盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠血清DAO与CGRP变化及其相关性研究

目的通过观察盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠血清DAO、CGRP水平变化及相关性分析,探讨CGRP在肠黏膜损害中的作用。方法将60只SD大鼠随机分成脓毒症组和假手术组,每组30只,脓毒症组采用CLP制作大鼠脓毒症模型,假手术组仅行盲肠探查术。各组均于术后3、6、12、24与48 h时点,采集腹主动脉血通过双抗体夹心酶标免疫分析法检测血清DAO、CGRP水平,并做相关性分析。结果脓毒症组中的DAO水平与假手术组比较,CLP术后3 h明显升高(P0.05),呈持续上升趋势,在CLP术后48 h血清DAO水平明显高于假手术组(P0.05)。脓毒症组中的CGRP水平与假手术组比较,CLP术后3 h明显降低(P0.05)呈持续降低趋势,虽随时间推移有所回升,但在CLP术后48 h仍低于假手术组(P0.05)。血浆CGRP、DAO含量的变化,经相关分析,CGRP与DAO具有高度正相关,相关系数为0.904,(P0.01)。结论盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠DAO明显高于正常水平、CGRP呈现持续降低状态,CGRP的释放减少可能是导致肠缺血缺氧和肠黏膜损伤的因素之一。     

脓毒症大鼠DAO与TNF-α变化研究

目的研究TNF-α在脓毒症大鼠肠道损伤中的作用。方法 60只SD大鼠随机分成假手术组(n=30),脓毒症组(n=30)。假手术组仅行盲肠探查术,脓毒症组采用CLP制作大鼠脓毒症模型。各组均于术后3、6、12、24与48 h时相点,经腹主动脉采血检测血清DAO、TNF-α水平。结果血清DAO水平逐渐升高,于48 h时达到最高值,高于假手术组(P0.05);血清TNF-α水平在CLP术后即明显高于假手术组(P0.05),在24 h达峰值,随后虽有下降,但仍显著高于假手术组(P0.05)。TNF-α与DAO具有正相关(r=0.897,P0.05)。结论 TNF-α的异常升高,可能在脓毒症大鼠肠道损伤中具重要作用。     

脓毒症大鼠早期内皮细胞活化与损害的实验研究

目的研究脓毒症大鼠早期内皮细胞活化与损害,探讨其在脓毒症中可能作用机制。方法 72只SD大鼠随机分成3组:正常组(n=8),不作任何处理;假手术组(n=32),仅行盲肠探查术;脓毒症组(n=32)采用盲肠结扎加穿孔术(CLP)制备脓毒症模型。假手术组和脓毒症组又分4组,分别在术后3、6、12和24h 4时点从腹主动脉采血,测量血清E-选择素,内皮素1(ET-1),一氧化氮(NO)水平,循环内皮细胞数量,电镜观察冠状动脉内皮细胞超微结构变化。结果血清NO、ET-1水平在CLP术后即明显高于正常与假手术组(P<0.01),在12h达到峰值,一直维持较高水平;NO/ET-1比值则随时间推移呈逐渐下降趋势,显著低于正常与假手术组。CLP术后3h血清E-选择素水平开始升高,明显高于正常与假手术组(P<0.05),在12h达到峰值,随后有下降趋势,但在24h点仍显著高于正常与假手术组(P<0.01);CLP后3h血液循环内皮细胞数量即升高,在12h达峰值,24h时点循环内皮细胞数量有所下降,但仍明显高于正常与假手术组;电镜下观察冠状动脉血管内皮细胞在脓毒症过程中损害逐渐加重。结论脓毒症大鼠早期血管内皮细胞活化、损害逐渐加重,内皮细胞损伤在脓毒症中可能发挥重要作用。     

脓毒症大鼠心功能变化特征及血必净注射液对其影响

目的:通过超声心动图观察脓毒症大鼠心功能变化特征及血必净注射液对其影响.方法:将78只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(n=6)、假手术组(n=24)、盲肠结扎穿孔术(CLP)组(n=24)、血必净治疗(XBJ)组(n=24).假手术组开腹翻动盲肠后关腹,CLP组及XBJ组采用CLP建立脓毒症大鼠模型.假手术组及CLP组于术后2、12、24、36、48、60h经阴茎背静脉注射生理盐水4 mL/kg,XBJ组于术后2、12、24、36、48、60h经阴茎背静脉注射血必净注射液4mL/kg.各组于术后6、24、48、72h通过超声心动图观察实验大鼠心功能的变化.结果:与正常对照组及假手术组比较,CLP组左室舒张末内径(LVEDD)增大、心率(HR)明显升高(P＜0.05),室间隔运动幅度及左室后壁运动幅度有降低趋势,左室射血分数(LVEF)、二尖瓣环舒张期早期峰值速度(Ea)与舒张晚期峰值速度(Aa)比值(Ea/Aa)明显降低(P＜0.05).与CLP组比较,应用血必净注射液后,LVEDD及HR无显著变化,LVEF及Ea/Aa显著升高(P＜0.05).结论:脓毒症大鼠存在心功能障碍,血必净注射液对脓毒症大鼠心功能有改善作用.     

精氨酸加压素对脓毒症大鼠的肝肾保护作用

目的探讨精氨酸加压素(AVP)对毒症大鼠的肝、肾的保护作用。方法雄性SD大鼠通过盲肠结扎穿刺术(CLP)制作脓毒症大鼠模型,以假手术组(n=4)为对照,部分CLP大鼠(n=18)术后4h、8h、12h测肝、肾功能生化指标,部分大鼠CLP术后8h通过侧脑室注射AVP的方式中枢补充AVP(n=6)或人工脑脊液(aCSF,n=4),另一部分大鼠CLP术后6h通过静脉持续泵入AVP(n=6)或生理盐水(n=4)2h,分别在给药后1h测肝、肾功能生化指标变化;结果CLP术后4 h后大鼠血浆ALT、AST、ALP、BUN及Cr开始升高,CLP术后8h有统计学意义,后ALT、AST、ALP、BUN及Cr逐渐升高,CLP术后6h静脉持续泵入AVP[2ng/(kg.h)]2h与静脉泵入生理盐水2h组相比大鼠血浆ALT、AST、ALP、BUN及Cr明显降低;但CLP术后8 h侧脑室给予AVP后大鼠血浆ALT、AST、ALP、BUN及Cr与对照组比较明显升高。结论脓毒症大鼠肝肾功能受损可能与血浆AVP水平有关,早期静脉给予AVP可改善肝肾功能,具有器官保护作用。     

脓毒症多器官损害与髓样细胞触发受体-1基因表达的关系

[摘要] 目的 探讨髓样细胞触发受体-1(TREM-1)基因表达与脓毒症所致多器官损害的关系。方法 采用小鼠盲肠结扎穿孔(CLP)模型造成脓毒症。将60只雄性小鼠随机分为正常对照组(n=10)、假手术组(n=10)和脓毒症组(n=40),并按不同的时间点留取肝、肺、肾及小肠组织及血液样本,分别用于检测TREM-1mRNA,TNF-αmRNA表达及测定丙氨酸转氨酶(ALT)、肌酐(Cr)、肺组织髓过氧化物酶(MPO)、小肠组织二胺氧化酶 (DAO)的活性。结果 与对照组及假手术组相比,CLP后6 h肝、肺、肾组织 TREM-1 mRNA 表达开始增多,肝组织24 h表达均达峰值(P＜0.01),肺、肾组织12 h表达达峰值(P＜0.01),小肠组织的TREM-1表达表现出了一定的升高趋势,但无统计学意义(P＞0.05)。TNF-αmRNA在各组织的表达在CLP后6 h开始升高(P <0.05或P <0.01),12 h降低,48 h再次升高(P<0.05)。相关分析结果显示,肝、肺、肾、小肠组织中TREM-1基因表达分别与TNF-αmRNA表达、ALT,Cr,MPO及DAO 水平显著相关。结论 脓毒症可导致多种组织 TREM-1 mRNA表达增加,其改变与多器官损害密切相关。 [关键词]　髓样细胞触发受体-1　脓毒症　多器官功能损伤     

参麦注射液对早期盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠血清IL-6、IL-8水平的影响

目的 研究参麦注射液(Shenmai,SM)对盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)脓毒症大鼠模型早期促炎性细胞因子IL-6、IL-8水平的影响.方法 96只SD大鼠随机分为A组(假手术组,n=32)、B组(生理盐水组,n=32)和C组(参麦注射液组,n=32),分别于CLP造模后1/2、12、24和36 h向A组、B组大鼠皮下注射生理盐水(5 mL/kg),C组大鼠皮下注射参麦注射液(5 mL/kg),并于术后12、24、36和48 h测量3组SD大鼠血清中IL-6、IL-8的水平.结果 CLP造模后B、C两组血清IL-6、IL-8水平均明显升高,C组在各时点的IL-6、IL-8水平均显著低于B组(P<0.01).结论 参麦注射液可显著降低脓毒症大鼠早期促炎性细胞因子IL-6、IL-8的水平,对早期脓毒症大鼠具有保护作用.     

肝大部切除大鼠肠黏膜屏障的动态变化

目的探讨肝大部切除(PH)大鼠肠黏膜屏障的动态变化。方法102只健康雄性成年Wistar大鼠随机分为正常对照(NC)组(0h组,n=6)、假手术(SO)组(n=48)和PH组(n=48),在SO与PH术后不同时间点(6h,12h,24h,36h,48h,72h,120h,168h,各时点n=6)检测循环血中二胺氧化酶(DAO)的动态变化,观察光、电镜下肠黏膜结构通透性的动态变化。结果血清DAO水平PH术后12h为(1856±302)U/L、24h为(1446±125)U/L,分别与NC组及SO组各对应时间点比较差异有统计学意义(P<0.01)。SO组术后各时间点血清DAO水平与NC组比较无显著性差异。光学显微镜检查显示PH组大鼠术后6-24h肠黏膜中性粒细胞浸润,绒毛损害伴表浅坏死。透射电镜检查显示PH组大鼠术后6-48h肠黏膜细胞间隙普遍明显增宽和镧颗粒沉积。SO组术后仅在6h时间点光、电镜下所见肠黏膜有轻度损伤表现,其余各时间点与NC组比较无显著性差异。结论大鼠PH后6-48h期间出现肠黏膜屏障损伤,48h后损伤的肠黏膜屏障自行修复。     

盲肠结扎穿刺致脓毒性肺损伤大鼠血清MMP-9水平研究

目的 观察盲肠结扎穿刺（CLP）手术致大鼠脓毒性急性肺损伤（ALI）血清基质金属蛋白酶9（MMP-9）、IL-1、IL-8和IL-10表达的变化,探讨MMP-9在ALI形成及预后判断的作用机制.方法 50只SD大鼠随机分为假手术组（SHAM组）（n=8）和CLP手术组42只（6h n=8、12h n=8、24h n=10、48h n=16）.动物成模在各对应时间点取材,检测各组生存率、肺湿重系数、肺组织病理评分,以及MMP-9、IL-1、IL-8、IL-10血清水平.结果 MMP-9蛋白水平在CLP后24小时出现明显上升,显著高于对照组（P＜0.01）,48小时进一步升高（P＜0.01）;IL-1、IL-8、IL-10在CLP术后升高,48小时组均显著高于对照组（P＜0.01）;CLP术后大鼠明显肺损伤出现于24小时并持续加重,48小时组内大鼠均出现严重肺损伤;MMP-9与肺损伤病理程度存在正相关（r=0.704,P＜0.01）,相关性高于IL-1（P＜0.01）、IL-8（P＜0.01）和IL-10（P＜0.05）.结论 CLP手术致大鼠脓毒性ALI血清MMP-9显著升高,MMP-9升高水平与肺损伤病理程度呈显著正相关,提示MMP-9可能在脓毒症后肺损伤的形成过程中扮演着关键性角色,对肺损伤的早期诊断和预后判断具有潜在价值.     

大鼠急性肠梗阻不同时段血浆内毒素和D-乳酸变化

目的探讨大鼠急性肠梗阻不同时段血浆内毒素和D-乳酸的变化。方法 Wistar大鼠随机分为正常对照组(n=8)、假手术组(n=32)和肠梗阻组(n=32),分别于术后8、24、72、168h取下腔静脉血,采用偶氮显色法测定血浆内毒素水平,改良分光光度法测定血浆D-乳酸水平。结果肠梗阻组术后8h血浆内毒素水平明显升高,24h有所下降,后又逐渐升高,至术后168h达高峰,各时点比较,差异有显著性(F=52.75,q=2.67～9.64,P<0.05);肠梗阻组各时点血浆内毒素水平均高于假手术组和对照组,差异有显著性(t=3.24～13.36,P<0.05)。肠梗阻组术后8h血浆D-乳酸浓度升高,呈双峰型变化,至术后168h仍明显高于对照组,差异有显著意义(F=106.28,q=5.36～13.17,P<0.05);肠梗阻组各时点血浆D-乳酸水平均高于假手术组和对照组(t=2.57～8.35,P<0.05);肠梗阻组血浆内毒素与D-乳酸水平呈正相关(r=0.632,P<0.05)。结论血浆D-乳酸水平可作为内毒素血症的预警指标,血浆内毒素水平可作为评价肠道屏障功能损伤程度的指标。     

OSAHS患者血浆β内啡肽、神经肽Y及脑肠肽Ghrelin水平变化及CPAP干预研究

目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者血浆β内啡肽(β-EP)、神经肽Y(NPY)及脑肠肽Ghrelin表达,以及与睡眠监测指标的相关性,观察持续气道正压通气(CPAP)治疗后3种肽类物质水平的变化。方法选取肥胖OSAHS患者32例(OSAHS组)、非OSAHS肥胖者26例(单纯肥胖组)和体质量正常的健康成人27例(正常对照组)。其中OSAHS组和单纯肥胖组接受多导睡眠仪(PSG)监测。血浆β-EP、NPY、Ghre-lin的浓度采用酶联免疫法(ELISA)测定。结果 OSAHS组血浆β-EP水平显著高于单纯肥胖组及正常对照组(P<0.01),与睡眠紊乱指数(AHI)、呼吸最长暂停时间(LAT)呈正相关(P<0.05),与最低氧饱和度(LSaO2)、平均氧饱和度(MSaO2)呈负相关(P值分别为0.016、0.000)。血浆NPY浓度显著高于单纯肥胖组(P<0.05)及正常对照组(P<0.01),与BMI、AHI、微觉醒指数(MAI)、Epworth嗜睡量表(ESS评分)呈正相关(P<0.01);单纯肥胖组NPY变化与BMI呈正相关(P<0.05)。OSAHS组血浆Ghrelin浓度低于单纯肥胖组及正常对照组(P<0.01),与睡眠指标无明显相关性。经持续气道正压通气(CPAP)治疗3个月后,β-EP、NPY水平均有下降(P<0.05);Ghrelin水平较治疗前升高,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 OSAHS组血浆β-EP、NPY水平升高,Ghrelin水平下降;反复呼吸暂停及低通气所致低氧是导致β-EP升高的可能原因;除了肥胖,反复呼吸暂停及微觉醒可能在NPY水平变化中发挥更为重要的作用;升高的NPY对OSAHS患者白天嗜睡起到一定促进作用。3个月CPAP治疗在一定程度上可以降低β-EP、NPY血浆水平,但对Ghrelin的改善作用有限。     

Effects of tetramethylpyrazine on cardiac function and mortality rate in septic rats

Objective:To study the effects of tetramethylpyrazine(TMP)on cardiac function and mortality rate in septic rats.Methods:Fifty male Sprague-Dawley rats were randomized into a sham-operation group (sham group,n=10),normal saline group(NS group,n=20),and TMP group(n=20).The rats in the NS and TMP groups underwent cecal ligation and puncture(CLP)to induce sepsis.Rats in the NS group were injected with NS(10 mL/kg)immediately after CLP and 6 h after CLP.Rats in the TMP group were injected with TMP (10 mg/kg)at the same time points.Twenty-four hours after modeling,the mortality rates were observed in each group.Cardiac function and serum concentration of tumor necrosis factorα(TNF-α)were also tested. The correlation between TNF-αand the ejection fraction(EF)was observed.Left ventricle specimens were reserved for histomorphologic study.Results:Compared with the sham group,the NS and TMP groups had decreased EF values and increased mortality rates and serum TNF-αlevels(P<0.05).The TMP group had a comparatively lower mortality rate and TNF-αlevel and a higher EF value compared with the NS group(P<0.05). Histomorphology indicated that myocardial inflammation in the TMP group was mild compared with that in the NS group.There was a negative correlation between TNF-αlevel and EF value(r=-0.583,P=0.000).Conclusion: TMP could reduce the mortality rate of septic rats and had certain protective effects on cardiac function.     

加速康复外科围术期营养管理对胃切除术后肠黏膜屏障的影响

目的: 探讨加速康复外科(enhanced recovery after surgery,ERAS)围术期营养管理对胃切除术后肠黏膜屏障的影响。方法: 选择22例胃癌胃切除术患者实施ERAS围术期营养管理(ERAS组),另选择20例胃癌胃切除术患者按传统围术期营养管理(传统组),比较两组患者术前及术后1、3、5 d血浆中二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸及肠脂肪酸结合蛋白(IFABP)水平。同时建立SD大鼠胃切除术模型,其中20只按ERAS围术期营养管理模式并行肠内营养(ERAS组),20只实施传统围术期营养管理模式并行肠外营养(传统组),并以10只大鼠作对照(对照组);于术后24、72 h每组各处死10只,比较各组回肠标本的肠黏膜病理评分及肠黏膜超微结构变化。结果： 两组患者术后1 d血浆DAO、D-乳酸及IFABP水平均明显高于术前(P均<0.01)。与传统组相比,ERAS组术后1、3、5 d DAO水平,术后3、5 d D-乳酸水平,术后1、3 d血浆IFABP水平均明显降低(P<0.01或0.05)。动物实验显示,ERAS组术后24、72 h肠黏膜病理评分均明显低于传统组(P均<0.05),肠上皮细胞超微结构损伤程度较传统大鼠减轻。结论： 胃切除术可导致肠屏障结构及功能受损,实施ERAS围术期营养管理可促进肠屏障结构及功能较早恢复。     

严重烧伤休克期CGRP、NPY变化与心肌损伤的关系

目的 探讨严重烧伤休克期降钙素基因相关肽（CGRP）、神经肽Y（NPY）与心肌损伤的关系。方法 采用放射免疫法测定60例严重烧伤患者不同时相点血中CGRP、NPY、心肌肌钙蛋白（cTnT）含量变化，并分析CGRP、NPY与cTnT相关性。结果 严重烧伤休克期后3hCGRP降低，12h达最低值，伤后48h仍低于正常对照组（P〈0．05）；NPY和cTnT与伤后1h升高，12h达峰值，48h仍高于正常对照组（P〈0．05）；CGRP与cTnT变化呈负相关（P〈0．01），NPY与cTnT变化呈正相关（P〈0．01）。结论 CGRP降低、NPY升高在严重烧伤休克期心肌损伤中起重要作用。     

安肠汤治疗腹泻型肠易激综合征肝郁脾虚证的临床疗效及其对肠屏障功能、炎性因子、神经肽Y水平的影响研究

背景　腹泻型肠易激综合征（IBS-D）作为消化系统的常见病和多发病之一,目前单纯应用西医治疗方案对于IBS-D患者的诊疗特别是内脏敏感性的调节治疗效果不够显著,且容易复发。目的　探讨安肠汤治疗IBS-D肝郁脾虚证患者的临床疗效及其对肠屏障功能、炎性因子、神经肽Y（NPY）水平的影响。方法　选取2018年2-12月在广西中医药大学附属瑞康医院消化内科住院及门诊就诊的符合研究标准的IBS-D肝郁脾虚证患者64例,依据随机数字表法分为对照组和观察组,各32例。对照组给予口服匹维溴铵片治疗,观察组在对照组的基础上口服安肠汤治疗,两组患者治疗疗程均为8周。比较两组患者临床疗效及治疗前后肠易激综合征生活质量测试表（IBS-QOL）评分、汉密尔顿焦虑量表（HAMA）评分、汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评分,血清二胺氧化酶（DAO）、D-乳酸、肠脂肪酸结合蛋白（IFABP）、白介素（IL）-6、IL-8、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、NPY水平。结果　观察组患者临床疗效优于对照组（Z=2.163,P<0.05）。治疗后观察组IBS-QOL评分高于对照组,HAMA、HAMD评分低于对照组（P<0.05）。治疗后两组患者IBS-QOL评分高于同组治疗前,HAMA、HAMD评分低于同组治疗前（P<0.05）。治疗后观察组患者血清DAO、D-乳酸、IFABP水平低于对照组（P<0.05）。治疗后两组患者血清DAO、D-乳酸、IFABP水平均低于同组治疗前（P<0.05）。治疗后观察组患者血清IL-6、IL-8、TNF-α水平均低于对照组,血清NPY水平高于对照组（P<0.05）。治疗后两组患者血清IL-6、IL-8、TNF-α水平低于同组治疗前,血清NPY水平高于同组治疗前（P<0.05）。结论　安肠汤治疗IBS-D肝郁脾虚证患者的临床疗效显著,能够改善其整体生活质量和焦虑抑郁状态,改善肠屏障功能,保护肠组织,减轻炎性反应,调控脑肠肽分泌平衡。     

Sodium Tanshinone ⅡA Sulfonate Ameliorates Microcirculatory Disturbance of Small Intestine by Attenuating the Production of Reactive Oxygen Species in Rats with Sepsis

Objective: To examine whether sodium tanshinone ⅡA sulfonate(STS), the main effective component of Salvia miltiorrhiza is effective in relieving the microcirculatory disturbance of small intestine by suppressing the production of reactive oxygen species(ROS) in rats with sepsis. Methods: A rat model of sepsis was induced by cecal ligation and puncture(CLP). Rats(n=40) were randomly divided into 4 groups: sham-operated group(sham, n=10), sepsis group(CLP, n=10), STS treatment group(STS, n=10) and ROS scavenger dimethylthiourea(DMTU, n=10) group. Animals in the STS group were injected with STS(1 mg/kg) for 10 min through the right external jugular vein after the CLP operation, and animals in the CLP group were given the same volume of normal saline after the CLP operation. Animals in the DMTU group were intraperitoneally injected with 5 m L/kg of 20% DMTU 1 h before CLP. The histopathologic changes in the intestinal tissues and changes of mesenteric microcirculation were observed. The levels of ROS in intestinal tissues from each group were qualitatively evaluated using a fluorescent microscope. The expressions of apoptosis signal-regulating kinase(ASK1), phosphorylated ASK1(phospho-ASK1), p38 mitogen-activated protein kinases(p38 MAPK), phosphorylated p38 MAPK(phospho-p38 MAPK) and tissue factor(TF) were determined by Western blotting. Results: It was shown that there were obvious microcirculatory disturbance(P0.05) and tissue injuries in intestinal tissues after CLP operation. The levels of ROS production, phospho-ASK1, phospho-p38 MAPK and TF were increased. Both STS and DMTU suppressed ROS, phospho-ASK1, phospho-p38 MAPK and TF production, and ameliorated the microcirculatory disturbance and tissues injury(P0.01). Conclusion: STS can ameliorate the microcirculatory disturbance of the small intestine by attenuating the production of ROS in rats with sepsis.