PTEN基因变异与人脑胶质瘤预后的关系研究

目的探讨PTEN基因变异与人脑胶质瘤病理级别、生存期及病人年龄、性别、肿瘤生长部位的关系。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性电泳分析（PCR-SSCP）结合银染技术和双重PCR技术．检测80例胶质瘤PTEN基因9个外显子点突变与基因缺失情况。结果15例（18．8％）发生基因点突变。27例（33．8％）存在基因缺失。PTEN基因失活与星形细胞瘤病理分级显著性相关（P〈0．05）。其中高度恶性胶质瘤（Ⅲ～Ⅳ级）的突变率（31．3％）和缺失率（52．1％）明显高于低度恶性者（Ⅰ～Ⅱ级）（P〈0．05）；与病人性别、年龄及肿瘤生长部位无关。PTEN基因第5、6和8外显子是胶质瘤病人的热点基因突变区。PTEN基因失活的胶质瘤病人生存期明显低于基因正常者。结论人脑胶质瘤PTEN基因与病理分级和生存期关系密切。可作为一项独立的预后指标。     

PTEN/MMAC1基因改变与胶质细胞瘤生物学特征相关性研究

目的探讨胶质瘤PTEN/MMAC1基因突变及缺失与肿瘤分型、病理分级和肿瘤生长部位、患者年龄、性别的关系.方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性电泳分析(PCR-SSCP)结合银染技术、双重PCR技术检测80例胶质瘤PTEN/MMAC1基因九个外显子点突变与基因缺失情况.结果 80例胶质瘤分别有15例(18.75%)和27例(33.75%)PTEN/MMAC1基因点突变和基因缺失,且PTEN/MMAC1基因失活与胶质瘤病理分级明显相关(P<0.05),其中低分化胶质瘤(Ⅲ～Ⅳ级)突变率(31.30%)和缺失率(60%)明显高于高分化(Ⅰ～Ⅱ级)胶质瘤(P<0.05).其中,少突胶质细胞瘤仅有1例PTEN/MMAC1基因缺失(7.70%).星形细胞瘤PTEN/MMAC1基因第5外显子、第6外显子和第8外显子是胶质瘤PTEN/MMAC1基因易突变区.PTEN/MMAC1基因失活与患者性别、年龄及肿瘤生长部位无相关性.结论人胶质瘤PTEN/MMAC1基因与病理分级关系密切,不同起源的胶质瘤PTEN/MMAC1基因改变差异明显.     

PTEN/MMAC1/TEP1基因与脑胶质瘤

脑胶质瘤的发生与多种染色体和基因突变有关,人类第10号染色体短臂缺失与脑胶质瘤关系密切。1997年发现的PTEN/MMACl/TEPl基因位于10q23上,本文就此基因与脑胶质瘤的关系作一综述。     

抑癌基因PTEN与胶质瘤细胞侵袭和迁移的体外实验研究

目的:研究抑癌基因PTEN对脑胶质瘤细胞侵袭和迁移的影响。方法:用PTEN表达型质粒转染大鼠C6胶质瘤细胞,利用Matrigel体外侵袭实验和细胞迁移运动实验进行细胞侵袭和迁移的研究。结果:转染PTEN的大鼠C6胶质瘤细胞侵袭与迁移能力均明显下降。结论:PTEN在体外可以有效的抑制肿瘤细胞的侵袭和迁移过程,其具体机制还有待进一步探讨。     

人脑胶质瘤P53基因突变的研究现状

P53基因是目前肿瘤学研究的热点。本文就近年来关于P53突变在人脑胶质瘤发生,发展中的作用及人脑胶质瘤中P53基因突变的特点作一综述。     

EGFL7和PTEN在人脑胶质瘤中的表达

目的探讨表皮生长因子样结构7基因(EGFL7)、第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN)在脑胶质瘤中的表达和相互关系。方法应用免疫组化方法检测56例脑胶质瘤和8例脑外伤内减压脑组织中EGFL7和PTEN的表达。结果 EGFL7蛋白在脑胶质瘤组织和正常脑组织中的阳性表达率差异有显著统计学意义(P<0.01);高度恶性胶质瘤组阳性表达率明显高于低度恶性胶质瘤组(P<0.01)。PTEN蛋白在脑胶质瘤组织和正常脑组织中的阳性表达率差异有显著统计学意义(P<0.01);随着胶质瘤恶性程度的增加,PTEN蛋白的表达相应降低(P<0.01)。EGFL7与PTEN在各级胶质瘤组织的表达呈负相关(r=-0.382,P<0.01)。结论 EGFL7基因可能直接参与了胶质瘤的发生、侵袭过程;PTEN基因突变或丢失、灭活导致PTEN蛋白表达的缺失或减弱在胶质瘤的发生、侵袭发展过程中起重要作用;EGFL7表达与PTEN表达具有明显的负相关性,EGFL7高表达与PTEN表达下降在胶质瘤的浸润发展过程起协同作用。     

44例人脑胶质瘤P53基因突变的研究

用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ及ＤＮＡ直接测序研究了４４例人脑胶质瘤。发现１３例有Ｐ５３基因突变。３３例星形细胞瘤１２例有Ｐ５３基因突变。１１例非星形细胞瘤１例有Ｐ５３基因突变。ＤＮＡ直接测序证实所有突变均在Ｐ５３基因第５～８外显子，发现了一些新的突变位点，并发现在３例胶质母细胞瘤中存在Ｐ５３基因的多个位点的突变。该结果提示在大多数非星形细胞胶质瘤并不涉及Ｐ５３基因突变，Ｐ５３基因突变对星形细胞瘤的诊断有重要价值。特别是多位点的Ｐ５３基因突变可做为星形细胞瘤进展到胶质母细胞瘤的基因标志。     

PTEN 在胶质瘤干/祖细胞中变异状态的研究

目的 为胶质瘤干/祖细胞来自神经干/祖细胞基因突变的推测寻找实验证据,以阐明二者之间的关联性.方法 体外培养的胶质瘤干/祖细胞和神经干/祖细胞,经免疫细胞化学法鉴定后分别进行RNA 提取、逆转录生成cDNA,以及针对PTEN 的逆转录聚合酶链反应;扩增产物进行正反双向测序并与野生型PTEN 基因序列比较肽链序列的异同.结果 神经干/祖细胞PTEN mRNA 序列无变异,胶质瘤干/祖细胞存在大量同义突变和少量异义突变,主要包括第1 号外显子第22 ~ 42 位碱基突变、第7 号外显子第712位碱基突变和第9号外显子第1192位碱基突变.致使PTEN 肽链上第8 ~ 14位氨基酸由原来的IVSRNKR突变为LRLICIF,第238 位的苯丙氨酸(F)突变为亮氨酸(L),第398 位的苏氨酸(T)突变为丝氨酸(S).其中第8 ~ 14 位和第238 位氨基酸突变,使PTEN 与细胞膜的结合能力下降,细胞外信号难以转导进入细胞内;第398 位氨基酸突变则使PTEN 稳定性破坏,易被降解.结论 PTEN基因在胶质瘤恶性转化的早期即已失活,可能是胶质瘤形成的始动因素之一.     

PTEN和AKT在胶质瘤研究中的进展

新近发现的抑癌基因ＰＴＥＮ通过拮抗ＰＩ３Ｋ对ＰＩＰ３磷酸化下调ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ传导通路的活性；而ＡＫＴ通路通过调节凋亡通路和细胞周期的运行转导细胞外生存信号、发挥对细胞生存的调节作用。研究发现：ＰＴＥＮ在恶性胶质瘤中的突变缺失率很高，其功能状态的稳定性在胶质瘤的恶性转化以及复发过程中十分重要。在胶质基因治疗中ＰＴＥＮ／ＡＫＴ可以作为颇具希望的候选靶基因而成为联合基因治疗的一个研究方向。     

PTEN 和钙粘素在胶质瘤中的表达及临床意义

目的探讨PTEN和钙粘素(E-cadherin, E-cd)在胶质瘤中的表达及意义.方法采用免疫组化方法检测50例胶质瘤和9例正常脑组织中的PTEN和E-cd蛋白的表达.结果 PTEN 和E-cd 在正常脑组织中的阳性表达率均为100%;PTEN 在Ⅰ～Ⅱ级和Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤中阳性表达率分别为80%、52%,组织学分级之间有显著差异(P＜0.05),与对照组之间有显著差异(P＜0.05);E-cd 在Ⅰ～Ⅱ级和Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤中阳性表达率分别为40%、24%,组织学分级之间无显著差异(P＞0.05),与对照组之间有显著差异(P＜0.05);PTEN 和E-cd表达在胶质瘤中呈正相关(P＜0.05).结论 PTEN 和E-cd 均在与胶质瘤的发生发展中起重要作用,且有可能与胶质瘤的侵袭性行为有关.     

The role of the PTEN gene in malignant gliomas

This article focuses on the latest data about the role of the gene for phosphatase and tensin homologue located on chromosome 10 (PTEN) in malignant gliomas. PTEN acts as a tumour suppressor gene and plays a critical role in cell cycle progression, angiogenesis, migration, invasions and stem cell regulation. Furthermore, there is an interaction with other tumour suppressor genes. We discuss the role of miRNAs in modulating PTEN expression and also PTEN's role in the nucleus.     

小儿脑胶质瘤p16基因的表达

目的：检测２０例小儿脑软质瘤中Ｐ１６基因及其蛋白的存在情况。方法用聚合酶链式反应－单链构象多态性分析和免疫组织化学技术检测了２０例１－１４岁小儿脑胶质瘤。成果显示Ｐ１６基因和Ｐ１６蛋白的丢失率分别为５０％（１０／２０％）及（５／２０）。结论本结果提示Ｐ１６基因和蛋白缺失可能与部分小儿脑有质瘤发生,发展有关。     

Analysis of the PTEN gene in human meningiomas

N. Peters, R. Wellenreuther, B. Rollbrocker, Y. Hayashi, B. Meyer-Puttlitz, E-M. Duerr, D. Lenartz, D.J. Marsh, J. Schramm, O.D. Wiestler, R. Parsons, C. Eng & A. von Deimling (1998) Neuropathology and Applied Neurobiology 24, 3–8
Analysis of the PTEN gene in human meningiomas
Previous observations demonstrated that the neurofibromatosis type 2 gene (NF2) plays an important role in the pathogenesis of the transitional, fibroblastic and malignant variants of human meningiomas. No specific genes have been associated with the pathogenesis of meningothelial meningiomas and with the progression to anaplastic meningiomas. However, allelic losses on chromosomal arms 1p, 10q and 14q have been implicated in the process of malignant progression. Recently, PTEN (phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten) also termed MMAC1 (mutated in multiple advanced cancers 1) or TEP1 (TGF—regulated and epithelial cell-enriched phosphatase), emerged as a candidate gene on chromosome 10q23.3. Initial studies revealed mutations of PTEN in limited series of glioblastomas, breast, kidney and prostate carcinomas mainly as cell lines. In order to evaluate the involvement of PTEN in the development of meningiomas, we have analysed the entire coding sequence of the gene in a series of 55 meningiomas (WHO grade I), 10 atypical meningiomas (WHO grade II) and 10 anaplastic meningiomas (WHO grade III). No PTEN mutations were seen in the WHO grade I meningiomas. However, one of the anaplastic meningiomas carried a somatic mutation. In addition, all tumours were examined for the presence of homozygous deletions of PTEN but these were not detected in any of the meningiomas. Our data suggest that mutations in PTEN are not involved in the formation of low grade meningiomas, but may contribute to malignant progression in a fraction of anaplastic meningiomas.     

端粒酶基因hTERT在脑胶质瘤的表达及与肿瘤增殖相关性的研究

目的研究人类端粒酶催化亚单位(hTERT)mRNA在胶质瘤的表达情况,探讨hTERT基因表达与胶质瘤增殖的关系.方法应用原位杂交方法检测45例胶质瘤标本、8例正常脑组织标本中hTERTmRNA的表达,采用免疫组织化学法测定增殖指数(PCNA LI).结果hTERTmRNA总的阳性表达率为60.0%(27/45例),低度恶性组为31.3%(5/16例),高度恶性组为75.9%(22/29例);8例正常脑组织均为阴性.高度恶性组与低度恶性组、正常组间相比较均有显著性差异(P＜0.05)hTERT阴性组PCNA LI均低于hTERT阳性组,胶质瘤hTERT mRNA表达率与肿瘤增殖指数呈正相关(r=0.727,P＜0.05).结论端粒酶hTERT在正常脑组织中未见表达,而在胶质瘤标本呈不同程度的表达,阳性表达率与肿瘤病理分级呈正相关,与肿瘤增殖程度一致.表明端粒酶hTERT的激活可能发生在胶质瘤的癌变过程中,并起关键性作用,有可能成为靶向基因治疗的候选基因.     

脑胶质瘤中PTEN、MMP2与MMP9表达的研究

目的探讨PTEN、MMP2与MMP9在脑胶质瘤增殖、侵袭过程中的相互作用机制。方法应用SP 免疫组化法检测了50例不同级别脑胶质瘤中的3种蛋白表达情况。结果不同级别的脑胶质瘤中3种抗体的表达程度不同,Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级肿瘤之间的表达差异具有统计学意义(P<0．01);PTEM与MMP2、MMP9在脑胶质瘤中的表达呈负相关(rMMP2=-0．27,rMMP9=-O．35,P<0．01)。结论 PTEN表达缺失可引起基质金属蛋白酶的过表达,从而使脑胶质瘤的侵袭性增强。     

胶质瘤中PTEN、FAK与Ki67表达的研究

目的 探讨PTEN、FAK与Ki67在胶质瘤增殖、侵袭过程中的相互作用。方法 应用SP免疫组化法检测了50例不同级别胶质瘤中的三种蛋白表达情况。结果 不同级别的胶质瘤中PTEN、FAK与Ki67的表达水平不同,Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级肿瘤之间三者表达差异显著;PTEN与FAK、Ki67在胶质瘤中的表达呈负相关。结论提示PTEN表达缺失可引起FAK及Ki67的过表达,从而加强胶质瘤的增殖和侵袭。     

Adenovirus-mediated gene therapy of experimental gliomas

The efficacy of adenovirus (ADV)-mediated gene therapy to treat brain tumors was tested in a syngeneic glioma model. Tumor cells were transduced in situ with a replication-defective ADV carrying the herpes simplex virus thymidine kinase (HSV-tk) gene controlled by the Rous sarcoma virus promoter. Expression of the HSV-tk gene enables the transduced cell to convert the drug ganciclovir to a form that is cytotoxic to dividing cells. Tumors were generated in Fischer 344 rats by stereotaxic implantation of 9L gliosarcoma cells into the caudate nucleus. Eight days later, the tumors were injected either with the ADV carrying the HSV-tk (ADV-tk) gene or a control ADV vector containing the β-galactosidase (ADV-βgal) gene and the rats were treated with either ganciclovir or saline. Tumor size was measured 20 days after implantation of 9L cells or at death. Rats treated with ADV-βgal and ganciclovir or with ADV-tk and saline had large tumors. No tumors were detected in animals treated with ADV-tk and with ganciclovir at doses ≥80mg/kg. An infiltrate of macrophages and lymphocytes at the injection site in animals treated with ADV-tk and ganciclovir indicated an active local immune reaction. In survival studies, all animals treated with ADV-tk and ganciclovir have remained alive longer than 80 and up to 120 days after tumor induction whereas all untreated animals died by 22 days. These results demonstrate that ADV-mediated transfer of HSV-tk to glioma cells in vivo confers sensitivity to ganciclovir, and represents a potential method of treatment of brain tumors. © 1994 Wiley-Liss, Inc.