血清蛋白醋纤薄膜电泳考马斯亮蓝 R250染色法

我们用考马斯亮蓝R250作为醋纤膜电泳的染料,并对一些影响因素作了探讨,介绍如下。一、材料与方法1.试剂:(1)pH8.6离子强度0.06的巴比妥缓冲液。(2)染色液:2.5g 考马斯蓝R250溶于227ml 甲     

醋纤膜电泳金染色检测体液微量蛋白

体液（尿,脑脊液）微量蛋白电泳一般采用浓缩标本进行。然而,浓缩方法非常费时,并可能由于吸附、分离或蛋白变性而导致误差。本文介绍未浓缩标本直接电泳,用稍加改进的Ｒｉｇｈｔｉ［１］金染色法染色,微量蛋白可现清晰电泳图谱。１材料与方法１１胶体金染液配制称...     

血清粘蛋白考马斯亮蓝比色测定法

血清粘蛋白考马斯亮蓝比色测定法解放军４７医院检验科（６１０５００）王加强，王谦，袁家楠（指导）临床上血清粘蛋白测定大多使用酚试剂法，但因其操作烦杂，标本用量大，难以作为实验室常规检查，限制了临床应用。我们根据考马斯亮蓝Ｇ２５０（ＣＢＢＧ２５０）染料结...     

血清蛋白质考马斯亮蓝染料结合法测定

1976年Bradford 报告了使用Coomassie Bril-liant Blue G-250(简称CBG-250)测定体液中微量蛋白.现已应用于尿和脑脊液及组织蛋白定量.本     

考马斯亮蓝结合比色法微量尿蛋白定量测定在糖尿病肾病早期诊断中的意义

1976年Bradford应用考马斯亮蓝(Coomassie brilliant blue G250,简称CBB)染料结合比色法作微量尿蛋白定量测定,此法灵敏度高,能测出微克水平的蛋白质,且操作简便,显色稳定,有很大的临床应用价值。国内近年来亦开始此种测定法。本文作者应用该法对糖尿病患者进行微量尿蛋白测定,     

考马斯亮蓝法测定微量蛋白的条件探讨

目的探讨测定微量蛋白的最佳方法。方法用考马斯亮蓝试验,不同浓度的定值样本吸取不同的量,以不同波长测定吸光度值,且选择不同浓度作标准液计算测定值进行分析。结果590nm波长时,样本吸光度变化最大;10μl样本量,以1.0g/L作标准液时,测定值与定值最相近,直线回归方程:Y=0.9549X+0.0386,r=0.9989,t=0.134,P>0.1。测定值与定值无差别。结论考马斯亮蓝试验测定微量蛋白,用试剂2.0ml,样本量10μl,以1.0g/L作标准及选590nm波长测定,是一种可行的理想方法。     

醋纤膜血清蛋白电泳规范化操作方法

醋纤膜蛋白电泳由于分辨率高,电泳时间短,染料吸附少,用途广等优点而被各级医院实验室采用,但在实际应用过程中,因为方法不统一,影响了结果的可比性。为了统一操作,江苏省检验学会于1986年12月11～13日召开了电泳专题学术讨论会,对其实验条件进行了广泛的讨论,在这个基础上制订了该省醋纤膜蛋白电泳规范化操作方法,供各级医院实验室试用。同时希望在试用过程中不断充实新的内容,使其更臻完善.本刊登载此文,旨在扩大交流面,以利更好改进。     

考马斯亮蓝法测定微量蛋白的条件探讨

目的探讨测定微量蛋白的最佳方法.方法用考马斯亮蓝试验,不同浓度的定值样本吸取不同的量,以不同波长测定吸光度值,且选择不同浓度作标准液计算测定值进行分析.结果590nm波长时,样本吸光度变化最大;10μl样本量,以1.0g/L作标准液时,测定值与定值最相近,直线回归方程:Y=0.9549X+0.0386,r=0.9989,t=0.134,P＞0.1.测定值与定值无差别.结论考马斯亮蓝试验测定微量蛋白,用试剂2.0ml,样本量10μl,以1.0g/L作标准及选590nm波长测定,是一种可行的理想方法.     

邻苯三酚红—钼酸盐作醋纤膜蛋白电泳染色

用０．０６１ｍｍｏｌ／Ｌ邻苯三酚红，０．０４０ｍｍｏｌ／Ｌ钼酸钠，ｐＨ３．０±０．５染液作醋纤膜蛋白电泳染色，染料只与蛋白络合并呈蓝色，不着染载体，吸收峰在６０２ｎｍ处。用Ａ／Ｇ比例各为５０％的蛋白溶液作电泳分析（批内，ｎ＝２０），Ａ与Ｇ的平均测得值分别为５０．４％和４９．６％，Ａ、Ｇ两种蛋白质的呈色强度很接近。与丽春红－Ｓ法比较（ｎ＝２２），白蛋白ｔ＝１．２８７，Ｐ＞０．０５，球蛋白ｔ＝１．７６４，Ｐ＞０．０５，均无显著差异；白蛋白Ｙ＝１．２２＋０．９６３Ｘ，ｒ＝０．９９５。球蛋白Ｙ＝５．４４＋０．８７９Ｘ，ｒ＝０．９７８。１２２例健康成年人血清蛋白电泳结果与国内外资料基本一致。     

醋纤膜电泳折膜加样法

“加样”是进行醋纤膜电泳分析操作的关键之一。它关系到电泳图谱的质量。笔者用折膜加样法进行醋纤膜电泳分析,可使各蛋白区带窄而直。折膜加样法具体操作程序如下: 1.将浸透缓冲液的醋纤膜平贴在玻璃板上,用小镊子夹起膜的一端折叠并用手指加压成形(图)。 2.用清洁滤纸盖在上述膜条上,轻轻加压吸取余液。只要看不到膜上有浮液即可,不能吸得过干。 3.用镊子夹起上述膜条拉开折叠处,将其两端分别轻放在电泳池内正负电极引桥纱布上。但不能用力压贴膜条,以免纱布上的缓冲液不规则流动而搞乱膜上形成的界面(指不连续电泳时)。膜条两端按放在纱     

血清载脂蛋白AI和B考马斯亮蓝比色测定

血清载脂蛋白ＡＩ和Ｂ考马斯亮蓝比色测定江西新余钢铁总厂第二职工医院（３３６５１３）孙明洪，魏维新血清ＡｐｏＡＩ、Ｂ的免疫比浊法包括光散射比浊（ＩＮＡ）和透射比浊（ＩＡＴ），操作简便，测定速度快，易于自动化而被广泛采用。但比浊法有一定的局限。ＩＮＡ法需...     

血清蛋白醋纤膜电泳改良脱色法

鉴于目前普遍采用的醋纤膜电泳条,是静态浸泡漂洗法漂洗次数多,脱色慢,漂洗液用量大等缺点,设计了动态漂洗法(旋转漂洗法和加温漂洗法),经过多年实践使用及实验对比效果良好,现介绍如下.1 材料和仪器1.1 所用电泳仪,醋纤膜、缓冲液、染色液、漂洗液     

考马斯亮蓝法测蛋白质含量用于变应原的标准化

采用考马斯亮蓝G250检测17种变应原的蛋白质含量,与重量/体积法对照,发现按后者配制的变应原皮试液蛋白质含量悬殊。认为以蛋白质含量作为衡量变应原浸液强度的标准较为合理。此法简便、快速、重复性好,使变应原的标准化程序简化。本文还探讨了皮试液的合宜浓度。     

高分辨力的血清蛋白醋纤膜电泳法

按不连续电泳的原理,笔者设计了一套缓冲系统,改进了某些操作条件,在醋纤膜上可将正常血清蛋白分成10个部份,图谱清晰,区带密集.一、试剂1.槽液:pH8.6:0.17mol/L.取硼砂15.26g及硼酸8.10g,以蒸馏水溶解并补足至1L.     

醋纤膜电泳色带快速脱洗定量法

目前，不少基层医院无吸光度计．仍采用比色定量法对醋纤膜电泳色带进行定量。此法脱洗时间长，且反复振摇，极不方便。笔者在实践中摸索出一种低速离心快速脱洗法，经多年实验验证，结果满意。现介绍如下：1器材与试剂①电泳仪，醋纤膜，染色液，缓冲液，漂洗液均与常规电泳法一致。②离心机，721分光光度计均同常规配备。2快速脱洗法按常规电泳条件泳毕后，染色漂净，将漂净的醋纤薄膜色带用镊子轻放于干燥滤纸上，再复盖上一层滤纸，用手轻压，待吸干后剪下各蛋白色带，分别浸泡于0．4mol／L氢氧化钠4毫升中，然后对称平衡放人离心机套…     

西藏山南地区健康成人血清蛋白醋纤膜电泳参考值

我们用快速、低压电泳法,分离测定138例健康成人参考值,结果如下.一、材料与方法1.WD-3微型多功能电泳仪,成都军区总医院研制.电泳槽只需10ml 缓冲液.2.电泳电压75V(电流会随膜的多少而自动升降),电泳时间30分钟.采用常法.     

血浆纤维蛋白原总量及其组份考马斯亮蓝微量比色测定法

血浆纤维蛋白原的组分分析测定,早已受到临床上的重视.用SDS-PAGE 电泳,纤维蛋白原可分离出高分子量(HF)和低分子量(LF)两个组分,1979年,Sasaki 等报道应用不同离子强度的氨基乙酸溶液,分别沉淀血浆纤维蛋白原总量及其高分子量组