东莨菪碱致学习记忆损伤大鼠不同脑区PREG含量的变化

目的:观察东莨菪碱致记忆损伤大鼠不同脑区孕烯醇酮(PREG)含量的变化.方法:东莨菪碱腹腔注射制备大鼠学习记忆损伤模型,Morris水迷宫检测大鼠的习记忆能力,高效液相色谱-质谱法检测大鼠额叶皮质及海马PREG的含量.结果:模型大鼠的学习记忆能力显著下降;与对照组大鼠比较,模型组大鼠额叶皮质PREG的含量显著下降(P＜0.05),海马PREG的含量无明显变化.结论:东莨菪碱致记忆损伤模型大鼠额叶皮质PREG的含量显著降低,提示东莨菪碱可能通过影响PREG的合成损伤大鼠的学习记忆能力.     

激活LXR对海马神经元神经甾体合成的促进作用

目的:研究肝X受体(LXR)激活对海马神经元神经甾体合成的影响.方法:将大鼠海马神经元体外培养至第7日,在培养液中加入2.0μmol/L T0901317,继续培养48 h.应用高效液相.质谱联用(HPLC-MS)分离测定培养液中游离型神经甾体孕烯醇酮(PREG)、脱氢表雄酮(DHEA)和结合型神经甾体孕烯醇酮硫酸酯(PREGS)、脱氢表雄酮硫酸酯(DHEAS)的含量;RT-PCR方法观察海马神经元P450侧链裂解酶(P450scc)、甾体合成快速调节蛋白(StAR)和3β-羟基甾醇脱氢酶(3β-HSD)等神经甾体合成关键酶基因的mRNA的表达.结果:T0901317激活LXR,促进P450scc,StAR和3β-HSD的mRNA表达,增加海马神经元培养液中神经甾体PREG,DHEA,PREGS和DHEAS含量.结论:LXR激活时,可通过上调海马神经元P450scc,StAR和3β-HSD的mRNA表达.促进神经甾体的合成.     

长期酒精暴露和戒断后大鼠不同脑区肌动蛋白结合蛋白、细胞周期素依赖性蛋白激酶5的表达

目的 探讨长期酒精暴露和戒断对大鼠不同脑区肌动蛋白结合蛋白（cofilin）、磷酸化cofilin （P-cofilin）以及细胞周期素依赖性蛋白激酶5（cdk5）表达的影响.方法 雄性SD大鼠24只,随机等分为1个对照组和3个实验组.实验组大鼠自由饮含低浓度乙醇（体积分数为6％）的水溶液2月,对照组大鼠正常饮自来水.2月后撤除酒精进行戒断症状评分,并分别在戒断0h、戒断6h、戒断2d处死大鼠取脑组织.采用免疫组织化学方法检测各组大鼠伏隔核和纹状体区cofilin、p-cofilin （ser3）以及cdk5的表达水平.结果 实验组大鼠撤除酒精后出现明显的戒断症状,在戒断6h达到高峰.在大鼠伏隔核区,戒断0h组cofilin表达水平较对照组显著降低[（0.31±0.05）,（0.39±0.05）,P＜0.05],戒断0h、戒断6h组cdk5表达水平较对照组显著升高[（0.36±0.07）、（0.34±0.07）,（0.25±0.05）,P＜0.05].在大鼠纹状体,戒断0h组cofilin表达水平较对照组显著降低[（0.26±0.04）,（0.34±0.05）,P＜0.05],戒断6h组p-cofilin表达水平较对照组显著升高[（0.43±0.06）,（0.30±0.06）,P＜0.01],戒断0h组cdk5表达水平较对照组显著升高[（0.35±0.06）,（0.26±0.05）,P＜0.05],戒断6h组cdk5表达水平与对照组相比显著升高[（0.37±0.06）,（0.26±0.05）,P＜0.01].结论 长期酒精暴露诱导大鼠形成酒精依赖,并导致相关脑区肌动蛋白结合蛋白以及cdk5的表达变化.     

海洛因成瘾大鼠相关脑区多巴胺及其代谢产物的变化

目的 初步探索多巴胺(DA)递质释放与海洛因成瘾和神经毒性的相关性.方法 建立海洛因成瘾大鼠模型,应用高效液相色谱层析技术检测前额叶皮质、海马、伏隔核和纹状体的DA及其代谢产物3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)的含量.结果 海洛因成瘾大鼠前额叶皮质和伏隔核的DA及其DOPAC含量相对于对照组增高(P＜0.01,P＜0.05),纹状体反而明显降低(P＜0.01);海马仅检测到DA且与对照组比较,差异无显著性(P＞0.05);成瘾大鼠的前额叶皮质的DOPAC/DA值比对照组显著增加(P＜0.01),而伏隔核和纹状体明显降低(P＜0.01).结论 DA的变化进一步证明了包括伏隔核和额叶皮质在内的奖赏系统在海洛因成瘾中的重要作用,DA减少预示纹状体功能受到损害.     

Cedemex对自然戒断吗啡依赖大鼠脑内β-内啡肽和多巴胺含量的影响

目的 观察(Cedemex对自然戒断吗啡依赖大鼠的内啡肽含量和多巴胺含量的影响. 方法 以剂量递增法连续皮下注射吗啡7 d,建立吗啡依赖大鼠模型.用放射免疫法分别测定大鼠下丘脑和垂体中β-内啡肽(β-EP)的含量;用高效液相-荧光检测法测定大鼠伏隔核多巴胺的含量. 结果 (1)与停用吗啡组比较,(Cedemex中、高剂量组能够显著升高下丘脑、垂体的β-EP水平(P＜0.05).其中(Cedemex 中剂量分别升高的平均百分数为50%、60%;高剂量分别升高的平均百分数为55%、36%;(2)与停用吗啡组比较,(Cedemex中、高剂量组能够显著降低吗啡戒断大鼠伏隔核的多巴胺水平(P＜0.05),降低的平均百分数分别为10%、17%. 结论 机体内啡肽和多巴胺的改变与吗啡依赖和戒断症状有关,(Cedemex能够促进机体内啡肽和多巴胺水平的恢复.     

吗啡依赖及戒断大鼠相关脑区Bcl-2的表达研究

目的:明确吗啡依赖及戒断两种状态时大鼠相关脑区Bcl-2的表达特征.方法:将18只Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为吗啡依赖组、吗啡戒断组和空白对照组,每组6只.采用递增法皮下注射吗啡建立大鼠吗啡依赖模型,纳络酮注射戒断,应用免疫组化和地高辛标记寡核苷酸探针原位杂交技术检测三组大鼠不同脑区Bcl-2的表达水平.结果:连续给予吗啡5天及纳络酮戒断后,中脑腹侧被盖区、海马、蓝斑、前额叶皮质脑区Bcl-2及其mRNA较对照组显著降低(P＜0.05),而吗啡戒断组伏隔核脑区内Bcl-2及其mRNA的表达较依赖组显著增加(P＜0.05),结论:吗啡依赖及戒断大鼠Bcl-2蛋白及其mRNA的表达在不同脑区有选择性的改变,可能是吗啡依赖及戒断的分子机制之一.     

气相色谱-质谱联用测定大鼠血清中的神经甾体

目的建立气相色谱-质谱测定大鼠血清中神经甾体的方法.方法本实验采用固相萃取方法对非结合型神经甾体和结合型神经甾体进行分离及纯化.经溶剂解后的结合型甾体和非结合型甾体分别与七氟丁酸酐进行衍生化,选择性离子检测模式进行气相色谱-质谱分析.结果经初步研究雄性大鼠血清中非结合型神经甾体PREG、PROG和DHEA的含量分别为5.75×10-9、1.28×10-8、2.36×10-9 mol/L.结合型神经甾体PREGS和DHEAS的含量分别为4.8×10-9、8.78×10-8 mol/L.每一种甾体都有好的线性关系和准确度.结论本方法适合同时测定血清中结合型和非结合型神经甾体,为实验及临床研究与特异性神经甾体有关的精神疾病提供有效方法.     

5-HT1A受体激动剂对青春期大鼠病理性攻击行为和前额叶皮质、海马内脑源性及胶质细胞源性神经营养因子的影响

目的 探索5-羟色胺1A(5-HT1A)受体激动剂8-OH-DPAT对青春期大鼠病理性攻击行为及对前额叶皮质、海马内脑源性神经营养因子(BDNF)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的影响.方法 出生后21 d的雄性SD大鼠42只随机分为6组(n=7):模型组、正常组、模型+药物组、模型+生理盐水(NS)组、正常+药物组、正常+NS组.模型组、模型+药物组及模型+NS组采用早年慢性应激建立病理性攻击模型,余3组正常饲养.建模成功后对模型+药物组、正常+药物组及模型+ NS组、正常+NS组分别行2周的8-OH-DPAT(0.5mg/kg)或生理盐水(2 mL/只)腹腔注射.用居住-入侵实验检测大鼠攻击行为,蛋白质印迹分析检测大鼠脑前额叶皮质及海马内BDNF、GDNF蛋白表达水平.结果 与正常组比较,模型组攻击潜伏期缩短(P＜0.01)、攻击持续时间及攻击总数增加(P＜0.01).模型+药物组攻击潜伏期较模型+NS组延长(P＜0.05);模型+药物组攻击持续时间较正常+药物组增加(P＜0.05);药物干预后攻击总数组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).模型组前额叶皮质、海马内BDNF及GDNF表达水平均低于正常组(P＜0.01),模型+NS组较正常+NS组降低(P＜0.05,P＜0.01),模型+药物组较模型+NS组升高(P＜0.05,P＜0.01).结论 前额叶皮质及海马内BDNF、GDNF可能与早年慢性应激所致青春期大鼠病理性攻击行为的发生有关.5-HT1A受体激动剂可上调前额叶皮质及海马内BDNF、GDNF的蛋白表达,并在一定程度上减轻早年慢性应激所致青春期大鼠病理性攻击行为.     

电针对吗啡戒断大鼠不同脑区FosB基因表达的影响

目的:观察电针对吗啡戒断大鼠戒断症状及不同脑区内FosB基因表达的影响。方法:采用逐日增量背部皮下注射盐酸吗啡注射液,末次注射后3h给予纳洛酮快速戒断建立吗啡戒断大鼠模型,随后治疗组采用电针穴位干预。戒断后1、3、7d,分别采用戒断症状评分表评定各组大鼠戒断症状,应用RT-PCR测定大鼠前额叶皮质、伏隔核内FosB基因的表达水平。结果:戒断后各组症状评分显示:与空白组比较,戒断后1、3、7d模型组与电针组评分均明显升高(P<0.01),而随戒断时间增加模型与电针组评分均逐渐下降;与模型组比较,戒断后1、3、7d电针组戒断评分均明显降低(P<0.01);实时荧光定量PCR结果表明:戒断后1、3、7d电针组大鼠伏隔核FosB mRNA表达较模型组显著下降(P<0.01),且呈先快后慢的趋势;前额叶皮质内FosB mRNA表达较模型组下降(P<0.05),但呈先慢后快的趋势。结论:电针可以逐渐改善吗啡戒断后大鼠戒断症状,同时下调不同脑区内FosB mRNA的表达,且其表达变化规律在奖赏环路不同脑区内存在差异。     

海洛因依赖对大鼠伏隔核神经元单位放电的影响

目的: 研究海洛因依赖对大鼠伏隔核(NAc)神经元单位放电的影响.方法: 按逐日递增原则皮下注射海洛因建立海洛因依赖模型,对照组注射等量生理盐水.玻璃微电极细胞外记录海洛因依赖组和对照组大鼠伏隔核神经元单位放电.结果: 海洛因依赖组大鼠伏隔核神经元单位放电以混合型为主,而对照组以单个不匀型放电为主,组间差异显著(P＜0.05);海洛因依赖组大鼠伏隔核神经元单位放电的频率以中频放电为主,而对照组以低频放电为主,组间差异显著(P＜0.05).结论: 海洛因依赖使大鼠伏隔核神经元单位放电发生了改变.     

褪黑素对吗啡依赖催促戒断大鼠不同脑区谷氨酸和γ-氨基丁酸含量的影响

目的 观察褪黑素(melatonin,MT)对吗啡催促戒断大鼠不同脑区谷氨酸(glutamate,Glu)和γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid,GABA)水平变化的影响.方法 以剂量递增法连续5 d背部皮下注射盐酸吗啡复制慢性吗啡依赖模型.实验分生理盐水对照组(normal saline,NS)、吗啡依赖组(morphine,MOR)、催促戒断组(naloxone,NAL)和褪黑素治疗组(MT组),采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatograph,HPLC)测定大鼠脑桥、中脑、海马、间脑和纹状体Glu和GABA含量.结果 与NS组相比,MOR组大鼠脑桥Glu含量明显升高(P＜0.01)而中脑、海马、间脑和纹状体则未见明显变化,脑桥、中脑、间脑和纹状体GABA含量明显升高(P＜0.05,P＜0.01);NAL组脑桥、中脑、海马、间脑和纹状体Glu含量进一步显著升高(P＜0.05,P＜0.01),而GABA含量则迅速下降(P＜0.05,P＜0.01);与NAL组相比,MT抑制吗啡催促戒断大鼠脑内Glu水平的升高(P＜0.05,P＜0.01)和GABA水平的下降(P＜0.05,P＜0.01).结论 MT对吗啡依赖纳洛酮催促戒断大鼠不同脑区的Glu和GABA水平具有调节作用.     

Corticotropin-releasing factor-like immunoreactivity in senile dementia of the Alzheimer type. Reduced cortical and striatal concentrations

The concentration of corticotropin-releasing factor-like immunoreactivity (CRF-LI) in the human central nervous system was measured by radioimmunoassay in postmortem tissue of control patients and in those with histologically confirmed senile dementia of the Alzheimer type (SDAT). In the controls, CRF-LI was found in high concentrations in the hypothalamus and frontal cortex (Brodmann's area 10), in moderate concentrations in amygdala, substantia innominata, temporal and parietal cortex (Brodmann's areas 38 and 7), and the caudate nucleus, and in low concentrations in posterior hippocampus and nucleus accumbens. A marked reduction in the concentration of CRF-LI was observed in the frontal and temporal cortex (approximately 50%) as well as in the caudate nucleus (approximately 70%) in the SDAT group. The present findings suggest that neurons containing corticotropin-releasing factor are pathologically altered in SDAT, in addition to the previously described cholinergic and somatostatinergic neuronal degeneration.     

人参皂苷Rb1对睡眠剥夺大鼠学习记忆及脑内生长抑素表达的影响

目的：研究人参皂苷Rb1 (ginsenosides Rb1,GSRb1)对睡眠剥夺（sleep deprivation,SD）大鼠学习记忆与海马及额叶生长抑素（somatostatin,SS）表达的影响。 方法：大鼠随机分为睡眠剥夺2 d组、4 d组、6 d组和未睡眠剥夺（SD 0 d）组,每组再分为GSRb1用药组和生理盐水对照组,共8组。采用改良小平台水环境法制作SD大鼠模型。造模前大鼠分别腹腔内注射GSRb1 30 mg/(kg·d）或生理盐水7 d。睡眠剥夺2 d、4 d和6 d后采用Morris迷宫检测各组大鼠学习记忆能力,免疫组织化学法结合图像分析脑内SS阳性神经元数量及SS平均光密度。 结果：与SD0d组大鼠比较,SD各组大鼠游泳平均速度减慢（P<0.01）,逃避潜伏期明显延长（P<0.01）;海马CA4&DG区SS表达下降（P<0.05）;SD 2 d组大鼠额叶SS表达无明显变化（P>0.05）,而SD 4 d、6 d组SS表达减少明显（P<0.05）。与生理盐水对照组比较,SD组同时段的GSRb1用药组大鼠游泳平均速度显著加快（P<0.05）,逃避潜伏期明显缩短（P<0.05）,用药组各时段海马内SS阳性神经元数量均明显增多,SS表达增强（P<0.05）。 结论：人参皂苷Rb1能显著改善SD大鼠认知功能,该作用可能与增加海马内SS密切相关。     

大白鼠伏隔核传入纤维的起源

用HRP逆行传递法,观察20只大白鼠伏隔核传入纤维的起源.结果:标记神经元主要出现在同侧海马CA_1区和CA_3区、杏仁复合体、带旁核、丘脑室旁核、丘脑背内侧核、连结核、黑质密带、被盖腹侧区、脚间核.此外,在同侧丘脑胶状核、菱形核、丘脑前内侧核、丘脑前腹核及中缝背核也有少量标记神经元.     

吗啡戒断大鼠脊髓和脑干以及前脑皮层胶质细胞源性神经营养 …

观察吗啡依赖或戒断时大鼠脊髓,脑干和皮层胶质细胞源性神经营养因子（ｇｉａｌｃｅｌｌ ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ,ＧＤＮＦ）以及受体ＧＤＮＦＲ－α和ＧＤＮＦＲ－β基因的表达以及毒蕈碱乙酰胆碱受体（ｍＡｃｈ）、Ｎ－甲基－Ｄ－天门冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体拮抗或一氧化氮合酶（ＮＯＳ）抑制剂处理后对它们合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）,以β－ａｃｔｉｎｍＲＮＡ作为内标检测ＧＤＮＦ,ＧＤＮ     

创伤后应激障碍大鼠海马和杏仁核中神经元凋亡及Caspase-9的表达及其意义

目的:探讨创伤后应激障碍(PTSD)大鼠海马和杏仁核神经元凋亡及Caspase-9表达水平的变化,阐明PTSD大鼠海马与杏仁核体积异常的原因。方法:将100只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(20只)和PTSD组(80只),利用改良的单一连续应激(SPS&S)制作PTSD大鼠模型。采用Morris水迷宫实验和僵立行为实验检测大鼠行为学表现;TUNEL方法检测大鼠海马和杏仁核神经元凋亡阳性细胞率;流式细胞术(FCM)检测大鼠海马和杏仁核神经元凋亡率;Western blotting法检测大鼠海马和杏仁核中Caspase-9表达水平。结果:PTSD组大鼠逃避潜伏期(EL)和僵立行为百分比显著高于对照组(P<0.05);PTSD后1、4、7和14d大鼠海马和杏仁核TUNEL阳性细胞和凋亡率高于对照组(P<0.05),28d与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);PTSD后1、4、7和14d大鼠海马和杏仁核Caspase-9表达水平高于对照组(P<0.05),28d与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PTSD大鼠海马和杏仁核神经元凋亡增加,Caspase-9表达水平上调,提示其凋亡可能是引起海马与杏仁核体积异常的原因之一。     

大鼠皮质、海马微血管构筑的定量分析

目的：观察并定量分析大鼠皮质、海马的微血管构筑。方法：采用单宁酸-氯化铁媒染微血管的方法观察大鼠海马与额叶皮质的微血管构筑,并采用MiVnt图像分析系统对海马与额叶皮质的微血管密度（MVD）及微血管面积密度（MVA）进行定量分析。结果：分布于大脑额叶皮质的动脉在脑表面垂直进入脑实质,各分支间可见丰富的吻合;营养海马的动脉自海马裂进入海马后发出分支,海马与周围脑组织之间血管吻合较少。定量分析结果显示大鼠皮质的MVD值和MVA值明显高于海马（P〈0．01）。结论：海马的微血管不及额叶皮质丰富,这可能是脑血管性痴呆早期智力障碍的原因之一。     

大鼠脑出血后部分脑区和垂体DynA1—13含量的变化

目的建立大鼠脑出血动物模型,研究ＤｙｎＡ１－１３与脑出血后脑水肿的关系。方法在立体定向仪上,大鼠左侧尾壳核注射胶原酶建立脑出血动物模型,用干湿法测定大鼠各段脑组织含水量,并用放射免疫测定法测定脑出血大鼠部分脑区与垂体ＤｙｎＡ１－１３的含量。结果脑出血组大鼠出现严重脑水肿的同时,各脑区（额叶皮质、顶叶皮质、海马、尾壳核）中ＤｙｎＡ１－１３含量在注射胶原酶后４至７２ｈ,比对照组显著降低（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０１）,其中２４ｈ与４８ｈ组降低最为明显,垂体与下丘脑ＤｙｎＡ１－１３含量比对照组明显升高（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０１）。结论脑出血后脑水肿可能与脑出血后内源性ＤｙｎＡ１－１３含量降低有关。     

白藜芦醇对肠易激综合征大鼠脑源性神经营养因子系统表达的影响

目的：探讨白藜芦醇对肠易激综合征（IBS）模型大鼠抑郁焦虑样行为和肠道动力紊乱、内脏高敏性的改善作用及其作用机制。方法：将42只SD大鼠随机分为正常对照组、慢急性联合应激模型组、不同剂量白藜芦醇组（10、20和40 mg/kg）、氟西汀组以及地西泮组。采用慢急性联合应激建立IBS模型,通过强迫游泳、大理石掩埋实验分别评估动物抑郁、焦虑样行为,以肠道动力学测试和内脏敏感性实验来测定大鼠肠道动力和肠道敏感程度。采用Western blot法测定大鼠海马、额叶、回肠和结肠脑源性神经营养因子（BDNF）水平。结果：慢急性联合应激模型组与正常对照组大鼠相比,强迫游泳不动时间显著增加（P＜0.01）,大理石掩埋（P＜0.01）和排便颗数明显增多（P＜0.01）,腹壁撤退反射评分升高（20 mmHg：P＜0.05;40 mmHg：P＜0.05;60 mmHg：P＜0.01;80 mmHg：P＜0.01）;海马和额叶中BDNF表达水平下降（P＜0.01）,结肠和回肠BDNF表达增加（P＜0.05）。在连续22 d给予白藜芦醇治疗后,上述现象都得到不同程度改善。结论：白藜芦醇能够改善IBS大鼠焦虑抑郁、肠道动力紊乱和内脏敏感性增加的现象,且这一作用很可能与其调节脑内与肠道中BDNF系统表达相关。