银杏内酯A、B对高胆固醇诱导的PC12细胞胆固醇代谢的影响

[目的] 基于体外血脑屏障(BBB)环境, 观察高胆固醇环境下PC12细胞胆固醇的代谢情况及银杏内酯A、B对其的影响。[方法] 利用Transwell装置共培养星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞建立体外BBB, 并与PC12细胞共培养。在Transwell 内皮细胞侧添加40 μmol/L胆固醇, 并分别给予30 μmol/L 银杏内酯A和25 μmol/L 银杏内酯B进行干预。干预结束后, 采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术, 检测胆固醇代谢关键酶低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(LRP-1)、胆固醇酰基转移酶(ACAT)、ATP结合盒转运子A1(ABCA1)及胆固醇24S-羟化酶基因(CYP46)在mRNA水平的表达。[结果] 高胆固醇环境下, LRP-1表达下调(P<0.01), ACAT 及ABCA1表达上调(P<0.05), CYP46的表达有上调趋势;药物干预后, 除LRP-1有不同程度的升高(P<0.05), 其余各指标均无明显变化。[结论] GKA、B对高胆固醇环境下PC12细胞胆固醇代谢关键酶LRP-1的表达有一定影响。     

远志皂苷调控RAGE和LRP1的抗Aβ诱导的氧化应激作用研究

目的 探讨远志皂苷(TEN)对转运蛋白RAGE和LRP1的调控作用,以及对Aβ诱导的PC12细胞氧化应激的保护作用.方法 建立Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤模型,MTT法测定细胞活力,Western blot 检测RAGE和LRP1蛋白表达水平变化,分光光度法检测活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)浓度及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性变化.结果 TEN能明显下调RAGE的表达,上调LRP1的表达,并且抑制Aβ25-35诱导引起的ROS、MDA浓度增加,提升Aβ25-35诱导引起的SOD、GSH-Px活性降低.结论 TEN可能通过调控Aβ转运清除蛋白RAGE和LRP1的表达,抑制Aβ诱导的氧化应激效应,发挥抗Aβ神经毒性和神经保护作用.     

银杏内酯对拟AD模型大鼠海马CA1区Aβ1-40表达的影响

目的: 研究银杏内酯对拟阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马CA1区Aβ1-40表达的影响.方法:采用冈田酸(OA)海马CA1区微量注射建立拟AD大鼠模型,3周后银杏内酯腹腔注射,水迷宫行为学试验检测学习记忆能力,免疫组织化学方法观察海马CA1区Aβ1-40的表达.结果:与拟AD模型组比较,银杏内酯组平均逃避潜伏期明显缩短(P＜0.01),银杏内酯组海马CA1区Aβ1-40表达明显减少或消失(P＜0.01).结论:银杏内酯显著改善拟AD模型大鼠学习记忆能力,其机理可能是抑制海马Aβ1-40的表达及tau蛋白磷酸化,减轻OA对大鼠海马神经元的病理损害.     

银杏内酯对拟AD模型大鼠海马CA1区Aβ1-40表达的影响

目的：研究银杏内酯对拟阿尔茨海默病（AD）模型大鼠海马CA1区Aβ1-40表达的影响。方法：采用冈田酸（OA）海马CA1区微量注射建立拟AD大鼠模型，3周后银杏内酯腹腔注射，水迷宫行为学试验检测学习记忆能力，免疫组织化学方法观察海马CA1区Aβ1-40的表达。结果：与拟AD模型组比较，银杏内酯组平均逃避潜伏期明显缩短（P〈0．01），银杏内酯组海马CA1区Aβ1-40表达明显减少或消失（P〈0．01）。结论：银杏内酯显著改善拟AD模型大鼠学习记忆能力，其机理可能是抑制海马Aβ1-40的表达及tau蛋白磷酸化，减轻OA对大鼠海马神经元的病理损害。     

银杏叶提取物、银杏黄酮和银杏内酯B对小鼠脑缺血／再灌注损伤的保护作用

目的比较银杏叶提取物及其主要成分银杏黄酮和银杏内酯B对小鼠脑缺血／再灌注损伤的保护作用。方法建立小鼠脑缺血／再灌注损伤模型,观察比较银杏叶提取物、银杏黄酮、银杏内酯B对小鼠存活时间、脑含水量及脑皮质组织中Na^＋-K^＋-ATP酶活性、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响。结果银杏叶提取物300mg·kg。能显著延长小鼠的存活时间,降低小鼠脑含水量,提高脑皮质组织中Na^＋-K^＋-ATP酶活性,抑制MDA含量增加和SOD活性降低（P〈0．01）。银杏内酯B和银杏黄酮亦有相似的作用,其中银杏内酯B对皮质Na^＋-K^＋-ATP酶活性的影响显著（P〈0．01）,而银杏黄酮能显著降低皮质中MDA的含量（P〈0．01）。结论银杏叶提取物、银杏内酯和银杏黄酮对小鼠全脑缺血／再灌注损伤均具有保护作用,银杏内酯B较银杏黄酮有较好的抑制脑水肿、提高Na^＋-K^＋-ATP酶活性的作用,而银杏黄酮抗氧化作用较优于银杏内酯B。     

银杏二萜内酯对缺氧处理人脐静脉内皮细胞凋亡和血管生成的影响及机制

目的 探讨银杏二萜内酯对缺氧处理的人血管内皮细胞株凋亡和血管生成的影响及分子机制。方法 在低氧状态下培养人血管内皮细胞株HUVEC 24 h,然后分别以低剂量(6.25mg/L)、高剂量(25.00 mg/L)银杏二萜内酯对HUVEC 进行处理。MTT法检测细胞活性情况;流式细胞术(FCM)检测各组细胞的凋亡情况;Transwell小室实验检测细胞的迁移能力;荧光实时定量RT-PCR(qPCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、P53、Bcl-2、Bax、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β(TGF-β)的mRNA和蛋白表达。结果 低氧培养后HUVEC细胞的活性明显低于正常氧培养组(P<0.05);低氧培养的HUVEC细胞凋亡率明显高于正常氧培养组,HIF-1α表达明显高于正常氧培养组(P<0.05)。银杏二萜内酯处理组的细胞活性明显高于对照组(低氧处理组),高剂量组的细胞活性高于低剂量组(P<0.05)。银杏二萜内酯处理组的细胞凋亡率明显低于对照组(低氧处理组),高剂量组的凋亡率低于低剂量组(P<0.05)。银杏二萜内酯处理组的细胞迁移能力明显高于对照组(低氧处理组),高剂量组的迁移能力高于低剂量组(P<0.05)。qPCR和Western blot结果显示,银杏二萜内酯处理组的细胞HIF-1α、Bax的mRNA和蛋白表达低于对照组,Bcl-2、VEGF、TGF-β的mRNA和蛋白表达高于对照组;高剂量组上述各基因表达变化程度比低剂量组更为明显(P<0.05)。结论 银杏二萜内酯能通过调控相关基因表达而改善缺氧处理的HUVEC细胞的凋亡及血管生成情况,可能成为治疗缺氧性血管疾病的新型药物。     

银杏内酯B、C及联合用药预处理对大鼠心肌缺血/再灌注心功能的影响

目的 探讨银杏内酯B（ginkgolide B,GB）、银杏内酯C（ginkgolide C,GC）及两者1∶1联合用药预处理对心肌缺血/再灌注损伤（ischemia/reperfusion injury,I/R）大鼠血流动力学的影响及其与氧自由基的关系.方法 50 只SD大鼠,随机分为5 组（n=10）：正常对照组（Control组）、缺血/再灌注组（I/R组）、银杏内酯B预处理组（GB组）、银杏内酯C预处理组（GC组）及银杏内酯B和C联合用药预处理组（GB＋GC组）.采用Langendorff装置逆行插管灌流,建立大鼠离体心脏I /R 模型;除Control组外,其余各组均缺血20 min,再灌注40 min.记录左心室收缩压（LVSP）、左心室舒张末压（LVEDP）、左心室内压上升和下降的最大变化速率（＋dp/dtmax）,并测定冠状动脉流出液中乳酸脱氢酶（LDH）的活性.结果 GB组、GC组及GB＋GC组用药预处理后,复灌时左心室内压差（△LVP）、＋ dp/dtmax等心功能指标明显优于I/R组（P〈0.05）,联合用药较单一用药效果差异不明显,各用药组的LDH活性均较I/R组明显降低.结论 银杏内酯B、C及联合用药均能一定程度改善大鼠心肌缺血/再灌注损伤,但联合用药较单一用药效果优势不明显.     

银杏黄酮甙对糖尿病大鼠肾组织PAI-1、MMPs-3表达的影响

目的探讨银杏黄酮甙对糖尿病大鼠肾脏保护作用机制。方法选择雄性SD大鼠48只，随机分为3组，每组16只，即正常对照组（A组），糖尿病组（B组），银杏黄酮甙治疗组（C组）。B、C组腹腔注射链脲佐菌素（STZ）制模成功后，C组给予银杏黄酮甙灌胃，10周后将大鼠宰杀，用免疫组化方法观察肾脏PAI-1、MMPs-3的表达。结果与A组相比免疫组化：PAI-1第6周时B、C组均高于A组（P〈0．01，P〈0．05），持续至第10周（P〈0．01），但C组低于B组（P〈0．01）。MMPs-3第6周时B组低于A组（P〈0．05），持续至第10周（P〈0．01），C组则高于A、B组（P〈0．01）。结论STZ诱导的糖尿病大鼠PAI-1表达增强、MMPs-3表达下调。应用银杏黄酮甙治疗，可以使PAI-1的表达下调，MMPs-3的表达上调，对糖尿病大鼠肾脏有保护作用。     

银杏内酯B协同地塞米松对小鼠哮喘模型气道炎症和辅助T细胞亚群影响作用的研究

目的 探讨银杏内酯B协同地塞米松对支气管哮喘气道变应性炎症及辅助T细胞亚群的作用.方法 40只BALB/c小鼠随机分成正常对照组、哮喘对照组、地塞米松组、银杏内酯B组和联合干预组,每组8只.收集支气管肺泡灌洗液(BALF),行白细胞(WBC)及嗜酸性粒细胞(EOS)计数;应用ELISA法测定BALF中IFN-γ和IL-4水平.结果 BALF中WBC及EOS计数:3个用药组较哮喘对照组明显减少(P<0.01),联合干预组减少的程度大于地塞米松组(P<0.05)、银杏内酯B组(P<0.01).3个用药组小鼠BALF上清中IFN-γ和IL-4水平与哮喘对照组比较,银杏内酯组、地塞米松组和联合干预组BALF上清中IFN-γ和IL-4水平分别增高和降低(P<0.05或P<0.01),而联合干预组增高和降低的程度大于地塞米松组(P<0.01)、银杏内酯组(P<0.05).结论 银杏内酯B能减轻小鼠哮喘模型BALF中炎性细胞浸润,并减少IL-4的水平;银杏内酯B与激素具有协同抗炎作用;同时具有更好的调节Th亚群失衡的作用.     

纳米银杏对动脉粥样硬化早期大鼠主动脉壁ICAM-1基因表达的影响

目的:观察纳米银杏(银杏黄酮-磷脂复合物)对动脉粥样硬化(AS)早期大鼠主动脉壁细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA及其蛋白表达水平的影响.方法:采用生化分析、免疫组化、实时定量荧光RT-PCR以及凝胶电泳,观察纳米银杏对大鼠主动脉ICAM-1 mRNA及其蛋白表达水平的影响.结果:与模型组比较,纳米银杏组ICAM-1表达明显降低(P<0.01);与银杏黄酮组比较,纳米银杏组ICAM-1表达明显降低(P<0.01).结论:银杏黄酮及纳米银杏可下凋AS早期大鼠主动脉壁ICAM-1的高表达,纳米银杏的作用明显优于银杏黄酮.     

肝细胞损伤模型中银杏内酯A保护机制及对Nrf2-抗氧化酶的影响

目的 探讨银杏内酯A对四氯化碳(CCl4)诱发的HepG2细胞损伤是否具有保护作用,并观察其对核因子E2相关因子2(Nrf2)调控的抗氧化酶的作用.方法 采用CCl4诱发HepG2细胞损伤,并予以不同剂量的银杏内酯A对其进行干预治疗,MTT法检测细胞活性,ELISA法检测细胞培养液中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)浓度,并观察细胞8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、丙二醛(MDA)、Nrf2、血红素氧合酶1 (HO-1)、谷胱甘肽(GSH)水平.进而采用PI3K/Akt、MAPK通路拮抗剂干预,探索介导银杏内酯A发挥作用的上游通路.结果 与对照组比较,CCl4组HepG2细胞活性降低,细胞培养液AST、ALT浓度增加,细胞8-OHdG、MDA水平升高(P＜0.05).而与CCl4组比较,银杏内酯A可剂量依赖性的升高HepG2细胞活性,降低AST、ALT浓度,降低8-OHdG、MDA水平,同时显著升高Nrf2、HO-1、GSH水平(P＜0.05).此外,PI3 K/Akt拮抗剂LY294002与p38拮抗剂SB203580显著减弱了银杏内酯A对HepG2细胞的保护作用,并抑制了银杏内酯A对Nrf2、HO-1、GSH表达的上调作用(P＜0.05).结论 银杏内酯A对CCl4诱发的HepG2细胞损伤具有保护作用,其机制之一可能与通过PI3K/Akt、p38通路上调Nrf2、HO-1、GSH表达、抑制氧化应激反应有关.     

HPLC-ELSD法测定注射用银杏内酯中银杏内酯A与银杏内酯B的含量

目的　研究并建立注射用银杏内酯中银杏内酯A与银杏内酯B的含量测定方法。方法　采用RP HPLC法 ,以正丙醇 四氢呋喃 水 (1∶30∶6 9) (V/V/V)为流动相 ,ELSD为检测器同时测定银杏内酯A和银杏内酯B的含量。结果　注射用银杏内酯中银杏内酯A、银杏内酯B与其它成分分离良好 ,银杏内酯A进样量在 2 .12～ 10 .6 0 μg ,银杏内酯B进样量在3.78～ 18.90 μg范围之间呈良好的线性关系 ;加样回收率分别为 97.2 4 %和 97.17% ,RSD分别为 1.94 %和 0 .78%。 结论本法简便 ,重现性好 ,可用于注射用银杏内酯的质量控制      

银杏黄酮磷脂复合物对家兔血液流变性与微循环的影响

目的观察银杏黄酮、银杏黄酮磷脂复合物对急性家兔血瘀证模型血液流变学与微循环的影响.方法取健康雄性大耳白兔24只,随机分为正常对照组、血瘀证模型组、血瘀证模型 银杏黄酮组、血瘀证模型 银杏黄酮磷脂复合物组4组.应用新鲜胎儿羊水制造家兔急性血瘀证模型,在此基础上给予银杏黄酮、银杏黄酮磷脂复合物,然后取每组血,检测血液流变学指标;采用WX-9A型微循环监测仪观察各组家兔肠系膜微循环的变化.结果银杏黄酮与银杏黄酮磷脂复合物对急性血瘀证家兔均能明显升高全血粘度、血浆粘度、降低红细胞聚集指数(P<0.05)、升高红细胞取向指数(P<0.05),红细胞变形指数(P<0.05);扩张肠系膜微动脉血管径、加快血流速度.银杏黄酮磷脂复合物组与银杏黄酮组比较有显著性差异(P<0.05).结论银杏黄酮及银杏黄酮磷脂复合物均可明显改善羊水造成的血瘀证家兔模型的血液流变学及微循环障碍,且银杏黄酮磷脂复合物的作用明显优于银杏黄酮,说明磷脂可以增加银杏黄酮的药理作用.     

尼莫地平对大鼠星形胶质细胞β淀粉样蛋白转运功能的影响及可能机制

目的探讨尼莫地平对大鼠星形胶质细胞(Ast)β淀粉样蛋白(Aβ)转运功能的影响及可能机制。方法利用Transwell装置共培养大鼠脑微血管内皮细胞与大鼠Ast建立体外血脑屏障模型,并分为Ast组(给予0μmol/L尼莫地平)、低浓度尼莫地平+Ast组(给予5μmol/L尼莫地平)、中浓度尼莫地平+Ast组(给予10μmol/L尼莫地平)、高浓度尼莫地平+Ast组(给予20μmol/L尼莫地平)。给予相应干预48 h后,检测跨膜电阻及荧光素-葡聚糖4000(FD4)通透性以评价血脑屏障完整性,观察Aβ跨血脑屏障由脑侧向血管侧的转运情况,检测蛋白磷酸酶2A(PP2A)活性,以及低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP-1)、晚期糖基化终产物受体(RAGE)、磷酸化Tau(p-Tau)蛋白、PP2A、成对免疫球蛋白样受体B(PirB)、糖原合酶激酶3β(GSK3β)蛋白表达水平。结果 4组细胞的跨膜电阻、FD4通透性差异无统计学意义(P>0.05)。Ast组、低浓度尼莫地平+Ast组、中浓度尼莫地平+Ast组、高浓度尼莫地平+Ast组Aβ跨血脑屏障由脑侧向血管侧转运量依次增多,Ast中LRP...     

HPLC法测定银杏叶片中银杏内酯的含量

银杏萜类内酯是银杏叶中除黄酮类化合物外的另一组具有较强生物活性的化合物，即银杏萜内酯A、B、C、M、J和白果内酯。现代药理研究表明，银杏内酯成分除具有扩张冠状动脉血管、增加脑血流量、改善脑营养及抗菌作用外，还有较强的血小板活化因子抑制作用，因此具有较高的研究开发价值。文献报道测定银杏叶提取物中的银杏内酯成分有HPLC-UV法、HPLC-ELSD法、HPLC-RID法、GC-MS法及HPLC-MS法等，     

银杏内酯的药理作用研究

银杏（Ｇｉｎｋｇｏ　ｂｉｌｏｂａ　Ｌ）为银杏科银杏属植物,又名白果,具有敛肺平喘,止遗尿、白带的功效,主要活性成分之一为银杏内酯（二萜类化合物）,是最有临床应用前景的血小板活化因子（ＰＡＦ）受体的天然拮抗剂,笔者就其药理作用研究进行综述。１对呼吸和中枢神经系统的保护作用ＰＡＦ能减少β－肾上腺素受体的数量,使β－受体激动剂的舒张气管作用减弱,银杏内酯可拮抗这种作用,用于治疗哮喘。动物实验表明［１］,银杏内酯Ｂ对实验性哮喘有明显的保护作用;对豚鼠抗原诱发的肺过敏反应有抑制作用;对内毒素诱导的支气管对…     

银杏内酯B对动脉粥样硬化家兔模型血清CRP和主动脉VCAM-1 mRNA的影响*

[目的]探讨银杏内酯B(EGB)对动脉粥样硬化家兔模型血清反应蛋白(CRP)含量和主动脉血管细胞黏附分子-1(VCAM-1mRNA)表达的影响.[方法]通过高脂饲料喂养8周复制动脉粥样硬化家兔模型,将35只家兔随机分为对照组、模型组和银杏内酯B组,8周后,银杏内酯B组加喂EGB 5 mg/(kg·d),继续喂养8周.处死前耳缘静脉取血,采用ELISA法检测血清CRP含量;处死后取主动脉,采用实时定量PCR法检测VCAM-1 mRNA表达.[结果]模型组血清CRP含量比对照组升高,银杏内酯B组血清CRP含量降低,与模型组相比两组差异均有显著性,P<0.01.模型组VCAM-1 mRNA表达比对照组升高,银杏内酯B组VCAM-1 mRNA表达降低,与模型组相比两组差异均有显著性,P<0.01.[结论]银杏内酯B能够降低动脉粥样硬化家兔模型血清CRP含量,有效抑制动脉粥样硬化家兔模型主动脉VCAM-1 mRNA表达,从而起到防治动脉粥样硬化的目的.     

银杏内酯对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的 研究银杏内酯对大鼠局灶性脑缺血的作用。方法 选用中动脉阻塞－再灌模型观测对比脑缺血大鼠给药组和模型组的各项指标。结果 银杏内酯口服能使脑缺血大鼠的神经行为明显改善,脑梗塞面积和脑含水量显著降低;高、中、低三个剂量组与缺血模型组相比均有显著性差异,该药还能降低缺血后脑组织匀浆中的MDA、LD含量,提高SOD和GSH活性。脑组织病理切片也证实了该药对神经细胞的保护作用。结论 银杏内酯对大鼠局灶性脑缺血有保护作用。     

银杏内酯A对胆碱能神经功能损伤引起的SD大鼠学习记忆的促进作用

目的 研究银杏内酯A对Meynert基底核（NBA)损伤引起的SD大鼠学习记忆的改善作用。方法 通过N－甲基－D－天冬氨酸（NMDA）单侧损伤SD大鼠NMB以破坏胆碱能神经功能，采用Y型迷宫法检测动物空间辨别学习记忆能力，利用放射化学法检测皮层胆碱乙酰转移酶（ChAT)活力，观察银杏内酯A对胆碱能损伤记忆功能的恢复，脑内ChAT的变化。结果 银杏内酯A对胆碱能损伤记忆功能具有恢复作用，且能防止ChAT活力降低。结论 银杏内酯A能改善NBM损伤引起的大鼠学习记忆能力。     

银杏化学成分及药理作用的研究进展

银杏为银杏科植物 Cinkgo biloba L,60年代以来国内外学者对银杏的化学成分、药理作用及应用作了大量的研究工作 ,以下就近几年来银杏化学成分及药理作用的研究概述如下 :1　银杏提取物的化学成分　　银杏的化学成分主要包括 ;双黄酮 (± )、黄酮甙元 (± )、黄酮单糖甙 (+)、黄酮双糖甙 (+)、黄酮三糖甙 (+)、桂皮酰黄酮苷 (+)、原花青色素 (+)、儿茶素单宁 (- )、银杏萜内酯 (+)、游离甾体和三萜(- )、甾体甙类 (± )、有机酸 (+)、银杏酸 (- )、叶绿素 (- )、聚异戊醇类 (- )和非黄酮甙 (+)等 ( 1) 。1 .1　黄酮类化合物 :Hasler报道 ,…