周期性张应力诱导成纤维细胞凋亡中p38MAPK信号通路的作用

背景：当牙齿受异常咬合力时会导致牙体吸收、牙周组织的大量破坏。目的：研究牙周膜成纤维细胞在受到周期性张应力刺激后是否发生凋亡及p38MAPK信号通路是否参与该凋亡过程。方法：取4～7代成纤维细胞,同步化后随机分为对照组、加力组和SB203580组。加力组和SB203580组细胞加载力值为12%表面应变率,加力频率为6个循环/min,即5s拉伸,5s松弛。SB203580组细胞在加力前1h加入终浓度为20mmol/L的p38MAPK抑制剂SB203580。分别在加力6,12,24h,取各组细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR检测细胞凋亡基因baxmRNA的表达。结果与结论：与对照组比较,加力后成纤维细胞凋亡率及baxmRNA表达增加（P〈0.05）,且随着加力时间的延长而增强,12h达高峰,之后逐渐下降。与加力组比较,SB203580组对应时间点细胞凋亡减少（P〈0.05）,baxmRNA表达降低。说明细胞受到力学刺激会发生凋亡,而丝裂原活化蛋白激酶p38MAPK信号通路参与了该凋亡过程。     

p38MAPK信号通路与应力介导成肌细胞的凋亡

背景：在体内条件下,细胞力学的功能研究因其所处生理环境的复杂性、实验条件的不易控制而很难得到满意结果。目的：在成功构建成肌细胞体外培养-力学刺激模型的基础上,研究p38MAPK信号通路在成肌细胞凋亡中的作用及其机制。方法：将体外培养的C2C12细胞分为对照组和SB203580组,SB203580组中加入20mmol/L的p38MAPK抑制剂SB203580。应用细胞应力加载装置FlecellStrainUnit-5000T给细胞提供15%的力值,分别施加0,6,12,24h的周期性张应力。每分钟10个循环,每循环包括3s牵张,3s松弛。Hoechst33258染色观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;RT-PCR法检测促凋亡基因baxmRNA的表达;Westernblot检测信号通路中p38MAPK和p-p38MAPK蛋白的表达。结果与结论：随着加力时间的延长,细胞逐渐出现核固缩及凋亡小体,凋亡率增加（P〈0.05）,baxmRNA表达增多（P〈0.05）;细胞p38MAPK和p-p38MAPK蛋白均在加力6h达到最低,此后逐渐升高。p38MAPK抑制剂SB203580可抑制加力引起的细胞凋亡,减少baxmRNA及p38MAPK和p-p38MAPK蛋白的表达（P〈0.05）。说明p38MAPK信号通路在应力介导的成肌细胞凋亡中起到重要的作用。     

p38丝裂素活化蛋白激酶与周期性张应力介导牙周膜成纤维细胞的增殖

背景:体内环境的复杂多变,使得在体外研究机械应力对细胞的作用存在着一定难度。目的:探讨p38丝裂素活化蛋白激酶信号通路在周期性张应力对人牙周膜成纤维细胞增殖中所产生的影响及其机制。方法:构建人牙周膜成纤维细胞体外培养-力学刺激模型,利用多通道细胞牵张应力加载系统,分别对细胞加以1,6,12,24h的周期性张应力,不加力组作为对照组,并在对照组和加力12h组分别加入p38丝裂素活化蛋白激酶特异性抑制剂SB203580。细胞计数试剂8检测细胞增殖情况;RT-PCR检测细胞和增殖细胞核抗原的表达。结果与结论:加力1h时细胞增殖得到促进,6h时继续上升,12h时达到高峰,24h增殖受到抑制;SB203580可抑制细胞增殖和增殖细胞核抗原mRNA的表达。说明在一定时间范围内,周期性张应力可促进人牙周膜成纤维细胞增殖,但随时间延长,增殖受到抑制;p38丝裂素活化蛋白激酶信号通路在周期性张应力介导的人牙周膜成纤维细胞增殖中发挥重要作用。     

周期性张应力对成纤维细胞凋亡的影响及其调控机制

背景:在体内条件下,细胞力学的功能研究因其所处生理环境的复杂性、实验条件的不易控制而很难得到满意结果.目的:探讨周期性张应力对成纤维细胞凋亡的作用及影响机制.方法:采用多通道细胞牵张应力加载系统,以成纤维细胞为对象构建细胞体外培养-力学刺激模型.加力组成纤维细胞分别给予周期性张应力刺激6,12,24 h,力值定为12%surface elongation,频率为6 cycles/min,每一循环包括3 s stretch/3 s relaxation,并设立正常对照组.采用Hoechst33258染色检测细胞凋亡情况,以流式细胞仪分析细胞周期,应用酶标仪测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的活性.结果与结论:正常对照组细胞核为弥散均匀的圆形或椭圆形荧光,加力组细胞核或细胞质内可见致密浓染的颗粒、新月体或环状荧光.与正常对照组比较,加力组细胞周期显著延长(P＜0.01);与加力6 h组比较,加力12,24 h组细胞周期均显著缩短(P＜0.01),而加力24 h组细胞周期略长于加力12 h组.与正常对照组比较,加力组细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性均显著升高(P＜0.01);加力12 h组细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性显著高于加力6 h组(P＜0.01).表明周期性张应力可以诱导成纤维细胞凋亡,在12 h内加力时间越长,早期凋亡越明显,且能够改变其细胞周期,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3参与了此过程.     

p38MAPK信号通路与应力介导成肌细胞的凋亡(英文)

背景:在体内条件下,细胞力学的功能研究因其所处生理环境的复杂性、实验条件的不易控制而很难得到满意结果。目的:在成功构建成肌细胞体外培养-力学刺激模型的基础上,研究p38MAPK信号通路在成肌细胞凋亡中的作用及其机制。方法:将体外培养的C2C12细胞分为对照组和SB203580组,SB203580组中加入20mmol/L的p38MAPK抑制剂SB203580。应用细胞应力加载装置FlecellStrainUnit-5000T给细胞提供15%的力值,分别施加0,6,12,24h的周期性张应力。每分钟10个循环,每循环包括3s牵张,3s松弛。Hoechst33258染色观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;RT-PCR法检测促凋亡基因baxmRNA的表达;Westernblot检测信号通路中p38MAPK和p-p38MAPK蛋白的表达。结果与结论:随着加力时间的延长,细胞逐渐出现核固缩及凋亡小体,凋亡率增加(P<0.05),baxmRNA表达增多(P<0.05);细胞p38MAPK和p-p38MAPK蛋白均在加力6h达到最低,此后逐渐升高。p38MAPK抑制剂SB203580可抑制加力引起的细胞凋亡,减少baxmRNA及p38MAPK和p-p38MAPK蛋白的表达(P<0.05)。说明p38MAPK信号通路在应力介导的成肌细胞凋亡中起到重要的作用。     

p38 MAPK信号转导通路与椎间盘退变

p38 MAPK信号通路是丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)介导的信号转导通路的重要分支,它在炎症、细胞应激、凋亡、细胞周期和生长等多种生理和病理过程中起重要作用.既往在骨关节炎的研究中发现,p38参与炎性因子的激活、软骨细胞的凋亡等,与骨关节炎的病理过程密切相关.椎间盘退变也存在炎性反应、细胞凋亡等病理变化,这其中p38 MAPK信号转导通路发挥的作用尚不明确.现将既往此类文献加以综述.     

p38MAPK信号转导通路与肿瘤关系的最新研究进展

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)级联是细胞内广泛存在的一类丝/苏氨酸蛋白激酶超家族,其亚族主要包括细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶/应激激活蛋白激酶(JNK/SAPK)和p38MAPK.他们主要是将细胞外信号转入细胞核内并引起相应变化的重要信号通路,调节细胞生长、分化、对环境的应激适应、炎症反应等多种...     

P38MAPK信号传导通路与炎症性肠病

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen—actived protein kinase,MAPK)介导了细胞的生长、发育、分裂、死亡、以及细胞间的功能同步等多种细胞生理过程。目前在哺乳动物中已发现和成功克隆了ERK、JNK／SAPK、P38MAPK、BRK5四个MAFK亚族，这些MAPK介导了炎性细胞子、细菌产物、物理、化学应激等多种刺激引起的细胞反应。在生物进化过程中，MAPK信导传导的三级激酶级联反应高度保守，即MAPKKK(MAP kinase kinase kinase)→MAPKK(MAP kinase kinase→MAPK。细胞受到刺激后，MAPKKK首先被磷酸化而激活，然后转而磷酸化激活MAP-KK，激活后的MAPKK通过对苏氨酸和酩氨酸双位点的磷酸化激活MAPK。不同的MAPK被不同的细胞外刺激所调节，并具有不同的底物作用特异性。     

缺血预处理星形胶质细胞GDNF抑制p38MAPK信号通路减轻神经元凋亡

目的研究缺血预处理星形胶质细胞分泌GDNF抑制p38MAPK信号通路发挥脑保护作用。方法原代培养神经元及星形胶质细胞,给予缺血预处理,将星形胶质细胞培养基制备成条件培养基,沉默GDNF基因的培养基作为另一种条件培养基,将神经元分为对照组、预处理组、预处理+缺血组、缺血组,应用不同条件培养基孵育神经元,流式细胞术检测神经元凋亡,Western Blot法检测神经元p38MAPK及p-p38MAPK的表达。结果预处理+缺血组和缺血组神经元凋亡率明显增高(P<0.05),加入ACM2后凋亡率较ACM1和ACM3两组均减低(P<0.05)。每组神经元的p38MAPK蛋白表达均无明显变化(P>0.05);预处理+缺血组及缺血组p-p38MAPK的蛋白表达均明显高于对照组和预处理组(P<0.05),预处理+缺血组p-p38MAPK的蛋白表达均较缺血组低(P<0.05),加入ACM2组的p-p38MAPK蛋白表达低于ACM1和ACM3两组(P<0.05)。结论缺血预处理后星形胶质细胞分泌GDNF抑制p38MAPK信号通路的激活从而减少神经元凋亡,起到脑保护作用。     

p38 MAPK抑制物对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及凋亡信号通路的影响

目的探讨p38 MAPK抑制物SB20358(SB)对心肌缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用及凋亡信号通路的影响。方法选择45只250~300 g雄性SD大鼠,通过阻断其左冠状动脉前降支(LAD)30 min再灌注180 min制备I/R损伤模型。随机分3组(n=15):溶剂对照组(Vehicle组)、低剂量SB预处理组(SB-L组)和高剂量SB预处理组(SB-H组);同时选取15只同周龄SD大鼠仅穿线但不结扎(Sham组)。SB-L组和SB-H组分别于LAD结扎前30 min注射50μg/kg、100μg/kg SB,其余两组注射等体积的生理盐水。分别在术前(T0)、缺血30 min后(T1)、再灌注60 min(T2)、120 min(T3)及180 min后(T4)检测各组血浆肿瘤坏死因子(TNF-α)水平及I/R后的心功能情况[舒张末期压力(LVEDP)、左室收缩期平均压(LVSP)、短轴缩短率(FS)和射血分数(EF)],处死大鼠并通过TTC染色分析缺血程度和梗死程度,将心脏组织包埋并采用HE染色观察各组的心肌形态学变化,同时采用Western blot检测心肌梗死区p38及其磷酸化形式的p-p38的蛋白水平。结果与Sham组相比,Vehicle组除T0外的I/R其余时间点的TNF-α水平均升高,LVSP、FS和EF均降低,LVEDP、心肌p-p38/p38值及缺血和梗死程度均升高(P0.05),心肌肌纤维出现断裂溶解及坏死,心肌间质出现水肿且间隙增大,出现坏死灶;给予SB处理后可减轻以上异常指标及心肌病理改变,与Vehicle组的差异均有统计学意义,但仍与Sham组有差异(P0.05)。SB-H组的改善效果优于SB-L组(P0.05)。结论 SB对大鼠心肌I/R损伤有改善作用,可降低心肌缺血及梗死程度,改善心功能和炎症反应并抑制p38 MAPK信号通路活化。     

乌司他丁经p38MAPK通路对脓毒症大鼠急性肾损伤影响的研究

目的研究乌司他丁（UTI）经p38MAPK通路对脓毒症大鼠急性肾损伤（AKI）的影响。 方法采用脂多糖（LPS）诱导脓毒症AKI大鼠模型,将32只SD大鼠随机分为4组,空白对照组、脂多糖组（LPS组）、乌司他丁处理组（LPS+UTI组）、p38MAPK阻断剂干预组（LPS+SB组）,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测肾组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和转化生长因子（TGF-β1）的表达,采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blotting）检测肾组织中磷酸化p38MAPK蛋白的表达,并在光镜和电镜下观察肾小球及肾小管的变化。 结果与空白对照组相比,LPS组光镜下肾小球充血肿胀,肾球囊扩张,近曲肾小管上皮细胞肿胀明显,细胞核淡染,部分出现核浓缩、破碎甚至溶解现象,肾间质充血、水肿、大量炎性细胞浸润;电镜下肾小球毛细血管内皮细胞窗孔消失或闭塞,基底膜部分断裂消失,足细胞足突广泛融合消失,近曲肾小管上皮细胞质内线粒体排列紊乱,结构模糊,高度肿胀,有空泡样现象;均提示脓毒症肾损伤严重,且肾组织TNF-α、TGF-β1和p38MAPK蛋白的表达明显升高。与LPS组相比,LPS+UTI组肾组织TNF-α、TGF-β1和p38MAPK蛋白的表达均较LPS组下降［TNF-α（pg/ml）：4915.00±267.06 vs 8836.00±739.51;TGF-β1（pg/ml）：257.71±23.88 vs 354.39±29.44;p-p38MAPK/β-actin：0.158±0.022 vs 0.300±0.044,均P＜0.05］,LPS+SB组肾组织中TNF-α、TGF-β1和p38MAPK蛋白的表达较LPS组均下降［TNF-α（pg/ml）：4856.75±167.23 vs 8836.00±739.51;TGF-β1（pg/ml）：249.56±23.42 vs 354.39±29.44;p-p38MAPK/β-actin：0.136±0.017 vs 0.300±0.044,均P＜0.05］,但LPS+UTI组与LPS+SB组差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论乌司他丁对脓毒症急性肾损伤有保护作用,且可能是通过抑制TGF-β1/p38MAPK信号转导通路来实现的。     

p38MAPK与新生大鼠成骨细胞的增殖、分化和凋亡

背景:p38MAPK是MAPK信号转导途径的通道之一.但是,p38MAPK如何参与成骨细胞增殖、分化的调控,是否与成骨细胞的凋亡有关,目前尚未见相关文献报道.目的:观察p38MAPK对新生大鼠成骨细胞增殖、分化和凋亡的影响.设计、时间及地点:单一样本观察,细胞学体外对比观察,于2007-05/2008-03在解放军兰州军区总院骨科研究所细胞培养室完成.材料:新生24 h SD大鼠9只用于分离成骨细胞;SB203580(p38MAPK的阻断剂)为Sigma公司产品.方法:取新生SD大鼠头盖骨成骨细胞.药物刺激组分别加入不同浓度(1×10-6,1×10-7,1×10-8mol/L)的17β-雌二醇、葛根素;含阻断剂组提前30 min添加10 μmol/LSB203580阻断信号转导通路,再加药物;设空白对照组.主要观察指标:作用72 h后用四甲基偶氮唑盐法与对硝基苯磷酸法测定细胞的增殖能力和碱性磷酸酶活性,AnnexinV-FITC/P1双标记流式细胞仪分析细胞早期凋亡.结果:加入17β-雌二醇或葛根素药物后,成骨细胞的增殖、分化明显增强,与空白对照组比较差异有显著性意义(P<0.05);阻断p38MAPK信号转导通路后,细胞增殖未受明显抑制(P>0.05);分化受到明显抑制,与未阻断组比较差异具有非常显著性意义(P< 0.01).流式细胞仪分析结果显示,与对照组相比,药物组细胞早期凋亡率明显降低(P< 0.05);与药物刺激组相比,含阻断剂组细胞早期凋亡率无明显变化(P>0.05).结论:17β-雌二醇、葛根素能促进成骨细胞的增殖和分化并抑制其凋亡;p38MAPK在成骨细胞分化过程中发挥重要作用,对成骨细胞的增殖、凋亡无明显影响.     

p38MAPK对甲胎蛋白诱导的树突细胞凋亡的影响

目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）在甲胎蛋白（AFP）诱导树突状细胞凋亡过程中的作用。方法联合细胞因子体外诱导培养人外周血来源树突状细胞。Western Blot检测树突状细胞caspase-3及p38MAPK的表达情况。结果AFP诱导树突状细胞凋亡的过程中伴随caspase-3及p38MAPK的表达增加,SB203580能够明显抑制Cas-pase-3及p38MAPK的表达,DEVD-fmk未能阻断p38MAPK的高表达。结论p38MAPK信号转导通路可能是AFP诱导树突状细胞凋亡的上游信号,并起到促进树突状细胞凋亡的作用。     

p38MAPK对肿瘤细胞ATM、ATR和p53信号通路的影响

目的 研究p38MAPK对细胞周期信号转导通路中重要蛋白激酶ATM、ATR、P53的影响并探讨其可能的机制.方法 采用人类结肠癌细胞株HT-29和肺癌细胞株SPAC-1进行研究,分别使用紫外线（UV）刺激和p38MAPK特异性抑制剂SB203580抑制肿瘤细胞中的p38MAPK,通过Western blot技术检测ATM、ATR、P53蛋白磷酸化情况,同时用real-time PCR技术检测细胞中相应基因的表达情况.结果 紫外线能上调ATM、ATR、p53和p38MAPK基因的表达,使用p38MAPK特异抑制剂SB203580能够使ATM、ATR和p53的表达降低.结论 P38MAPK可以调控ATM、ATR和p53的表达,ATM-Chk2信号通路和p38MAPK信号通路之间可能存在交互联系.     

大承气汤对脓毒症大鼠p38MAPK信号转导通路的影响

目的 观察大承气汤对脓毒症大鼠肝脏p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)表达水平的影响,进一步揭示大承气汤治疗脓毒症的机制.方法 将60只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(n=20)、脓毒症组(n=20)、大承气汤组(n=20),应用大鼠盲肠结扎穿孔(CLP)复制脓毒症模型.假手术组开腹轻扰肠管后关腹,脓毒症组、大承气汤组均为脓毒症模型.大承气汤组在术前2 h和术后每4 h予以大承气汤灌胃.分别于术后2、6、12、24 h每组取5只大鼠,腹主动脉采血,用ELISA方法 检测大鼠血浆IL-6、TNF-α浓度,取肝组织进行免疫组化检测及观察p38MAPK表达.结果 与脓毒症组比较,大承气汤组大鼠肝脏p38MAPK表达水平受到抑制,炎症因子释放减少(P<0.05).结论 大承气汤对脓毒症大鼠的肝脏产生保护作用,可能是由于抑制大鼠肝脏p38MAPK表达来实现的.     

Dietary polyphenol canolol from rapeseed oil attenuates oxidative stress-induced cell damage through the modulation of the p38 signaling pathway

Canolol (CAO) is a main phenolic compound with remarkable antioxidative properties that is generated in rapeseed oil during microwave pressing. The objective of this study was to identify the protective effect of CAO in hydrogen peroxide (H₂O₂)-triggered oxidative stress and reveal the role of the p38 MAPK pathway during the protective process. CAO treatment showed an observable cytoprotective effect. Results showed that CAO significantly improved H₂O₂-stimulated cell death, and diminished ROS production and malondialdehyde (MDA) level. Moreover, CAO increased glutathione (GSH) content and promoted the activities of superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT). As a result, apoptosis was ameliorated and depletion of the mitochondrial membrane potential was restored. Western blotting analysis demonstrated CAO downregulated the expression of caspase-3 and decreased the ratio of Bax/Bcl-2. Notably, the phosphorylation of p38 MAPK was inhibited by CAO in H₂O₂-induced apoptosis, which was confirmed by its inhibitor (SB203580). Taken together, our study demonstrated the pivotal role of the p38 MAPK pathway in the cytoprotective effect of CAO on oxidative stress-induced cell damage, suggesting CAO is a promising antioxidant in food and health-related fields.

Canolol extracted from rapeseed oil attenuated oxidative stress-induced apoptosis and cellular redox status imbalance by inhibition of p38 phosphorylation.