caspase-3蛋白的表达.结果：与空白对照组比较,MA依赖组和MA ＋z-DEVD-fmk干预组海马组织caspase-3活性明显升高（P＜0.01）,Caspase-3蛋白表达增多（P＜0.01）;与MA依赖组比较,Ma＋ z-DEVD-fmk干预组caspase-3活性明显降低（P＜0.05）,Caspase-3蛋白表达减少（P＜0.05）.结论：z-DEVD-fmk能够抑制MA依赖大鼠海马组织caspase-3活性,降低Caspase-3蛋白表达,z-DEVD-fmk具有干预与保护MA致大鼠脑组织损伤作用.