在搅拌罐中的自循环发酵

加拿大McGill大学van Walsum等用枯草杆菌和乙酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus),在一个有搅拌装置的罐内进行自循环发酵(SCFs)。自循环发酵(SCF)是计算机控制的、连续循环的半分批发酵,根据生长的代谢速率,通过反馈控制进行系统循环。SCF以一个频率循环,每个循环的持续时间与微生物增代时间(doubling time)相等,它诱导细胞同步生长,在一定条件下,因为每个循环时间与各个微生物的增代时间相     

发酵生产中pH连续测定及自动调节装置

在发酵生产中,如果pH值变化过大,有碍菌种的生长,直接影响发酵率。人工调节酸度则操作不便,控制不稳。我厂的工人和技术人员批判了林彪、孔老二散布的“上智下愚”反动谬论,根据生产的需要,试制成功了pH连续测定和自动调节装置。 pH值的连续测定装置我们用上海第二分析仪器厂生产的PHGF-23型流通式清洗变送器和PH G-21A型工业酸度计安装在发酵罐上,完成pH连续测定(见图1)。     

硝酸汞电位滴定法测定阿莫西林钠含量

用硝酸汞电位滴定法测定阿莫西林钠含量,以铂电极为指示电极,汞一硫酸亚汞电极为参比电极,用硝酸汞滴定液滴定,本方法简便,重现性好。     

S_(180)CR细胞生物学特性的初步研究

<正> S_(180)CR细胞系本室用小鼠S_(180)肉瘤细胞在小鼠体内诱导生成的耐卡铂细胞。本试验在过去研究的基础上,对S_(180)CR细胞的耐药特性进行了测定,现将结果报告如下。 1.材料与方法 1.1 细胞 S_(180)细胞 小鼠S_(180)肉瘤细胞,腹水型传代,已在本室保种传代五年以上。 S_(180)CR细胞 本室建立的耐卡铂细胞,已稳定传代两年以上。体外试验时两种细胞均培养于含10%小牛血清的RPMI1640培养基中。     

汞量法测定青霉素

青霉素的噻唑环含有一个硫原子,当开环时形成巯基。据此,Grafnetterova提出了一种在尿和生物材料中测定青霉素的滴定方法,先碱解,继之以中和,随即以氯化汞滴定,终点以旋转铂电极及甘汞电极的电位差指示。     

用膜细胞循环生物反应器高水平生产D—甘露醇

比较了 10株异型发酵的乳酸菌在休眠状态下从 D-果糖发酵产生 D-甘露醇的能力。在高细胞密度的膜细胞循环培养中对最好的菌株肠系膜状明串珠菌 ATCC-913 5 (L eu-conostoc mesenteroides ATCC-913 5 )进行了试验 ,甘露醇的发酵指数达到了 2 6.2 g· L-1 · h-1 ,产率为 97% (摩尔百分比 )。使用相同的初始生物量 ,甘露醇的稳定高产持续了 14批连续生物转化。应用反应表面方法学 ,分别研究了温度、p H对甘露醇发酵指数和产率的影响。用膜细胞循环生物反应器高水平生产D-甘露醇@李海明…     

聚维酮碘涂膜剂的制备及质量控制

目的：制备聚维酮碘涂膜剂,测定有效碘的含量。方法：用电位滴定法,批示电极为铂电极,参比电极为甘汞电极,０．１０３９ｍｏｌ／ＬＮａ２Ｓ２Ｏ３溶液为滴定液。结果：批示电极电势突变时,为滴定终点（选用Ｅ－Ｖ曲线法）。结论：电位滴定法测定ＰＶＰ－Ｉ中有效碘含量快速、简便、准确。     

流动注射双安培法测定异烟肼

目的　建立一种快速准确的在线分析测定异烟肼的电化学方法。方法　基于不可逆电对的双安培检测原理,使用经过恒电位阳极化预处理的双铂电极,在外加电位差为0V时,通过偶合异烟肼在一支铂电极上的催化氧化和另一支铂电极上氧化铂的还原两个不可逆电对,建立了流动注射双安培检测异烟肼的新方法。结果　常用药物赋形剂、无机离子、氨基酸、维生素、蛋白质等共存物均不干扰异烟肼的测定。异烟肼的氧化电流与其浓度在1.0×10^-6 - 1.0×10^-4 mol·L^-1 有良好的线性关系(γ=0.998,n=11)。连续8次测定1.0×10^-5mol·L^-1 异烟肼,电流值RSD =1 8%。结论　该方法有很高的选择性和灵敏度,且简单快速,适用于在线分析。     

带有压力补偿膜的新型测氧电极的研制

测定发酵过程中的溶氧变化,要求测氧电极能直接插入发酵罐内进行测量。因而会遇到电极的消毒问题。众所周知,一般发酵罐的蒸汽灭菌时温度要维持在120℃左右半小时(指实罐灭菌)或130～135℃一小时左右(指空罐灭菌)。这样高的温度往往使得电极内的电解质溶液膨胀,甚至沸腾而使复盖在阴极表面上的塑料膜鼓起,强度差的膜会破     

发酵系统中二氧化碳的影响及其测定

和氧一样,二氧化碳作为一个重要的工艺参数也愈来愈受到发酵工业的重视。对发酵系统中的二氧化碳实行连续的测定,不仅使得操作人员能对发酵工艺条件进行考察,而且与其他工艺参数(如摄氧率,经过电子计算机在线处理所得的参数(呼吸商)能给出整个系统的气体交换状况。尤其是在需氧微生物的培养中,这种气体交换状况往往能反映出细胞核的分化和蛋白质的代谢趋势,进而反映出与次级代谢有关的酶活力及细胞分裂状况。     

2-APB对顺铂诱导人卵巢癌SKOV3细胞内质网应激途径凋亡的影响

目的观察2-APB对顺铂诱导人卵巢癌SKOV3细胞内质网应激途径凋亡的影响。方法体外培养SKOV3细胞,分别加入3.5、7和14μg/ml顺铂作用12和24 h后,用MTT法检测顺铂对SKOV3细胞的抑制率,应用激光共聚焦显微镜观察细胞质内钙离子浓度变化;将SKOV3细胞随机分为空白对照组、顺铂组、2-APB组和顺铂+2-APB组,分别处理24 h后,用倒置相差显微镜观察顺铂对SKOV3细胞形态的影响,用激光共聚焦显微镜观察细胞质内钙离子浓度变化;分别处理12 h后,采用Western blot检测Caspase-3、CHOP和GRP78蛋白表达。结果 MTT结果显示,3.5、7和14μg/ml顺铂作用SKOV3细胞12和24 h,SKOV3细胞存活率明显降低,作用12和24 h的IC50分别为(14.7±0.1)μg/ml和(6.6±0.1)μg/ml。激光共聚焦显微镜检测发现,随顺铂浓度及作用时间的增加,SKOV3细胞质游离钙离子浓度逐渐增加。顺铂与2-APB联合作用后,经倒置相差显微镜观察,与顺铂组比较,顺铂+2-APB组细胞密度明显增多。MTT结果显示,与顺铂组比较,顺铂+2-APB组细胞存活率由56.8%±0.9%上升至74.4%±1.0%,激光共聚焦显微镜检测发现,游离钙荧光点数由(58.4±0.2)×10~3个降低至(23.8±0.3)×10~3个,差异有统计学意义(P0.01)。Western blot结果表明,与顺铂组比较,顺铂+2-APB组的Caspase-3、CHOP和GRP78蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论细胞内钙离子参与调控顺铂诱导的SKOV3细胞凋亡。     

顺铂处理肝癌细胞SMMC-7721的蛋白质组学分析

目的:用蛋白质组技术分析顺铂(cisplatin,DDP)作用于肝癌SMMC-7721细胞后细胞内蛋白质组的变化.方法:采用四氮唑蓝还原反应法(MTT)测定细胞生长抑制率.顺铂(10 mg·L-1)作用肝癌SMMC-7721细胞24 h,分别收集顺铂处理组与对照组细胞,提取细胞内总蛋白并采用双向电泳(2-DE)分离,Image Master 2D Platinum软件分析顺铂处理前后差异表达蛋白质,切取明显差异点,基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异蛋白.结果:顺铂可抑制肝癌SMMC-7721细胞的生长,其抑制作用具有剂量及时间依赖性.质谱鉴定出4个已知序列的差异蛋白点.结论:顺铂处理后肝癌SMMC-7721细胞内差异表达的蛋白可能与顺铂的抗肿瘤作用机制有关.     

蛇葡萄素钠协同卡铂抑制人肺腺癌SPC-A-1细胞增殖

目的:探讨蛇葡萄素钠(AMP-Na)单用及其与卡铂(CBP)合用对SPC-A-1人肺腺癌细胞增殖的抑制作用及可能的机制。方法:采用MTT比色法测定AMP-Na单用及其与CBP合用对SPC-A-1细胞的体外细胞毒活性;用流式细胞仪分析AMP-Na单用及与卡铂合用后对SPC-A-1细胞凋亡的影响。结果:体外细胞毒实验和流式细胞仪结果表明,AMP-Na对人肺腺癌SPC-A-1细胞增殖的抑制作用具有明显的量效关系,与CBP联用后凋亡率较卡铂单用明显上升,有协同抑制作用。结论:AMP-Na单用能够显著抑制人肺腺癌SPC-A-1细胞的增殖,与卡铂合用可以增强卡铂的活性,协同抑制SPC-A-1细胞的增殖;AMP-Na可能是通过诱导凋亡而发挥其抗肿瘤作用。     

旋光法测定发酵液中林可霉素的含量

林可霉素(洁霉素)发酵过程中含量的测定,以往均采用微生物法(下简称生测法)测定。但测定时间长,对发酵过程指导意义不大。分光光度法测定林可霉素〔本刊1986,     

核苷二磷酸激酶A亚基的纯化、鉴定及其对顺铂抗癌作用的增强

目的　了解核苷二磷酸激酶A亚基 (NDPK A)能否提高顺铂的抗癌效果。方法　利用十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和Western印迹杂交来监测和鉴定目标蛋白NDPK A ,利用离子交换、亲和层析结合高效液相色谱纯化分离目标蛋白 ;MTT比色法测定药物对细胞生长抑制率的影响。结果　获得NDPK A单体蛋白 ,酶比活为 8mmol·min- 1·g- 1蛋白质 ;细胞生长抑制率显示 ,NDPK A单独处理细胞时未见明显的细胞毒性 ,但与顺铂联合处理却能大大加强后者对鼠肺腺癌细胞LA795和人喉癌细胞Hep 2的细胞毒性。结论　NDPK A与顺铂联用能增强顺铂对体外培养的鼠肺腺癌细胞LA795和人喉癌细胞Hep 2的杀伤作用     

左旋紫草素联合顺铂对宫颈癌Hela细胞的抑制作用及其作用机制

目的探讨左旋紫草素(shikonin,SHK)联合顺铂(cisplatin,CDDP)对宫颈癌Hela细胞的抑制作用及作用机制。方法采用CCK-8法分别测定不同浓度的顺铂、紫草素和紫草素联合顺铂溶液对宫颈癌Hela细胞增殖的活性抑制作用;流式细胞仪测定紫草素联合顺铂后诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的情况;Western blot检测Caspase-3蛋白表达情况。结果左旋紫草素对宫颈癌Hela细胞有抑制作用,24 h与48 h的IC50分别为1.05和0.89 mg·L~(-1)。紫草素联合顺铂作用于Hela细胞48 h后,细胞数量明显变少,胞体变圆,缩小,出现明显的细胞凋亡现象;不同浓度的紫草素联合顺铂作用于Hela细胞,24 h/48 h的IC50值(0.15 mg·L~(-1)SHK+CDDP 2.82 mg·L~(-1)/1.87 mg·L~(-1);0.3 mg·L~(-1)SHK+CDDP 2.43 mg·L~(-1)/1.52 mg·L~(-1);0.6 mg·L~(-1)SHK+CDDP 2.01 mg·L~(-1)/1.23 mg·L~(-1))明显低于顺铂(CDDP 3.54 mg·L~(-1)/2.78 mg·L~(-1))的IC50值,具有显著性差异(P<0.05);用流式细胞仪检测细胞凋亡率显示,随着紫草素浓度的增大,紫草素联合顺铂(1.2 mg·L~(-1)SHK+CDDP总凋亡率15.6%)细胞凋亡比率增高,与对照组顺铂(CDDP总凋亡率3.7%)相比,具有显著性差异(P<0.05)。0.3、0.6、1.2 mg·L~(-1)紫草素+顺铂分别作用Hela细胞48 h后,Western blot结果显示,Caspase-3随着紫草素浓度的增加,出现了明显的裂解活化,促进了凋亡。结论紫草素联合顺铂对宫颈癌Hela细胞有明显的抑制作用,其抑制作用与促进Hela细胞凋亡有关。     

自控pH连续补料发酵生产微生物产物

本文对自控pH和连续补料的发酵罐中pH电极灭菌、连续补料用电磁阀等技术关键作了介绍,它们应用于维生素 C、青霉素、林可霉素和头孢菌素 C 发酵,获得了较为满意的效果。     

C-1型溶氧电极的研制

近些年来,国内在微生物深层发酵溶氧自测研究中,上海化工学院等单位研制的原电池型闭式溶氧复膜电极得到了应用。该电极具有不需外加电源,受外界影响较小和结构简单等优点。但是,还存在着蒸汽灭菌时由于电极内外压差变化而导致膜的破损、使用寿命较短和更换电解质溶液需拆卸电极等问题。为此研制一种带补偿装置的原电池型闭式溶氧复膜电极,经长期试用考察,效果较好。初步解决了使用寿命等问题。经四川抗菌素工业研究所学术委员会审定,将此带有     

顺铂、紫杉醇对人卵巢癌HO-8910细胞端粒酶活性表达的影响

目的　探讨顺铂和紫杉醇对卵巢癌细胞端粒酶活性表达的影响。方法　用TRAP ELISA法分别检测顺铂 (5 μg/ml)和紫杉醇 (10 6M )作用不同时间后卵巢癌HO 8910细胞端粒酶活性改变 ,并以TUNEL法同步检测细胞凋亡。结果　随着药物作用时间的延长 ,HO 8910细胞株的凋亡率逐渐增加 ,而端粒酶活性逐渐降低。在紫杉醇作用 6 0h后 ,细胞凋亡达 (88 30± 1 0 0 ) %时 ,端粒酶才完全丧失活性 ;而顺铂作用 12h后 ,该细胞株的端粒酶活性完全消失时细胞凋亡率仅有(11 4 3± 0 2 3) %。结论　端粒酶活性抑制可能是顺铂诱导卵巢癌细胞凋亡的机制之一 ,临床监测端粒酶活性表达有助于对抗卵巢癌化疗药物的疗效进行客观评价。     

卡那霉素链霉菌在摇瓶培养中的溶氧研究

微生物在发酵过程中,不断消耗发酵液中的溶解氧,发酵液中溶氧量等于供氧减去耗氧。由于在发酵的各阶段微生物在发酵液中单位容量内细胞数和呼吸强度不同,所以耗氧也不同。一般说来,发酵开始时,虽然细胞的呼吸很强,但菌丝量很少,所以微生物在