在卵类粘蛋白手性柱上拆分药物对映体西替利嗪的研究

目的:建立利用卵类粘蛋白手性固定相拆分西替利嗪对映异构体的反相高效液相色谱分析方法,研究色谱条件对拆分结果的影响和该蛋白柱的部分拆分机理。方法:西替利嗪溶解在流动相中配成浓度为22μg·mL-1的溶液,用Ultron Es-OVM柱(5μm,150 mm×4.6 mm),流动相为磷酸二氢钾缓冲溶液与有机改进剂(甲醇或乙醇或乙腈)的混合溶液,紫外器波长230 nm,柱温25℃。结果:首次利用卵类粘蛋白手性柱成功拆分了西替利嗪药物对映体,最佳分离条件:乙腈-20 mmol·L-1磷酸二氢钾(pH 6.20,用磷酸和氢氧化钾溶液调节)(18:82),流速0.5 mL·min-1,出峰时间在20 min内,分离度达到1.68。结论:本方法简单、快速,无需柱前衍生,可方便用来拆分和检测西替利嗪对映体。     

尼群地平对映体在Chiralcel OJ柱上的拆分特性研究

目的:研究尼群地平对映体在ChiralcelOJ柱上的拆分特性和规律。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为纤维素键合OJ手性柱(250mm×4.6mm,10μm),流动相为正己烷-无水乙醇,检测波长为236nm,流速为0.5mL/min。用溶质计量置换保留模型考察固定相和流动相中置换剂强度对拆分的影响,同时考察三乙胺及温度对保留与拆分的影响。结果:尼群地平R-对映体的lgI值均高于S-对映体,置换剂无水乙醇对对映体拆分有不同的影响;三乙胺浓度增加,对映体的保留和拆分效率均减小;随柱温从4～40℃改变,对映体间的分离度出现极值。结论:溶质计量置换保留模型的计量置换参数lgI和Z值可以分别表征ChiralcelOJ柱的拆分能力和对映体空间效应,三乙胺使拆分效率降低,适当的柱温可以改善和提高拆分效果。     

键合纤维素手性固定相拆分奥美拉唑对映体

目的建立采用键合纤维素手性固定相拆分奥美拉唑对映体的高效液相色谱法。方法在正相条件下,采用Chiralpak IB色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)对奥美拉唑对映体进行拆分,考察了流动相组成、流速和柱温对对映体分离的影响。结果确立了最佳拆分条件:流动相为正己烷-乙醇(90∶10),流速0.8 mL/min,检测波长280 nm,柱温25℃。结论本法简便,准确,适用于奥美拉唑对映体的拆分。     

纤维素键合型手性固定相分离二氢吡啶类钙离子拮抗剂药物对映体

目的采用HPLC手性固定相法拆分6种二氢吡啶类钙离子拮抗剂药物对映体。方法采用Chiralpak IC[纤维素-三(3,5二氯苯基氨基甲酸酯)共价键合硅胶]手性色谱柱,考察了流动相中有机改性剂的种类和比例、碱性添加剂、柱温及流速对对映体分离的影响。结果最终确定分离尼莫地平的最优条件为正己烷-正丙醇(体积比90∶10);分离西尼地平的最优条件为正己烷-正丙醇(体积比85∶15);分离尼索地平、阿折地平的最优条件为正己烷-正丙醇-二乙胺(体积比92∶8∶0. 01);分离阿雷地平的最优条件为正己烷-正丙醇-二乙胺(体积比90∶10∶0. 01);分离贝尼地平的最优条件为正己烷-正丙醇-二乙胺(体积比95∶5∶0. 01);柱温为25℃,流速为1. 0 mL·min~(-1)。以上6种化合物均可在Chiralpak IC手性固定相上得到完全分离。且热力学研究结果表明尼莫地平、西尼地平、阿折地平、贝尼地平对映体的手性拆分过程均受焓驱动影响,低温有利于对映体分离。而阿雷地平、尼索地平既受焓驱动,同时也受熵驱动影响。结论该纤维素键合型手性固定相对以上6种二氢吡啶类化合物表现出良好的对映体选择性。     

纤维素键合手性固定相拆分盐酸奈福泮对映体

目的 建立一种用键合纤维素手性固定相的HPLC拆分盐酸奈福泮对映异构体。方法 盐酸奈福泮的分离使用Chiralpak IC色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为正己烷-异丙醇（90：10,0.1% DEA）,流速为0.8 mL·min^-1,检测波长267 nm,柱温25℃。结果 盐酸奈福泮对映体在键合纤维素手性固定相上能够完全分离,分离度为6.53。结论 该方法可快速实现盐酸奈福泮对映体的分离。     

新型键合纤维素手性固定相拆分氯西加酮对映体

目的:建立一种用新型键合纤维素手性固定相拆分氯西加酮对映异构体的高效液相色谱方法。方法:使用Chiralpak IB(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为正己烷-无水乙醇(90︰10),流速0.8 mL.min-1,检测波长230 nm,柱温30℃;通过对比氯西加酮和添加了苏式氯西加酮的氯西加酮色谱图,判断先流出物的构型。结果:氯西加酮对映体在新型键合直链纤维素衍生化合物手性固定相上能够完全分离,分离度为1.79;先流出物为苏式氯西加酮。结论:本方法可方便地实现氯西加酮对映体的分离。     

高效液相色谱纤维素类手性固定相法拆分麻黄碱对映体

目的:用手性固定相拆分麻黄碱对映体,并建立检测麻黄碱对映体光学纯度的高效液相色谱法。方法:采用 CHIRAL-CEL OD-H(250 mm×4.6 mm,5 μm)手性柱,柱温为22℃,以正己烷-异丙醇-二乙胺(96:4:0.2)为流动相,流速0.5 mL·min~(-1),在257 nm 检测。结果:麻黄碱对映体拆分效果好,分离度大于2.5,最低检测限分别为5 ng 和10 ng。麻黄碱浓度在0.001～0.25 mg·mL~(-1)范围内线性关系良好(r=0.9999)。结论:该方法操作简单,快速,重复性好,可有效地控制药品质量。     

键合纤维素衍生物手性固定相拆分酮洛芬对映体

目的建立用键合纤维素衍生物手性固定相拆分酮洛芬对映体的高效液相色谱法。方法采用Chiralpak IB色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)在正相条件下拆分酮洛芬对映体,流动相为正己烷-异丙醇(95∶5),流速0.8 mL/min,检测波长254 nm,柱温25℃。结果酮洛芬对映体在键合纤维素衍生物手性固定相上能够基线分离,分离度为5.44。结论本法简便、快速、重复性好,适用于酮洛芬对映体的分离。     

对-羟基苯甲酸印迹整体柱识别机制研究

目的：采用原位热引发聚合法制备分子印迹整体柱,在高效液相色谱上考察印迹整体柱在不同色谱条件下分子印迹整体柱选择性的变化。利用计量置换模型对实验数据进行模拟,研究决定分子印迹整体柱选择性识别能力的主要因素。方法：以甲基丙烯酸为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,甲苯和异辛烷为致孔剂,偶氮二异丁腈为引发剂,选择原位热引发聚合法,制备以对-羟基苯甲酸为模板的分子印迹整体柱。在高效液相色谱上考察印迹整体柱对模板分子的特异选择性;系统考察了向流动相中依次加入水、甲醇、乙醇和异丙醇4种强氢键竞争溶剂后对-羟基苯甲酸、邻-羟基苯甲酸和对-硝基苯甲酸容量因子的变化,利用计量置换模型对实验数据进行模拟。结果：制得的分子印迹整体柱对模板分子具有特异选择性;在流动相中加入强氢键竞争溶剂后,各种样品的容量因子以及印迹整体柱的选择性均降低;计量置换模型模拟结果显示lnk值用来表示分子印迹聚合物的分离效率,n值用来表示当溶质和印迹聚合物间的相互作用是氢键时,被分离样品和印迹聚合物之间相互作用的空间效应。结论：当强氢键竞争性溶剂加入流动相中时印迹聚合物孔穴结构的匹配性决定了印迹体系的特异识别能力。     

Column-Switching High-Performance Liquid Chromatography for On-Line Simultaneous Determination and Resolution of Enantiomers of Verapamil and Its Metabolites in Plasma

An on-line simultaneous assay for the enantiomers of verapamil (VA) and its three metabolites in plasma was developed with column-switching HPLC. This system consists of an ovomucoid protein chiral stationary phase coupled to an achiral reversed-phase column via a dilution tube and a trapping column. The reversed-phase column was used to separate and quantitate VA, its metabolites, and internal standard, without interference from plasma components. Then each of the eluates containing VA and its metabolites was selectively switched into a sampling loop, and the samples were transferred successively to the trapping column after dilution with a new mobile phase. After concentration on the trapping column, each sample was passed to the ovomucoid column, where the enantiomers were resolved and quantitated. The mobile phases for both HPLC columns were independently optimized and the diffusion of the sample during column switching was minimized. This method was shown to be efficient and reliable.     

高效液相色谱手性流动相法拆分帕珠沙星对映体

目的:对帕珠沙星对映体进行手性分离。方法:采用高效液相色谱手性流动相法,用ODS柱(4.6 mm×150 mm,10 μm),检测波长320 nm,流动相为甲醇-手性溶液(25:75,pH 3.0),流速1 mL·min-1。结果:右旋体最低检测限1.5 ng,重现 性好。结论:该法可用于帕珠沙星光学纯度检查。     

超高效合相色谱法拆分及测定板蓝根中(R,S)-告依春对映异构体含量

目的建立拆分板蓝根中(R,S)-告依春对映异构体及测定其含量的超高效合相色谱(UPC2)法。方法色谱柱为TrefoilTM AMY1柱(150 mm×3.0 mm,2.5μm),流动相为超临界CO₂-甲醇(梯度洗脱),流速为1.2 mL/min,检测波长为245 nm,柱温为45℃,动态背压为1 800 psi,进样量为2μL。结果 R-告依春、S-告依春能达到较好分离,质量浓度分别在2.01～64.32μg/mL(r=0.999 9,n=6)和1.01～32.38μg/mL(r=1.000 0,n=6)范围内与峰面积线性关系良好;检测限均为0.09μg/mL,定量限分别为0.46μg/mL和0.44μg/mL;精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于3.0%;平均加样回收率分别为100.97%和101.26%,RSD分别为1.73%和2.08%(n=6)。结论该方法稳定性、重复性均较好,结果准确可靠,可用于拆分板蓝根中(R,S)-告依春对映异构体及测定其含量。     

Stereospecific High-Performance Liquid Chromatographic (HPLC) Assay of Fenoprofen Enantiomers in Plasma and Urine

A new high-performance liquid chromatographic (HPLC) assay suitable for pharmacokinetic studies of enantiomers of fenoprofen (FEN) was developed. Following the addition of internal standard (IS; racemic ketoprofen), the plasma or urine constituents are extracted into a mixture of isooctane:isopropanol (95:5), back extracted into water, and finally, extracted into chloroform. After evaporation of the organic layer, the drug and IS are derivatized with l-leucinamide hydrochloride via ethyl chloroformate intermediate. The formed diastereoisomers are chromatographed on a reversed-phase HPLC with a mobile phase consisting of monopotassium phosphate solution:acetonitrile:triethylamine (65:35:0.02) at a flow rate of 1 ml/min. The detection UV wavelengths are 232 and 275 for the drug and IS, respectively. The suitability of the assay for pharmacokinetic analysis of FEN enantiomers was examined by analysis of the plasma and urine samples taken from a healthy subject, following peroral administration of a single 300-mg dose of racemic FEN.     

衍生化HPLC柱切换法测定人血浆中卡托普利浓度的方法研究

目的 :建立高效液相色谱柱前衍生化结合柱切换技术测定血浆中卡托普利浓度的方法。方法 :血浆中卡托普利与对溴苯甲酰甲基溴发生衍生化反应后 ,分别加入等体积的丙酮和水 ,离心后取上清液进样 ,以HPLC柱切换进行分离测定。结果 :线性范围为 2 0～ 10 0 0ng·mL-1,净化回收率为 94 7%～ 96 2 % ,方法回收率为 98 1%～ 10 3 8% ,日内和日间检测RSD分别小于 2 8%和 4 2 %。结论 :方法简便灵敏 ,为卡托普利人体药代动力学研究及临床药物监测提供了方法     

ICH-GCP E6(R2)指导下的临床试验伦理学思考

临床试验(Clinical trail)是指按照预先制订的方案,在人体进行的与生物医学或健康相关的研究,以揭示试验药物的作用、不良反应、试验药物在人体的吸收、分布、代谢和排泄,目的是确定试验药物在特定的给药方案下,对特定的适用证人群的疗效与安全性.临床试验通常会产生伦理方面的问题.ICH-GCP(临床试验管理规范指导原则)是关于药品临床试验的质量管理规范(Good Clinical Practice,GCP),其中关于临床试验的伦理准则的相关规定在E6中涉及.本文分析ICH-GCP E6(R2)指南中与伦理相关的条款,将条款与临床试验遵循的伦理原则一一对应,同时对ICH-GCP E6(R2)需要改进之处进行了探讨.