盐-溶剂法浓缩鱼油中EPA和DHA的研究

鱼油中所含二十碳五烯酸(EPA:eicosapentaencic acid)和二十二碳六烯酸(DHA:docosahyexaencic acid),等W-3系多烯脂肪酸(PRFA:polyunsaturated fatty acid)有抑制血小板聚集,调整血脂,提高生物膜液态性等怍用,已被称为人体必需脂肪酸(EFAS essential fatty acids)富含EPA和DHA的鱼油制品用于防治心脏血管疾病已     

鱼油对小鼠血浆PGI2和TXA_2代谢物的影响

<正> 二十碳五烯酸(Ecosapentaenoic acid,EPA)和二十二碳六烯酸(Docosahexaenoicacid,DHA)是n-3系不饱和脂肪酸,鱼油的主要成分。它们具有调整血浆脂类、抑制血小板聚集、减少纤维蛋白原含量等药理作用。此外,还影响PGs系统,但动物实验资料较少。本实验通过放射免疫方法测定鱼油对小鼠血浆PGI_2和TXA_2代谢物的影响,为鱼油开发应用提供实验依据。材料鱼油(鲐鱼),PUFA-E,批号890308,山东医科大学生化制药研究室提供。内含EPA241.68mg/ml,DHA 470.62mm/ml。6-keto-PGF_1α/TXB_2放射免疫药盒,苏州医学院血栓与止血研究室。     

气相色谱法测定鱼油及其脂肪酸中二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的含量

<正> 自EPA从Dyerberg等发现鱼油中的二十碳五烯酸(all cis-5,8,11,14,17-eicosapenaenoic acid)和二十二碳六烯酸(DHAall cis4,7,10,13,16,19-docosahexaenoic acid)具有降血脂、抗血栓和抗动脉粥样硬化等作用以来,鱼油制品已作为医药或营养食品出现,受到医药界的关注。我国鱼产丰富,开发药用鱼油有重要意义。我们研究了与鱼油开发密切相关的气相色谱法测定其制品中EPA和DHA含量的方法,现报道如下。     

二十碳五烯酸对实验性血栓形成的影响

<正> 以海洋动物为食品的爱斯基摩人和日本渔民心血管发病率较低,主要与鱼油中含二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic acid,EPA)和二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA)等ω-3多不饱和脂肪酸有关。文献报道EPA具有抑制血小板聚集及使血脂和纤维蛋白原降低等作用,但对实验性抗栓作用研究甚     

富含廿碳五烯酸海洋鱼油在体内外对血小板功能的影响

廿碳五烯酸(EPA)对血小板功能的影响:(1)在体外实验中发现EPA对花生四烯酸的诱聚作用及血小板聚集后血栓烷B_2的生成均有明显的抑制。(2)12例健康志愿者分别服鱼油15g或3g(高浓度EPA鱼油经气相色谱分析含EPA约为12.17％),结果2组均表现为出血时间延长,血小板粘附及聚集率下降。(3)对15例糖尿病、12例高血压、20例冠心病患者的血液高凝状态,服鱼油20d后均有显著的改善(P<0.05),且无明显副作用。     

二十碳五烯酸的药理作用及作用机制的研究进展

<正> 鱼油曾做为一种保健食品风靡很多国家,鱼油中的主要有效成分二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA.n—3)近年已被开发成一种防治心血管疾病的有效药物。EPA不仅可以改善血脂、抑制血栓形成,亦具有抗炎、免疫调节等作用,所以被认为是一种很有发展前景的新药。本文拟就EPA研究的由来、药理作用、临床效果及作用机制等结合作者的一些实验研究结果作一介绍二口。1 EPA研究的由来     

左旋咪唑对大鼠脑组织咪唑啉2受体-配体结合试验的影响

目的研究左旋咪唑(LMS)对大鼠脑组织咪唑啉2受体(I_2R)的影响。方法采用受体-配体竞争结合试验,观察LMS与受体的结合能力;采用受体-配体饱和试验,测定LMS处理大鼠和对照组大鼠脑内I_2R最大受体结合容量(B_(max))和平衡解离常数(K_d)变化。结果LMS抑制了放射性配基[~3H]idazoxan与大鼠脑组织内I_2R的结合,其半数抑制浓度(IC_(50))为4.04×10~(-7)mol·L~(-1)。LMS长期处理大鼠,脑内I_2R亲和力上调63%。结论LMS能与I_2R结合,长期应用LMS能通过刺激I_2R而改变了受体亲和力。     

硝酸银-水法提纯高含量DHA和EPA的实验研究

目的 从鱼油中分离提纯高含量的DHA和EPA方法 用硝酸银一水法对鱼油乙酯化产品进行分离提纯。结果 用硝酸银一水法分离粗鱼油得到(1)DHA、EPA总含量大于95％的产品；(2)DHA含量大于95％的产品；(3)EPA含量高于DHA的产品。结论 研究的工艺可降低生产高含量鱼油DHA、EPA的成本，降低现售DHA、EPA产品的副作用，提高DHA、EPA产品的稳定性。     

鱼油中二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的工业制备

<正> 二十碳五烯酸(eieosapentaenoic acid,简称EPA)和二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,简称DHA)均为高度不饱和脂肪酸,化学结构分别为全反式CH_3CH_2[CH=CH-CH_2]_5CH_2CH_2COOH和全反式CH_3CH_2[CH=CH-CH_2]_6 CH_2COOH。EPA和DHA广泛存在于自然界的水生动物,如沙丁鱼、鲭鱼、金枪鱼、鳕鱼、鲱鱼、秋刀鱼、海豹、海象、乌贼、章鱼和虾等的油脂中。EPA和DHA具有重要的生物学功能,如降低血中胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白和升高高密度脂蛋白的作用,并能抑制血小板凝集、降低血液粘度和延长凝血时间,对脑血栓、心肌梗塞等心血管疾病具有防治作用,因此,从鱼油中分离提纯药用EPA和DHA具有重要意义。     

鱼油对心脏功能的影响

鱼油富含二十碳五烯酸(eicosapen-taennoic acid, EPA)和二十六碳六烯酸(de-cosahexaenoic acid,DHA)具降血脂,改善脂质代谢,降低血压,抗血小板聚集等作用。现又证明鱼油可改善心脏功能,具有抗心肌缺血,抗儿茶酚胺和氯化钡诱导的心律失常,减轻结扎冠脉所致心肌坏死面积,对抗结扎冠脉再灌所致室颤的发生率等作用。总之,鱼油不仅具有对血脂调节作用,而且对心脏功能的效应日益受到人们的关注,现就其对心功牟的影响作一概括介绍。     

龙葵碱对HepG_2人肝癌细胞NAT酶动力学常数的影响

目的探讨龙葵碱对HepG2细胞NAT酶米氏常数Km及最大反应速率Vmax的影响。方法MTT法测定龙葵碱对消化系统SGC-7901人胃癌、HepG2人肝癌、Ls-174人大肠癌3种肿瘤细胞株的细胞毒作用,采用高效液相色谱(HPLC)法,以2-AF为底物,以2-AF的浓度为底物浓度,在以HepG2完整细胞及细胞质内2-AF被NAT酶乙酰化为2-AAF的速度为NAT酶的反应速率,采用双倒数作图法,以底物2-AF浓度的倒数1/S对NAT反应速率的倒数1/V作直线,得出回归方程,计算Km和Vmax。结果MTT法测定表明龙葵碱对HepG2人肝癌细胞比较敏感,酶动力学研究表明,以2-AF为底物,对于HepG2完整细胞,阴性对照组的Km和Vmax分别为(2.37×10-3±8.37×10-5)mmol.L-1、(9.16×10-4±7.54×10-5)nmol.106cells-1,龙葵碱组的Km和Vmax分别为(2.22×10-3±9.05×10-5)mmol.L-1和(5.14×10-4±3.72×10-5)nmol.106cells-1。对于HepG2细胞质,阴性对照组的Km和Vmax分别为(8.95×10-3±2.61×10-4)mmol.L-1、(2.55×10-6±1.92×10-8)μmol.min-1g-1Pro,龙葵碱组的Km和Vmax分别为(9.48×10-3±3.63×10-4)mmol.L-1和(2.43×10-6±1.32×10-8)μmol.min-1g-1Pro,统计学表明对于HepG2完整细胞和细胞质,阴性对照组和龙葵碱组的Km没有差异,而Vmax差异有显著性(完整细胞P<0.01,细胞质P<0.05)。结论龙葵碱是HepG2人肝癌细胞NAT酶2-AF底物的非竞争性抑制剂。     

茶黄素对大鼠心室肌细胞内游离钙浓度的影响

目的研究茶黄素对大鼠心室肌细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)的影响并探讨其可能机制。方法用激光共聚焦显微镜探测细胞内游离钙浓度,结果用相对荧光强度((FI-FI0)/FI0,%;FI0:对照;FI:给药)表示。结果①茶黄素(10,20,40μmol.L-1)对正常台氏液中心肌细胞内游离钙浓度没有影响,却可浓度依赖性地降低模拟缺血液中心室肌细胞[Ca2+]i的增加。②预先应用L型钙通道开放剂Bay k8644,可大部分取消茶黄素(20μmol.L-1)在模拟缺血液中的作用。③茶黄素(20μmol.L-1)能明显抑制无钙台氏液中由低浓度ryanodine引起的[Ca2+]i增加。④当细胞外液钙浓度由1 mmol.L-1增加到10 mmol.L-1而诱发心室肌细胞钙超载时,部分心室肌细胞产生可传播的钙波,茶黄素(20μmol.L-1)可降低钙波发生的频率和持续时间,最终阻断钙波并降低[Ca2+]i。结论茶黄素可抑制电压门控性钙通道的外钙内流和减少肌浆网的内钙释放从而降低[Ca2+]i。     

3,4′,5-三羟基芪-3-β-单-D-葡萄糖甙抑制凝血酶非依赖花生四烯酸途径诱导兔血小板聚集作用及机理

3,4’,5-三羟基芪-3-β-单-D-葡萄糖甙(PD)0.33,0.56,0.95,1.63,2.79mmol·L~1能显著抑制2.3mmol·L~1·s~1凝血酶诱导的家兔洗涤血小板聚集,呈良好的量效关系,PD对1 min和最大血小板聚集抑制率IC_(50)分别为0.57和1.16 mmol·L~1,并能使血小板聚集延迟相延长,血小板聚集速度减慢,PD0.33～1.63mmol·L~1对血小板聚集时TXA_2释放无明显影响,仅在浓度为2.79mmol·L~1时,才明显减少TXA_2释放,PD的作用与阿司匹林不完全相同.这可能与它们的作用机理不同有关,本文还观察了PD0.33 mmol·L~1有抑制凝血酶诱导兔血小板胞浆游离钙离子浓度升高的作用。     

槲皮素对大鼠大脑皮质细胞膜α_2－肾上腺素能受体的影响

用３Ｈ－可乐定分析大鼠大脑皮质细胞膜α２－肾上腺素能受体的特征，研究槲皮素对３Ｈ－可乐定结合的影响。３Ｈ－可乐定与大鼠大脑皮质细胞膜的结合是快速（Ｋ１：０．０２７Ｌ·ｎｍｏｌ－１·ｍｉｎ－１）、可逆（Ｋ２：０．１０４ｍｉｎ－１）的，有高度亲和力（ＫＤ：５．８７±１．１３ｎｍｏｌ·Ｌ－１）和可饱和性（Ｂｍａｘ：１６０±１０ｐｍｏｌ·ｇ－１，ｐｒ）。ｌ－可乐定、ｌ－肾上腺素、ｌ－去甲肾上腺素和ｌ－异丙肾上腺素等药物抑制３Ｈ－可乐定结合的效能顺序表明，大鼠大脑皮质细胞膜上３Ｈ－可乐定结合点为α２－肾上腺素能受体。１ｎｍｏｌ·Ｌ－１～１ｍｍｏｌ·Ｌ－１槲皮素竞争抑制３Ｈ－可乐定与大鼠大脑皮质细胞膜α２－肾上腺素能受体结合，Ｋｉ值为５．７３±１．５８μｍｏｌ·Ｌ－１。     

内皮素-1对大鼠血管平滑肌的作用及川芎嗪的对抗效果

用离体大鼠的主动脉和培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞,研究了内皮素-1对主动脉的收缩作用及对主动脉平滑肌细胞增殖周期及能量代谢的影响,结果表明1.0～18.0nmol·L~1的内皮素-1能引起浓度依赖性血管收缩,川芎嗪能有效对抗内皮素-1血管收缩作用.100～100.0 pmol·L~1的内皮素-1能使S+G_2+M期细胞的比例增加,具有促进血管平滑肌细胞增殖的作用;10.0 pmol·L~1内皮素-1作用10 min可升高平滑肌细胞ATP含量,20 min之后ATP含量一直低于正常水平,内皮素1对平滑肌细胞ATP含量的影响呈双相作用,先升高后降低     

肺动脉高压模型大鼠肺动脉平滑肌细胞内钙的改变

目的分析肺动脉高压时肺动脉平滑肌细胞Ryanod-ine受体[Ca2+]i释放功能的改变。方法腹腔注射野百合碱建立大鼠肺动脉高压模型,原代培养肺动脉平滑肌细胞,Fura-2/AM负载培养细胞,荧光测钙技术测量Ryanodine受体激动剂对[Ca2+]i变化的影响。结果10nmol.L-1Ry-anodine使对照组[Ca2+]i平均增加(93.31±12.41)nmol.L-1,使PAH组[Ca2+]i平均增加(141.71±13.59)nmol.L-1。两组样本[Ca2+]i增加的数值差异有显著性(P<0.01);10mmol.L-1Caffine使对照组[Ca2+]i平均增加(149.02±13.02)nmol.L-1,使PAH大鼠PASMC的[Ca2+]i平均增加(191.2±21.26)nmol.L-1,两组样本[Ca2+]i数值的变化差异有显著性(P<0.01)。结论肺动脉高压大鼠原代培养的肺动脉平滑肌细胞对Ryanodine受体激动剂的敏感性增强,提示肺动脉高压时Ryanodine受体释放[Ca2+]i的功能发生了异常改变。     

小檗碱对培养的新生大鼠心肌细胞内游离钙含量的影响

采用Ｃａ２＋指示剂Ｆｕｒａ－２作为细胞内钙离子的荧光探针，利用ＡＲ－ＣＭ－ＭＩＣ阳离子测定系统。检测了培养新生大鼠心肌细胞内游离钙的浓度，并观察了小檗碱对去甲肾上腺素，Ｈ２Ｏ２，高Ｃａ２＋及高Ｋ＋引起细胞内钙离子浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）变化的影响。小檗碱对心肌细胞静息［Ｃａ２＋］ｉ无明显影响，能浓度依赖地抑制去甲肾上腺素和Ｈ２Ｏ２引起的［Ｃａ２＋］ｉ的升高。小檗碱５０μｍｏｌ·Ｌ－１能抑制高Ｋ＋引起的［Ｃａ２＋］ｉ的升高，而小剂量（１－１０μｍｏｌ·Ｌ－１）则无作用。对搏动细胞，小檗碱能抑制其［Ｃａ２＋］ｉ瞬间变化的最大值，对最小值则无作用。     

前胡丙素对培养心肌细胞~（45）Ca~（2＋）摄入及细胞内游离钙的影响

利用培养的乳鼠心肌细胞测定细胞４５Ｃａ２＋的摄入及细胞内游离钙的浓度。结果表明，前胡丙素（Ｐｒａ－Ｃ）１０－１００μｍｏｌ·Ｌ－１依浓度抑制４５Ｃａ２＿的摄入，并抑制由３０μｍｏｌ·Ｌ－１ＫＣｌ所引起的４５Ｃｓ２＋摄入的增加，同时Ｐｒａ－Ｃ１００μｍｏｌ·Ｌ－１对去甲肾上腺素所诱发的４５Ｃａ２＿摄入的增加也有抑制作用。Ｐｒａ－Ｃ１０μｍｏｌ·Ｌ－１和维拉帕米１０μｍｏｌ·Ｌ－１能抑制细胞外高钾（３０，５０ｍｍｏｌ·Ｌ－１）引起的［Ｃａ２＋］ｉ的升高，同时Ｐｒａ－Ｃ３０ｍｏｌ·Ｌ－１和维拉帕米１０μｍｏｌ·Ｌ－１对去甲肾上腺素１０μｍｏｌ·Ｌ－１在无钙及含ＣａＣｌ２１．３ｍｍｏｌ·Ｌ－１的溶液中所引起的［Ｃａ２＋］，的增加也有抑制作用。提示前胡丙素对心肌细胞的作用与其阻滞钙通道有关。     

pH对大鼠离体胸主动脉环静息张力的影响及机制

目的观察pH改变对大鼠离体胸主动脉环静息张力的影响,探讨其可能的作用机制。方法采用离体血管张力实验方法,观察pH改变对大鼠离体胸主动脉环静息张力的的影响。观察静息状态下外钙内流和内钙释放在pH=9.5收缩大鼠离体胸主动脉环中的作用,以及孵育钙通道阻断剂维拉帕米(VEP,10-5 mol.L-1)、Na+/Ca2+交换阻断剂KB-R7943(10-6 mol.L-1)、Na+/H+交换抑制剂氨氯吡咪(AM,10-4 mol.L-1)对pH=9.5时大鼠离体胸主动脉环收缩的影响。结果胞外酸性环境下随pH值逐渐降低,大鼠离体胸主动脉环静息张力无明显改变;碱性环境下随pH值逐渐增加,其静息张力明显升高,其中pH=8.5、pH=9.0、pH=9.5、pH=10.0时的Emax分别为(11.79±6.83)%、(30.25±3.57)%、(92.24±5.73)%、(110.85±7.78)%。外钙内流和内钙释放均参与pH=9.5时的胸主动脉环收缩,VEP可部分阻断其收缩。KB-R7943和AM对pH=9.5时大鼠离体胸主动脉环收缩有减弱作用(P<0.01),其Emax分别为(48.33±5.75)%、(32.12±4.45)%。结论胞外碱性环境下,大鼠离体胸主动脉环静息张力随pH值增大而明显升高,此作用依赖外钙内流和内钙释放,与Na+/Ca2+交换和Na+/H+交换均有关。     

蛋白激酶C与血管平滑肌α_1肾上腺素受体触发Ca~（2＋）内流的关系

在酶新鲜分离的犬肠系膜上动脉平滑肌细胞，蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）的激活剂佛波二丁酯（ＰＤＢ）引起的胞内Ｃａ２＋增高作用可被ＰＫＣ抑制剂１－（５－异喹啉磺酰）－２－甲基哌嗪（Ｈ７）所阻断，而哌唑嗪和普萘洛尔则不能阻断ＰＤＢ的这一作用；１０μｍｏｌ·Ｌ－１苯福林引起的胞内Ｃａ２＋增高作用可被１０和２０μｍｏｌ·Ｌ－１Ｈ７部分阻断；在无Ｃａ２＋液，Ｈ７可部分抑制苯福林引起的内Ｃａ２＋释放和外Ｃａ２＋内流，两者分别被抑制了３３±３％和５８±６％；ＫＣｌ（２０－１００ｍｍｏｌ·Ｌ－１）可浓度依赖性地引起胞内钙升高，这一作用可被１０和２０μｍｏｌ·Ｌ－１Ｈ７不同程度地阻断；ＰＤＢ引起的胞内Ｃａ２＋增高也可分别被１．２５和２．５μｍｏｌ·Ｌ－１维拉帕米部分和全部阻断。上述结果提示ＰＫＣ参与苯福林引起的部分内Ｃａ２＋释放和外Ｃａ２＋内流，但以参与外Ｃａ２＋内流为主；这一作用可能与ＰＫＣ激活，引起电压依赖性Ｃａ２＋通道开放有关。