大黄素对人肺腺癌细胞Anip973增殖周期及凋亡基因的影响

目的 探讨大黄素对人肺腺癌Anip973细胞生长的抑制作用及其对细胞增殖周期和凋亡基因的影响。方法 采用甲基噻唑（MTT）比色法和生长曲线测定不同浓度大黄素在不同作用时间内对在体外培养的Anip973细胞增殖的影响,同时应用流式细胞术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化,用免疫印迹法检测Caspase-3蛋白表达。结果 大黄素可在G0／G1期阻滞人肺腺癌Anip973细胞的增殖,使S期细胞比率降低,并激活Caspase-3蛋白;在一定范围内,大黄素的浓度越高、作用时间越长,对肿瘤细胞生长的抑制作用越强,凋亡率也越高。结论 大黄素能抑制人肺腺癌Anip973细胞生长,其抗肿瘤机制是通过激活Caspase-3,诱导细胞凋亡而阻止细胞周期。     

芦荟大黄素对人结肠癌细胞SW480增殖周期及凋亡的影响

目的:探讨芦荟大黄素对人结肠癌细胞SW480细胞生长的抑制作用及其对细胞增殖周期和凋亡的影响.方法:采用甲基噻唑(MTT)比色法和生长曲线测定不同浓度芦荟大黄素在不同作用时间内对在体外培养SW480细胞增殖的影响,同时应用流式细胞术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化.结果:芦荟大黄素可在G0/G1期阻滞人结肠癌细胞SW480的增殖,使S期细胞比率降低;在一定范围内,芦荟大黄素的浓度越高、作用时间越长,对肿瘤细胞生长的抑制作用越强,凋亡率也越高.结论:芦荟大黄素能抑制人结肠癌细胞SW480细胞生长,并诱导细胞凋亡而阻断细胞周期.     

大黄素对人胰腺癌Panc-1细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨大黄素对人胰腺癌细胞株Panc-1增殖和凋亡的影响。方法人胰腺癌细胞株Panc-1经不同浓度大黄素(10、20、40、80、160μmol/L)分别作用24、48、72 h后,应用CCK-8法检测细胞增殖,光学显微镜下观察细胞形态学改变,流式细胞术检测细胞凋亡。结果大黄素对Panc-1细胞的增殖抑制作用呈明显的浓度和时间依赖性,20、40、80μmol/L大黄素作用Panc-1细胞24 h后凋亡率分别为7.1%、15.2%、21.4%。结论大黄素可显著抑制人胰腺癌Panc-1细胞生长,大黄素对人胰腺癌Panc-1细胞株的增殖抑制作用可能以诱导细胞凋亡方式为主。     

老鹳草乙醇提取液对结肠癌细胞增殖和凋亡的实验观察

目的 探讨老鹳草乙醇提取液对人结肠癌HT29细胞增殖和凋亡的作用.方法 采用MTT比色法比较不同浓度的老鹳革乙醇提取液作用不同时间后对结肠癌HT29细胞增殖的影响,并用流式细胞仪检测其细胞凋亡率.结果 在一定范围内,老鹳草乙醇提取液的浓度越大、作用时间越长,对肿瘤细胞生长的抑制作用越强,凋亡 率也越高.结论 老鹳草乙醇提取液对结肠癌细胞的增殖具有抑制作用,且呈一定的时效和量效关系,其机制与诱导肿瘤细胞凋亡有关.     

熊果酸对人肝癌SMMC-7721细胞增殖作用的实验研究

目的:评定熊果酸对肝癌细胞SMMC-7721的增殖作用,流式细胞术研究对肝癌细胞凋亡的影响。方法:将不同浓度的熊果酸分别与人肝癌细胞SMMC-7721共同培养24,72 h后,采用中性红染色法测定吸光度(A),评定熊果酸对肝癌细胞的增殖作用,流式细胞术研究其对肝癌细胞的凋亡。结果:熊果酸对SMMC-7721细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.05或P<0.01),呈时间-剂量依赖关系,24 h和72 h半数抑制浓度(IC50)分别为12.59,8.32μg·mL-1;对肝癌细胞凋亡率为14.07%,药物浓度与凋亡率呈正相关。结论:熊果酸对肝癌细胞SMMC-7721增殖有明显抑制作用,该抑制作用可能与诱导肝癌细胞凋亡有关。     

金宁方代谢产物抑制肺癌细胞增殖的研究

目的:研究金宁方代谢产物对人高转移肺癌细胞95-D增殖的抑制作用。方法:收集金宁方饲喂SD大鼠的血清,采用噻唑蓝(MTT)法,观察不同浓度的金宁方代谢产物对人肺癌细胞95-D生长增殖的抑制效果。结果:不同浓度的金宁方代谢产物对人高转移肺癌细胞95-D的增殖均有抑制作用,抑制率产生在24-48 h。15%浓度(实验的最高浓度)在48 h达到最佳抑制细胞生长的生物学作用,其抑制率约为47%。金宁方的各主要药效单体都具有抑制95-D细胞增殖的作用,其中草酸铵(ammonium oxalate,Am O)作用最明显,能够调控caspase3和8表达而促进95-D细胞凋亡。结论:金宁方代谢产物能抑制人高转移肺癌细胞95-D的体外增殖,其可能在肺癌的治疗中具有一定的价值。     

大黄素抑制人结肠癌RKO、Caco-2细胞体外增殖作用的研究

目的:探讨大黄素对人结肠癌细胞株RKO、Caco-2的体外增殖的抑制作用。方法:MTT比色法检测细胞活力;倒置显微镜显像观察细胞数量变化;FCM检测细胞凋亡率及周期分布;Caspase-3分光光度法检测Caspase-3酶蛋白活性。结果:随着作用时间的延长以及大黄素浓度的升高,大黄素对人结肠癌RKO、Caco-2细胞的体外增殖抑制作用增高;大黄素阻滞两种细胞于S期,使G2/M期细胞比率明显下降,激活Caspase-3酶蛋白;提高细胞凋亡率。结论:大黄素抑制人结肠癌细胞株RKO、Caco-2体外增殖,其作用呈浓度、时间依赖性;大黄素能够阻滞RKO、Caco-2细胞株细胞周期并激活Caspase-3诱导细胞凋亡。     

大黄素联合吉西他滨对体外人胰腺癌细胞株BxPC-3生长及凋亡的影响

目的 探讨大黄素(emodin)联合吉西他滨（gemcitabine）对人胰腺癌细胞株BxPC-3的影响。 方法 人胰腺癌细胞株BxPC-3经不同浓度大黄素(0、10、 20、40、80、160 μmol/L)分别作用 24、48、72 h;及大黄素(40 μmol/L) 联合吉西他滨(20 μmol/L)作用72 h。应用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测大黄素及大黄素联合吉西他滨对BxPC-3细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测BxPC-3细胞凋亡情况。 结果 大黄素对BxPC-3细胞的增殖抑制作用呈明显浓度和时间依赖性,40 μmol/L大黄素作用于BxPC-3细胞24、48、72 h后的细胞存活率分别为79.39%、46.35%、45.44%;大黄素(40 μmol/L) 联合协同吉西他滨(20 μmol/L)作用72 h后胰腺癌BxPC-3细胞的存活率仅为26.62%,与吉西他滨组（42.78 %）及大黄素组（47.18%)比较,差异有统计学意义（P<0.05）。大黄素(40 μmol/L)和吉西他滨(20 μmol/L)单独作用于BxPC-3细胞24 h后,诱导胰腺癌细胞早期凋亡率分别为（4.70±1.54）%和（11.20±1.41）%,与联合组［细胞凋亡率为（20.60±3.23）%］比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论 大黄素可显著抑制人胰腺癌BxPC-3细胞生长;大黄素有效增强吉西他滨对人胰腺癌BxPC-3细胞的增殖抑制作用;其协同作用以诱导胰腺癌细胞凋亡方式为主。     

重楼皂苷I对高转移人卵巢癌细胞体外生长抑制功能的研究

目的:研究重楼提取的活性成分重楼皂苷I对高转移人卵巢癌细胞的体外生长抑制及促凋亡功能,并初步探讨其可能的作用机制。方法:用CCK8法检测不同浓度重楼皂苷I在不同时间点对高转移人卵巢癌细胞(HO-8910PM)体外增殖的影响;光镜下观察细胞形态的变化;用流式细胞术(FCM)检测经不同浓度重楼皂苷I处理后高转移人卵巢癌细胞的细胞周期变化;用AnnexinV/PI双染法、Hoechst33258检测不同浓度重楼皂苷I诱导细胞凋亡的发生。结果:重楼皂苷I在0.5～5μg/mL浓度范围对HO-8910PM细胞的增殖均有明显抑制作用,并呈现明显的剂量-时间依赖性。其半数抑制浓度在24h到120h范围内基本集中在1～3.5μg/mL之间;重楼皂苷I主要影响HO-8910PM细胞的DNA合成前期(G0/G1);重楼皂苷I浓度控制在2μg/mL以内,早期即3h开始就能诱导HO-8910PM细胞的凋亡,作用时间越长,凋亡发生率越高。结论:重楼皂苷I能抑制卵巢癌细胞的增殖并诱导其凋亡,从而发挥抗肿瘤作用。     

玉竹多糖抗肺癌肿瘤活性及其机制研究

目的观察不同来源玉竹多糖对在体肿瘤和离体培养肺癌细胞的抑制作用,探讨其抑制作用的可能机制。方法以接种人肺癌细胞的裸鼠为荷瘤小鼠模型,观察不同来源的玉竹多糖对接种瘤体生长的抑制作用,以及促进肿瘤细胞凋亡的蛋白和基因的变化。以人肺癌细胞(A549)为模型,检测不同来源玉竹多糖的体外抗肿瘤活性。结果不同来源的玉竹多糖处理荷瘤小鼠后能有效抑制小鼠瘤体的生长以及体外肺癌细胞的增殖(P 0. 05);促进肺癌细胞以及瘤组织细胞的凋亡。结论玉竹多糖有显著的抗肿瘤作用,其作用机制可能与玉竹多糖抑制Wnt/β-catenin信号通路表达,从而降低细胞周期蛋白表达,阻止肺癌细胞增殖和诱导细胞凋亡。     

20(S)-原人参二醇对肺癌A549细胞增殖和荷瘤裸小鼠肿瘤生长的抑制作用

目的研究20(S)-原人参二醇对小细胞肺癌A549细胞增殖和荷瘤裸小鼠肿瘤生长抑制作用。方法采用噻唑蓝(MTT)法观察20(S)-原人参二醇对小细胞肺癌A549细胞增殖的抑制作用,流式细胞术测定20(S)-原人参二醇对小细胞肺癌A549细胞凋亡及周期的影响,并在裸小鼠人肺癌模型上观察20(S)-原人参二醇对荷瘤裸小鼠肿瘤生长的抑制作用。结果20(S)-原人参二醇对A549细胞具有明显的抑制作用并有剂量时间依赖关系,并且流式细胞仪检测时均出现典型凋亡峰,24小时凋亡率分别为32.47%、32.75%、33.51%。荷瘤裸小鼠动物实验表明,20(S)-原人参二醇对裸小鼠的肿瘤生长也具有明显的抑制作用,抑瘤率分别为18.78%、34.37%、50.02%。结论20(S)-原人参二醇对A549细胞的增殖和荷瘤裸小鼠肿瘤的生长具有明显的抑制作用。     

乌索酸体外抑制人胃癌BGC-823细胞增殖的作用

目的探讨乌索酸(UA)对体外培养的人胃癌细胞系BGC-823增殖的抑制作用。方法用MTT法在不同浓度、不同给药时间、不同溶剂溶解的条件下,以5-Fu作对照,观察UA对人胃癌细胞系BGC-823细胞的体外增殖抑制效果。结果UA在低浓度条件下(5~20mg/L)对BGC-823细胞抑制率呈浓度依赖性。25~2000 mg/L时随着浓度的增加抑制率无明显差异;UA对BGC-823细胞作用呈时间依赖性;不同溶剂溶解UA,抑制率无差异(P>0.05);UA对BGC-823细胞抑制率明显高于5-Fu(P<0.01)。结论UA对体外培养的人胃癌细胞系BGC-823有明显的增殖抑制作用,用药量小时呈现浓度依赖性及时间依赖性;其增殖抑制作用强于5-Fu。溶剂不同对UA增殖抑制作用无影响。     

芦荟大黄素对人膀胱癌细胞T24增殖及凋亡的影响

目的：探讨芦荟大黄素（AE）对人膀胱癌细胞株T24细胞增殖和凋亡的影响及其可能的机制。方法：采用甲基噻唑（MTT）比色法测定AE对体外培养的T24细胞的抑制率,并用作图法计算半数有效抑制浓度（IC5）0;光学显微镜下观察AE作用前后细胞形态学变化;流式细胞技术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测mRNA表达。结果：MTT法测定显示,在5～160μg/mL浓度范围内,AE对膀胱癌T24细胞生长有抑制作用,并呈量-效关系,IC50为31.55μg/mL;光学显微镜下药物IC50剂量（32μg/mL）作用T24细胞后呈现明显的死亡形态变化;流式细胞仪检测显示AE可阻滞T24细胞进入G2/M期;Annexin V-FITC/PI双染法显示早期凋亡细胞数明显增加;R T-PCR法显示myc基因表达下降。结论：AE能抑制人膀胱癌T24细胞生长,并阻断细胞周期和诱导细胞凋亡。其机制可能与myc基因表达下调有关。     

罗勒多糖对紫杉醇抑制肺腺癌A549细胞增殖作用的影响

目的:探讨罗勒多糖对紫杉醇体外抑制人肺腺癌A549细胞增殖作用的影响。方法:采用MTT法测定罗勒多糖对紫杉醇抑制A549细胞增殖作用的影响,倒置相差显微镜下观察罗勒多糖联合紫杉醇导致的A549细胞形态学变化,并采用Hoechst 33342/PI荧光双染法分析罗勒多糖与紫杉醇联合应用所引起的A549细胞死亡方式。结果 :MTT检测和形态学观察表明罗勒多糖对紫杉醇抑制A549细胞增殖具有明显的增效作用,其增效作用呈浓度和时间依赖性;Hoechst 33342/PI检测显示紫杉醇及紫杉醇联合罗勒多糖作用48 h后可见凋亡细胞。结论:罗勒多糖能增强紫杉醇对人肺腺癌A549细胞株增殖的抑制作用,具有化疗增效作用,这种增效作用以诱导细胞凋亡为主要方式,呈浓度和时间依赖性。     

大黄素对人结肠癌HT-29细胞体外增殖的抑制作用

目的观察大黄素对人结肠癌细胞株HT-29体外增殖的抑制作用。方法取对数生长期的HT-29细胞,按每孔5×103个细胞接种于96孔板,贴壁24 h后换液,分为对照组和实验组(分别含有12.5μM、25μM、50μM、100μM大黄素),共5组。每组均设6个复孔,于37°C、5%CO2孵箱中分别培养24 h、48 h和72 h。采用MTT比色法检测细胞活力;倒置显微镜显像观察细胞数量变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率及周期分布;分光光度法检测Caspase-3酶蛋白活性。结果①MTT比色法显示,处理24 h时,与对照组比较,大黄素50μM、100μM组细胞抑制率差异有统计学意义(P<0.05),而大黄素12.5μM、25μM组抑制率差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,处理48 h及72 h后大黄素12.5μM、25μM、50μM、100μM组的细胞抑制率差异有统计学意义(P<0.05);大黄素各浓度组处理48 h及72 h后的抑制率与同浓度组处理24 h比较,抑制率升高,差异有统计学意义(P<0.05);大黄素各浓度组处理72 h后的抑制率与同浓度组处理48 h比较抑制率升高,差异有统计学意义(P<0.05)。②倒置显微镜观测显示,对照组多为类圆形成团生长,经各浓度大黄素处理后,细胞体积缩小、间隙变大,细胞数减少。③流式细胞仪检测显示,对照组G2/M期细胞比率明显高于大黄素各浓度组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组G0/G1期细胞比率明显高于大黄素25μM、50μM、100μM浓度组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组与12.5μM大黄素组G0/G1期细胞比率差异无统计学意义(P>0.05);对照组S期细胞比率明显低于大黄素各浓度组,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,大黄素12.5μM、25μM、50μM、100μM组HT-29细胞凋亡率增加,差异有统计学意义(P<0.05)。④与对照组比较,大黄素各浓度组Caspase-3酶蛋白活性显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大黄素抑制人结肠癌细胞株HT-29体外增殖,其作用呈浓度、时间依赖性;大黄素能够阻滞HT-29细胞周期,并激活Caspase-3诱导细胞凋亡。     

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??OBJECTIVE To investigate the effects of a monomer purified from Paris Polyphylla(PP-22) on proliferation,apoptosis of human gastric carcinoma MGC803 cells and to study the sensitizing effect of PP-22 on the proliferation of MGC803 cells to chemotherapeutic drugs 5-fluorouracil(5-Fu) or lobaplatin. METHODS MTT assay and cell colone formation inhibitory assay were used to determine the inhibitory effect of PP-22 on human gastric carcinoma MGC803 cells.The sensitizing effects of PP-22 on MGC803 cells to chemotherapeutic drugs 5-Fu, lobaplatin were determined by MTT assay.The percentage of apoptotic cells and cell cycle distribution were determined by flow cytometry.The expression of cell apoptosis associated proteins were analyzed by Western blotting.RESULTS MTT assay showed that PP-22 inhibited gastric carcinoma MGC803 cells proliferation in dose-dependent manner (r=0.90,P<0.05), but did not inhibit the growth of normal liver L02 cells at the same concentration. Cell colony formation inhibitory assay demonstrated that cell clones decreased with the increase of drug concentrations. The chemosensitivity of 5-Fu,or lobaplatin combined with PP-22 was improved compared with PP-22 group,respectively.PI staining analysis showed that the cell cycle was arrested at S phase. Western blotting detecting showed that the expression of Caspase-9, Caspase-3 were downregulated, the anti-apoptotic protein Bcl-2 is downregulated and pro-apoptotic protein Bak upregulated.CONCLUSION PP-22 inhibits proliferation and induces apoptosis of MGC803 cells effectively and also sensitizes MGC803 cells to chemotherapeutic drugs.     

苦参素与顺铂联合应用诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡及其机制

目的:探讨苦参素和顺铂联合应用诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及其机制。方法:采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,应用金氏公式分析药物间的相互作用,RT-PCR方法检测fas和caspase-3基因mRNA表达水平。结果:与单药组相比,联合用药对肝癌SMMC-7721细胞增殖抑制率明显增高(P<0.05),细胞凋亡率显著增高(P<0.05),并表现明显的协同作用,细胞fas和caspase-3基因mRNA表达水平明显上升(P<0.05)。结论:苦参碱与顺铂联合应用能明显诱导肝癌SMMC-772 l细胞凋亡并有协同作用,其机制可能与上调细胞fas和caspase-3基因表达有关。     

大黄素对肝星状细胞增殖及细胞外信号调节激酶的影响

目的:观察大黄素对HSC-T6细胞增殖及细胞外信号激酶(ERK1)表达的影响。方法:将培养细胞分成正常组和大黄素不同浓度干预组(大黄素终浓度分别为20μmol/L、40μmol/L、60μmol/L),采用MTT法观察大黄素对HSC-T6增殖的影响;采用流式细胞仪观察各组细胞周期的变化;采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)半定量法观察ERK1mRNA的表达;采用免疫细胞化学SABC法,观察HSC-T6 ERK1表达的变化。结果:不同浓度大黄素对HSC-T6的增殖均有抑制作用(与正常组比较P0.05,P0.01),且呈一定的量效关系。大黄素作用HSC-T6细胞后,G0/G1期增加,S期减少;当浓度为40～60μmol/L时,G2/M期减少(与正常组比较均P0.05)。正常组HSC-T6有ERK1mRNA表达,而大黄素使ERK1mRNA的表达显著降低,(与正常组比较P0.05,P0.01)。正常组HSC-T6 ERK1阳性均强表达,大黄素使ERK1阳性表达细胞数量减少,阳性减弱。结论:大黄素对HSC-T6细胞增殖有抑制作用,其作用与阻滞细胞于G0/G1期、抑制其ERK1表达有关。