直肠癌手术前后门静脉血CK20 mRNA检测的临床意义

目的 :研究直肠癌门静脉血 CK2 0 m RNA表达及临床意义。方法 :采用 RT- PCR法对 4 0例直肠癌根治术前后门静脉血 CK2 0 m RNA进行检测。结果 :4 0例直肠癌 2 5例 CK2 0 m RNA阳性表达 ,阳性率 6 2 .5 % ;Dukes分期与门静脉血中 CK2 0 m RNA阳性表达率无关 ,淋巴结转移阳性门静脉血中 CK2 0 m RNA阳性率高于阴性者 (P<0 .0 1) ;随访发现 ,门静脉血 CK2 0 m RNA阳性者远处转移率高 (P<0 .0 5 )。结论 :门静脉血中 CK2 0 m RNA检测有助于预后判断 ,区域淋巴结转移和 (或 )门静脉血 CK2 0 m RNA阳性易发生远处转移     

CEA mRNA、CK20 mRNA在胃肠道肿瘤患者外周血、引流静脉血中的表达及临床意义

目的 :研究胃肠道肿瘤患者外周血、引流静脉血中CEAmRNA、CK2 0mRNA的表达与胃肠道肿瘤的临床病理联系及预后的关系。方法 :以CEAmRNA、CK2 0mRNA为指标 ,用RT PCR方法检测对照组 10例外周血 ,14例胃癌和 11例结直肠癌外周血及腹腔内引流静脉血中的肿瘤细胞。 结果 :对照组 10例无CEAmRNA、CK2 0mRNA表达 ,CEAmRNA、CK2 0mRNA在 2 5例胃肠道肿瘤患者外周血、引流静脉血中的阳性表达率分别为5 / 2 1(2 3.8% )、12 / 2 4 (5 0 % ) ,0 / 2 1(0 % )、0 / 2 4 (0 % )。CEAmRNA阳性表达率高于CK2 0mRNA阳性表达率 (P <0 .0 5 )。CEAmRNA在引流静脉血中的阳性率 (5 0 % )高于外周血中阳性率 (2 3.8% ) ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。 3例外周血、引流静脉血CEAmRNA阳性的患者半年内出现复发和转移。 2 5例病例中未发现CEAmRNA阳性表达与年龄、性别、肿瘤的浸润深度、分化、分期及淋巴结转移相关。 结论 :CK2 0mRNA在外周血、引流静脉血中表达非常不稳定 ,以CEAmRNA、CK2 0mRNA为指标监测肿瘤的复发或者作为预后的指标还需要扩大样本进一步的研究。     

腹腔镜结直肠癌根治术对血循环微转移影响的研究

目的 检测腹腔镜结直肠癌根治术患者外周静脉血肿瘤标志物细胞角蛋白20(CK20) mRNA的表达,探讨腹腔镜结直肠癌根治术对术后肿瘤细胞血循环微转移的影响及临床意义.方法 应用FQ-PCR方法检测24例行腹腔镜辅助下结直肠癌根治术和31例传统开腹结直肠癌根治术患者外周静脉血的CK20 mRNA,并用免疫组化(IHC)SP法测定术后组织标本的CK20和CD44 v6的表达水平.结果 TNM分期Ⅲ期结直肠癌患者外周静脉血的CK20 mRNA阳性表达率显著高于Ⅰ期+Ⅱ期患者(P<0.05).腹腔镜辅助下结直肠癌根治术患者CK20手术开始时阳性率为29.16%(7/24),手术结束时阳性率为37.50%(9/24),两组之间差异无统计学意义(P>0.05),手术前后和开腹组比较,差异无统计学意义(P>0.05).CK20 mRNA阳性表达患者结直肠癌组织中CK20(57.14%)和CD44 v6(71.43%)阳性表达率明显高于CK20 mRNA阴性表达患者的CK20(35.29%)和CD44 v6(47.06 %)阳性表达率(P<0.05).结论 结直肠癌患者外周静脉血CK20 mRNA的水平和组织学分级、TNM分期、淋巴结转移有关,腹腔镜结直肠癌根治术和传统开腹手术一样,并不增加外周静脉血CK20 mRNA的阳性率,不增加术后肿瘤血行微转移的危险性.     

CK20mRNA在腹腔镜结直肠癌根治术后对肿瘤细胞血循环微转移的影响

目的：探讨血清CK20mRNA与结直肠癌组织学、TNM分期的关系以及腹腔镜结直肠癌根治术后对肿瘤细胞血循环微转移的影响及其临床意义．方法：应用FQ-PCR方法检测20例健康成人（对照组）及55例结直肠癌患者（实验组）,不同术式、手术前、后外周静脉血CK20mRNA的表达;分析血清CK20mRNA与肿瘤组织分化、TNM分期的关系．比较24例腹腔镜辅助下行结直肠癌根治术患者和31例传统开腹根治术患者外周静脉血CK20mRNA的表达．结果：对照组外周静脉血CK20mRNA阳性表达率为0;CK20mRNA阳性率（0．75）明显高于高、中分化腺癌组（0．23）（P〈0．05）．TNM分期Ⅲ期结直肠癌组外周静脉血CK20mRNA阳性表达率（0．43）显著高于Ⅰ期Ⅱ期患者（0．22）（P〈0．05）．腹腔镜辅助下行结直肠癌根治术愚者CK20mRNA阳性率术前（0．29）,术后（0．38）,与开腹组相比较差异均无统计学意义．结论：结直肠癌患者外周静脉血CK20mRNA水平与肿瘤分化、TNM分期有关;腹腔镜辅助下行结直肠癌根治术与传统开腹手术一样,并不增加外周静脉血CK20mRNA的阳性率和术后肿瘤血循环微转移的危险性．     

大肠癌患者外周血中CK20 mRNA检测的临床意义

目的　探讨大肠癌患者外周血微转移的检测及临床意义。方法　应用反转录聚合酶链反应 (RT-PCR) ,检测 4 7例大肠癌患者外周血中CK2 0mRNA的表达。结果　 4 7例病人外周血中查出CK2 0阳性表达 2 7例 ,阳性率 5 7.5 %。CK2 0阳性检出与Dukes分期、淋巴转移有关而与肿瘤病理分化程度无关。结论　CK2 0mRNA可作为检测大肠癌病人外周血中微转移的良好指标 ,外周血中CK2 0mRNA检测有助于识别具有复发或远处转移倾向的大肠癌病人。     

定量RT-PCR检测结直肠癌患者外周血CK20 mRNA的表达

目的:检测结直肠癌患者外周血中细胞角蛋白20(CK20)mRNA的表达水平,并探讨其临床价值.方法:采用实时荧光定量RT-PCR法检测51例经病理学确诊的结直肠癌患者和30例健康对照者外周血CK20 mRNA的表达水平.结果:结直肠癌患者中CK20 mRNA阳性率为27.45%,而健康对照组阳性率为6.67%,两者相比差异有统计学意义(P<0.025).随着临床分期的提高,患者外周血中CK20 mRNA的表达率随之提高,但各分期间阳性率相比无显著统计学意义(P>0.05).Dukes'C期与D期患者中>10拷贝/ml者高于A期与B期患者.结论:检测结直肠癌患者外周血CK20 mRNA的表达水平可发现早期脱落的肿瘤细胞,对肿瘤微转移的诊断有一定的提示意义.     

CK20 mRNA联合组织切片检测直肠癌系膜内转移的临床研究

目的通过检测直肠癌系膜组织中CK20 mRNA的表达水平,研究直肠癌系膜转移与临床病理特征的关系,探讨直肠癌系膜转移规律,为切除直肠系膜的合理范围提供依据。方法取行直肠癌手术切除的直肠癌和直肠系膜组织标本40例,良性肠道疾病的正常直肠系膜组织10例。剪取肿瘤组织和距肿瘤下缘1、2、3、4、5cm的直肠系膜组织,分别进行：①各段系膜组织分别HE染色切片检查;②各段系膜组织中CK20 mRNA表达水平检测（RT-PCR法）,并结合临床病理资料进行分析。结果40例直肠系膜标本HE染色切片中,距肿瘤下缘1、2、3、4、5cm的阳性率分别为：37．5％（15／40）、15．0％（6／40）、0％（0／40）、0％（0／40）、0％（0／40）;40例直肠系膜标本中,距肿瘤下缘1、2、3、4、5cm的系膜组织CK20 mRNA阳性表达率分别为：47．5％（19／40）、27．5％（11／40）、12．5％（5／40）、0％（0／40）、0％（0／40）。CK20 mRNA在正常直肠系膜组织中不表达,系膜中CK20 mRNA的表达与肿瘤分期、肿瘤形态及分化程度有关（P〈0．05）。结论①检测直肠系膜组织中CK20 mRNA的表达（肿瘤微转移）较常规病理组织学检查方法更为敏感;②对于直肠癌,一个相对比较安全的远端直肠系膜切除长度为4cm,但对于TNM分期偏晚、浸润型、低分化直肠癌病例,范围应适当增大。     

腹腔镜胃癌根治术对肿瘤细胞血循环微转移影响的初步研究

目的通过检测腹腔镜胃癌根治术患者与开腹胃癌根治术患者的外周静脉血液微转移发生的情况,探讨腹腔镜胃癌根治术对胃癌细胞血循环微转移的影响。方法本研究采用FQ-PCR技术,以细胞角蛋白(CK19)mRNA为标志物,以51例胃癌患者为研究对象,分为腹腔镜组(14例)及开腹组(37例),分别行腹腔镜胃癌根治术及开腹胃癌根治术;在手术前后采取静脉血,提取RNA,检测其血液微转移发生情况。结果两组患者手术前后CK19差异均无统计学意义(均>0.05)。术前Ⅲ期CK19mRNA表达阳性率为53.85%,Ⅰ期+Ⅱ期阳性率为20.00%,差异有统计学意义(=0.0197);术后Ⅲ期CK19mRNA表达阳性率为60.71%,Ⅰ期+Ⅱ期阳性率为30.00%,差异有统计学意义(=0.0173)。结论腹腔镜胃癌根治术并不增加静脉血CK19mRNA的阳性率,不增加术后肿瘤血循微转移的危险性。     

胃癌患者外周血CK20 mRNA表达及其临床意义

目的:探讨胃癌患者外周血CK20 mRNA表达及临床意义。方法:应用Taq Man定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测58例胃癌患者(其中50例化疗2周期后复查CK20 mRNA)、20例健康对照者外周血CK20 mRNA表达;患者平均随访2年。结果:胃癌患者外周血CK20 mRNA阳性率为46.55%(27/58),显著高于健康对照组,二者差异有统计学意义(P<0.001);单因素分析胃癌患者外周血CK20 mRNA表达与远处转移(P<0.05)和临床分期相关(、期之间比较P<0.05);多因素Logistic回归分析表明:远处转移是影响胃癌患者外周血CK20 mRNA表达的独立因素;化疗2周期后CK20mRNA阳性率无显著下降,但近期疗效无效的患者外周血CK20 mRNA阳性率显著高于近期疗效有效的患者(P<0.05)。平均随访2年后,CK20 mRNA阳性患者与阴性患者的1年生存率分别为34.78%和64.29%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:外周血CK20 mRNA可作为检测胃癌患者肿瘤细胞微转移的分子标志;定期监测胃癌患者外周血CK20 mRNA表达有助于评估化疗疗效和预测预后。     

膀胱癌患者外周血特异性标记物CK-20 mRNA检测及临床意义

目的膀胱癌患者外周血中特异性角蛋白上皮CK—20mRNA在诊断中的意义。方法以半巢式RT-PCR检测外周血有核细胞成分中CK—20mRNA。结果91例膀胱癌中检出CK—20mRNA 37例,阳性率41%,其中证实有转移的20例中17例阳性(85%),25例健康对照组均为阴性。外周血细胞CK—20mRNA的阳性率在远处转移的病例中显著升高(P<0.01)。结论检测膀胱癌患者外周血CK—20mRNA对早期发现膀胱癌细胞的血行播散有重要参考价值。     

膀胱移行细胞癌患者外周血CK20表达的研究

目的：探讨CK20在膀胱移行细胞癌(TCCB)患者外周血的表达及其意义。方法：采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测63例TCCB患者和19例健康志愿者以及19例非肿瘤患者外周血CK20表达。以CAPDH作为内参照。结果：19例健康志愿者和19例非肿瘤患者外周血CK20的表达均为阴性；63例TCCB患者外周血CK20阳性表达率为25．4％(16／63)，其中T1期为0(0／31)，T2期为12．5％(2／16)，T3期为77．8％(7／9)，T4期为100％(7／7)，CK20阳性表达率随分期增加而增加，T3～4期明显高于T1期和T2期。对T1～3期33例患者随访6个月，其中外周血CK20阴性表达26例未发现远处转移；外周血CK20阳性表达7例中2例发生远处转移。结论：检测外周血CK20表达，可以提示癌细胞的血行播散，对判断预后以及指导治疗具有一定临床价值。     

CK20 mRNA在大肠癌患者外周血中阳性表达的临床意义

目的：研究大肠癌患者外周血中CK20 mRNA的阳性表达可作为肿瘤细胞血行播散的标志，探讨CK20 mRNA阳性表达与肿瘤病理指标的关系，观察大肠癌患者手术前、后外周血中CK20 mRNA表达的变化情况。方法：采用巢式逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）的方法，对大肠癌42例、原发性肝细胞肝癌5例、对照组（非癌肿）10例患者手术前、后不同时间外周血中肿瘤细胞的靶基因CK20 mRNA表达进行检测。结果：对照组（非癌肿）10例及原发性肝细胞肝癌5例手术前、后外周血中CK20 mRNA均为阴性表达。大肠癌组42例，手术前外周血中CK20 mRNA阳性表达率为50．0％（21／42），手术后48h外周血中CK20 mRNA阳性表达率为59．5％（25／42）。大肠癌患者外周血中CK20 mRNA的阳性表达率与肿瘤细胞病理分化程度无关，与Dukes分期、淋巴结转移、远处转移有关。结论：大肠癌患者外周血中CK20 mRNA的阳性表达可作为肿瘤细胞血行播散的标志，有助于判断大肠癌的预后及鉴别原发性肝细胞肝癌和大肠癌肝转移。手术操作会促使肿瘤细胞向血液中播散，手术过程中应加强预防措施以减少癌细胞的播散。     

肋骨骨髓CK18 mRNA基因表达与食管癌微转移的关系

目的：探讨巢式逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）检测CK18 mRNA对食管癌微转移的诊断意义。 方法：采用巢式RT-PCR方法检测50例无远处转移、10例有远处转移的食管癌患者及10例食管良性病变患者肋骨骨髓中细胞角蛋白CK18 mRNA基因的表达。 结果：食管良性病变患者的肋骨骨髓未检测出CK18 mRNA阳性表达;50例无远处转移、10例有远处转移的食管癌患者外周血中CK18 mRNA表达阳性率分别为42.0%（21/50）、100.0%（10/10）。食管癌Ⅳ期与Ⅱa、Ⅱb和Ⅲ期阳性率（分别为100.0％、40.0％、41.7％和45.8%）比较差异有显著性意义（P＜0.05）,而其他各期之间阳性率比较差异无显著性（P＞0.05）。不同病理分化程度之间阳性率（Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期分别为41.7％、41.7％和42.9％）比较差异无显著性（P＞0.05）。结论：食管癌患者临床早期已有癌细胞发生微转移。应用巢式RT-PCR检测肋骨骨髓中CK18 mRNA靶基因有助于食管癌微转移的早期诊断。     

大肠癌组织血管生成与患者外周血CK20mRNA表达的临床研究

目的观察大肠癌组织中微血管密度、血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达与大肠癌患者外围血癌细胞微转移的关系.方法采用S-P免疫组织化学法检测了58例大肠癌组织中的微血管密度(MVD)和VEGF的表达,用巢式RT-PCR法检测了大肠癌患者外周血中癌细胞微转移情况并分析其与病理指标的关系.结果 58例大肠癌组织中35例高中分化MVD计数为30.2±12.7,低分化大肠癌23例MVD计数为86.6±19.1;26例大肠癌组织中VEGF呈阳性染色(44.8%).MVD计数及VEGF阳性表达与大肠癌分化程度、Dukes分期、有无区域淋巴结转移及远处转移密切相关(P<0.05或P<0.01).58例大肠癌患者外周血中32例CK20mRNA阳性表达(32/58),术后48 h有35例阳性表达(35/58),其中根治性切除组有21例阳性表达(21/44),非根治性手术组12例阳性表达(12/14),21例根治性切除患者术后7～14 d有11例转为阴性,12例非根治性切除患者术后7～14 d有11例阳性表达.CK20mRNA阳性表达与大肠癌病理分化程度无关,但与Dukes分期、区域淋巴结转移及远处转移情况相关(P<0.01).CK20mRNA阳性表达患者大肠癌组织中MVD计数(88.5±15.1)与VEGF阳性表达率(65.6%)明显高于CK20mRNA阴性表达患者的MVD计数(31.0±12.9)和VEGF阳性表达率(19.2%)(分别P<0.01,P<0.001).结论大肠癌组织中MVD和VEGF阳性表达与大肠癌的病理分化程度、Dukes分期、淋巴结及远处转移情况相关.大肠癌组织血管生成与周围静脉血中癌细胞微转移情况密切相关.CK20mRNA的检测对大肠癌预后判断、疗效评估及指导综合治疗有重要意义.     

原发性肝癌患者外周血中肝细胞特异性AFP mRNA检测及意义

【目的】寻找一种敏感的方法以检测原发性肝癌患者外周血中肝细胞特异性AFPmRNA。【方法】巢式RT PCR检测外周血有核细胞成分中AFPmRNA。【结果】 49例肝癌中 17例检出AFPmRNA ,阳性率 35 % ,其中 9例证实有转移的 6例阳性 (6 7% )。 19例肝硬化、6例急性肝炎、8例慢性肝炎、5例肝良性肿瘤、6例肝内胆管癌、11例肝转移癌、13例健康对照组均为阴性。外周血细胞AFPmRNA的存在与肝内肿癌灶的数目、是否有门静脉癌栓形成、远处器官转移与肿瘤的TMN分期密切相关 ,与血清AFP浓度无关。【结论】检测肝癌患者外周血AFPmRNA ,可帮助早期发现肝癌细胞的血行播散。