Rho /Rock信号通路在原发性高血压肾纤维化中作用

目的探讨Rho／Rock信号通路在原发性高血压肾纤维化中的作用。方法选择31例原发性高血压病人,依据24h尿微量清蛋白排泄率（UAER）分为正常清蛋白尿组（A组）11例、微量清蛋白尿组（B组）10例和尿毒症组（C组）10例,选取正常体检者10例作为对照组,用酶联免疫吸附法（ELISA法）测定各组血清转化生长因子β（TGF-β）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）及Rho关联含卷曲螺旋蛋白激酶1（ROCK-1）水平,分析TGF-β、MMP-9、ROCK-1在各组间的表达规律及三者之间的相关性。结果与对照组比较,A、B、C组TGF-β、MMP-9、ROCK-1血清浓度均显著升高（F=14．498～126．037,q=3．222～20．617;P〈0．05、0．01）;B、C组TGF-13及ROCK-1血清浓度较A组显著升高（q=4．797～17．636,P〈0．01）,B、C组间TGF-β、ROCK-1血清浓度差异无显著（q=0．612、1.175,P〉0．05）;B组MMP-9血清浓度较A、C组显著增高（q=4．799、5．959,P〈0．01）,而A、C组之间差异无显著性（q=1．299,P〉0．05）。血清TGF-β与MMP-9、TGF-β与ROCK-1、MMP-9与ROCK-1浓度之间均呈正相关（r=0．381～0．652,P〈0．05）。结论Rho／Rock信号通路可能参与了高血压肾纤维化过程。     

血管钙化及其平滑肌细胞表型转化的调节机制

血管钙化常见于高血压、糖尿病血管病变、动脉粥样硬化、慢性肾病、衰老等传统的老年病或慢性病,此外还可见于小儿,如新生儿期血管钙化、肺动脉高压、尿毒症性小动脉钙化等,均可危及生命。最近研究发现,血管钙化是一种多因素介导、可逆的、主动的调节过程,涉及多种细胞因子及信号通路,血管钙化的本质是血管平滑肌细胞向成骨细胞样表型转化,导致血管壁增厚、管腔狭窄、血管硬化重塑,因此血管钙化及其平滑肌细胞表型转化相关的信号转导调节机制成为这一领域的重大研究课题。     

卡维地洛对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌重塑中Rho/Rock信号通路的影响

目的研究卡维地洛对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌重塑中的作用及对Rho/Rock信号通路的影响。方法 24只雄性SD大鼠随机分成3组:空白对照组(对照组)、ISO模型组(模型组)、卡维地洛(Carvedilol Car)组(治疗组),每组8只。模型组和治疗组皮下多点注射ISO[5 mg/(kg·d)×10 d]建立大鼠心肌纤维化模型,其中治疗组给予Car[10 mg/(kg·d)]灌胃,模型组及对照组每日给予相同体积的生理盐水灌胃。6周后取左室心肌组织进行MASSON染色、免疫组织化学染色,分别检测胶原容积分数(CVF)、心肌组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)表达量;RT-PCR法检测心肌组织RhoA和Rho激酶(Rock)mRNA的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠CVF增加,TGF-β1表达增高(P<0.01),左室组织RhoA和Rho激酶mRNA表达上调(P<0.01);与模型组比较,治疗组CVF表达下降(P<0.01),TGF-β1、RhoA和Rho激酶mRNA表达减少(P<0.01),但均仍高于对照组(P<0.01)。结论 ISO诱导心肌纤维化伴有Rho/Rock信号通路激活,卡维地洛能抑制Rho/Rock信号转导通路的活性、抑制TGF-β1表达,减轻心肌纤维化。     

W nt／β-连环蛋白信号通路在诱导气道平滑肌细胞外基质蛋白沉积中的作用

目的探讨Wnt／β‐连环蛋白信号通路在TGF‐β1诱导人气道平滑肌细胞（HASMC）细胞外基质（ECM ）蛋白沉积中的作用。方法将原代培养的 HASMC用于实验。用Western blot的方法来分析蛋白表达量,用实时荧光定量PCR的方法来分析ECM蛋白的基因表达。结果用TGF‐β1刺激体外培养的 HASMC ,可以引起胶原蛋白Ⅰα1（P＜0．01）及ECM 蛋白mRNA （包括胶原蛋白Ⅰα1、纤连蛋白、多功能蛋白聚糖、层粘连蛋白α2及核心蛋白多糖）表达增加（P＜0．01）。TGF‐β1可以引起β‐连环蛋白（P＜0．05）及其mRNA表达显著增加（P＜0．01）。TGF‐β1通过抑制糖原合酶激酶3（GSK3）β活化（P＜0．01）而引起非磷酸化的β‐连环蛋白表达增加（P＜0．01）。此外,用Wnt信号通路药理学抑制剂PKF115‐584可以明显抑制TGF‐β1诱导的胶原蛋白Ⅰα1（P＜0．01）及ECM蛋白（包括胶原蛋白Ⅰα1、纤连蛋白及多功能蛋白聚糖）的基因表达（P＜0．01）。结论 HASMC中Wnt／β‐连环蛋白信号通路的活化,参与了TGF‐β1诱导的ECM蛋白沉积。     

阿魏酸钠干预对Rho/Rock信号通路的影响及其对肝脏的保护作用

［摘 要］ 目的：探讨阿魏酸钠(SF)干预后对Rho/Rock信号通路相关蛋白表达及肝脏的影响,阐明其对脏器的保护作用。方法：雄性Wistar大鼠20只,分为正常对照组、模型组、阳性药组及SF干预组。除正常对照组外,其余组大鼠注射盐酸异丙肾上腺素（Iso）15 mg/kg诱发大鼠心肌纤维化模型;稳定2 d后,除模型组外,其余2组给予SF和贝那普利。利用Masson染色分析给予SF后心肌胶原的含量变化;RT-PCR法分析Rho A和Rock mRNA表达;采用免疫组织化学染色分析心肌Rock蛋白表达;拉曼光谱分析肝脏的损伤。结果：与正常对照组比较,注射Iso后3周,Rho A和Rock mRNA表达即有所增加 (P<0.01);给予SF和贝那普利后,Rho A和Rock基因和蛋白表达水平较模型组明显降低(P<0.01);拉曼光谱分析结果显示,给予SF后大鼠肝脏组织的峰位较模型组向右移动1个单位,趋近正常对照组峰位。结论：SF可能通过阻断Rho/Rock信号通路进而起到抑制纤维化的作用,同时又起到肝脏保护作用。     

转化生长因子-β1介导的ERK／MAPK信号通路与肺纤维化

肺纤维化的发生是一个由多种细胞因子启动和维持的胶原蛋白代谢调控失衡的结果.在众多致纤维化细胞因子中,转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)被公认为纤维化形成与发展的诱导和启动因子,可促进间质细胞如成纤维细胞(fibroblast,FB)的增殖、分化和分泌,继而促进胶原蛋白等细胞外基质(extra cellular matrix,ECM)成分在肺问质和肺泡间过度积聚[1].     

Geminin在血管平滑肌细胞分化表型转化中的介导作用

目的 通过比较静止状态的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)与血清刺激后的VSMCs在分化表型改变中Geminin的表达变化情况,探讨Geminin对VSMCs表型转化的影响.方法 实验设置静止状态(血清饥饿)对照组、血清刺激组,研究不同时相两个组Geminin的分布、活性及表达水平的差异.血清饥饿法可以诱导出VSMCs表型分化及活性差异;免疫荧光染色后激光共聚焦显微镜观察Geminin核内定位;应用PCR检测Geminin基因表达的变化;Western blot检测Geminin蛋白、VSMC合成型标志物骨桥蛋白(osteopontin,OPN)及收缩型标志物平滑肌肌动蛋白相关蛋白(actin-related proteins,ARP)表达的变化.结果 ①静止状态下(血清饥饿)VSMCs以收缩型为主,血清刺激后以合成型为主;②静止状态Geminin几乎全部存在于细胞质内,而血清刺激后Geminin几乎全部定位于胞核内;③Geminin mRNA在血清刺激时明显升高,且在刺激48 h时差异表达最明显,与无血清比较差异具有统计学意义(P<0 05);④Geminin蛋白和骨桥蛋白在血清刺激时均明显升高,与无血清比较差异具有统计学意义(P<0.05).结论 Geminin参与介导了VSMCs由收缩型向合成型的转化.     

TGFβ1-Smad信号通路在胆管癌中作用的研究现状

转化生长因子β1(TGFβ1)-Smad信号通路是胆管癌发展、侵袭及远处转移过程中的重要因子。TGFβ1-Smad信号通路在细胞上皮间-质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中也起到至关重要的作用,可使细胞间的黏附性降低,肿瘤细胞能透过基底膜,广泛侵袭至癌旁组织,并发生远处转移。故TGFβ1-Smad信号通路在胆管癌发展中作用的研究是胆管癌相关研究中的焦点所在。本文就近几年TGFβ1-Smad信号通路与胆管癌的关系相关研究进展做综述。     

Rho/ROCK激酶信号通路在大鼠宫腔粘连中的作用

目的 复制宫腔粘连大鼠模型,探讨Rho/ROCK信号通路相关蛋白的表达及其在宫腔粘连中的作用机制。方法 SD大鼠宫腔注入0.5?ml 95%乙醇,复制宫腔粘连模型;对照组注入等量生理盐水。术后15?d观察两组子宫内膜形态学变化,免疫组织化学法检测子宫内膜角蛋白、波形蛋白、Rho（RhoA、RhoB、RhoC）、Rho激酶（ROCKI、ROCKII）及TGF-β1表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠子宫内膜厚度变 薄（P?<0.05）;两组腺体数目比较,模型组腺体数目减少（P?<0.05）;两组角蛋白比较,模型组表达下降（P?<0.05）;两组波形蛋白比较,差异无统计学意义（P?>0.05）;两组大鼠子宫内膜RhoA、RhoB、RhoC、ROCKI、ROCKII的表达比较,差异有统计学意义（P?<0.05）,模型组均高于对照组;模型组大鼠子宫内膜TGF-β1的表达高于对照组（P?<0.05）。结论 注射无水乙醇可复制稳定的大鼠宫腔粘连动物模型,其Rho/ROCK信号通路处于激活状态,TGF-β1通过激活Rho/ROCK信号通路促使子宫内膜损伤后组织纤维化,参与宫腔粘连的发生、发展。     

血管过氧化物酶1在Ang-Ⅱ诱导血管平滑肌细胞表型转化中的作用及机制

血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化在动脉粥样硬化等血管增生性疾病中起重要作用,但具体调节机制仍不明确。为探讨血管过氧化物酶1(VPO1)在血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)诱导VSMCs表型转化中的作用及机制,予以Ang-Ⅱ培养VSMCs,结果发现Ang-Ⅱ升高VSMCs内VPO1的表达,伴随着SM22α、α-SMA表达下降和OPN、KLF4表达升高。VPO1基因沉默后可明显抑制Ang-Ⅱ诱导的SM22α、α-SMA表达下降和OPN、KLF4表达升高,同时抑制HOCl的生成。HOCl培养VSMCs使SM22α、α-SMA表达下降和OPN、KLF4表达升高。研究结果表明VPO1通过调节KLF4的表达在Ang-Ⅱ诱导VSMCs表型转化中起重要作用。     

TGF-β及 PDGF介导的信号通路在肝纤维化中的作用

人肝纤维化是肝脏在受到各种有害刺激的作用下导致的损伤‐修复反应过程,表现为细胞外基质合成、降解与沉积不平衡,肝内结缔组织增生［1］。它不是一个独立的疾病,而是由各种原因包括病毒性、自身免疫性、药源性、胆汁淤积、代谢异常及先天性肝疾病等引起的共同病理过程［2‐4］,在炎性和细胞因子的作用下,直接或间接的刺激肝星状细胞（HSC ）,HSC活化、合成过多的细胞外基质在肝内沉积最终致肝纤维化的形成［5］,本文就导致肝纤维化中两个主要炎性因子：转化因子β（TGF‐β）及血小板源性生长因子（PDGF）所涉及的主要细胞信号通路进行综述。     

转化生长因子β1在糖尿病鼠血管平滑肌细胞中的表达

目的：研究转化生长因子β1（TGF－β1）在糖尿病大鼠血管平滑肌细胞中的表达。方法：纯种雄性Wistar大鼠16只，随机分为对照组、糖尿病组。在糖尿病成模的第4周末用半定量逆转录－聚合酶链反应检测各组鼠血管平滑肌细胞的TGF－β1mRNA的表达，结果：糖尿病组TGF－β1mRNA的表达较对照组明显增高（P＜0．01）。结论：糖尿病血管病变的发病与TGF－β1mRNA的高表达有关。     

转化生长因子-β/Smads信号通路在病理性瘢痕形成中的作用机制研究进展

纤维性修复是人体组织细胞受到损伤时启动的主要修复过程。过量的纤维修复会导致病理性瘢痕的产生,对患者的生理及心理健康造成巨大影响。形成病理性瘢痕的原因有很多,其中免疫因素越来越受到研究者的关注。本文就瘢痕形成及其免疫机制的研究进展作了简单阐述,同时对在其中发挥主要作用的转化生长因子-β及其下游的Smad信号通路展开讨论,在此基础上,并对瘢痕的预防和免疫治疗的研究前景进行了展望。     

转化生长因子β信号通路与肝癌的研究进展

肝癌的发病机制较复杂,是多因素、多基因、多阶段共同参与的结果,其中转化生长因子β(TGF-β)在肝癌的发生发展过程中具有重要作用。虽然TGF-β信号通路的研究已取得了一定发展,但对于TGF-β在肝癌中的转导机制尚未有明确定论。应用小鼠模型癌症基因组图谱分析及基因工程处理等综合方法可以剖析TGF-β信号通路上下联系的驱动角色,TGF-β可作为肿瘤抑制因子,具有调节免疫机制的作用;同时与上皮-间质转化过程存在关系,是肿瘤发生的启动因子;但是在肝癌干细胞产生过程中TGF-β又具有抑制作用,其在肿瘤不同进展阶段亦表现出不同的生物学效应。     

转化生长因子β及其信号通路的研究进展

转化生长因子β(TGF-β)是具有生物活性的多肽,是TGF-β超基因家族的一员,TGF-β的功能复杂并日益受到人们的关注。TGF-β可激活Smad通路,亦可激活丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路,激活的MAPK通路有细胞外信号调节蛋白激酶、p38和c-Jun N-末端激酶三条通路。现就TGF-β家族结构特征、生物学作用、TGF-β的信号转导通路作一综述。     

micro RNAs调控平滑肌细胞表型转化及其在心血管疾病中的作用

血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)的表型转化在心血管疾病的发生发展过程中起着重要的作用.生理状态下,VSMCs处在静止期,保持着收缩表型;然而,在病理状态下(如内皮损伤、细胞因子刺激),VSMCs由收缩表型转变为合成表型,由分化状态变为去分化状态.与此同时,其收缩蛋白...     

TGFβ1-Smad信号通路参与IL-33诱导的A549细胞上皮间质转化

目的:探讨TGFβ1-Smad信号通路在IL-33诱导的A549细胞上皮间质转化中的作用。方法:体外培养人肺泡上皮细胞来源的A549细胞株,将传代培养的细胞分为对照组、TGFβ受体抑制剂(LY2109761)组、IL-33组、IL-33+TGFβ受体抑制剂(LY2109761)组。给予相应处理,24h后收集各处理组细胞。RT-PCR和Western blot检测转化生长因子β1(TGFβ1)、上皮细胞标志物E钙黏素(E-cad)和间质细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平。Western-blot检测Smad信号通路Smad3、p-Smad3的表达水平。结果:与对照组比较,TGFβ受体抑制剂组Smad3蛋白,p-Smad3蛋白,TGFβ1、E-cad、α-SMA的mRNA及蛋白表达表达水平均未见明显变化(P>0.05);与对照组比较,IL-33组Smad3蛋白表达水平无明显变化(P>0.05),但p-Smad3蛋白表达水平明显升高(P<0.05),TGFβ1mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.05),E-cad mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05),α-SMA mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.05);IL-33+TGFβ受体抑制剂组与IL-33组比较,Smad3蛋白表达水平无明显变化(P>0.05),但p-Smad3蛋白表达水平明显降低(P<0.05),TGFβ1的mRNA及蛋白表达未见明显改变(P>0.05),E-cad的mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.05),α-SMA的mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:TGFβ1-Smad信号通路参与IL-33诱导的A549细胞上皮间质转化。     

TGFβRII-siRNA对肝星状细胞TGFβR/Smad信号通路的影响

目的：研究转化生长因子βⅡ型受体小干扰RNA（TGFβRⅡ-siRNA）对肝星状细胞TGFβR/Smad信号通路的影响。方法：构建TGFβRⅡ-siRNA的表达质粒,将TGFβRⅡ-siRNA质粒采用脂质体转染HSC-T6细胞。转染72 h后,采用半定量RT-PCR检测TGFβRⅡ、Samd2、Smad3、Smad7的mRNA的表达变化,放射免疫法测上清液Ⅲ型前胶原、IV型胶原和透明质酸含量变化。结果：与无关siRNA比较,TGFβRⅡ、Smad2和Smad3 mRNA表达差异有显著性（P〈0.01）,但Smad7表达差异无显著性,上清液Ⅲ型前胶原、IV型胶原和透明质酸含量明显减少（P〈0.01）。结论：TGFβRⅡ-siRNA下调TGFβRⅡ、Samd2、Smad3 mRNA表达,减少肝星状细胞胶原合成,但对Smad7 mRNA无明显下调。     

同型半胱氨酸对大鼠主动脉血管平滑肌细胞表型转化的影响

目的： 验证同型半胱氨酸（Hcy）是否具有促进大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）去分化的作用。 方法： SD大鼠主动脉VSMCs原代细胞培养鉴定,取4～7代细胞用于实验。VSMCs分为对照组、100 μmol/L Hcy干预组、500 μmol/L Hcy干预组、1 000 μmol/L Hcy干预组共4组。MTT法测各组VSMCs的增殖情况;划痕法和Transwell法检测各组VSMCs的迁移情况;ICC法检测各组VSMCs的细胞形态;Western blot法检测各组VSMCs中SM-actin、SM-MHC、Calponin、骨桥蛋白（OPN）的表达情况。 结果： 相比于对照组,Hcy组VSMCs增殖迁移增加;细胞形态变圆;SM-MCH和Calponin表达减少（ P＜0.01〉;OPN表达增加（ P＜0.01）,Hcy的这一作用与浓度呈正相关。 结论：Hcy可以促进VSMCs去分化,这可能是其促进VSMCs增殖和迁移的机制之一。