涎腺腺样囊性癌细胞凋亡的动物实验

目的　检测不同剂量的重组人肿瘤坏死因子α(rhTNF -α)对涎腺腺样囊性癌细胞凋亡的体内诱导。方法　利用人涎腺腺样囊性癌细胞株 (SACC - 83)建立裸鼠移植瘤动物模型 ,局部肿瘤内直接注射rhTNF -α,选用两个不同剂量 (1 0 0× 1 0 4 IU/kg和 1 0× 1 0 4 IU/kg) ,观察对肿瘤的抑制作用 ,并采用流式细胞术定量检测体内细胞凋亡及细胞周期的变化情况。结果　①A实验组的抑瘤率为 52 .1 6 % ,B实验组的抑瘤率为 73 .0 1 %。②用药后三组瘤体体积的变化有显著性差异。③三组流式细胞周期的变化及凋亡率有显著性差异。结论　①rhTNF -α可抑制裸鼠SACC移植瘤生长 ,使细胞增殖在G1 期发生阻滞。这种抑制主要通过细胞凋亡来实现的。②本文低剂量的rhTNF -α诱导凋亡的效果优于高剂量的rhTNF -α ,为临床SACC治疗提供了参考剂量     

三氧化二砷诱导涎腺腺样囊性癌细胞凋亡的研究

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对人涎腺腺样囊性(SACC)细胞的作用机制,寻找治疗SACC的新途径.方法 应用As2O3对SACC细胞株作用,以 MTT、软琼脂集落形成和形态学分析法观察细胞的变化.结果 三氧化二砷作用后,癌细胞异形性逐渐消失,细胞凋亡现象明显,可见凋亡小体.结论 As2O3对SACC细胞株具有显著的抑制增殖、诱导分化和促进凋亡作用.     

涎腺腺样囊性癌细胞凋亡的诱导与P53基因的修复

目的　探讨涎腺腺样囊性癌 (salivaryadenoidcysticcarcinoma) p5 3基因的突变以及重组人肿瘤坏死因子α(recombinedhumantumornecrosisfactor-α ,rhTNF -α)诱导凋亡过程中 p5 3基因的修复。 方法　①在裸鼠移植瘤模型上 ,采用TNF -α 10 0× 10 4IU/kg或 10× 10 4IU/kg瘤体内注射 ,诱导腺样囊性癌移植瘤细胞凋亡 ;②采用DNA核酸序列测定方法 ,对移植瘤及凋亡诱导后的肿瘤分别进行 p5 3基因 6、7、8外显子的测定。 结果　发现腺样囊性癌移植瘤 p5 3基因第 8外显子的第 2 73、2 80号位点有点突变 ,其中 2 73位点为GCA→GCG ;2 80位点为GAG→GAC。第 6、7外显子未见突变。采用TNF -α治疗后 ,第 8外显子的第 2 80号突变位点得以修复正常 ,GAC→GAG ;而 2 73号突变位点未被修复。第 6、7外显子序列无变化。结论　①涎腺腺样囊性癌发生中 p5 3基因的第2 73、2 80号密码子有点突变 ;②TNF -α可以修复p5 3基因突变中的C :G配对的点突变 ,不能修复A :G碱基的突变 ;③TNF -α对正常基因序列没有影响。     

全反式维甲酸对涎腺样囊性癌细胞株Acc—M体外抗增殖作用的研究

目的 维甲酸类化合物能预防头颈部癌前病变转变为癌，并能有效地降低头颈部第二原发癌的发生率。近来研究证实，维甲酸对头颈部鳞癌有诱导分化治疗作用，但维甲酸对头颈部腺癌诱导分化作用研究少见报道。方法 本研究采用克隆形成法、ＭＴＴ检测法以及细胞周期技术，把全反式维甲酸对人涎腺腺样囊性癌细胞株的体外抗增殖作用周期进行了观察。结果显示，ＡＴＲＡ对Ａｃｃ－Ｍ细胞有一定抗增殖作用，且该作用与浓度、时间、呈依赖关系     

全反式维甲酸对涎腺腺样囊性癌细胞株Acc-M体外抗增殖作用的研究

目的维甲酸类化合物能预防头颈部癌前病变转变为癌，并能有效地降低头颈部第二原发癌的发生率。近来研究证实，维甲酸对头颈部鳞癌有诱导分化治疗作用，但维甲酸对头颈部腺癌诱导分化作用研究少见报道。方法本研究采用克隆形成法、ＭＴＴ检测法以及细胞周期测定技术，把全反式维甲酸（ａｌｔｒａｎｓｒｅｔｉｎｏｉｃａｃｉｄＡ－ＴＲＡ）对人涎腺腺样囊性癌细胞株（ＡｃｃＭ）的体外抗增殖作用和细胞增殖周期进行了观察。结果显示，ＡＴＲＡ对ＡｃｃＭ细胞有一定抗增殖作用，且该作用与浓度、时间呈依赖关系；ＡｃｃＭ细胞经ＡＴＲＡ作用７２小时后其Ｓ期比例明显下降，同时Ｇ０＋Ｇ１期比例上升。结论研究表明，５～２０μｍｏｌ／Ｌ浓度的ＡＴＲＡ对ＡｃｃＭ细胞产生抗增殖作用。     

survivin反义寡核苷酸对人涎腺腺样囊性癌细胞凋亡的影响

目的:探讨survivin反义寡核苷酸(ASODN)对人腺样囊性癌细胞(ACC-M) 凋亡及survivin基因表达的影响.方法:设计合成针对survivin基因的反义寡核苷酸片段,脂质体介导survivin反义寡核苷酸转染SACC-M细胞,通过RT-PCR,Western-blotting检测survivin表达的改变,MTT测定细胞增殖抑制,流式细胞术测定细胞凋亡率.结果:转染ASODN组survivin表达下降,细胞凋亡率明显提高,细胞增殖明显受抑制,且与浓度有一定依赖性;SODN组、空白组与对照组无明显差异.结论:survivin ASODN能下调SACC-M细胞系中survivin的表达,在促进凋亡,抑制增殖中发挥重要作用.     

裸鼠体内人腺样囊性癌细胞凋亡的研究

目的　在人涎腺腺样囊性癌 (salivaryadenoidcysticcarcinoma,SACC)裸鼠移植瘤模型上 ,观察重组人肿瘤坏死因子α(recombinedhumantumornecrosisfactor α ,rhTNF α)诱导凋亡的形态学特征及bax、bcl 2蛋白的表达情况。方法　将 6× 10 10 /L的SACC细胞悬液接种于裸鼠皮下建立动物模型后 ,按rhTNF α 10 0× 10 4IU /kg或 10× 10 4IU /kg瘤体内直接注射给药。采用光镜、电镜、流式细胞术及原位凋亡试剂检测盒观察凋亡的形态学变化 ;采用免疫组织化学观察bax、bcl 2的表达情况。结果　移植瘤细胞凋亡率明显高于对照组 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。凋亡细胞核消失后出现钙盐沉积 ,形成砂粒小体。凋亡细胞对bax、bcl 2蛋白的表达明显上升 (P <0 .0 5 )。结论　砂粒体钙化是TNF α诱导的SACC裸鼠移植瘤细胞凋亡的特征和归宿 ;TNF α诱导的细胞凋亡能够特异性增强bax、bcl 2基因蛋白的表达     

涎腺腺样囊性癌细胞侵袭鼠胶原的实验观察

为了研究涎腺腺样囊性癌对Ｉ型胶原的侵袭能力，本实验利用鼠尾胶原作培养基，接种涎腺腺样囊性癌细胞系ＡＣＣ－２和高转移细胞株ＡＣＣ－Ｍ，以研究其侵袭能力。结果发现，肿瘤细胞紧密粘附胶斫，部分形成单层或复层，高转移细胞（ＡＣＣ－Ｍ）形成侵袭灶，并形成类似腺管结构，说明高转移细胞株对Ｉ型胶原具有更强的侵袭能力。     

肿瘤坏死因子-α诱导腺样囊性癌细胞凋亡中p53和bcl-2基因的表达

目的　探讨肿瘤坏死因子 (TumorNecrosisFactor -alpha ,TNF -α)诱导体外人涎腺腺样囊性癌(Salivaryadenoidcysticcarcinoma ,SACC)细胞凋亡过程中P5 3与bcl- 2蛋白的表达 ,以揭示TNF -α诱导的凋亡与癌基因表达间的相互关系。方法　SACC细胞于RPMI 16 40培养液 (含 10 %胎牛血清 )中 ,37 C恒温孵育。实验组用TNF -α处理 ;对照组只加入胎牛血清作为对照。实验组与对照组均分别于 2 4、48、72小时取出细胞爬片 ,免疫组化 (SP法 )检测P5 3与bcl- 2蛋白的表达情况。结果　经TNF -α处理的SACC细胞 2 4小时后 ,细胞出现胞体变小 ,胞核固缩的凋亡早期的形态学改变。P5 3和bcl - 2蛋白表达检测 ,经RelativeIdentifiedDistributionunit(RIDIT)分析表明 ,在 2 4、48、72小时 ,实验组P5 3蛋白的高染率分别为 5 %、2 5 %、5 5 % ,bcl- 2蛋白为 15 %、2 0 %、35 % ;在 48、72小时 ,实验组与对照组均存在显著性差异 (P <0 .0 1) ;且P5 3蛋白的高染率与相应时间段的细胞凋亡率有相关性 (P <0 .0 1) ,而bcl- 2蛋白的高染率与相应时间段的细胞凋亡率无相关关系 (P >0 .0 5 )。结论　在TNF -α诱导SACC细胞凋亡的早期阶段 ,P5 3及bcl- 2蛋白表达均增强。     

RD抗涎腺腺样囊性癌细胞转移的体外实验研究

目的　研究精氨酸 天冬氨酸 (RD)抗涎腺腺样囊性癌 (salivaryadenoidcysticcarcinoma ,SACC)转移的作用。方法　MTT法测定RD对SACC LM与纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原粘连的影响 ,用改良Boydenchamber方法观察RD对SACC细胞人工重组基底膜侵袭以及趋化运动能力的作用。结果　RD在 5mg/L时能抑制SACC LM与细胞及纤维粘连蛋白的粘附 ,而对SACC LM与层粘连蛋白、Ⅳ型胶原的粘附无明显作用。RD在 1、5、2 5mg/L时能明显抑制SACC LM对人工基底膜的侵袭。RD在2 5mg/L时能抑制SACC LM的趋化运动。结论　体外实验表明RD有抗SACC转移的作用     

涎腺腺样囊性癌细胞转移潜能与细胞外基质的关系

目的 了解不同转移能力的涎腺腺样囊性癌（ｓａｌｉｖａｒｙ ａｄｅｎｏｉｄ ｃｙｓｔｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ,ＳＡＣＣ）细胞与细胞外基质粘附、对细胞外基质侵袭及趋化运动的能力。方法 ＭＴＴ法测定ＳＡＣＣ－ＬＭ,ＳＡＣＣ－８３,ＡＣＣ－Ｍ,ＡＣＣ－２与纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原的粘附,用改良Ｂｏｙｅｄｎ ｃｈａｍｂｅｒ方法观察了ＳＡＣＣ细胞对人工重组基底膜的侵袭以及趋化运动。结果 高转移的ＳＡ     

吴茱萸碱抑制涎腺腺样囊性癌细胞系ACC-M增殖的实验研究

目的:研究吴茱萸碱对涎腺腺样囊性癌ACC-M细胞增殖的影响。方法:用终浓度为0.01、0.1、1、10、100μg/ml的吴茱萸碱处理ACC-M 24、48、72 h后,应用MTT比色试验、倒置显微镜、Giemsa染色、Annexin-V-FITC和流式细胞仪检测和观察ACC-M的生长抑制率和凋亡情况。结果:吴茱萸碱(1μg/ml以上)对ACC-M细胞具有时间-浓度依赖性生长抑制作用,最大生长抑制率可达89%。吴茱萸碱可诱导ACC-M细胞凋亡,凋亡率随处理时间延长和药物浓度增加而上升,各组间有显著差异。吴茱萸碱同时可引起ACC-M细胞坏死。结论:吴茱萸碱可以诱导细胞凋亡和/或坏死,从而抑制涎腺腺样囊性癌ACC-M细胞增殖。     

涎腺腺样囊性癌细胞生物学特性的探讨

一、材料和方法1.材料 :将正常涎腺 2 3例和腺样囊性癌 (ａｄｅｎｏｉｄｃｙｓｔｉｃｃａｒｃｉｎｏｍａ,ＡＣＣ) 2 6例常规 10 %甲醛固定 ,石蜡包埋并切成4μｍ厚 切片以备ＨＥ染色和免疫组化染色。单克隆和多克隆抗体Ｓ 10 0Ａ1、Ｓ 10 0Ａ2、Ｓ 10 0Ａ4、Ｓ 10 0Ａ6和Ｓ 10 0Ｂ均由瑞士的Ｚｕｒｉｃｈ大学的ＣＷＨｅｉｚｍａｎｎ教授馈赠。其余的抗体来源如下 :ＧＦＡＰ6Ｆ 2 (ＭｏＡｂ) ,ＧＦＡＰ(ＰｏＡｂ ) ,ＮＳＥ(ＭｏＡｂ) ,ｖｉｍｅｎｔｉｎ(ＭｏＡｂ) ,ＥＭＡ (ＭｏＡｂ)和ＣＥＡ (ＰｏＡｂ)购自Ｄａｋｏ,Ｄｅｎｍａｒｋ。ＧＦＡ…     

涎腺腺样囊性癌自杀基因治疗的实验研究

为 检测单纯疱疹病毒胸革激酶基因／无环鸟苷自杀基因治疗系统对高转移性涎腺腺样囊性癌细胞的体内治疗作用。方法 将肿瘤细胞接种于裸鼠两肋下,腹腔给予线日５０ｍｇ＝ｋｇ体重,２次／ｄ,连用１４ｄ。结果 实验组均不致瘤,而对照组均致瘤。用 原注射治疗移植瘤,可明显抑制肿瘤生长,抑制作用有较明显的旁杀伤效应,但远处旁杀伤效应不十分明显,结论ＨＳＶ－ｔｋ／ＧＣＶ地体积较小的肿瘤有较发的作用,而对体积较大的 欠     

TNP—470对人涎腺腺样囊性癌细胞增殖和凋亡的实验研究

目的 研究TNP－470对人涎腺腺样囊性癌细胞（ACC－M）的增殖抑制效应及凋亡诱导作用。方法 采用四氮唑盐还原法（MTT法）和台盼蓝拒染法,检测药物对ACC－M细胞的增殖抑制作用;荧光染色观察细胞凋亡变化;琼脂糖凝胶电泳测定DNA梯状条带;流式细胞术检测细胞凋亡峰和细胞周期变化。结果 MTT法和台盼蓝拒染法显示,TNP－470对ACC－M细胞的半数抑制浓度（IC50）分别为40．68μg/mlt 46.38μg/ml;实验用药组荧光染色观察到细胞呈现凋亡特征,DNA电泳显示典型的梯状条带;流式细胞术检查有明显的凋亡峰出现,细胞周期主要阻滞在G2／M期;实验用药组细胞凋亡率明显增高,与对照组有显著性差异（P＜0．01）。结论 TNP－470对ACC－M细胞体外直接杀伤作用不明显,但可诱导ACC－M细胞体外凋亡,诱导凋亡可能是其抗肿瘤作用机制之一。     

涎腺腺样囊性癌过继免疫治疗的实验研究

为研究涎腺腺样囊性癌过继免疫治疗的特点，通过体外试验观察了肿瘤坏死因子α（ｔｕ－ｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒα，ＴＮＦ－α）与γ干扰素（ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－γ，ＩＦＮ－γ）分别作用于白细胞介素２（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－２，ＩＬ－２）诱导的淋巴因子激活杀伤（ｌｙｍｐｈｏｋｉｎｅ－ａｃｔｉｖａｔｅｄｋｉｌｅｒ，ＬＡＫ）细胞杀伤靶细胞不同阶段时对ＬＡＫ细胞杀伤活性的影响。结果表明腺样囊性癌（ａｄｅｎｏｉｄｃｙｓｔｉｃｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＡＣＣ）－２为ＬＡＫ杀伤敏感细胞，ＴＮＦ－α与ＩＦＮ－γ均适合作为增强剂增强ＬＡＫ细胞杀伤ＡＣＣ－２的活性。ＴＮＦ－α的增强方式是与ＩＬ－２共同诱导ＬＡＫ细胞，而ＩＦＮ－γ则通过预保温ＡＣＣ－２细胞提高其被ＬＡＫ细胞杀伤的敏感性。     

涎腺腺样囊性癌细胞对抗癌药物敏感性的研究

目的 检测涎腺腺样囊性癌对抗癌药物的敏感程度。方法 采用ＭＴＴ法测试了１４种抗癌药物对ＳＡＣＣ－８３、ＡＣＣ－２和ＡＣＣ－Ｍ等３个体外培养的涎腺腺样囊性癌细胞株的杀伤作用强度。结果 ３种细胞株对１４种药物的敏感性大体相似而又有差别,在抗代谢类抗肿瘤药物中,对ＭＴＸ、ＤＮＡ、ＡＤＭ、５－Ｆｕ、ＭＭＣ的敏感性较强,在植物来源的抗癌药物中,对Ｔａｘｏｌ有明显的敏感性。结论 药物敏感性测定对临床选用有效的     

紫杉醇抗涎腺腺样囊性癌远处转移的实验研究

目的　观察紫杉醇对涎腺腺样囊性癌细胞远处转移的作用及其对转移灶肿瘤细胞凋亡的影响。方法　用ACC -M裸鼠肺转移模型观察紫杉醇体内抗转移效果 ,原位杂交法检测转移灶肿瘤细胞凋亡。结果　对照组与紫杉醇治疗组相比 ,二者之间转移率 (90 %和 4 0 % )及瘤结节数均有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;对照组与治疗组凋亡指数分别为 6 .0 3± 3.36与 2 5 .4 7± 4 .78,二者对比有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论　紫杉醇对涎腺腺样囊性癌肺转移有较好的抑制效果 ,诱导凋亡可能是其抗ACC -M裸鼠肺转移的作用机制之一。     

全国涎腺腺样囊性癌专题研讨会会议纪要

由中华口腔医学会口腔颌面外科专业委员会涎腺疾病学组主办、中国抗癌协会头颈肿瘤协作组协办、北京大学口腔医学院承办的全国涎腺腺样囊性癌专题研讨会于 2 0 0 2年 6月 1 7～1 8日在北京召开 ,来自全国各地的专家、代表 2 0余人参加了会议。本次会议针对具有特殊生物学行为的涎腺腺样囊性癌进行了深入探讨 ,相关专家相聚在一起 ,交流各自的研究经验 ,共同商讨进一步深入研究的计划和方案 ,并准备开展协作研究。在本次会议上 ,北京大学方伟岗教授介绍了肿瘤细胞侵袭转移的最新研究动向 ;上海第二医科大学林国础教授介绍了涎腺腺样囊性癌的…     

顺铂诱导人涎腺腺样囊性癌细胞多药耐药性的评价

目的:用恒定顺铂浓度、周期性作用的方法,诱导产生耐顺铂的腺样囊性癌细胞株SACC,并检测其多药耐药性。方法:用浓度为1μg/ml的顺铂作用于腺样囊性癌细胞株,每次作用时间48h,经6个月后形成在该药物浓度下生长良好的耐顺铂细胞株。用MTT法、流式细胞仪检测4种化疗药物甲氨喋呤、平阳霉素、长春新碱、丝裂霉素对2种细胞的杀伤效应和细胞周期的变化。结果:经过6个月诱导形成的耐顺铂细胞株SACC/DDP,较之SACC,对4种化疗药物均产生了不同程度的抗性,流式细胞仪检测发现其细胞周期发生变化,主要是G0/G1比例下降,且与药物浓度密切相关。结论:经顺铂周期性诱导,可以产生人涎腺腺样囊性癌多药耐药细胞株。