CD44v6和基质金属蛋白酶-2表达与胆囊癌的侵袭和转移关系

目的 探讨粘附分子CD44v6，基质金属蛋白－2（MMP－2）在胆囊癌侵袭和转移中的作用。方法 采用免疫组织化学方法检测了42例胆囊癌，10例慢性结石性胆囊炎组织中CD44v6和MMP－2的表达。结果 （1）CD44v6阳性表达率在胆囊癌组（64．3％，72／42）明显高于慢性结石性胆囊炎组（0％，0／10）（P＜0．005）；CD44v6表达强度与胆囊癌的病理学分级相关（P＜0．05），低分化与中，高分化组差异有显著性（P＜0．01）；胆囊癌中转移组阳性率明显高于非转移组（P＜0．01），CD44v6阳性的胆囊癌病人预后较差。（2）MMP－2在胆囊癌组织中表达率（61．9％）明显高于慢性结石性胆囊炎组（10％，P＜0．005）；MMP－2的表达与胆囊癌细胞的分化，转移和预后有关（P＜0．05）；随着分化程度的恶化，其阳性率增高；93）CD44v6和MMP－2在胆囊癌组织中表达呈正相关（P＜0．005）。结论 CD44v6，MMP－2的表达与胆囊癌分化，转移及预后有关，在胆囊癌细胞的侵袭和转移中起重要作用。联合检测有利于评估胆囊癌的生物学行为和判断预后。     

4种肿瘤相关抗原在胆囊癌组织中的表达及其意义

目的 探讨肿瘤相关抗原表达对胆囊癌早期诊断及其预后判断的价值。方法 采用免疫组化染色对10例慢性胆囊炎、10例胆囊腺瘤及50例胆囊癌组织的癌胚抗原（CEA）、癌相关粘液抗原（CA50）、钙粘附蛋白E（E－CD）及增殖细胞核抗原（PCNA）的表达进行检测。结果 胆囊癌组织中CEA及CA50表达阳性率显著高于腺癌组和胆囊炎组（P＜0．05），而E－CD表达阳性率明显降低，且伴有转移的胆囊癌E－CD表达更低。胆囊癌的PCNA标记指数显著高于胆囊炎组和腺瘤组（P＜0．01）。CEA及PCAN过度表达者3年生存率显著降低（P＜0．01），E－CD过度表达者3年生存率较阴性者明显增高（P＜0．05）。结论 CEA、CA50以及PCNA检测可能有助于胆囊腺瘤恶变和胆囊癌的早期诊断，且CEA、PCNA和E－CD检测可作为胆囊癌预后判断的参考指标。     

nm23-H1和E-Cadherin基因蛋白在胆囊癌组织中的表达

目的：探讨nm23-H1和E－cadherin(E-Cad)基因蛋白在胆囊癌组织中的表达与组织类型，病理分级和转移的关系。及nm23-H1和E－Cad基因蛋白表达的相关性。方法：应用催化信号放大系统免疫组化方法，检测52例胆囊腺癌，20例胆囊腺瘤和10例慢性胆囊炎组织中nm23-H1和E－Cad表达水平。结果：在胆囊癌中nm23-H1和E－Cad阳性表达率分别为51．9％和42．3％，均明显低于胆囊腺瘤和慢性胆囊炎（P＜0．05），nm23-H1和E－Cad表达与胆囊癌的组织类型，病理分级和转移密切相关（P＜0．05），两基因蛋白表达在胆囊癌组织中呈正相关（P＜0．05），结论：nm23-H1和E－Cad基因与胆囊癌的转移密切相关，对临床判断胆囊癌预后有一定指导意义。     

血管内皮生长因子与E-钙粘蛋白在胆囊癌组织中的表达研究

目的：探讨血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF)与F－钙粘蛋白（E－Cad)在胆囊癌组织中的表达及与胆囊癌发生发展的关系。方法：应用免疫组织化学法检测14例胆囊腺癌和41例胆囊癌组织中VEGF、E－Cad的表达。结果：VEGF阳性表达率胆囊腺瘤中为42．86％，胆囊癌组织中为80．49％，二者差异有显著意义（P＜0．05），E－Cad在胆囊腺瘤中仅1例表达减弱，而在胆囊癌组织中表达减弱或不表达占68．29％（28／41），差异有非常显著意义（P＜0．01）。胆囊癌直径≥2cm及侵及浆膜组VEGF表达升高，而E－Cad表达率明显降低，E－Cad表达率在远处转移组也明显降低。两者表达与肿瘤Nevin分期、组织学分级及有无淋巴结转移无关。结论：VEGF与E－Cad在胆囊癌发生和浸润转移过程中发挥重要作用，两者表达率的高低可作为预示胆囊癌进展及判断预后的指标。     

胆囊癌组织中抑癌基因p53突变与肿瘤血管生长的相关性研究

目的：探讨胆囊癌中抑癌基因p53突变与肿瘤血管生长的相关性。方法：1998年1月至2000年12月共收集44例胆囊切除标本，其中24例胆囊癌，20例胆囊腺瘤。用免疫组化方法定性检测突变抑癌基因p53蛋白产物的表达，同时检测标本中血管内皮生长因子（VEGF）的表达以反映肿瘤血管生长的情况，比较二者的相关性。结果：胆囊癌中p53蛋白的阳性率达到62．5％。VEGF的阳性率为75％，其阳性表达率随胆囊癌的病理分期的进展而逐渐增强（P＜0．05）。p53与VEGF的阳性率显著相关（P＜0．01）。结论：抑癌基因p53突变在胆囊癌早期发生中起重要作用，在胆囊癌晚期则通过促进肿瘤血管的生长，导致癌肿的浸润转移。     

原发性胆囊癌Survivin和Ki-67的表达及意义

目的探讨Survivin和Ki-67蛋白在原发性胆囊癌（PGC）组织中的表达及其与癌组织类型、病理分级和转移状况的关系，以及Survivin和Ki-67表达的相关性。方法应用免疫组织化学方法检测49例原发性胆囊癌、21例胆囊腺瘤和13例慢性胆囊炎组织中Survivin和Ki-67蛋白的表达。结果胆囊癌组织中Survivin和Ki-67表达阳性率分别为65．31％（32／49）和77．55％（38／49），均明显高于胆囊腺瘤（分别为0％和9．52％，P〈0．05），Survivin阳性表达与胆囊癌细胞分化程度、病理分级和转移无关（P〉0．05）。而Survivin和Ki-67的表达呈明显关联（K=0．509，P〈0．01）。结论Survivin和Ki-67均是胆囊癌高度恶性的重要指标，但Survivin表达可能与胆囊癌预后无关。Survivin和Ki-67蛋白的表达在胆囊癌的发生发展过程中可能具有相互协同作用。     

TGF-β1和TβRⅠ在胆囊癌发病及预后中的作用

目的探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）和转化生长因子βⅠ型受体（TβRⅠ）与胆囊癌细胞增殖和细胞周期的关系,分析其在胆囊癌发病中的机理,评价其对胆囊癌预后的价值。方法用免疫组化方法检测原发性胆囊癌、胆囊腺瘤及慢性胆囊炎组织中TGF-β1、TβRⅠ、增殖细胞核抗原（PCNA）及细胞周期素E（cyclinE）的表达,对胆囊癌患者进行随访。结果胆囊癌TGF-β1表达阳性率为57.14%（20/35）,显著高于胆囊腺瘤〔20.00%（2/10）〕和胆囊炎〔10.00%（1/10）〕,P〈0.01,TGF-β1表达阳性率在Nevin各分期间和是否伴淋巴结及远处转移患者中差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）,TGF-β1表达阳性率与PCNALI和cyclinE表达阳性率呈正相关（r=0.5232,P=0.0013;r=0.4065,P=0.0154）。胆囊癌中TβRⅠ表达阳性率为34.29%（12/35）,显著低于胆囊腺瘤〔70.00%（7/10）〕和胆囊炎〔70.00%（7/10）〕,P〈0.05,伴淋巴结和远处转移者TβRⅠ表达阳性率明显低于无转移者（P〈0.05）,TβRⅠ表达阳性率与PCNALI呈负相关（r=-0.4024,P=0.0166）。TGF-β1和TβRⅠ表达与胆囊癌预后密切相关,TGF-β1阳性表达者预后比阴性者差（P〈0.01）,TβRⅠ阳性表达者预后比阴性者好（P〈0.05）。结论TGF-β1和TβRⅠ表达与胆囊癌细胞增殖和细胞周期关系密切,是判断胆囊癌发生、发展的重要生物学标志。TβRⅠ低表达而导致TGF-β1负性生长调控作用的逃逸,以及TGF-β1的促肿瘤形成作用,可能是胆囊癌变过程中的重要机理。TGF-β1和TβRⅠ是判断胆囊癌预后的良好指标。     

细胞周期素E在胆囊癌中的表达及意义

目的:探讨cyclinE与胆囊癌发生发展的关系 。方法:应用S-P免疫组织化学技术,对35例原发性胆囊癌、10例胆囊腺瘤及10例慢性胆囊炎行cyclinE多克隆抗体的免疫组化标记 。结果:胆囊癌cyclinE的阳性率为48.57%,与胆囊腺瘤、胆囊炎（阳性率均为10%）比较差异有显著性（P<0.05）。cyclinE阳性表达率在病理组织学分级中有显著性差异（P<0.05）,伴淋巴结及远处转移者cyclinE阳性表达率明显高于无转移者,而与Nevin分期无关。cyclinE表达程度与性别、年龄无关 。结论:cyclinE可反映细胞的增殖状态,是判断胆囊癌发生发展的重要生物学标志。     

环氧合酶-2在原发性胆囊癌中的表达及临床意义

目的：研究环氧合酶—2基因(COX—2)在原发性胆囊癌中的表达及其意义，探讨COX—2与原发性胆囊癌发生与发展的关系，为原发性胆囊癌的防治提供实验依据。方法：应用免疫组织化学SABC法检测39例原发性胆囊癌、11例胆囊腺瘤和16例慢性胆囊炎组织中COX—2蛋白的表达情况，并结合临床病理指标进行分析。结果：COX—2在原发性胆囊癌、胆囊腺瘤和慢性胆囊炎组织中的阳性表达率分别为82％(32/39)、36％(4／11)和25％(4／16)，其差异有显著性(P＜0．05)；原发性胆囊癌组织中COX—2的表达在Nevin分期晚期病例比早期高(P＜0．05)，有转移者明显高于无转移者(P＜0．05)。结论：COX—2在原发性胆囊癌组织中为诱导性表达，其表达上调与原发性胆囊癌的形成关系密勿，并与肿瘤Nevin分期及是否有转移相关，提示COX—2在原发性胆囊癌的发生、发展中可能起一定作用。     

增殖细胞核抗原在原发性胆囊癌中的表达及意义

目的:探讨PCNA在原发性胆囊癌的表达及意义。方法:34例原发性胆囊癌,8例胆囊腺瘤和10例慢性胆囊炎石蜡包埋标本,用SP免疫组织化学方法测定。结果:PCNA在原发性胆囊癌、胆囊腺瘤和慢性胆囊炎中的阳性表达指数分别为43．75±21．73％、7．98±5．19％和4．31±2．15％,原发性胆囊癌PCNA指数显著高于胆囊良性病变（P<0．01）。低分化腺癌PCNA指数显著高于高、中分化者（P<0．01）。结论:原发性胆囊癌的发生发展与细胞的异常增殖有关,PCNA可作为胆囊癌预后的重要指标。     

Fas和FasL在胆囊癌免疫逃逸中的作用

目的探讨Fas／FasL在胆囊癌免疫逃逸机制中的作用。方法（1）应用SP免疫组织化学法研究26例胆囊癌组织、18例胆囊腺瘤组织、3例胆囊上皮不典型增生组织和20例慢性胆囊炎组织中Fas蛋白和FasL蛋白的表达水平；（2）运用TUNEL法原位检测在上述4种组织中浸润的淋巴细胞的凋亡。（3）比较在不同的胆囊癌临床病理类型中Fas蛋白和FasL蛋白的表达情况和在原位胆囊癌组织浸润的淋巴细胞的凋亡情况。结果（1）Fas蛋白表达的阳性率在上述4种组织之间的差异无统计学意义。FasL蛋白表达的阳性率在胆囊癌组织显著高于慢性胆囊炎组织（χ^2=4．89。P〈0．05）；（2）浸润的淋巴细胞的凋亡数量在高分化癌显著低于低分化癌（t=2．52，P〈0．05）．在腺瘤和慢性炎症组织中未见到浸润的淋巴细胞的凋亡。（3）浸润的淋巴细胞的数量在腺瘤组织显著低于癌组织（t=6．99，P〈0．01），在慢性炎症组织显著低于腺瘤组织（t=3．66，P〈0．01）：在高分化癌显著低于低分化癌（t=5．31，P〈0．01），在NevinⅠ、Ⅱ、Ⅲ期显著低于Ⅳ、Ⅴ期（t=3．76。P〈0．01）。结论胆囊癌细胞表达的FasL通过诱导在癌组织浸润的淋巴细胞的凋亡从而使癌细胞逃避机体的免疫监视，它的上调表达在胆囊癌的分化、浸润和转移过程中扮演重要角色。     

血管内皮生长因子及其受体Flt-1和KDR在原发性胆囊癌的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）、Flt-1和KDR的表达与原发性胆囊癌临床病理特征的关系。方法对21例原发性胆囊癌和10例胆囊腺瘤样息肉新鲜组织标本采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组织化学染色在mRNA和蛋白水平检测VEGF、Flt-1和KDR在原发性胆囊癌和胆囊腺瘤样息肉的表达情况，并分析VEGF、Flt-1和KDR免疫组织化学阳性表达的病例与胆囊癌肝浸润、淋巴转移、病理分级和Nevin分期等临床病理特征的相关性。结果在胆囊癌和胆囊腺瘤样息肉组织中VEGF mRNA阳性表达率为90．47％（19／21）和20％（2／10）；Flt-1mRNA阳性表达率为71．42％（15／21）和0％（0／10）；KDR mRNA阳性表达率为85．71％（18／21）和10％（1／10）；两组差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫组织化学染色VEGF蛋白检测阳性表达率为80．95％（17／21）和20％（2／10）；Flt-1蛋白阳性表达率为60．90％（13／21）和10％（1／10）；KDR蛋白阳性表达率为76．19％（16／21）和10％（1／10），两组差异有统计学意义（P〈0．05）。VEGF、Flt-1和KDR蛋白的阳性表达率在胆囊癌肝浸润、淋巴转移和NevinⅣ、Ⅴ期组明显高于无肝浸润、无淋巴转移和NevinⅠ、Ⅱ、Ⅲ期组（P〈0．05），而在高、中和低分化组三者的阳性表达率无统计学意义（P〉0．05）。结论原发性胆囊癌组织中VEGF、Flt-1和KDR在mRNA和蛋白水平均存在高表达，VEGF、Flt-1和KDR蛋白的阳性表达同胆囊癌肝浸润、淋巴转移和Nevin分期明显相关，但与病理分级无明显相关。     

Bcl-2蛋白与增殖细胞核抗原在原发性胆囊癌的表达及意义

目的：探讨 Bcl-2蛋白和增殖细胞核抗原（PCNA）在原发性胆囊癌组织中的表达及意义。方法 采用SP免疫组化法对24例原发性胆囊癌和12例慢性胆囊炎石蜡包埋组织切片进行Bcl-2和PCNA染色，检测Bcl-2蛋白和PCNA的表达。结果 （1）慢性胆囊炎与原发性胆囊癌组织 Bcl-2表达阳性率有明显差异（P＜0．01）。慢性胆囊炎组织中100％存在Bcl-2表达，其表达主要分布于胆囊基底腺细胞，而表面分化成熟的腺上皮细胞均无Bcl-2表达，原发性胆囊癌组织中45．8％存在Bcl-2表达，其表达不仅分布于癌组织腺样结构的基底层细胞，也分布于其表面分化较好的癌变的腺上皮细胞。在胆囊癌组织中，高分化和组织学分级I级的Bcl-2表达阳性率明显高于低分化和组织学分级Ⅲ级者（P＜0．05）。（2）原发性胆囊癌PCNA计数值明显高于慢性胆囊炎（P＜0．01）。在胆囊癌组织中，低分化和组织学分级Ⅲ级的PCNA计数值明显高于高分化和组织学分级Ⅰ级者（P＜0．05）。结论 细胞凋亡抑制与细胞异常增殖在原发性胆囊癌的发生发展过程中均起着重要的作用。Bcl-2蛋白和PCNA表达可部分反映原发性胆囊癌的恶性程度。     

良性增生前列腺组织中TGFβ1mRNA和蛋白的表达

目的：在转录和翻译水平探讨转化生长因子β1（TGFβ1）在良性前列腺增生症（BPH）前列腺组织中的表达及意义。方法：应用原位杂交和 免疫组织化学法对22例BPH和10例正常前列腺（NP）组织标本中TGFβ1的表达进行定性、定位检测。结果：BPH前列腺和NP组织的上皮和间质都有明显的TGFβ1mRNA表达,其表达在BPH和NP间差异无显著性意义（P＞0．05）;在两组间,基质细胞TGFβ1mRNA表达明显高于上皮细胞（P＜0．01）。BPH前列腺和NP的上皮组织中TGFβ1蛋白表达较弱,且两者之间差异无显著性意义（P＞0．05）;间质中TGFβ1表达均为阳性,BPH前列腺间质中阳性表达显著强于NP的间质（P＜0．01）,以基质为主要成分的增生结节中表达更高。结论：TGFβ1是导致BPH前列腺间质增生的重要物质,启动BPH发生发展的因素在转录后水平调控TGFβ1的表达。     

抗凋亡基因bcl—2在原发性胆囊癌中的表达及其临床意义

为探讨抗凋亡基因ｂｃｌ２与胆囊肿瘤发生、分化及临床预后的关系，采用免疫组织化学方法对４５例原发性胆囊癌和３９例胆囊腺瘤抗凋亡基因ｂｃｌ２的表达进行了观察。结果显示：ｂｃｌ２在原发性胆囊癌和胆囊腺瘤的表达率分别为７１．１％和８７．２％，两者比较无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；ｂｃｌ２在原发性胆囊癌高、中、低分化型的表达率分别为８２．３％、８２．４％和５０．０％，彼此间存在显著性差异（Ｐ＜０．０１）；ｂｃｌ２表达在原发性胆囊癌临床Ⅰ～Ⅱ期与Ⅲ期的阳性率分别为８１．３％、６５．３％，彼此间无显著性差异，表明ｂｃｌ２表达可能与原发性胆囊癌临床分期无直接关系。     

p16、Rb基因表达与原发性胆囊癌病理生物学行为及预后的关系

目的：探讨p16,Rb基因在原发性胆囊癌中的表达及其与病理生物学行为和预后的关系。方法：采用免疫组化（SP）法对56例胆囊癌进行p16和Rb蛋白的定位观察。结果：p16和Rb基因在原发性胆囊癌中的表达阳性率分别为46．3％和71．4％，显著低于在胆囊良性病变中的表达（P＜0．05），Rb表达与胆囊癌的病理组织学分级，组织类型，浸润，转移和预后无明显关系（P＞0．05），而p16与胆囊癌的浸润，转移和预后有明显相关性（P＜0．05），p16和Rb基因蛋白表达存在着明显的互补性。结论：p16和Rb基因蛋白丢失是胆囊癌发生，发展中的重要分子事件，与细胞周期G1－S期的负反馈调节环路中断关系密切，p16蛋白表达可作为评估胆囊癌病理生物学行为及预后的参考指标。     

转化生长因子β及其受体在胃癌中表达的研究

目的：研究转化生长因子β（TGF－β）及其受体在胃癌中的表达，探讨其在胃癌发病中的作用机制及临床意义。方法：应用免疫组织化学SABC方法进行研究，结果：TGF－β表达主要分布于肿瘤细胞浆中，其在胃癌中的表达率71．43％明显高于正常组织的23．21％，P＜0．05，TGF－βI型受体表达主要分布于细胞膜和细胞浆中，其在胃癌和正常组织中的表达无明显差异，P＞0．05，TGF－βII型受体表达亦位于细胞膜和细胞浆中，其在胃癌中的阳性表达率44．64％明显低于正常组织的96．43％，P＜0．01，结论：TGF－β表达与胃癌发生，发展有着密切关系，其受体表达的缺失可能是肿瘤细胞逃逸TGF－β负调控的机制之一。     

原发性胆囊癌细胞增殖与细胞周期素E表达的关系

目的 探讨原发性胆囊癌细胞增殖与细胞周期素Ｅ表达的关系。方法 ４１例原发性胆咒０便胆囊腺瘤和１５例慢性胆囊炎石蜡包埋标本,用ＳＰ免疫组织化学方法测定ｃｙｃｌｉｎＥ和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达。结果 ｃｙｃｌｉｎＥ在原发性胆囊癌、胆囊腺瘤和慢性胆囊炎中的阳性表达率分别为４６．３％￣１０．０％和０,原发性胆囊癌ｃｙｃｌｉｎＥ阳性率显著高于胆囊良性病变。ｃｙｃｌｉｎＥ在胆囊癌的表达与ＰＣＮＡ指数相     

�ְ�����p53��Ѫ����Ƥ�������ӱ��Ե��Ұ�Ԥ���Ӱ��

目的 探讨抑癌基因p53和血管内皮生长因子（VEGF）在胆囊癌发生发展中的作用。方法 采用免疫组化方法分别对24例胆囊癌、20例胆囊腺瘤和18例慢性胆囊炎进行p53和VEGF蛋白表达的检测。结果 胆囊癌的p53和VEGF的阳性表达率明显高于胆囊腺瘤和慢性胆囊炎（P＜0.01，P＜0.05），根据Nevin分期，胆囊癌S1、S2、S3期的p53阳性表达率明显高于S4、S53期（P＜0.05），而VEGF的阳性表达率在S4、S5期胆囊癌中高于S1、S2、S3期（P＜0.05）。胆囊癌中p53和VEGF的阳性表达明显相关（P＜0.05）。它们与胆囊癌病理分级均未发现明显相关性。结论 p53和VEGF的过度表达可能对胆囊癌的预后判断有一定作用。     

胆囊良、恶性病变组织中CA19-9和CA125的表达及其临床病理意义

目的研究胆囊腺癌及其癌旁组织和慢性胆囊炎组织中CA19-9和CA125表达水平并探讨其临床病理意义。方法108例胆囊腺癌、46例癌旁组织和35例慢性胆囊炎手术切除标本常规石蜡包埋切片，应用En-Vision^TM免疫组化法检测CA19-9和CA125的蛋白表达。结果胆囊腺癌组织中CA19-9和CA125的表达阳性率（49．1％、51．9％）明显高于癌旁组织（26．1％、15．2％）和慢性胆囊炎组织（14．3％、5．7％），P〈0．01。腺瘤癌变、肿块最大径〈2cm、无淋巴结转移和未侵犯周围组织者CA19-9和CA125的表达阳性率均明显低于低分化腺癌、肿块最大径≥2cm、有淋巴结转移和侵犯周围组织器官者（P〈0．05，P〈0．01）；两者在胆囊腺癌中的表达具有一致性（χ^2=44．69，P〈0．01）。结论CA19-9和CA125可能是反映胆囊腺癌发生、发展、生物学行为和预后的重要肿瘤标志物。