青蒿琥酯增强顺铂对前列腺癌细胞杀伤活性及作用机制研究

目的观察体外联用青蒿琥酯对顺铂抗前列腺癌活性的影响并研究其机制。方法人前列腺癌细胞系LNCaP分为对照组、青蒿琥酯组、顺铂组、顺铂+青蒿琥酯组、顺铂+青蒿琥酯+MET质粒组。采用噻唑蓝(MTT)法检测前列腺癌细胞系LNCaP的细胞活力抑制率;流式细胞术检测LNCaP细胞的凋亡;Western blot实验检测LNCaP细胞Met表达水平,AKT和Bad磷酸化水平,caspase-9和caspase-3活化水平;免疫共沉淀法检测Bad与Bcl-xl及Bcl-2相互作用。结果顺铂+青蒿琥酯组LNCaP细胞活力抑制率(61.4±4.9)%和凋亡率(34.8±2.9)%均高于顺铂单处理组的细胞活力抑制率(14.7±1.1)%和凋亡率(12.5±1.0)%(P均0.05)。顺铂+青蒿琥酯组LNCaP细胞Met表达水平,AKT和Bad磷酸化水平均低于顺铂组,而顺铂+青蒿琥酯组LNCaP细胞Bad与Bcl-xl及Bcl-2结合水平,caspase-9和caspase-3活化水平均高于顺铂组(P均0.05)。青蒿琥酯发挥对顺铂的辅助治疗作用依赖于Met的抑制,顺铂+青蒿琥酯+Met质粒组LNCaP的细胞活力抑制率(20.3±1.4)%和凋亡率(15.5±1.2)%均低于顺铂+青蒿琥酯组的细胞活力抑制率(61.4±4.9)%和凋亡率(34.8±2.9)%(P均0.05)。结论青蒿琥酯可能通过Met/AKT/Bad途径增强顺铂对前列腺癌细胞的杀伤活性。     

青蒿琥酯协同5-氟尿嘧啶杀伤胰腺癌细胞及机制研究

目的 探讨中药活性成分青蒿琥酯对胰腺癌5-氟尿嘧啶化疗的辅助治疗作用并研究其机制。方法: MTT法检测青蒿琥酯和5-氟尿嘧啶对胰腺癌细胞系Capan-2的杀伤活性。Western blot实验检测Capan-2细胞中survivin的表达水平和细胞色素c、凋亡诱导因子从线粒体中的释放水平。流式细胞术检测Capan-2细胞的线粒体膜电位和凋亡率。结果: 青蒿琥酯对5-氟尿嘧啶有协同作用,青蒿琥酯联合5-氟尿嘧啶组Capan-2的细胞活力抑制率(68.5±5.9)%和凋亡率(37.9±3.2)%显著高于5-氟尿嘧啶单处理组Capan-2的细胞活力抑制率(20.7±2.1)%(P<0.05)和凋亡率(11.3±1.5)%(P<0.05)。青蒿琥酯处理显著抑制Capan-2细胞中survivin的表达。青蒿琥酯联合5-氟尿嘧啶组Capan-2细胞的线粒体膜电位明显低于5-氟尿嘧啶单处理组。青蒿琥酯联合5-氟尿嘧啶组Capan-2细胞的细胞色素和凋亡诱导因子释放水平均明显高于5-氟尿嘧啶单处理组。青蒿琥酯发挥对5-氟尿嘧啶的协同作用依赖于survivin的抑制,青蒿琥酯+5-氟尿嘧啶+survivin质粒组Capan-2的细胞活力抑制率(26.8±2.5)%和凋亡率(14.5±1.7)%显著低于青蒿琥酯+5-氟尿嘧啶组Capan-2的细胞活力抑制率(68.5±5.9)%(P<0.05)和凋亡率(37.9±3.2)%(P<0.05)。结论: 青蒿琥酯抑制survivin的表达发挥对5-氟尿嘧啶的协同抗胰腺癌活性。     

青蒿琥酯和TRAIL对前列腺癌细胞凋亡诱导作用的实验研究

目的探讨青蒿琥酯和肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)对前列腺癌细胞(PC-3、LNCaP)凋亡的诱导作用。方法培养前列腺癌PC-3、LNCaP细胞,分别加入不同浓度的青蒿琥酯和TRAIL,随机分为7个组:对照组、青蒿琥酯Ⅰ组(低剂量组)、青蒿琥酯Ⅱ组(高剂量组)、TRAILⅠ组(低剂量组)、TRAILⅡ组(高剂量组)、TRAIL(1 ng/mL)加青蒿琥酯(1mmol/L)Ⅰ组及TRAIL(1 ng/mL)加青蒿琥酯(5 mmol/L)Ⅱ组。流式细胞仪检测青蒿琥酯和TRAIL诱导前列腺癌细胞凋亡的凋亡率。结果青蒿琥酯和TRAIL均可增加前列腺癌细胞凋亡的凋亡率,二者联合使用诱导的前列腺癌细胞的凋亡率明显高于两种药物单独使用。结论青蒿琥酯与TRAIL联合使用对前列腺癌存在诱导凋亡的协同作用。青蒿琥酯能诱导提高前列腺癌细胞对TRAIL的敏感性,加强TRAIL的诱导肿瘤细胞凋亡的作用。     

二氢杨梅素通过SIRT1/ROS/JNK途径增强顺铂对乳腺癌细胞的杀伤活性

目的: 探讨天然药物活性成分二氢杨梅素是否对顺铂有协同抗乳腺癌效应并研究其机制。方法: MTT法和Annexin V染色流式细胞术检测二氢杨梅素和顺铂处理对乳腺癌细胞系MDA-MB-435细胞活力和细胞凋亡的影响。采用western blot方法检测二氢杨梅素是否影响MDA-MB-435细胞中SIRT1的表达。运用二氢乙啶(DHE)染色流式细胞术及western blot方法研究二氢杨梅素联合顺铂对MDA-MB-435细胞ROS/JNK通路的影响。结果: 顺铂联合二氢杨梅素对MDA-MB-435的细胞活力抑制率(61.5±5.1)和凋亡诱导率(36.8±2.9)显著高于顺铂单治疗组的的细胞活力抑制率(15.2±1.4,P<0.05)和凋亡诱导率(7.6±0.6,P<0.05)。流式细胞和western blot实验结果显示二氢杨梅素处理可显著抑制MDA-MB-435细胞SIRT1蛋白的表达水平并显著增强顺铂对MDA-MB-435细胞活性氧簇(ROS)的诱导、JNK蛋白的磷酸化和caspase-9、caspase-3的活化。另外,顺铂+二氢杨梅素+SIRT1组MDA-MB-435的细胞活力抑制率(19.7±1.6)和凋亡诱导率(10.8±0.9)显著低于顺铂联合二氢杨梅素组MDA-MB-435的细胞活力抑制率(61.5±5.1,P<0.05)和凋亡诱导率(36.8±2.9,P<0.05)。结论: 二氢杨梅素通过抑制SIRT1的表达增强顺铂对乳腺癌细胞的杀伤活性。     

青蒿琥酯对骨髓瘤 RPMI 8226 细胞增殖、凋亡及对 Survivin、Caspase-3、Caspase-7 的影响

目的 探讨青蒿琥酯对体外培养的人多发性骨髓瘤细胞株 RPMI8226 的增殖、凋亡及对凋亡相关基因 survivin 及 caspase-3、caspase-7 表达的影响。方法 采用 MTT 法检测青蒿琥酯对 RPMI8226 细胞增殖的抑制作用,光镜下观察细胞形态学变化,流式细胞仪分析细胞凋亡率,荧光定量 PCR (FQ-PCR) 检测 survivin 和 caspase-3、caspase-7 mRNA 表达水平变化,Western blotting 检验 Survivin蛋白表达变化,应用 Caspase-3/7 试剂盒检测 Caspase-3、Caspase-7 蛋白活性。结果 青蒿琥酯质量浓度从 2.5 μg/mL 增加至 50 μg/mL 时,青蒿琥酯体外对 RPMI8226 细胞的抑制率由 33.55% 增加到 74.71%。细胞凋亡率呈剂量依赖性增加,50 μg/mL 青蒿琥酯诱导 RPMI8226 细胞最大凋亡率达 (68.1±5.9)%。不同质量浓度青蒿琥酯干预 48 h 后 Survivin mRNA 及蛋白表达水平明显降低,Caspase-3、Caspase-7 mRNA 及蛋白活性明显升高 (P＜0.01)。结论 青蒿琥酯对 RPMI8226 细胞有生长抑制和诱导凋亡作用,其机制可能与增强 Caspase-3、Caspase-7 活性,抑制抗凋亡分子 survivin 表达有关。     

川楝素通过XIAP途径增强肺癌细胞对顺铂的敏感性

目的: 研究天然药物活性成分川楝素对顺铂抗肺癌活性的协同效应并研究其机制。方法：实验对象为人肺癌细胞系A549,实验分为对照组,川楝素组,顺铂组,川楝素+顺铂组及川楝素+顺铂+XIAP质粒。MTT实验检测各组A549的细胞活力抑制率;流式细胞实验检测各组A549的细胞的凋亡;免疫共沉淀及western blot实验检测各组A549的细胞中XIAP表达水平及其与caspase-9和caspase-3的相互作用;western blot实验检测各组A549的细胞caspase-9和caspase-3的活化。结果：顺铂+川楝素组A549的细胞活力抑制率(66.8±5.9)显著高于顺铂单治疗组(15.2±1.2, P<0.05)和川楝素+顺铂+XIAP质粒组(20.4±1.8, P<0.05);顺铂+川楝素组A549的细胞凋亡率(34.5±2.6)显著高于顺铂单治疗组(9.7±0.8, P<0.05)和川楝素+顺铂+XIAP质粒组(13.3±1.2, P<0.05);免疫共沉淀及western blot实验显示川楝素能显著抑制A549细胞中XIAP的表达及其与caspase-9和caspase-3的相互作用,川楝素促进顺铂对caspase-9和caspase-3的活化。结论：川楝素通过下调XIAP的表达增强肺癌细胞对顺铂的敏感性。     

青蒿琥酯联合奥沙利铂诱导胃癌细胞凋亡及对p38MAPK和Caspase-3表达的影响

目的 观察青蒿琥酯联合奥沙利铂对胃癌细胞SGC-7901生长的抑制作用,并探讨其可能的机制.方法 应用光学显微镜观察青蒿琥酯联合奥沙利铂对胃癌细胞形态学变化的影响;噻唑氮蓝(MTT),吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双荧光染色法检测细胞活力及细胞凋亡情况;RT-PCR及Western blot检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)表达水平.结果 (1)青蒿琥酯及奥沙利铂单独作用胃癌细胞后,其生长均明显被抑制,抑制率具有浓度依赖性(P＜0.05).(2)青蒿琥酯联合奥沙利铂对胃癌细胞的抑制率优于青蒿琥酯或奥沙利铂单药使用,两者具有协同作用.(3)胃癌细胞的凋亡率随药物作用浓度增加而增加.(4)青蒿琥酯及青蒿琥酯联合奥沙利铂作用于胃癌细胞后p38MAPK、Caspase-3表达量均明显增加(均P＜0.05).结论 青蒿琥酯联合奥沙利铂能有效抑制胃癌细胞增殖,诱导其凋亡.其机制可能是通过p38MAPK通路诱导p38MAPK和Caspase-3表达增加最终导致胃癌细胞凋亡有关.     

中药活性成分雷公藤红素通过抑制Bcl-w的表达逆转宫颈癌细胞的顺铂耐药

目的：研究中药活性成分雷公藤红素是否能逆转耐药宫颈癌细胞株Hela/R对顺铂的耐药性并探讨其机制。方法：采用顺铂梯度暴露法构建顺铂耐药宫颈癌细胞株Hela/R;采用MTT法检测雷公藤红素是否能增强顺铂对Hela/R的杀伤活性;Western blot试验检测常规Hela细胞及Hela/R细胞Bcl-2, Bcl-w及Bcl-xl的表达水平;采用流式细胞术检测雷公藤红素联合顺铂对Hela/R细胞的凋亡诱导效应及对线粒体膜电位的影响。结果：不同浓度顺铂对Hela及Hela/R细胞的细胞活力抑制率如下：1μmol/L顺铂组: 18.6±1.5 (Hela), 1.9±1.0 (Hela/R); 2μmol/L顺铂组: 23.9±2.4 (Hela), 3.1±1.2 (Hela/R); 4μmol/L顺铂组: 47.8±3.9 (Hela), 6.8±1.5 (Hela/R); 8μmol/L顺铂组: 63.4±5.4 (Hela), 11.6±1.8 (Hela/R); 16μmol/L顺铂组: 72.7±5.9 (Hela), 20.4±2.0 (Hela/R); 32μmol/L顺铂组: 85.7±6.7 (Hela), 41.2±3.3 (Hela/R); 64μmol/L顺铂组: 91.8±7.9 (Hela), 55.8±4.3 (Hela/R)。雷公藤红素联合顺铂对Hela/R细胞的细胞活力抑制率如下: 雷公藤红素组: 6.6±1.1; 10μmol/L顺铂组: 12.4±1.2; 20μmol/L顺铂组: 27.8±1.9; 40μmol/L顺铂组: 45.2±3.1; 10μmol/L顺铂+雷公藤红素组: 57.2±3.9; 20μmol/L顺铂+雷公藤红素组: 71.4±5.1; 40μmol/L顺铂+雷公藤红素组: 84.8±6.8。Hela及Hela/R细胞Bcl-2抗凋亡蛋白家族成员的相对表达水平如下: Bcl-2/β-actin: 37.9±1.8 (Hela), 41.4±2.1 (Hela/R); Bcl-xl/β-actin: 32.1±1.9 (Hela), 30.2±1.7 (Hela/R); Bcl-w/β-actin: 22.1±1.3 (Hela), 70.9±4.9 (Hela/R)。雷公藤红素显著增强顺铂对Hela/R细胞线粒体膜电位的损伤,促进细胞色素C的释放,进而诱导Hela/R细胞发生凋亡。结论：雷公藤红素通过抑制Bcl-w的功能促进顺铂对耐药宫颈癌细胞的凋亡诱导效应。     

黄芩素通过SIRT1/p53途径提高宫颈癌细胞对顺铂的敏感性

目的: 探讨中药活性成分黄芩素是否对顺铂有协同抗宫颈癌效应并研究其机制。方法: MTT实验检测宫颈癌细胞系Hela的细胞活力;流式细胞术检测Hela细胞的凋亡;western blot实验检测Hela细胞中SIRT1、p53、乙酰化p53、Puma的表达水平及caspase-3的活化水平。结果: 顺铂联合黄芩素对Hela的细胞活力抑制率(66.3±5.7)和凋亡诱导率(38.4±3.2)显著高于顺铂单治疗组的的细胞活力抑制率(18.1±1.4,P<0.05)和凋亡诱导率(10.4±0.9,P<0.05)。顺铂联合黄芩素治疗组的SIRT1表达水平显著低于顺铂单治疗组,同时顺铂联合黄芩素治疗组的p53乙酰化水平和表达水平、Puma表达水平及caspase-3活化水平均显著高于顺铂单治疗组。另外,顺铂+黄芩素+SIRT1质粒组Hela的细胞活力抑制率(25.7±2.1)和凋亡诱导率(14.5±1.1)显著低于顺铂联合黄芩素组Hela的细胞活力抑制率(66.3±5.7,P<0.05)和凋亡诱导率(38.4±3.2,P<0.05)。结论: 黄芩素通过SIRT1/p53途径增强顺铂对宫颈癌细胞的杀伤活性。     

槲皮素通过SIRT1/ROS/DR5途径发挥对TRAIL的协同抗前列腺癌活性

目的: 探讨中药活性成分槲皮素是否对TRAIL有协同抗前列腺癌效应并研究其机制。方法: MTT实验检测前列腺癌细胞系PC3的细胞活力;流式细胞术检测PC3细胞的凋亡和ROS的产生;western blot实验检测PC3细胞中SIRT1、DR5的表达水平及caspase-8、caspase-3的活化水平。结果: TRAIL联合槲皮素对PC3的细胞活力抑制率(64.7±5.2)和凋亡诱导率(34.7±2.6)显著高于TRAIL单治疗组的细胞活力抑制率(16.9±1.4,P<0.05)和凋亡诱导率(9.1±0.8,P<0.05)。TRAIL联合槲皮素治疗组的SIRT1表达水平显著低于TRAIL单治疗组,同时TRAIL联合槲皮素治疗组的DR5表达水平、ROS产生水平及caspase-8、caspase-3活化水平均显著高于TRAIL单治疗组。另外,TRAIL+槲皮素+SIRT1质粒组PC3的细胞活力抑制率(23.4±1.9)和凋亡诱导率(12.5±1.2)及TRAIL+槲皮素+NAC组PC3的细胞活力抑制率(21.5±1.8)和凋亡诱导率(11.3±1.1)均显著低于TRAIL联合槲皮素组PC3的细胞活力抑制率(64.7±5.2,P<0.05)和凋亡诱导率(34.7±2.6,P<0.05)。结论: 槲皮素通过SIRT1/ROS/DR5途径发挥对TRAIL的协同抗前列腺癌活性。     

蛇床子素通过c-met/PI3K/AKT途径提高顺铂对肺癌细胞的杀伤活性

目的探讨蛇床子素是否能提高顺铂对肺癌细胞的杀伤活性并研究其机制。方法 A549非小细胞肺癌细胞按对照组、蛇床子素组、顺铂组、蛇床子素+顺铂组及蛇床子素+顺铂+c-met质粒组进行分组后,MTT法检测A549细胞活力,Western blot实验检测A549细胞蛋白酪氨酸激酶(cmet)表达水平,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)磷酸化水平及半胱天冬酶(caspases)活化水平的影响,流式细胞术检测A549细胞的凋亡。结果顺铂+蛇床子素组A549的细胞活力抑制率[(59.8±3.5)%]显著高于顺铂单治疗组[(16.9±1.2)%,P0.05]和蛇床子素+顺铂+c-met质粒组[(21.6±1.5)%,P0.05]。蛇床子素处理可诱导A549细胞c-met蛋白的下调并抑制A549细胞PI3K和AKT的磷酸化。顺铂+蛇床子素组对A549细胞的凋亡诱导率[(29.7±2.1)%]显著高于顺铂组[(7.8±0.9)%,P0.05]和蛇床子素+顺铂+c-met质粒组[(10.1±1.5)%,P0.05]。顺铂+蛇床子素组A549细胞的Caspase-9、Caspase-3活化水平显著高于顺铂组和蛇床子素+顺铂+c-met质粒组。结论蛇床子素通过下调c-met表达提高肺癌细胞对顺铂的敏感性。     

汉防己甲素体外辅助多柔比星杀伤胃癌细胞及机制研究

目的探讨中药活性成分汉防己甲素是否能在体外辅助多柔比星杀伤胃癌细胞并研究其机制。方法噻唑蓝(MTT)法检测胃癌细胞系MGC-803相对细胞活力。Western blot实验检测MGC-803细胞中小窝蛋白-1(caveolin-1)表达水平、蛋白激酶B(AKT)和B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)相关细胞死亡激动子(Bad)磷酸化水平、半胱天冬酶-9(caspase-9)和半胱天冬酶-3(caspase-3)活化水平。免疫共沉淀法检测Bad与大分子B淋巴细胞瘤蛋白(Bcl-xl)及Bcl-2相互作用。流式细胞术检测MGC-803细胞的凋亡。结果汉防己甲素+多柔比星组MGC-803相对细胞活力(0.34±0.03)显著低于多柔比星(0.79±0.06)(P0.05),汉防己甲素+多柔比星组MGC-803的细胞凋亡率显著高于多柔比星组[(40.32±3.51)%比(12.23±1.13)%,P0.05]。汉防己甲素+多柔比星组MGC-803细胞的caveolin-1表达水平、AKT和Bad的磷酸化水平均低于多柔比星组,而汉防己甲素+多柔比星组MGC-803细胞的Bad与Bcl-xl及Bcl-2结合水平、caspase-9和caspase-3活化水平均高于多柔比星组。汉防己甲素+多柔比星+caveolin-1质粒组MGC-803相对细胞活力显著高于汉防己甲素+多柔比星组[(0.71±0.06)比(0.34±0.03),P0.05],而其细胞凋亡率显著低于汉防己甲素+多柔比星组[(15.94±1.22)%比(40.32±3.51)%,P0.05]。结论汉防己甲素可能通过caveolin-1/AKT/Bad途径增强多柔比星对胃癌细胞的凋亡诱导活性。     

二氢青蒿素抑制ATF2的磷酸化提高胃癌细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性

目的探讨二氢青蒿素与5-氟尿嘧啶协同抗胃癌效应的机制。方法 MTT实验检测胃癌细胞系BGC-823的细胞活力;流式细胞术检测BGC-823细胞的凋亡;Western blot实验检测BGC-823细胞中ATF2、磷酸化ATF2、Bcl-xl的表达水平及细胞色素c的释放水平和Caspase-3活化水平。结果 5-氟尿嘧啶联合二氢青蒿素对BGC-823的细胞活力抑制率[(67.1±5.5)%]和凋亡诱导率[(37.3±2.9)%]均显著高于5-氟尿嘧啶单治疗组[细胞活力抑制率:(18.9±1.5)%,P0.05];凋亡诱导率[(9.5±0.9)%,P0.05]。5-氟尿嘧啶+二氢青蒿素+ATF2质粒组BGC-823的细胞活力抑制率[(26.5±2.1)%]和凋亡诱导率[(14.9±1.1)%]显著低于5-氟尿嘧啶联合二氢青蒿素组(P0.05)。5-氟尿嘧啶联合二氢青蒿素组的ATF2磷酸化水平和Bcl-xl表达水平均显著低于5-氟尿嘧啶单治疗组,同时5-氟尿嘧啶联合二氢青蒿素治疗组的细胞色素c释放水平及Caspase-3活化水平均显著高于5-氟尿嘧啶单治疗组。结论二氢青蒿素通过抑制ATF2的磷酸化增强5-氟尿嘧啶对胃癌细胞的杀伤活性。     

白藜芦醇通过下调HAX-1的表达提高耐药结直肠癌细胞对TRAIL的敏感性

目的: 探讨天然药物白藜芦醇是否能提高耐药结直肠癌细胞对TRAIL的敏感性并研究其机制。方法: 将TRAIL耐药HT29细胞(TR-HT29细胞)按对照组,白藜芦醇组,TRAIL组,白藜芦醇+TRAIL组及白藜芦醇+TRAIL+HAX-1质粒组进行分组后,CCK-8法检测TR-HT29的细胞活力,流式细胞术检测TR-HT29细胞的凋亡程度和线粒体膜电位,western blot实验检测TR-HT29细胞HAX-1的表达水平、细胞色素c的释放和caspase-3的活化。结果: TR-HT29细胞对TRAIL的半数有效浓度(IC50)(19.4±1.3 ng/ml)显著高于HT29细胞(1.8±0.2, P<0.05)。白藜芦醇处理可显著抑制TR-HT29细胞中HAX-1蛋白的表达水平。白藜芦醇+TRAIL组TR-HT29的细胞活力抑制率(53.6±4.4 %)和凋亡诱导率(39.4±2.9 %)显著高于TRAIL组的细胞活力抑制率(14.3±1.0 %, P<0.05)、凋亡诱导率(9.6±0.7 %, P<0.05)和白藜芦醇+TRAIL+HAX-1质粒组的细胞活力抑制率(19.9±1.5 %, P<0.05)、凋亡诱导率(13.8±1.1 %, P<0.05)。白藜芦醇+TRAIL组TR-HT29的线粒体膜电位显著低于TRAIL组和白藜芦醇+TRAIL+HAX-1质粒组。白藜芦醇+TRAIL组TR-HT29细胞色素c的释放和caspase-3的活化显著高于TRAIL组和白藜芦醇+TRAIL+HAX-1质粒组。结论: 白藜芦醇通过下调HAX-1的表达提高耐药结直肠癌细胞对TRAIL的敏感性。     

桔梗皂苷D上调ASK1的表达增强阿霉素的体外抗肝癌活性

目的: 探讨中药活性成分桔梗皂苷D是否对阿霉素有协同抗肝癌效应并研究其机制。方法: MTT实验检测肝癌细胞系PLC的细胞活力;流式细胞术检测PLC细胞的凋亡和活性氧簇(ROS)的产生;western blot实验检测PLC细胞中ASK1及JNK的磷酸化水平及caspase-3的活化水平。结果: 阿霉素联合桔梗皂苷D对PLC的细胞活力抑制率(63.2±5.4)和凋亡诱导率(35.1±3.1)显著高于阿霉素单治疗组的的细胞活力抑制率(16.6±1.3,P<0.05)和凋亡诱导率(8.2±0.7,P<0.05)。桔梗皂苷D处理不影响PLC细胞内的ROS水平,但阿霉素联合桔梗皂苷D处理组的ASK1及JNK的磷酸化水平及caspase-3的活化水平均显著高于阿霉素单治疗组。另外,阿霉素+桔梗皂苷D+ASK1小干扰RNA组PLC的细胞活力抑制率(21.5±1.8)和凋亡诱导率(11.3±0.9)显著低于阿霉素联合桔梗皂苷D组PLC的细胞活力抑制率(63.2±5.4,P<0.05)和凋亡诱导率(35.1±3.1,P<0.05)。结论: 桔梗皂苷D上调ASK1的表达增强阿霉素的体外抗肝癌活性。     

Akt抑制剂MK2206对舌鳞癌TCA-8113细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制

目的：探讨Akt抑制剂MK2206对舌鳞状细胞癌(舌鳞癌)TCA-8113细胞增殖和凋亡的影响,并阐明其可能的作用机制。方法：取处于对数生长期舌鳞癌TCA-8113细胞株随机分为对照组和1、5、25、125及250 nmol/L MK2206实验组。在不同剂量及时间处理因素下,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,蛋白质印迹分析检测细胞中caspase-9、Bad 、GSK-3β、p-Akt和T-Akt蛋白表达水平。 结果：舌鳞癌TCA-8113细胞在MK2206
作用12、24和36 h的半数抑制浓度（ＩＣ５０）分别为（112.54±1.67）、（79.67±2.01）和(33.33±1.98） nmol/L。FCM法检测,1、5、25、125和250 nmol?L-1 MK2206作用舌鳞癌TCA-8113细胞12 h后,细胞凋亡率分别为（14.2±0.74）%、（19.3±0.45）%、（35.1±0.45）%、（39.6±0.48）%和（52.1±0.19）%,与对照组比较差异均有统计学意义（P<0.01）。蛋白质印迹分析,随着MK2206药物剂量和作用时间的增加,p-Akt、Bad 和GSK-3β蛋白表达水平下降,与对照组β-actin比较其条带的颜色变暗;caspase-9蛋白表达水平升高,与对照组β-actin比较其条带的颜色变深。T-Akt蛋白表达变化不明显,与对照组β-actin比较条带的颜色无明显不同。结论：Akt抑制剂MK2206可抑制舌鳞癌TCA-8113细胞增殖并诱导凋亡。     

α-生育酚缓解链脲佐菌素诱导乳鼠胰岛细胞损伤的研究

目的探讨α-生育酚(α-T)对链脲佐菌素(STZ)诱导的胰岛细胞损伤的作用及其机制。方法原代培养大鼠胰岛细胞,电镜观察STZ处理前、后胰岛β细胞形态,检测STZ处理前、后胰岛细胞活性、胰岛细胞凋亡率以及Bcl-xl和Bax的变化。并进一步观察给予α-T预处理后上述指标的变化。结果 (1)随着α-T浓度增高,α-T干预组中反映胰岛细胞活性的吸光度(A)值呈剂量依赖性增加;(2)STZ组与空白对照组比较,胰岛细胞凋亡率增加(P<0.01),细胞Bcl-xl表达下降及Bax表达增强(P<0.01);(3)α-T干预组与STZ组比较,胰岛细胞凋亡率降低(P<0.01),细胞Bcl-xl表达增强及Bax表达下降(P<0.01)。结论α-T能够缓解STZ诱导大鼠胰岛细胞损伤,其机制可能与抑制胰岛细胞凋亡有关。