苦玄参中苦玄参甙IA的含量测定

采用双波长薄层扫描法测定了苦玄参中苦玄参甙ＩＡ的含量，结果表明：本法简便可行，结果准确，重现性好，其它共存成分无干扰     

广西苦玄参不同药用部位的薄层鉴别与含量测定

目的:对苦玄参的根、茎、叶、花进行薄层鉴别和含量测定研究,为进一步的应用研究提供科学依据。方法:采用薄层层析法对中苦玄参不同部位进行定性鉴别;采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)对其不同部位进行含量测定。结果:TLC鉴别均表明:茎、叶、花的乙酸乙酯∶甲醇(5∶1)提取物的主斑点一致,提示根、茎、叶、花中所含部分成分有可能相同。含量测定结果显示苦玄参苷A在0.0242~0.1694μg/μl范围内线性良好。结论:广西龙州县苦玄参药材中苦玄参苷A在根、茎、叶花中的平均含量分别为0%,0.11%,1.63%,1.12%。     

苦玄参、黄芩与黄柏的大孔树脂提取研究

目的：探讨大孔吸附树脂在精制苦玄参、黄芩与黄柏有效部位的应用。方法：以中药中的有效成分为指标，筛选适用的大孔吸附树脂型号，评价树脂吸附与解吸工艺。结果：苦玄参、黄芩与黄柏提取物精制适用树脂型号分别为HPD500、HPD300与HPD100，吸附阶段的泄漏点分别为1．5，0．5和1；饱和点分别11,2烽4．75；解吸阶段的适用乙醇浓度分别为50％，30％和50％。结论：不同型号的大孔吸附树脂对中药有效部位的提取精制有较大差别。     

藤茶中双氢杨梅树皮素对2215细胞分泌HBsAg、HBeAg的抑制作用

目的:探讨藤茶双氢杨梅树皮素(DHM)在2215细胞培养中对乙肝病毒HBsAg、HBeAg分泌的抑制作用。方法:通过DHM含药血清对2215细胞进行毒性实验,在最佳DHM含药血清下,测定HB-sAg和HBeAg水平。结果:DHM含药血清的最佳添加量为不超过20%;在最佳添加量不超过20%浓度下,DHM对2215细胞HBsAg、HBeAg的分泌有明显的抑制作用。结论:DHM可明显抑制2215细胞HBsAg和HBeAg的分泌。     

妇炎净胶囊中苦玄参甙IA的含量测定

该文采用双波长薄层扫描法测定妇炎净胶囊中苦玄参甙IA的含量。该法平均回收率为98．32％,RSD为1．0％（n＝5）,方法简便可行,结果准确,重现性好,其它成分无干扰,可用于妇炎净胶囊的质量控制。     

中草药抑制HBsAg的实验研究

应用酶联免疫吸附试验（ELISA）的方法，对180种中草药的水提取物进行抑制乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg)的实验研究，根据药物的综合药效指数（SEI）评价药效，经筛选得抗HBsAg的有效药8种，其中高效药3种，即天花粉（1．63）、香薷（2．02）、茴香油（2．09）。     

绵毛黄芪苷和苦玄参苷的中枢抑制作用

报道了绵毛黄芪苷(SK)及其同类结构苦玄参苷(PIA)给予昆明种式BLC_(57)/1小鼠50mg/kg腹腔注射能明显延长硫贲妥钠的睡眠时间,用扭体法或热板法证实同量SK或PIA静脉注射能产生明显的镇痛作用。用格斗试验证实:同量SK或PIA腹腔注射可使小鼠格斗试验次数明显减少。提示两种苷可能具有中枢镇静、镇痛和安定作用;此类中枢抑制作用说明四环三萜皂苷类具有药用价值的前景。     

二种方法四种试剂检测血清HBsAg的对比研究

本文选用反向被动血凝法和酶免疫法四种试剂检测ＨＢｓＡｇ进行对比研究，共检测临床血清２００份，沪产冻干血球ＨＢｓＡｇ阳性学为１２．５％，宁产液体血球为２７％，沪产ＥＬＩＳＡ试剂为４２％，宁产ＥＬＩＳＡ试剂阳性率为４０％，同时还进行试剂的重复性试验，ＲＰＨＡ及ＥＬＩＳＡ中和试验。结果表明：１．所有方法稳定性均较好，但酶联法敏感性明显高于血凝法。２．血凝法中液体血球检测敏感性优于冻干血球．３．酶联法中两种试剂阳性率结果无明显差异，宁产试剂阳性结果易于判定推测．４．无论是酶联法还是血凝法其结果不一致时，均经中和试验证实其特异性是好的，只是血凝法敏感性较低。因此我们建议用酶联法检测ＨＢｓＡｇ的单位均可淘汰血凝法。     

玄参总DNA提取方法的比较研究

目的探讨药材玄参总DNA的最佳提取方法。方法分别采用SDS法和CTAB法提取药材玄参总DNA,并对其进行核酸含量测定和电泳检测。结果采用SDS法提取的总DNA其OD260/OD280=1.83,而采用CTAB法提取的总DNA其OD260/OD280=1.64;DNA电泳检测显示采用SDS法提取的总DNA条带清晰,而采用CTAB法提取的总DNA出现严重的拖尾现象。结论用SDS法提取药材玄参总DNA优于CTAB法。     

酶联免疫法和胶体金法测定HBsAg的比较

目的比较酶联免疫法和胶体金免疫层析法测定乙肝表面抗原的结果,为实验室工作提供参考。方法对我站10493份血清标本分别采用酶联免疫法和胶体金免疫层析法测定乙肝表面抗原,对结果进行比较分析。结果酶联免疫法和胶体金免疫层析法的检测阳性率分别为0.48%、0.40%,两者比较无显著性差异(χ2=0.6987,P0.05);两种方法检测标本符合率为99.81%,胶体金试纸法的灵敏度为72.00%,特异度为99.94%。结论酶联免疫法和胶体金免疫层析法均为测定乙肝表面抗原的可靠方法,但胶体金免疫层析法的灵敏度有待提高。     

Experimental study of the inhibitory effect of gantai capsule on HBsAg and HBeAg expression

Objective

To study the inhibitory effect of Gantai capsules (GTC) on replication and expression of HBsAg and HBeAg.

Methods

The 2.2.15 cell line was chosen as a in vitro cell culture system, and by means of radioimmunoassay, the hepatitis B surface antigen (HBsAg) and hepatitis B e antigen (HBeAg) in cell cultured medium were examined.

Results

HBsAg, HBeAg values of 2.2.15 cells treated by GTC (200 μg/ml- 1200 μg/ml) were lower than those of the control. And this inhibitory effect was in a dose-dependent manner under experimental condition, GTC had no cytotoxicity.

Conclusion

GTC could inhibit HBV replication and expression.     

软肝饮对HBV转染细胞表达功能抑制的实验研究

目的 :观察软肝饮对HBV转染细胞表达功能的影响。方法 :本研究以乙型肝炎病毒 (HBV)转染细胞 (2 2 15细胞系 )作为筛选抗HBV药物的细胞模型 ,观察了纯草药方软肝饮对 2 2 15细胞分泌HBV表面抗原(HBsAg)和HBVe抗原 (HBeAg)的影响 ,并以抗病毒药物无环鸟甘为对照。结果 :软肝饮对 2 2 15细胞无明显毒性作用 ,同时显著抑制HBsAg成分。结论 :提示软肝软在体外有一定的抗病毒作用。     

天花粉提取物对HepG2.2.15细胞HBsAg和HBeAg表达的影响

目的:探讨天花粉水提取物、醇提取物对HepG2.2.15细胞的增殖及培养细胞上清中HBsAg与HBeAg表达的影响。方法:用MTT方法检测HepG2.2.15细胞的存活率,以酶联免疫法(ELISA)检测HepG2.2.15细胞上清液HBsAg和HBeAg的表达量。结果:天花粉水提取物和醇提取物处理HepG2.2.15细胞后HBsAg和HBeAg的表达均呈时间依赖性和浓度依赖性抑制,但天花粉水提物的治疗指数明显优于醇提物。结论:天花粉水提物较醇提物有更好的抗HBV活性。     

丁香多总皂对HBV转染细胞表达功能的影响

目的：观察丁香多总皂对HepG2．2．15细胞分泌HBeAg和HBsAg的影响．方法：采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测培养上清中HBeAg和HBsAg表达的变化并以抑制率来表示．结果：丁香多总皂对HBeAg和HBsAg的分泌具有抑制作用，该作用呈现剂量依赖性和时间依赖性。结论：丁香多总皂对HBeAg和HBsAg分泌的抑制作用提示其在体外具有抗乙型肝炎病毒的作用。     

大鼠骨髓来源树突状细胞外泌体的提取及功能研究

目的:探讨在不同成熟状态下树突状细胞(dendritic cell,DC)分泌的外泌体(exosomes,Dex)的制备、提取及体外功能鉴定。方法:F344大鼠骨髓来源DC培养6后分为2组,一组为未成熟树突状细胞组(immature DC,imDC):直接收集上清;一组为成熟树突状细胞组(mature DC,mDC):每孔加入终浓度为1μg/ml的LPS培养48h后,收集上清。然后用多步离心法分离得到Dex,流式细胞术检测两组Dex的表型,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测两组Dex与Wistar大鼠骨髓来源的imDC共培养上清的白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素12(IL-12p70)的含量,混合淋巴细胞实验(MLR)检测共培养DCs刺激T细胞增殖能力。结果:与mDC分泌的exosomes相比,imDC分泌的exosomes表面中度表达MHC-Ⅱ类分子、低表达CD80、CD86、CD40共刺激分子,而且与Wistar大鼠骨髓来源的imDC共培养后刺激IL-12p70分泌能力较低(P<0.05),刺激T淋巴细胞增殖的能力也较mDC分泌的exosomes组弱(P<0.05)。结论:不同成熟状态下的DC分泌...     

二氧化氯对HBsAg、HBeAg灭活作用的实验研究

目的 研究二氧化氯对HBsAg、HBeAg灭活作用.方法 采用中和剂分组试验,用SPRLA法检测HBsAg、HBeAg活性,PCR法测HBV-DNA.结果 1 000mg/L的二氧化氯溶液作用5min和500mg/L作用10min均可破坏血清中的HBsAg;500mg/L的二氧化氯溶液作用5min即可全部破坏HBeAg.结论 稳定性二氧化氯溶液的浓度和作用时间对HBsAg、HBeAg的灭活密切相关.适当的浓度和作用时间HBV-DNA可完全被破坏.     

沉香叶鞣质含量测定及抗氧化、延缓衰老作用的研究

目的测定沉香叶中鞣质含量并评价其抗氧化及延缓衰老活性。方法按照2010年版《中国药典》一部附录ⅩB方法测定沉香叶中鞣质含量;采用体外方法评价沉香叶的抗氧化活性;以人工饲养果蝇方法研究其延缓衰老作用。结果沉香叶中鞣质的含量为1.41%;氧化时间为16.4 s,超氧阴离子清除率为35.1%,总还原力的吸光度为0.189;与对照组相比,0.04 g/mL沉香叶能显著延长果蝇最高寿命(P<0.05);0.02、0.04、0.08 g/mL沉香叶均能显著延长果蝇的平均寿命(P<0.05)。结论沉香叶中含少量的鞣质,具有体外抗氧化和延缓果蝇衰老的作用。     

不同处理的NS1骨髓瘤细胞微小池分隔培养对树突状细胞生长和活性的影响

目的：观察不同方法处理灭活的骨髓瘤NS1细胞对树突状细胞(DC)生长和活性的影响。方法：采用细胞冻融、紫外线照射、次黄嘌呤-氨基瞟呤-胸腺嘧啶核苷(HAT)杀死肿瘤细胞法处理NS1细胞,将处理过的NS1细胞与DC细胞分别于直径3μm和直径8μm微小池内同池培养,并以活NS1细胞和空白微小池DC孔为对照;观察DC数目和形态改变;检测各组DC激活的体外混合淋巴细胞杀伤活性,观察各组DC对NS1骨髓瘤动物移植性肿瘤的抑瘤效果。结果：与活NS1同一孔池培养的DC数目减少,形态改变,不能诱导太强的细胞活性T淋巴细胞(CTL)作用和宿主体内免疫系统的抗肿瘤作用。而不同处理灭活NS1脉冲致敏的DC增殖旺盛,形态典型,均诱导出较强的CTL作用和宿主体内免疫系统的抗肿瘤作用。结论：在肿瘤免疫治疗中,脉冲致敏DC一定要用灭活的肿瘤细胞作为抗原刺激物,才能有效地完成抗原递呈功能。     

高脂饮食对氧化修饰低密度脂蛋白和巨噬细胞集落刺激因子影响的实验研究

目的：探讨高脂饮食引起动脉粥样硬化的机理。方法：采用高脂饮食喂养小鼠，用酶联免疫吸附法检测小鼠血清中OX－LDL含量；用RT－PCR法检测小鼠腹腔M－CSF mRNA的表达。结果：高脂刺激动物体内OX－LDL含量增加和M－CSF mRNA的表达的增强。结论：高脂刺激动物体内OX－LDL、M－CSF含量的升高，加速动脉粥样硬化的形成。