足细胞相关蛋白与蛋白尿

蛋白尿是肾脏病常见表现之一，也是肾脏病持续进展的重要因素，深入探究蛋白尿的发生机制对临床上早期防治肾脏病以及延缓病程进展具有重要的意义。传统观点认为蛋白尿发生主要与肾小球滤过屏障有关，人们围绕肾小球滤过屏障的电荷屏障及机械屏障进行较多的研究。近年随着慢性肾脏病蛋白分子机制的深入研究，已发现肾小球脏层上皮细胞，即足细胞裂孔隔膜分子结构和功能是维持肾小球滤过屏障的主要因素，多种重要的足细胞相关蛋白异常与蛋白尿密切相关。本文就足细胞具有代表性的几类相关蛋白结构特征、功能及异常与蛋白尿的关系做一综述。     

足细胞相关蛋白对糖尿病肾病的影响

近年来的研究证实在糖尿病肾病发生、发展过程中,足细胞在其中起着关键的作用。在高血糖,TGFβ-和血管紧张素Ⅱ等致病因素作用下,足细胞裂孔隔膜蛋白、细胞骨架蛋白及细胞骨架与裂孔隔膜之间紧密连接蛋白和顶膜区蛋白表达的改变,继而出现足突融合,足细胞从基底膜上脱离,肾小球滤过屏障通透性增高等结构改变,促进局灶节段性肾小球硬化的发生,肾功能下降,出现蛋白尿。研究足细胞相关蛋白分子的表达改变及相应的逆转措施可为糖尿病肾病早期防治带来新的希望。     

小鼠肾脏足细胞GPSD核心蛋白在高糖环境下表达的变化

目的通过观察高糖环境培养的肾小球足细胞裂孔隔膜（GPSD）核心蛋白nephrin、podocin和CD2AP的表达,探讨糖尿病肾病蛋白尿的发生机制。方法以RT—PCR方法检测不同浓度（5、10、20和40mmol／L）葡萄糖培养液培养小鼠足细胞24h后nephrin、podocin和CD2AP mRNA的表达水平。结果足细胞nephrin mRNA的表达在5mmol／L葡萄糖培养液培养24h后即显著减弱（P〈0.05）,在其它浓度葡萄糖培养液培养24h后几乎无表达（均P〈0.01）;podocin和CD2AP mRNA的表达在10mmol／L葡萄糖培养液培养24h后显著下降（P〈0．01）。但随着培养液的葡萄糖浓度增加,podocin和CD2AP mRNA的表达却逐渐上调。结论口糖环境抑制足细胞nephrin、podocin和CD2AP的表达,可能是糖尿病肾病蛋白尿发生、发展机制之一。     

足细胞标志蛋白在足细胞病中的研究进展

肾小球滤过屏障由肾小球内皮细胞、肾小球基底膜和足细胞组成,在维持肾小球的正常生理功能中起着重要作用.足细胞作为一种高度分化的细胞,在维持肾小球滤过屏障、产生系膜细胞、生成内皮细胞生长因子方面具有重要作用[1～2].以足细胞病变为显著特点的肾小球疾病称为足细胞病(podocytopathy),临床上可表现为大量蛋白尿、低...     

肾小球足细胞骨架蛋白研究进展

足细胞即肾小囊脏层上皮细胞,附着在肾小球毛细血管襻的外侧,其足突之间的裂孔膜与肾小球基底膜(GBM)及肾小球毛细血管内皮细胞共同组成肾小球的滤过屏障,位于肾小球基底膜的最外层,是阻止蛋白丢失的最后屏障.近年来随着一系列新的表达于足细胞的蛋白分子的发现,显示足细胞是一种具有特殊动力学的上皮细胞,在多种肾小球疾病的发生和发展中起着重要作用.     

CD2AP突变对肾小球足细胞骨架蛋白F-actin 分布的影响

目的 构建突变型CD2相关蛋白(CD2AP)荧光表达载体并转染肾小球足细胞,观察细胞内骨架蛋白F-actin分布的变化.方法 定点诱变真核表达质粒pcDNA6-V5-CD2AP致CD2AP第2外显子160G＞A杂合突变,测序鉴定.利用野生型和突变型质粒和pEGFP-C1荧光表达载体,分别构建野生型和突变型重组质粒pEGFP-C1-CD2AP荧光表达载体并转染小鼠肾小球足细胞,荧光显微镜观察处于不同细胞周期的足细胞内F-actin分布情况.结果 测序结果显示,pcDNA6-V5-CD2AP真核表达载体CD2AP的2号外显子第160位碱基G诱变为A,而其他碱基未发生改变.在细胞分裂间期,未转染足细胞内F-actin平行排列成纤维束;野生型重组质粒转染足细胞内F-actin在细胞核周围呈点、块状浓聚;而突变型重组质粒转染足细胞内F-actin主要在细胞膜上勾出轮廓.在细胞分裂中期,野生型重组质粒转染足细胞内F-acin纤维丝呈粗纤维状,环细胞浓聚;突变型重组质粒转染足细胞则仅见胞质内F-acin纤维丝增多,部分区域浓聚.结论 成功构建野生型和突变型重组CD2AP荧光表达载体.CD2AP基因160G＞A杂合突变使肾小球足细胞分裂间期和分裂中期的F-actin纤维骨架发生改变.     

CD2AP突变对肾小球足细胞骨架蛋白F-actin分布的影响

目的 构建突变型CD2相关蛋白（CD2AP）荧光表达载体并转染肾小球足细胞,观察细胞内骨架蛋白F-actin分布的变化.方法 定点诱变真核表达质粒pcDNA6-V5-CD2AP致CD2AP第2外显子160G＞A杂合突变,测序鉴定.利用野生型和突变型质粒和pEGFP-C1荧光表达载体,分别构建野生型和突变型重组质粒pEGFP-C1-CD2AP荧光表达载体并转染小鼠肾小球足细胞,荧光显微镜观察处于不同细胞周期的足细胞内F-actin分布情况.结果 测序结果显示,pcDNA6-V5-CD2AP真核表达载体CD2AP的2号外显子第160位碱基G诱变为A,而其他碱基未发生改变.在细胞分裂间期,未转染足细胞内F-actin平行排列成纤维束;野生型重组质粒转染足细胞内F-actin在细胞核周围呈点、块状浓聚;而突变型重组质粒转染足细胞内F-actin主要在细胞膜上勾出轮廓.在细胞分裂中期,野生型重组质粒转染足细胞内F-acin纤维丝呈粗纤维状,环细胞浓聚;突变型重组质粒转染足细胞则仅见胞质内F-acin纤维丝增多,部分区域浓聚.结论 成功构建野生型和突变型重组CD2AP荧光表达载体.CD2AP基因160G＞A杂合突变使肾小球足细胞分裂间期和分裂中期的F-actin纤维骨架发生改变.     

CD2相关蛋白在足细胞分化中的作用

为研究肾脏足细胞的分化特点及CD2相关蛋白（CD2-associated protein,CD2AP）在足细胞分化过程中的作用。采用RP—MI1640培养液在33C许可条件下培养永生化小鼠足细胞系（未分化组）．转染针对CD2AP的小分子干扰RNA（small interfering RNA．siRNA）后置于37C非许可条件下培养（转染组）,并将非许可条件下未转染组作为对照组。用MTT、法检测足细胞的生K速度;用RT—H、R方法检测CD2AP、WTI、synaptopodin和ncphrin mRNA表达;用Western blot检测CD2AP、     

缬沙坦对小鼠足细胞GPSD核心蛋白在高糖环境下表达的影响

目的通过观察缬沙坦体外干预高糖环境培养的小鼠足细胞nephrin、podocin和CD2AP的表达,探讨RAS抑制剂治疗糖尿病肾病蛋白尿的机制。方法用不同浓度的缬沙坦干预高糖(25mmol/L的葡萄糖)培养24h后的小鼠足细胞,以RT-PCR方法检测干预前后足细胞nephrin、podocin和CD2AP mRNA的表达水平;以间接免疫荧光法检测2×10-5mol/L缬沙坦干预后nephrin、podocin蛋白的表达。结果①与对照组相比,高糖诱导的足细胞nephrin、podocin和CD2AP mRNA表达显著减弱(P<0.01);②缬沙坦能显著上调高糖诱导的足细胞nephrin、podocin和CD2AP mRNA的表达(P<0.05或P<0.01);③2×10-5mol/L缬沙坦能显著上调高糖对足细胞nephrin和podocin(P<0.05)蛋白表达的抑制。结论缬沙坦显著上调髙糖诱导的足细胞nephrin、podocin和CD2AP的表达,可能是其独立于降压作用以外的降低糖尿病肾病蛋白尿的机制之一。     

激素耐药型肾病综合征中NPHS2基因研究进展

激素耐药型肾病综合征病情复杂,临床治疗相当棘手,大部分将进展为终末期肾病,故阐明该疾病发病机制对临床基因筛查、诊断、治疗等有重要意义。近年来,相关研究发现足细胞突变基因NPHS2可能在激素耐药型肾病综合征的发生、发展过程中发挥重要作用,NPHS2基因突变可导致肾小球足细胞裂孔隔膜结构破坏,足细胞裂隙膜蛋白(podocin)等足细胞相关蛋白表达异常,引起大量蛋白尿,最终发展至终末期肾病。     

TRPC6与糖尿病肾病足细胞损伤的相关机制研究及中医药治疗进展

糖尿病肾病(DN)是糖尿病的常见并发症,也是终末期肾病的主要病因之一。蛋白尿是DN最直接、最主要的表现,然而蛋白尿的出现与足细胞的损伤密切相关。DN的主要病理变化是肾小球基底膜增厚、肾小球细胞肥大和足细胞损伤及丢失。足细胞是肾小球滤过屏障的重要组成部分,是保障肾小球滤过功能的关键。足细胞功能的正常发挥严重依赖胞内钙信号的处理,过量的Ca2+内流会导致足细胞足突融合、消失及细胞的凋亡,进一步导致肾小球的损伤。TRPC6是介导足细胞钙内流最关键的蛋白,其表达水平与DN等蛋白尿性肾脏疾病的发生发展密切相关。西医对DN尚无直接有效的治疗方法,多以降低其相关危险因素为主。中医对DN的认识由来已久,以其治疗形式多样、成本低廉、疗效确切被广泛应用于DN的临床治疗。本文对TRPC6的表达与DN中足细胞损伤的相关机制及中医药对DN的干预作简要的总结和概括。     

足细胞病的发病机制研究进展

足细胞是位于肾小球基底膜外部（GBM）的终末分化细胞,其形成的裂孔膜是肾小球滤过的最后屏障。足细胞损伤后,其结构完整性受损,足突消失,滤过膜孔径增大或断裂,大分子蛋白质滤出,超出近端肾小管重吸收能力而形成蛋白尿。研究表明,原发性足细胞病是以足细胞结构和功能异常为主要特点的肾小球疾病。本文主要对原发性足细胞病的几种类型,包括膜性肾病（MN）、微小病变型肾病（MCN）和局灶节段性肾小球硬化（FSGS）与足细胞的关系及其发病机制作一概述。     

NCX1通过介导钙离子内流损伤足细胞的机制研究

背景 肾小球滤过屏障由足细胞及足突裂隙膜构成,病理状态下足细胞损伤破坏足突裂隙膜结构,造成肾小球滤过功能改变而产生蛋白尿.钠钙交换蛋白1(sodium-calcium exchanger 1,NCX1)作为Ca2+通道,具有调节钙稳态、维持细胞结构的重要作用.目的 本研究拟证实NCX1在足细胞损伤中的作用,解析蛋白尿发...     

足细胞在糖尿病肾病发展过程中的作用

足细胞损伤在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)发展过程中发挥重要作用,主要表现为足细胞数量减少以及密度减低,裂孔隔膜分子nephrin 、podocin与细胞骨架蛋白辅肌劲蛋白(actinin)通过分子CD2相关蛋白(CD2 association protein,CD2AP)、ZO-1相连,裂孔隔膜分子以及连接分子的改变导致了足细胞数量的减少、密度减低.     

环氧合酶-2基因敲低对足细胞相关蛋白表达的影响

目的:观察足细胞环氧合酶-2(COX-2)基因敲低对足细胞相关蛋白表达的影响。方法:以条件永生性小鼠足细胞株为研究对象,分为足细胞正常对照组、足细胞COX-2基因敲低组和足细胞阴性转染组,用流式细胞仪检测足细胞凋亡水平,用Western bolt检测COX-2、Nephrin、Podocin、CD2相关蛋白(CD2AP)的表达水平。结果:与足细胞正常对照组及阴性转染组相比,足细胞COX-2基因敲低组COX-2蛋白表达明显降低、细胞凋亡率明显增高,而Nephrin、Podocin、CD2AP蛋白表达则显著降低。结论:足细胞COX-2基因敲低可以导致足细胞凋亡,且足细胞Nephrin、Podocin、CD2AP蛋白的表达下调。     

免疫抑制药物对肾小球足细胞的影响

临床上肾脏损伤最常见的表现即为蛋白尿,而蛋白尿的产生与肾小球滤过屏障功能障碍密切相关,而肾小球滤过屏障中足细胞损伤是引起蛋白尿的关键因素。研究显示,目前一些用于治疗足细胞相关疾病的免疫抑制药物,能够直接保护足细胞,减少蛋白尿的产生,延缓肾功能减退。本文就免疫抑制药物对足细胞的直接作用及其可能作用机制进行综述。     

足细胞损伤机制的研究进展

足细胞是维持肾小球滤过屏障的重要部分。遗传、免疫、感染等因素常导致足细胞结构完整性破坏及细胞代谢失调,导致足细胞足突融合,足细胞从肾小球基底膜脱离,引起蛋白尿,甚至肾小球硬化等肾脏疾病。而足细胞与神经细胞、肌肉细胞等永久细胞类似,是一种没有增殖潜能的细胞。因此,足细胞损伤在肾脏疾病的发病机制中至关重要。足细胞损伤引起的生理和功能改变并不是简单的被动过程,而是构成足细胞解剖结构的蛋白质之间的复杂相互作用。文章从足细胞骨架损伤、细胞核内转录因子异常、胞浆线粒体能量代谢异常、细胞内钙离子动态稳定性改变等方面对足细胞损伤的机制进行综述。     

足细胞蛋白Nephrin、Podocin和肾小球疾病

【摘要】肾小球疾病是指累及两侧肾小球的一类疾病,多以蛋白尿为主要临床表现,由于发病机理尚不明确,因此疾病早期缺乏准确有效的检测和诊断手段。近来研究发现足细胞蛋白Nephrin和Podocin在多种肾小球疾病发生发展和诊断预测中起重要作用。本文就近几年Nephrin、Podocin与肾小球疾病的相关研究作一综述。 【关键词】足细胞蛋白;Nephrin;Podocin;肾小球疾病     

足细胞蛋白标志物在原发性足细胞病中的应用进展

原发性足细胞病常见于微小病变型肾病、局灶节段性肾小球硬化及膜性肾病。足细胞损伤是原发性足细胞病进程中的重要环节之一，而足细胞蛋白标志物在其中扮演重要角色。研究表明，足细胞蛋白标志物可作为原发性足细胞病的非侵入性诊断方法之一。本文综述足细胞蛋白标志物在原发性足细胞病中的应用研究进展，以期为原发性足细胞病的预防和诊治提供理论依据。     

足细胞及信号传导系统对蛋白尿形成的机制研究

蛋白尿是肾脏病主要临床表现,同时又是导致肾脏病进展的重要因素,其形成与肾小球滤过屏障的损伤有着密切的关系.足细胞(podocyte)是贴覆于肾小球基底膜(glomerular basement membrane,GBM)表面的终末期分化细胞,在GBM上伸出许多足突,足突互相连接形成如指状交叉相接的栅栏状结构为裂孔,裂孔上覆有一层4～6nm厚的薄膜,即裂孔膜(slit diaphragm,SD).