肝星状细胞增殖与p38丝裂原活化蛋白激酶信号传导通路的关系

背景：肝星状细胞的激活、增殖导致肝纤维化,p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路可参与调控细胞增殖。目的：探讨SB203580作用于乙醛刺激的大鼠肝星状细胞后p38丝裂原活化蛋白激酶活性变化和细胞增殖变化。方法：体外培养大鼠肝星状细胞株,在乙醛干预的基础上加入不同浓度的p38特异性抑制剂SB203580进行培养,并设置对照。以Westernblot检测磷酸化p38蛋白表达水平变化,MTT比色法检测细胞增殖。结果与结论：乙醛刺激后大鼠肝星状细胞内磷酸化p38水平增强,细胞增殖明显。使用5,10,20μmol/L SB203580能明显抑制乙醛刺激的肝星状细胞增殖（P〈0.05）,加大浓度至30μmol/L时,抑制作用更明显（P〈0.01）,抑制率为43.9%,而磷酸化p38水平也降低（P〈0.05）。结果证实,抑制p38丝裂原活化蛋白激酶活性可能影响肝星状细胞的增殖。     

β-arrestin1通过活化p38信号转导通路激活肝星状细胞促进肝纤维化

目的 探讨β-arrestin1(ARRB1)在肝纤维化中的作用,阐明ARRB1和p38信号转导通路诱导肝星状细胞活化从而促进肝纤维化的机制。方法 选取C57BJ/6L背景的雄性小鼠12只,随机分为对照组和模型组,每组6只小鼠,采用浓度为20%的四氯化碳诱导肝纤维化小鼠模型,并于临床收集肝硬化患者的肝组织及健康对照志愿者的肝组织样本。采用HE和天狼星红染色来评估肝纤维化情况。通过免疫组织化学法、蛋白免疫印迹法及实时荧光定量PCR法检测ARRB1、p38、磷酸化p38(pp38)及纤维化相关指标α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Ⅰ型胶原蛋白的表达水平。在人肝星状细胞LX2中使用转化生长因子-β(TGF-β)细胞因子诱导其活化,并分析ARRB1的表达水平;进而利用小干扰RNA和质粒沉默或者过表达ARRB1,同时配合p38特异性抑制剂（SB203580）,揭示两者的调控关系。结果 在肝纤维化组织中ARRB1表达升高,p38信号活化增强（P均<0.05）。在肝星状细胞LX2中,TGF-β可以激活肝星状细胞并表达ARRB1和增强p38信号。ARRB1表达的升高或抑制可以相应地影响p38信号从...     

p38丝裂原活化蛋白激酶基因敲除对小鼠胚胎成纤维细胞增殖的影响

目的 研究p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)基因敲除对小鼠胚胎成纤维细胞增殖的影响.方法 用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测小鼠胚胎成纤维细胞中p38+/+和p38-/-的表达;利用噻唑蓝(MTT)比色法绘制p38+/+和p38-/-细胞的生长曲线,用流式细胞仪检测细胞周期各时相所占百分比.结果 绘制的生长曲线表明,p38-/-细胞的生长速率明显下降,增殖受到抑制,细胞倍增时间延长,培养96 h时,p38-/-细胞数量较p38+/+减少了15.5%,说明p38基因敲除明显抑制了G2/M的进程.流式细胞仪检测结果显示,p38+/+细胞中G0/G1期细胞占34.47%,G2/M期占10.81%,S期占54.72%;p38-/-细胞中G0/G1期占48.49%,G2/M期占4.06%,S期占47.44%.与p38+/+细胞相比,G1期的p38-/-细胞增加了40.7%,S期则减少了13.3%,说明p38基因敲除抑制了G1/S的进程.结论 p38基因敲除能够阻滞细胞周期进展,减慢细胞增殖速度.     

参与骨关节炎的P38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路

背景：p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路属于丝裂原活化蛋白激酶家族成员,在骨关节炎的发生发展中发挥重要作用。目的：对骨关节炎病理进程中 p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路相关作用机制的研究进展进行综述。方法：由第一作者用计算机检索中国期刊全文数据库和 PubMed 数据库,检索词分别为“p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路、骨关节炎、关节软骨、软骨细胞”和“p38MAPK signal transduction pathway, osteoarthritis, Articular cartilage,Chondrocyte”。从 p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路简介,p38丝裂原活化蛋白激酶在骨关节炎中的作用,p38丝裂原活化蛋白激酶阻断剂在骨关节炎中的应用3方面进行总结。共检索到可应用文献90篇,按纳入标准对文献进行筛选,共纳入46篇文章。结果与结论：p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路与软骨细胞的肥大化和钙化、软骨细胞的凋亡、软骨基质金属蛋白酶的合成、软骨炎性细胞因子的产生等有密切关系,对骨关节炎的发生发展有重要影响。p38丝裂原活化蛋白激酶通过多种复杂的机制参与骨关节炎的形成和发展,对其起到极其重要的作用,因此阻断 p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路可能成为骨关节炎治疗的新靶点。     

p38丝裂原激活蛋白激酶特异性抑制剂SB203580减轻小鼠气道炎症及黏液高分泌

目的探讨小鼠吸入丙烯醛后是否出现气道黏液高分泌及其产生机制,观察p38丝裂原激活蛋白激酶（p38MAPK）信号通路在气道炎症损伤、黏液高分泌中的作用,以及应用p38MAPK特异性抑制剂SB203580干预后对气道炎症、MUC5AC的影响。方法64只小鼠随机分为四组丙烯醛模型组、丙烯醛＋SB203580治疗组、生理盐水对照组和SB203580对照组,每组16只小鼠。于第7和21d各组随机处死8只,采集支气管肺泡灌洗液（BALF）和肺组织标本。BALF作细胞总数及分类计数,石蜡包埋肺组织切片HE染色观察形态学,AB-PAS染色了解气道杯状细胞和黏液物质,免疫组织化学及RT-PCR方法进行黏蛋白基因半定量分析,Western-Blot定量分析信号通路蛋白。结果小鼠吸入丙烯醛21d后出现明显的气道炎症和黏液高分泌,经SB203580治疗后,炎性细胞浸润减少,杯状细胞增生改善,黏液分泌明显减轻。丙烯醛模型组、丙烯醛＋SB203580治疗组的AB-PAS阳性着色面积比较差异有统计学意义[（15.54±0.93）%比（9.82±0.56）%,P〈0.01];丙烯醛模型组与丙烯醛＋SB203580治疗组之间MUC5AC阳染积分光密度比较差异有统计学意义（0.153±0.017比0.066±0.007,P〈0.01）。拮抗p38MAPK后,MUC5ACmRNA表达量下降（7d0.934±0.061,21d1.041±0.026）,与模型组相应时间点比较差异有统计学意义（P〈0.01）。治疗组磷酸化p38MAPK表达与模型组比较明显下调（0.844±0.014比1.004±0.039,P〈0.01）。结论小鼠吸入丙烯醛模型中,p38MAPK信号通路调控MUC5AC基因转录,SB203580可减轻气道炎症和气道黏液高分泌。     

盐酸氨溴索对AECOPD患者p38丝裂原活化蛋白激酶通路的影响研究

目的探讨盐酸氨溴索对慢性阻塞性肺疾病急性加重（AECOPD）患者p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）通路的影响。方法90例AECOPD患者在给予抗感染、解痉平喘等对症支持治疗的基础上,根据应用祛痰药物不同,随机分为生理盐水组、溴己新组、氨溴索组,每组30例,监测治疗过程中白细胞计数（WBC ）、中性粒细胞比例（N％）、超敏C-反应蛋白（hs-CRP）、红细胞沉降率（ESR）变化;测定3组患者入院当天及用药治疗7 d后血清中p38MAPK、白细胞介素（IL）-8、IL-10的变化情况。结果经治疗后患者血常规、CRP、ESR较治疗前明显下降;并且氨溴索组改善情况优于溴己新组;氨溴索组治疗后第7天,与生理盐水组、溴已新组治疗后第7天比较,以氨溴索组的p38M A PK、IL-8、IL-10下降最明显,3组比较差异有统计学意义（ P＜0．01）。结论氨溴索通过下调p38MAPK通路活化,调节AECOPD患者血清IL-8、IL-10,是其抗炎作用机制之一。     

肝星状细胞活化机制研究进展

肝纤维化不是一个独立的疾病,而是许爹漫性肝病共同的病理过程,且为最终发展为肝硬化、肝癌的必经阶段。近年来,大量实验业已证实,肝星状细胞（HSCs）是致肝纤维化的主要效应细胞,     

结膜下注射50μmol/L p38信号转导通路抑制剂SB203580对角膜细胞的毒性

背景:p38 信号转导通路抑制剂SB203580 具有抗炎及抑制肿瘤血管生长的作用,但其刺激性和毒性成为眼表应用的障碍.目的:观察结膜下注射SB203580 对大鼠角膜的毒性作用.方法:分别于SD 大鼠右眼结膜下注射0.04 mL 50 μmol/L SB203580 或等量生理盐水,1 次/d,共7 d.注射后第7 天记录各组角膜炎症指数,并摘取角膜行组织学及透射电镜检查.结果与结论:裂隙灯显微镜下观察发现SB203580 注射部位结膜呈可逆性贫血状改变,在注射次日消失;注射SB203580或生理盐水后,大鼠角膜炎症指数差异无显著性意义(P > 0.05);但注射生理盐水后睫状充血程度重于注射SB203580 的大鼠(P < 0.05);组织学检查发现所有大鼠角膜上皮层完整,基质层排列规则,内皮层连续,透射电镜观察发现细胞结构及细胞器无明显异常.提示结膜下注射0.04 mL 50 μmol/L SB2036580 对大鼠角膜无明显毒性作用.     

p38MAPK信号转导通路与肿瘤关系的最新研究进展

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)级联是细胞内广泛存在的一类丝/苏氨酸蛋白激酶超家族,其亚族主要包括细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶/应激激活蛋白激酶(JNK/SAPK)和p38MAPK.他们主要是将细胞外信号转入细胞核内并引起相应变化的重要信号通路,调节细胞生长、分化、对环境的应激适应、炎症反应等多种...     

脊髓压迫性损伤后p3 8MAPK信号转导通路的时间变化规律

目的研究脊髓压迫性损伤后p38MAPK信号转导通路在其中的变化规律和可能的意义.方法制备脊髓压迫伤动物模型,用Westerm blot检测伤后0,30 min,6,24,72 h组织中p38MAPK的变化情况.结果脊髓损伤后局部组织中p38MAPK存在明显的变化规律30 min时出现明显表达上调,6 h达到高峰,以后逐渐下降,而正常脊髓组织中未检测出明确的表达.结论p38MAPK信号转导通路参与了脊髓损伤后的信号转导,其变化规律有可能对脊髓损伤的治疗具有参考意义.     

N-乙酰半胱氨酸对高氧肺损伤保护机制与p38丝裂素活化蛋白激酶途径的相关性研究

目的 观察p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)信号途径在高氧肺损伤中的表达,探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)在高氧肺损伤中的保护作用及机制.方法 将30只幼年Wistar大鼠按随机数字表法分为空气对照组(A组)、高氧暴露组(B组)、高氧+NAC干预组(C组)、高氧+p38MAPK特异性抑制剂(SB203580)干预组(D组)、高氧+NAC+SB203580联合干预组(E组),每组6只.实验7 d后,光镜下观察肺组织病理改变,并行肺损伤评分;测定肺湿/干重(W/D)比值、支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白(TP)含量、肺通透系数;采用免疫组化法检测磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)在肺组织中的分布;用蛋白质免疫印迹法检测p-p38MAPK蛋白含量.结果 与A组比较,高氧各组均有不同程度的肺损伤,但药物干预各组(C、D、E组)肺损伤均较B组有所减轻.免疫组化显示,高氧各组p-p38MAPK阳性表达较A组明显增强,尤高表达在炎性浸润细胞;药物干预后(C、D、E组)p-p38MAPK阳性细胞较B组明显减少.蛋白质免疫印迹法显示,B组p-p38MAPK蛋白含量明显高于A组(0.20±0.03比0.11±0.01,P<0.05);干预后C、D、E组p-p38MAPK蛋白含量低于B组(0.16±0.02、0.15±0.01、0.14±0.02比0.20±0.03,均P<0.05),但仍高于A组(均P<0.05),而C、D、E组间则无明显差异.各组肺W/D比值、BALF中TP含量、肺通透系数改变与p-p38MAPK蛋白含量变化趋势一致.结论 高氧应激可激活损伤肺组织p38MAPK活性;NAC抗氧化肺保护作用机制可能是通过下调高氧诱导p38MAPK的激活而对肺损伤起保护作用.     

达格列净通过p38丝裂原活化蛋白激酶抑制高糖诱导的人肾小球足细胞损伤

目的 探讨达格列净通过p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）信号通路对D-葡萄糖诱导的人肾小球足细胞凋亡、自噬、炎症反应及氧化损伤的影响。方法 体外培养人肾小球足细胞（HGPCs），分为对照组（5 mmol/L D-葡萄糖）、D-葡萄糖组（30 mmol/L D-葡萄糖）、达格列净组（30 mmol/L D-葡萄糖＋50 μmol/L达格列净）、抑制剂组（30 mmol/L D-葡萄糖＋10 μmol/L p38 MAPK通路抑制剂SB 203580）、达格列净＋抑制剂组（30 mmol/L D-葡萄糖＋50 μmol/L达格列净＋10 μmol/L SB 203580）和达格列净＋激活剂组（30 mmol/L D-葡萄糖＋50 μmol/L达格列净＋10 μmol/L p38 MAPK通路激活剂C16-PAF）。对照组与D-葡萄糖组用D-葡萄糖干预24 h；其他组D-葡萄糖干预24 h后相应药物继续干预 24 h。采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）检测细胞活力；采用Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡率；采用ELISA检测白细胞介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、丙二醇（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）的表达水平；采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测酵母ATG6同源物（Beclin-1）、微管相关蛋白1轻链3 Ⅱ（LC3 Ⅱ）mRNA表达水平；采用Western印迹法检测Beclin-1、LC3 Ⅱ、p53、p38 MAPK及p-p38 MAPK蛋白表达。结果 与对照组相比，D-葡萄糖组细胞活力降低（P＜0.05），达格列净组细胞活力升高（P＜0.05），细胞凋亡率，IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA、Beclin-1、LC3 ⅡmRNA和蛋白、p53和p-p38 MAPK蛋白水平升高（P＜0.05），SOD水平降低（P＜0.05）。与D-葡萄糖组相比，达格列净组和抑制剂组细胞凋亡率、IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA、Beclin-1、LC3 ⅡmRNA和蛋白、p53和p-p38 MAPK蛋白水平降低（P＜0.05），SOD水平升高（P＜0.05）。与达格列净组相比，达格列净＋抑制剂组细胞凋亡率、IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA、Beclin-1、LC3 Ⅱ mRNA和蛋白、p53和p-p38 MAPK蛋白水平进一步降低（P＜0.05），SOD水平进一步升高（P＜0.05）；达格列净＋激活剂组与达格列净＋抑制剂组变化趋势相反，与达格列净组差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 达格列净可抑制高糖诱导的人HGPCs的凋亡、自噬、炎症反应及氧化损伤，其作用机制可能与抑制p38 MAPK通路信号转导相关。     

Insulin activates p38 mitogen-activated protein (MAP) kinase via a MAP kinase kinase (MKK) 3/MKK 6 pathway in vascular smooth muscle cells

BACKGROUND: Induction of stress-activated mitogen-activated protein (MAP) kinases such as p38 could be important for the development of cardiovascular diseases since p38 MAP kinase activation stimulates apoptosis, cell growth, prostanoid formation and other cellular dysfunctions when induced by oxidants, hyperosmolarity, or pro-inflammatory cytokines. On the other hand, insulin resistance is one of the most important factors promoting atherogenesis, including cardiovascular diseases, but it is not clear how these different factors transmit their signals intracellularly at the cytosolic and nuclear levels. In this study, we investigated the effect of insulin on p38 mitogen-activated protein (MAP) kinase activation in cultured rat vascular smooth muscle cells (VSMC). MATERIALS AND METHODS: VSMC were obtained from the aortas of male Wistar rats by the media explant technique. After being stimulated by insulin with SB-203580, PD-98059, or GF109203X, the cells were solubilized and the expressions of MAP kinases, MAP kinase kinases and p70 S6 kinase were examined by immunoblot analysis. The amount of DNA synthesis was measured by [3H]thymidine incorporation. RESULTS: Insulin activated p38 MAP kinase phosphorylation in a dose-dependent manner, and the phosphorylation was specifically inhibited by SB-203580, a p38 MAP kinase-specific inhibitor, but not by PD-98059, a specific inhibitor of upstream kinase (MEK), of extracellular signal-regulated kinase (ERK), or GF209203X, a protein kinase C-specific inhibitor. Insulin also activated MAP kinase kinase (MKK) 3/MKK 6 phosphorylation, the upstream kinase of p38 MAP kinase, but neither stress-activated protein kinase (SAPK)/ERK kinase (SEK1/MKK4) nor SAPK/c-jun NH2-terminal protein kinase. Surprisingly, phosphorylation of p70 S6 kinase and an increase of DNA synthesis by insulin were suppressed dose dependently by SB-203580. CONCLUSION: These results have established that insulin activates the p38 MAP kinase cascade via an MKK 3/6 pathway in rat VSMC, independently of a MEK-ERK cascade, and partly regulates cell growth.     

p38信号通路对单侧输尿管结扎大鼠RANTES的影响

目的探讨p38有丝分裂素激活蛋白激酶(MAPK)在单侧输尿管结扎(UUO)大鼠肾组织的表达及活化状态。方法采用免疫组织化学法和Western印迹分析法检测UUO大鼠肾组织p38MAPK的磷酸化水平和RANTES蛋白水平,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测RANTES mRNA的表达。结果RANTES蛋白和RANTES mRNA随着梗阻时间的延长,表达明显上调,同时p38MAPK蛋白活性增高,两者呈显著正相关(P＜0．05)。结论UUO大鼠肾组织中p38MAPK的活化可上调RANTES的表达。