小鼠骨髓细胞长期培养中支持造血的基质细胞辐射抗性

骨髓基质细胞确切的辐射敏感性是一个尚有争论的问题。为此,Zuckerman KS 等对照射0、9、15、20、25、50、100、200或500Gy 的长期培养小鼠骨髓细胞贴壁融合基质细胞层进行了研究。所有受照射的培养物造血均迅速停止。并且,观察十周未见恢复。辐射剂量在100Gy 以下时,基质细胞看不出明显形态学改变。但是随着剂量加大,则出现细胞浆肿胀、细胞溶解和基质细胞的明显减少。照射9Gy 后两天内,RNA和蛋白质总合成下降35～60%,下降的主要原因可能是由于贴壁层中造血细胞的丢失。辐射剂量达100Gy     

培养小鼠骨髓细胞半同系移植研究的补充材料

用体外培养不同时间的C57BL/6雄性小鼠骨髓细胞移植到受致死剂量γ线照射的DBF_1雌性小鼠,记录受照射小鼠30天和60天的活存率,并分析造血和免疫功能的主要指标.对部分长期活存小鼠(60～110天)的骨髓细胞和淋巴细胞的染色体核型作细致观察,了解移植进去的造血细胞是否已被植入,结果表明移植培养骨髓细胞的受照射小鼠活存率远较照射对照组为高,造血与免疫功能明显地重建,这无疑是由于移植骨髓在照射动物中形成稳定的辐射嵌合体所致.     

人骨髓粒-巨噬祖细胞和基质祖细胞的辐射敏感性:剂量率效应

体外培养的人类白血病细胞系已显示出比骨髓基质细胞更高的辐射敏感性。然而,所提供的有关照射剂量率方面的资料并不多。要了解正常人骨髓造血细胞辐射敏感性是否与剂量率有一定关系,首先,必须纯化各种造血祖细胞。大量资料表明,新鲜骨髓含有很多其他非造血系细胞群,这些细胞同造血干细胞相比,可能对辐射有个高的固有敏感性。但目前还不能从骨髓中将其所含的非造血性基质细胞分离出来,致使人骨髓造血细胞的放射生物学研究工作陷入困境。本文报道以新鲜骨髓细胞及通过长期骨髓培养LTBMC方法,从基质细胞中分离出的非贴壁造血细胞作为靶细胞,观察不同剂量率的X线对同系细胞活存的影响。     

胚胎期受辐射对子鼠造血基质细胞功能的影响

目的　研究胚胎期 2 0Gy137Csγ射线照射后对子鼠造血基质细胞的远期影响。方法　建立胚胎期受辐射小鼠模型 ;以细胞计数检测股骨骨髓有核细胞 (BMNCs)数 ;用免疫组化ABC法检测基质细胞粒单系集落刺激因子 (GM CSF)和干细胞因子 (SCF)的表达 ;用体外小鼠骨髓细胞培养法以粒单细胞系祖细胞集落形成单位 (CFU GM )为指标观察基质细胞对正常骨髓造血的支持功能。结果　胚胎期受辐射小鼠BMNCs数明显低于正常小鼠 (P <0 0 1) ,其骨髓基质细胞生长因子GM CSF和SCF的表达均高于正常小鼠 (P <0 0 5 ) ,同时 ,胚胎期受辐射小鼠骨髓基质细胞对正常骨髓造血的支持能力也高于正常小鼠 (P <0 0 5 )。结论　 2 0Gy137Csγ射线对发育中的小鼠胚胎的造血基质细胞产生了明显影响。     

W/W~v和SL/SL~d小鼠全身照射后红系造血的不同类型

以往实验结果表明,正常小鼠全身照射后红系造血的开始时间与一定范围的照射剂量成正比。本实验的目的是研究 W/W~v 和 SL/SL~d 两个种系有遗传缺陷的再生障碍性贫血的小鼠对全身照射后的反应是否相同。实验用(WB×B_6)_f_1-W/W~v 和(WC×B_6)_f_1-SL/SL~d 小鼠,并以同窝小鼠(WB×B_6)_f_1-+/+或(WC×B_6)_f_1+/+为对照,每组5～10只,用X 线照射,剂量率为100拉德/分,分别于照后3～12天和3～16天从眼眶静脉窦取血,进行网织红细胞计数和红细胞比积测定。并以网织红细胞降至最低值后持续升高的开始时间作为红系造血的开始时间。实验结果:W/W~v 小鼠,100或200拉德照射后网织红细胞降到最低值(0～0.3%)之后,随之发     

小鼠胎肝和骨髓造血基质细胞对粒系造血祖细胞增殖的影响

本文应用体外液体培养方法建立小鼠胎肝和骨髓造血基质细胞贴壁层,在贴壁细胞层上做粒系造血祖细胞集落(GM-CFU-C)培养,观察胎肝造血基质细胞和骨髓造血基质细胞对粒系造血祖细胞生长的影响。实验结果表明,培养1～2周的胎肝造血基质细胞贴壁层能抑制 GM-CFU-C 的集落生成,此抑制作用可被消炎痛拮抗。随贴壁培养时间的延长,胎肝造血基质细胞贴壁层转而增加 GM-CFU-C 产率。不同培养时间的骨髓造血基质细胞贴壁层均能明显地促进 GM-CFU-C 的生长。文中讨论了造血基质细胞与造血的关系以及两种来源造血基质细胞作用不同的可能原因。     

骨髓长期培养的造血基质祖细胞的辐射敏感性

骨髓的长期培养体系使造血干细胞等所有造血细胞活存数周。这是由于培养过程中所形成的贴壁细胞层起到了造血微环境作用所致。把培养的这种贴壁细胞层接种到同系小鼠的肾包膜下,造血基质祖细胞形成异位造血灶。问题是培养的基质祖细胞在转移造血微环境的能力上是否和骨髓基质祖细胞相一致?辐射敏感性是细胞的最重要的特征之一。新鲜骨髓中转移造血微环境的细胞辐射敏感性的特征已有详细介绍。     

基质细胞支持的体外扩增造血细胞对致死剂量照射小鼠造血恢复的促进作用

目的 研究基质细胞支持条件下体外扩增的造血细胞回输体内后，促进经致死剂量照射小鼠造血功能恢复的作用。方法 在培养的小鼠骨髓基质细胞层存在的条件下，加入或不加入几种细胞因子组合，分别在小鼠骨髓单个核细胞液体培养体系中进行造血细胞体外扩增。将不同条件下扩增的细胞经尾静脉回输至经致死剂量照射的小鼠体内，并与单纯细胞因子存在条件下的扩增及末扩增造血细胞进行比较，动态观察小鼠的外周血象变化及其一般状况和生存宰。结果 ①单纯细胞因子介导小鼠骨髓单个核细胞(BMMNC)体外扩增后并不能增进这些细胞促进造血恢复的能力；②含有骨髓基质细胞底层的体外扩增，无论是否加入细胞因子，均有明显的促进移植受体造血功能迅速恢复的作用。     

血小板第4因子对放射损伤小鼠骨髓基质细胞周期的影响

目的探讨血小板第4因子（platelet factor 4,PF4）对5.0 Gy γ射线全身照射小鼠的骨髓基质细胞（bone marrow stromal cells,BMSCs）的保护作用,进一步探讨PF4对造血的辐射防护机制.方法30只雄性小鼠随机分为3组：①放射组,②PF4保护组,③对照组.小鼠照射前分别于26和20 h腹腔内注射PF4,每次剂量50 μg/kg.于照射后3 d取骨髓细胞体外培养,分别计数培养后3、7和14 d的骨髓基质细胞集落（CFU-F）;在培养后10 d流式细胞仪检测细胞周期.结果3组中,照射组3 d的CFU-F数量与PF4保护组差异无统计学意义,7和14 d的CFU-F数量PF4保护组较照射组明显增加.流式细胞仪检测结果表明3组中照射组G0＋G1期细胞明显高于其余两组,S,G2＋M期细胞明显低于其余两组.结论PF4对照射小鼠的骨髓基质细胞有保护作用,促进造血重建.     

小鼠骨髓基质细胞的扫描电镜观察

光镜见小鼠骨髓细胞体外液体培养后贴壁的基质细胞呈多种形态,并有消长过程。本文以扫描电镜进一步观察骨髓基质细胞形态。实验所见支持光镜所得结果。骨髓基质细胞有多种形态,分别具有巨噬细胞样、成纤维细胞样和网状细胞样细胞的某些特征。在体外液体培养的早期,巨噬样细胞较多;而培养两周后的贴壁基质细胞中,成纤维细胞样和网状细胞样的细胞比例增多,相互交错联结成层成同,形成体外造血微环境样结构。     

辐射后骨髓造血基质细胞对粒系造血祖细胞生长的影响

本文观察了骨髓造血基质细胞贴壁层及细胞悬液对 GM-CFU-C 生长的影响及照射后的变化。实验结果表明,骨髓基质细胞贴壁层及细胞悬液均有增高 GM-CFU-C 产率的作用。这种刺激性影响与基质细胞贴壁层的细胞密度和细胞悬液的浓度没有依赖关系。1～5Gyγ线照射的骨髓基质细胞贴壁层和细胞悬液支持 GM-CFU-C 集落生成的作用明显削弱。文中讨论了造血基质细胞的辐射损伤在放射病骨髓综合征发病机理中的意义。     

消炎痛对小鼠造血组织的辐射防护作用

作者探讨消炎痛(INDO)对造血组织的辐射防护作用及其机理.方法:1.小鼠(雌性,C3Hf/kam,3月龄)受250kV的X线全身照射6.6～8.9Gy,剂量率为1.7Gy/min,分别测定INDO组(照前饮用35μg/ml INDO溶液6天)与对照组的LD50/30)2.小鼠X线照射6.5～9.5Gy,分INDO组(照前或照后饮用INDO溶液1～6天)与对照组,照前30min均腹腔注射WR-2721(400mg/kg),照后第9天测定内源脾结节数;3.INDO组(饮用INDO溶液6天)与对照组小鼠各照射1.5、2、3、4、5及6Gy,照后立即制备双侧股骨骨髓细胞悬液,以2×10~4～2.8×10~6的细胞数静脉注射给受8.5Gy照后1天的小鼠,注射后8天测定外源脾结节数.结果:1.INDO组与对照组内源脾结节数均随     

5-甲氧基色胺-α-硫辛酸盐对6.0 Gy受照小鼠造血系统的辐射防护作用

目的 探讨新化合物5-甲氧基色胺-α-硫辛酸盐（MLA）对亚致死剂量受照小鼠造血系统损伤的辐射防护作用。方法 将15只C57BL/6小鼠完全随机分为对照组、照射组和照射+MLA组。对照组接受假照射（0 Gy）,其余两组进行6.0 Gy全身137Cs γ射线照射。照射后2 h将照射+MLA组小鼠按10 mg/kg灌胃给药,持续给药3 d。待照射后30 d处死小鼠,取外周血和单侧骨髓细胞进行计数,检测骨髓细胞克隆形成能力、造血细胞活性氧以及烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸氧化酶4（NOX4）的表达。结果 与对照组比较,照射组小鼠骨髓有核细胞计数、粒细胞-单核细胞集落生成数量（CFU-GM）均明显下降（t=9.304、7.493,均P＜0.05）;骨髓细胞活性氧水平和NOX4表达显著升高（t=14.74、53.12,均P＜0.05）,且差异有统计学意义。与照射组相比,照射+ＭＬＡ组小鼠外周血WBC、CFU-GM显著升高（t=4.858、3.947,均P＜0.05）;骨髓细胞活性氧水平和NOX4表达显著下降（t=11.21、33.93,均P＜0.05）,且差异有统计学意义。结论 ＭＬＡ对辐射引起的造血系统损伤有一定的防护作用。     

体外雌激素代谢物2-甲氧雌二醇增强辐射效应

目的 :2 -甲氧雌二醇 (2 - ME)是一种内源性雌二醇代谢物 ,具有破坏微管、抑制小鼠肿瘤和血管生成功能。由于某些微管抑制剂可改变辐射敏感性 ,因而对 2 - ME在体外作为辐射增强剂进行评价。方法 :1选用 H46 0人肺癌细胞株、MCF- 7乳房癌细胞株和 4种小鼠 SCID免疫缺陷细胞株 (SCID、CB- 17、10 0 E和5 0 D)。 2细胞贴壁后 ,加 2 - ME或β-雌二醇培养 2 4h,6 0 Coγ射线照射 (2～ 5 Gy,1.18Gy/ min) ,再培养 7～ 10 d,观察其克隆的存活率。 3分裂剂量恢复 ,即细胞分 2次照射 ,每次3Gy,照后观察其克隆细胞亚致死性损伤 (SL D)的…     

小鼠骨髓造血诱导微环境(HIM)Ⅱ.基质前体的辐射损伤并用改良长期骨髓培养分析其子代的功能

目前虽已认识到造血诱导微环境的重要性,但其性质仍待阐明。Friedenstein等将豚鼠骨髓细胞长期培养物中获得的成纤维细胞移种于同系宿主的肾包膜下时,能维持造血细胞的生长。Dexter等报告的长期骨髓培养系统,其骨髓贴壁单层细胞可支持造血干细胞增殖数月。虽然构成贴壁单层的有许多类细胞如成纤维细胞、巨噬细胞、上皮细胞和脂肪细胞等,但     

移植骨髓或屏蔽骨髓对照后早期肠道损伤的影响

本实验采用输注骨髓细胞或屏蔽造血组织照射腹部的方法,探讨在大剂量照射后造血组织对早期肠道损伤的作用.结果表明,输注骨髓细胞对受~(60)Co-γ线12Gy和10Gy照射小鼠的小肠重量减轻及隐窝活存率都没有明显影响.小鼠经14GyX线全身照射或照射腹部后,肠上皮细胞的减少及隐窝有丝分裂受抑制的程度相似,没有观察到由于屏蔽自身造血组织而减轻肠道的损伤.提示,在大剂量照射时,肠道的损伤主要取决于射线的直接作用并与照射剂量有关,而造血组织对它的影响不明显.     

白藜芦醇促进γ射线照射小鼠造血系统损伤修复的作用

目的观察白藜芦醇对60Coγ射线照射小鼠造血系统损伤修复的影响。方法 ICR小鼠随机分成5组,即正常对照组、照射对照组以及白藜芦醇50、100、200 mg.kg-1照射组,照射前3 d灌服给药,每天1次。除正常对照组外,所有小鼠60Co射线全身5.5 Gy辐照1次,照射后第7天小鼠取骨髓细胞和脾脏,对骨髓单个核细胞和脾集落形成单位进行计数,测定骨髓细胞DNA含量和细胞周期。结果与正常对照组比较,照射对照组小鼠骨髓单个核细胞数和骨髓细胞DNA含量显著降低（P〈0.05）,脾集落形成单位数和S和G2/M期细胞百分率显著增多（P〈0.05）;与照射对照组比较,白藜芦醇100、200 mg.kg-1照射组小鼠照射骨髓单个核细胞数、骨髓细胞DNA含量、脾集落形成单位数和S和G2/M期细胞百分率显著增多（P〈0.05）,白藜芦醇50 mg.kg-1照射组有增多趋势。结论白藜芦醇可以促进60Coγ射线照射小鼠造血系统损伤的恢复,防护效果与给药剂量相关。     

人骨髓细胞体外长期培养中贴壁细胞层的作用

本实验用人骨髓细胞建立起贴壁细胞层,做第二次骨髓接种后,每周换液时取出全部细胞悬液,换入等量的无细胞新鲜生长培养液,观察悬浮细胞和GM-CFUc数量变化的规律。在这种培养条件下,造血干细胞的增殖与分化可维持7周。虽然悬浮细胞和GM-GFUc的数量在培养第二周后下降较快,但在培养七周内悬液中始终存在少量悬浮细胞和GM-CFUc。对部分培养同时测定了悬液与贴壁层中的GM-CFUc,在培养2～3周时贴壁层中GM-CFUc有增多趋势,到5～8周时贴壁层中就测不出GM-CFUc,此时悬浮的GM-CFUc也很少了。实验结果说明在人骨髓体外培养悬液中的造血干细胞(或祖细胞)来源于贴壁层,贴壁层是维持体外造血干细胞增殖与分化的基地。     

铜蒸气激光对造血细胞GM—CFUc的效应

本研究用铜蒸气激光照射人胎骨髓或小鼠骨髓造血干/组细胞,可以使造血细胞GM-CFUc增殖,用578.2nm和510.6nm的激光照射造血细胞,经体外培养后,其GM-CFUc值和未照射组比较都有显著增加,这些结果与我们用Ar~ 激光514.5nm照射的结果相似。本文还就激光对造血细胞的作用机理作了初步探讨。     

局部或全身应用16,16dm前列腺素E_2(PGE2)或WR—2721(WR—1065)对受局部照射小鼠脱毛的防护作用

方法;麻醉下拔去B6D_2F_1雄性小鼠右胁腹部及其周围的毛,导致毛生长初期,每组6只动物用~(137)Cs γ射线局部照射(剂量率1.3Gy/min,剂量范围20～50Gy)。从毛生长初期的10～15天,每天照射4.0Gy或4.5Gy(5天组);从5～