酶联免疫吸附试验定量检测产毒性大肠杆菌定居因子

目的为了特异、敏感和方便地检测产毒性大肠杆菌（ＥＴＥＣ）的ＣＦＡⅠ和ＣＦＡⅡ。方法和结果我们用ＣＦＡⅠ或ＣＦＡⅡ阳性ＥＴＥＣ株免疫的兔抗血清所纯化的抗体,建立了检测ＣＦＡⅠ和ＣＦＡⅡ的ＥＬＩＳＡ试验方法,并且探索了简便的标本处理方法。结论本法特异、敏感、简单易行,适合于临床实验室和流行病学调查应用。     

产毒性大肠杆菌质粒的研究进展

<正> 产毒性大肠杆菌(ETEC)是引起腹泻病的主要病原之一。它引起了各国学者的广泛关注,并以极大的兴趣研究了其致病机理。近年来对大肠杆菌肠毒素的研究进展很快,特别是应用分子生物学和遗传学等方法,不仅证明肠毒素的产生和决定菌毛表面抗原的定居因子都是受质粒控制的,而且已克隆出完整的产肠毒素基因片段,从而更加开阔了人们的眼界,丰富了人们对产毒性大肠杆菌的认识。本文就近年来有关ETEc质粒的研究若干进展综述如下。     

产肠毒素大肠杆菌定居因子I基因克隆与表达

目的:在大肠杆菌DH5α中表达产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenio escherichia coli,ETEC)定居因子CFA/I,检测重组表达的ETEC CFA/I.方法:以质粒pBV220为基础,构建pBV220-CFA/I重组载体,表达产物用SDS-PAGE鉴定,免疫原性实验验证.结果:成功构建了pBV220-CFA/I重组载体,表达产物的分子量与天然蛋白相同,动物免疫试验表明重组菌具有免疫原性.结论:CFA/I基因的成功克隆为今后的ETEC CFA/I候选疫苗研制奠定了基础.     

产肠毒素大肠杆菌定居因子Ⅰ基因克隆与表达

目的：在大肠杆菌DH5α中表达产肠毒素大肠杆菌（Enterotoxigenio eseheriehia coli,ETEC）定居因子CFA／Ⅰ,检测重组表达的ETECCFA／Ⅰ。方法：以质粒pBV220为基础,构建pBV220-CFA／1重组载体,表达产物用SDS—PAGE鉴定,免疫原性实验验证。结果：成功构建了pBV220-CFA/Ⅰ重组载体,表达产物的分子量与天然蛋白相同,动物免疫试验表明重组菌具有免疫原性。结论：CFA／Ⅰ基因的成功克隆为今后的ETECCFA／Ⅰ候选疫苗研制奠定了基础。     

PCR检测产毒性大肠杆菌及初步应用

本文应用聚合酶链反应(PCR)检测产毒性大肠杆菌(ETEC).在ETEC的肠毒素基因内设计合成3对引物,扩增出LT(627bp)和ST(STa;24bp,STb:169bP)基因片段,一次性分型检测各种ETEC,对标准菌株、模拟标本及临床标本进行检测,结果表明PCR有较好的特异性和敏感性,在临床有较好的应用价值.     

SPA协同凝集试验检测肠产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素的研究

本文报道应用葡萄球菌A蛋白(SPA)协同凝集试验检测55株产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素,结果与Y-1细胞培养法基本一致。此外,以血平板上培养菌用多粘菌素及三硝基甲苯溶解制备不耐热肠毒素,用协同凝集试验进行检测,结果较其它测毒方法敏感、特异、简单、经济、是一种检测不耐热肠毒素(LT)可行的方法,特别适用于基层的实验室。     

中西医结合治疗产毒性大肠杆菌肠炎1例

笔者采用电针配合TDP(电磁波康复器)治疗肩周炎37例，效果显著，现报告如下。     

产毒性大肠杆菌（ETEC）中毒力岛分布的研究

目的 了解小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛在产毒性大肠杆菌中的分布,以便于进一步深入研究毒力岛在大肠杆菌中的结构的完整性和功能。方法 PCR扩增和原位杂交及基因序列分析,结果 在检测的93株产毒性大肠杆菌（ETEC）的毒力岛的检出率为32.25%(32/93),而且这些阳性菌株中的毒力岛大部分连接到asntRNA(天门冬氨酸tRNA0位点。结论 产毒性大肠杆菌是致病性较强的病原菌之一,而小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛在产毒性大肠杆菌中阳性率较高的分布。对于进一步研究产毒性大肠杆菌的毒力的变化和毒力的调控以及细菌毒力的进化具有重要意义。     

产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位基因克隆及表达

目的研究克隆并表达产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素Ｂ亚单位。方法合成２条引物用ＰＣＲ法扩增包括产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素（ＥＴＥＣ，ＬＴ）Ｂ亚单位基因编码区及起始密码子上游７９３ｂｐ的ＤＮＡ片段。ＰＣＲ产物克隆入ｐＢｌｕｅＳｃｒｉｐｔＳＫ（－）并转化进入ＸＬ－Ｂｌｕｅ工程菌中。结果经ＥＬＩＳＡ，Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ测定共获得２２株菌表达ＬＴ－Ｂ，表达水平比Ｈ１０４０７高２～３倍。克隆的基因经测序证实有一个碱基置换，但无氨基酸序列改变。结论本工作成功表达了产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素Ｂ亚单位。     

肺吸虫病酶联免疫吸附试验：附96例检测

卫氏肺吸虫病亚■床型及感染者酶联免疫吸附试验的检测结果,光密度均值1:20为0.81±0.26,1:100为0.58±0.33,1:200为0.13土0.10,与既往排卵患者比无显著差异(P<0.05),与现症排卵患者比较差异非常显著(P<0.001),其阳性符合率达100%,而亚临床型阳性检出率仅4.0%,感染者全部阴性.提示酶联免疫吸附试验具有特异性的诊断价值,但血清稀释浓度以1:200为准,可避免假阳性与假阴性.     

实时荧光定量酶联免疫吸附试验检测HBV-DNA的临床意义

目的:探讨实时荧光定量PCR检测HBV- DNA在乙型肝炎的诊断、治疗及判断病情、预防等方面的临床应用价值。方法:运用实时荧光定量PCR和EL ISA法同时检测了乙型肝炎180例和正常献血员5 6例血清中HBV - DNA的含量及其免疫标志物,并对结果进行对比分析。结果:乙肝大三阳95例HBV - DNA阳性达95例(10 0 .0 0 % ) ,显著高于其它各组(P<0 .0 5 ) ,HBV- DNA含量为4 .8×10 7copies·ml- 1 ;小三阳患者HBV- DNA阳性率低于大三阳组(P<0 .0 5 ) ,但平均病毒含量与大三阳组差异无显著性(P>0 .0 5 ) ,高达2 .1×10 7copies·ml- 1 ;单独HBs Ag阳性和单独HBs Ab阳性组HBV- DNA阳性率分别为5 3.85 %、33.33% ,平均病毒含量分别为5 .6×10 5copies·ml- 1、3.8×10 4 copies·ml- 1 ;献血员5 6例血清HBV- DNA阳性3例,其病毒含量低于其它组。结论:实时荧光定量PCR检测HBV- DNA含量比EL ISA法具有更好的灵敏度和特异性,能准确反映HBV在体内的复制情况,这对临床上抗病毒药物的选择和判断疾病的预后意义重大。