补肾益气和活血祛瘀中药治疗血管性痴呆的实验研究

背景血管性痴呆( vascular dementia,VD)是老年期痴呆中常见的一种.补肾益气法、活血祛瘀法是治疗 VD的常用中医治疗方法.而对这两种方法的比较研究尚少. 目的比较补肾益气方、活血祛瘀方对血管性痴呆大鼠的治疗作用,并探讨中药治疗血管性痴呆大鼠的机制. 设计完全随机设计,对照实验研究. 地点与材料地点为浙江省中医院脑病研究室.材料为清洁级健康成年雄性 SD大鼠 75只,鼠龄 18～ 20月,体质量 (400± 30) g.由浙江省中医学院实验动物中心提供并饲养. 方法采用双侧颈总动脉永久性结扎造成血管性痴呆大鼠模型,并观察药物对该大鼠模型的学习记忆能力,海马 CA1区锥体细胞的形态及数量的影响. 结果①补肾益气组大鼠跳台测试成绩,造模前( 2.24± 0.17) s,造模用药后 59 d( 2.73± 0.34) s, 造模用药后 60 d( 2.35± 0.28) s.活血祛瘀组大鼠跳台测试成绩,造模前( 2.41± 0.57) s, 造模用药后 59 d( 2.62± 0.41) s, 造模用药后 60 d( 2.34± 0.44) s.补肾益气方,活血祛瘀方可明显改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力.②补肾益气方,活血祛瘀方有减轻缺血对海马 CA1区锥体细胞损伤的作用. 结论①中药补肾益气方、活血祛瘀方为治疗血管性痴呆大鼠的有效方,但活血祛瘀方的治疗作用更好.②活血祛瘀方治疗血管性痴呆大鼠的机制可能与减轻缺血对海马 CA1区椎体细胞的损伤有关.     

雌二醇对拟痴呆小鼠学习记忆功能的影响

目的:在氯化铝(AlCl3)所致拟痴呆动物模型基础上,探讨雌二醇对拟痴呆小鼠记忆功能保护作用及其作用机制。方法:皮下注射AlCl370mg/d共7d,实验组腹腔注射雌二醇0.3,0.6,0.9mg/kg共20d后,用跳台、避暗等实验方法测定小鼠学习记忆能力,同时测定小鼠脑内乙酰胆碱脂酶(AchE)及脑B型单胺氧化酶(MAO-B)的含量。结果:AlCl3所致痴呆小鼠记忆能力明显降低,表现为避暗、跳台实验的错误次数明显增加,以及增加脑MAO-B含量及脑内AchE的含量,雌二醇各剂量组能够减少小鼠电击次数(错误次数),24h重复实验,可延长跳下平台的潜伏期及进入暗箱的潜伏期,错误次数明显减少。同时降低了脑内AchE和MAO-B。结论:雌二醇对AlCl3所致痴呆小鼠记忆障碍具有保护作用,能增强学习记忆能力。     

从氧化应激角度探讨脑络通颗粒对痴呆型血管性认知功能障碍模型大鼠的干预机制

目的:本课题拟通过建立痴呆型血管性认知功能障碍大鼠模型,观察脑络通颗粒对大鼠行为学以及脑组织GSH、NO、MDA含量及SOD、GSH-PX及NOS活性的影响,进一步揭示脑络通颗粒治疗痴呆型血管性认知功能障碍的作用机理。方法:应用双侧颈总动脉分期永久结扎法建立痴呆型血管性认知功能障碍大鼠模型,采用跳台法观察脑络通颗粒对模型大鼠行为学以及脑组织GSH、NO、MDA含量及SOD、GSH-PX及NOS活性等指标的影响。结果:跳台法显示,脑络通颗粒可以改善痴呆型血管性认知功能障碍大鼠模型的学习记忆能力。与模型组相比,尼莫地平组、中剂量组及高剂量组能升高大鼠脑组织GSH含量及SOD、GSH-PX活性,降低NO含量及MDA及NOS活性(P0.01),而中剂量组及高剂量组在升高大鼠脑组织GSH含量及SOD、GSH-PX活性,降低NO含量及MDA、NOS活性与尼莫地平组比较无显著性差异(P0.05)。结论:脑络通颗粒对痴呆型血管性认知功能障碍模型大鼠的学习记忆有明显的改善作用,可能与干预氧化应激反应有关。     

脑络通颗粒对痴呆型血管性认知功能障碍模型大鼠行为学及脑组织IL-1β、TNF-α含量的影响

目的:进一步阐明脑络通颗粒的作用途径及机制,观察该药对痴呆型血管性认知功能障碍大鼠模型行为学及脑组织IL-1β、TNF-α含量的影响。方法:建立痴呆型血管性认知功能障碍大鼠模型,采用跳台法、避暗法观察脑络通颗粒对痴呆型血管性认知功能障碍大鼠模型的学习记忆能力的影响,观察药物对脑组织IL-1β、TNF-α含量等相关指标的影响,结果:跳台法、避暗法显示,脑络通颗粒可以改善痴呆型血管性认知功能障碍大鼠模型的学习记忆能力。与模型组比较,脑络通颗粒3剂量组能降低模型大鼠脑组织IL-1β、TNF-α含量(P0.05或P0.01),而脑络通颗粒中、高剂量在降低IL-1β、TNF-α含量方面,无明显差异(P0.05);模型组及尼莫地平组二者之间在降低大鼠脑组织中IL-1β、TNF-α含量方面,无明显差异(P0.05)。结论:脑络通颗粒对痴呆型血管性认知功能障碍模型大鼠的学习记忆有明显的改善作用,其作用机制可能与抑制过强的炎症反应有关。     

补肾益气和活血祛瘀中药治疗血管性痴呆的实验研究

背景：血管性痴呆(vascular dementia．VD)是老年期痴呆中常见的一种。补肾益气法、活血祛瘀法是治疗VD的常用中医治疗方法。而对这两种方法的比较研究尚少。目的：比较补肾益气方、活血祛瘀方对血管性痴呆大鼠的治疗作用，并探讨中药治疗血管性痴呆大鼠的机制。设计：完全随机设计．对照实验研究。地点与材料：地点为浙江省中医院脑病研究室。材料为清洁级健康成年雄性SD大鼠75只，鼠龄18～20月，体质量(400&;#177;30)g。由浙江省中医学院实验动物中心提供并饲养。方法：采用双侧颈总动脉永久性结扎造成血管性痴呆大鼠模型，并观察药物对该大鼠模型的学习记忆能力，海马CA1区锥体细胞的形态及数量的影响。结果：①补肾益气组大鼠跳台测试成绩，造模前(2．24&;#177;0．17)s，造模用药后59d(2．73&;#177;0．34)s，造模用药后60d(2．35&;#177;0．28)s。活血祛瘀组大鼠跳台测试成绩，造模前(2．41&;#177;0．57)s，造模用药后59d(2．62&;#177;0．41)s，造模用药后60d(2．34&;#177;0．44)s。补肾益气方，活血祛瘀方可明显改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力。②补肾益气方，活血祛瘀方有减轻缺血对海马CA1区锥体细胞损伤的作用。结论：①中药补肾益气方、活血祛瘀方为治疗血管性痴呆大鼠的有效方，但活血祛瘀方的治疗作用更好。②活血祛瘀方治疗血管性痴呆大鼠的机制可能与减轻缺血对海马CA1区椎体细胞的损伤有关。     

运动训练对血管性痴呆大鼠认知障碍及长时程增强的影响

目的：探讨运动训练对大鼠空间学习、记忆能力和长时程增强（LTP）的影响。方法：选用Wistar雄性大鼠随机分成对照组5只，血管性痴呆组10只，血管性痴呆＋运动训练组10只。用电生理学方法检测在体海马CAI区LTP。用Morris水迷宫评价大鼠学习记忆能力。结果：血管性痴呆组大鼠水迷宫逃避潜伏期明显延长．血管性痴呆＋运动训练组大鼠较血管性痴呆组大鼠水迷宫隐匿平台逃避潜伏期缩短，但仍长于对照组（P〈0．05）。血管性痴呆组大鼠LTP诱导明显受到抑制，血管性痴呆＋运动训练组大鼠较血管性痴呆组大鼠LTP诱导明显改善．但仍比对照组差（P〈0．05）。结论：血管性痴呆大鼠学习记忆能力降低，LTP诱导障碍，运动训练可提高大鼠空间学习、记忆能力，增强LTP的形成．     

激光穴位照射对失眠大鼠下丘脑单胺类递质的影响

目的观察激光穴位照射对对氯苯丙氨酸(PCPA)所致失眠大鼠下丘脑单胺类神经递质5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)含量的影响,探讨激光穴位照射治疗失眠的机制。方法将SD大鼠24只随机分为4组:对照组、模型组、安定组、激光组,每组6只。腹腔注射PCPA建立失眠大鼠模型,氦氖激光照射神门和三阴交穴各10 min,用荧光分光光度分析法检测下丘脑5-HT、5-HIAA、DA、NE的变化。结果激光组大鼠下丘脑5-HT、5-HIAA含量明显升高,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01),与安定组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);NE、DA含量明显降低,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),与安定组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论激光穴位照射可能是通过升高失眠大鼠下丘脑5-HT、5-HIAA,降低DA、NE来达到治疗失眠的目的。     

补气活血方对改善痴呆小鼠学习记忆功能的作用

目的：观测补气活血方对东莨菪碱（Scop）所致痴呆模型小鼠的学习记忆功能、MAO活力及5-HT阳性细胞数的影响。方法：通过跳台法、光电比色法及免疫组化法,在实验中与造模组比较观察。结果：预防组小鼠触电潜伏期明显延长（P〈0.05）,5min错误次数明显减少（P〈0.01）;MAO活力显著降低（P〈0.01）;5-HT阳性细胞数显著增多（P〈0.01）。结论：补气活血方对痴呆模型小鼠学习记忆有明显改善作用。     

微泵恒速灌注叠氮钠致痴呆大鼠脑内胆碱及单胺类神经递质含量改变

目的 观察线粒体呼吸链复合体IV(线粒体细胞色素C氧化酶)抑制剂叠氮钠对大鼠脑内胆碱及单胺类神经递质的影响，探讨线粒体缺陷导致学习记忆障碍的可能机制。方法 SD大鼠皮下埋植Alzet微泵，连续恒速给予叠氮钠共30天，分为1mg／kg／h和2mg／kg／h两个剂量组。取脑，分区测定皮层和海马胆碱乙酰基转移酶(放射化学法)及乙酰胆碱酯酶(羟胺比色法)的活性，高效液相色谱法测定纹状体内单胺类神经递质及其代谢产物含量。结果 模型大鼠皮层和海马胆碱乙酰基转移酶活性降低，海马区乙酰胆碱酯酶活性升高，皮层和海马胆碱乙酰基转移酶与乙酰胆碱酯酶活性的比值明显降低。纹状体内单胺类神经递质及其代谢产物含量各组间无明显差异。结论 线粒体细胞色素C氧化酶活性的抑制可以导致动物脑内胆碱乙酰基转移酶及乙酰胆碱酯酶活性的异常，是模型大鼠学习记忆能力障碍的基础。微泵恒速灌注叠氮钠仅损伤大鼠脑内胆碱能神经系统，对脑内单胺类神经递质无影响，可作为拟痴呆模型，应用于发病机理及药理学等方面的研究。     

雌二醇对拟痴呆小鼠学习记忆功能的影响

目的：在氯化铝（AlCl3)所致拟痴呆动物模型基础上，探讨雌二醇对拟痴呆小鼠记忆功能保护作用及其作用机制。方法：皮下注射AlCl3 70mg/d共7d，实验组腹腔注射雌二醇0．3，0．6，0．9mg/kg共20d后，用跳台、避暗等实验方法测定小鼠学习记忆能力，同时测定小鼠脑内乙酰胆碱脂酶（AchE)及脑B型单胺氧化酶（MAO－B）的含量。结果：AlCl3所致痴呆小鼠记忆能力明显降低，表现为避暗、跳台实验的错误次数明显增加，以及增加脑MAO－B含量及脑内AchE的含量，雌二醇各剂量组能够减少小鼠电击次数（错误次数），24h重复实验，可延长跳下平台的潜伏期及进入暗箱的潜伏期，错误次数明显减少。同时降低了脑内AchE和MAO－B。结论：雌二醇对A1C13所致痴呆小鼠记忆障碍具有保护作用，能增强学习记忆能力。     

罗布麻水提物对抑郁模型小鼠脑内单胺递质含量的影响

目的：探讨罗布麻叶水提物抗抑郁作用的机理。方法：雄性昆明种小鼠经强迫游泳造成抑郁模型，用高效液相-电化学法测定小鼠脑内单胺类神经递质及其主要代谢产物的含量。结果：与对照组相比，小鼠强迫游泳6min后，海马组织5-HT、NA的含量显著下降，而单胺代谢产物5-HIAA的含量明显升高；与强迫游泳小鼠相比，连续给予7天LBM（60mg／kg）的小鼠海马组织内5-HT、NA的含量显著升高，5-HIAA的含量明显下降，表现出与阳性对照药物FLU（20mg／kg）相同的作用特点。结论：罗布麻叶水提物的抗抑郁作用可能与增加脑内单胺类神经递质的含量有关。     

脑涨落图检测阿尔茨海默病病人脑神经递质变化特点

目的:利用脑涨落图仪探索阿尔茨海默病(AD)病人脑神经递质变化特点。方法:采集经过《临床痴呆评定量表》(CDR)评定的20例AD病人的脑电功率信号,与集中体检的正常老人18例脑电功率进行比较,分析AD病人脑神经递质变化的特点。结果:与正常组相比,痴呆组脑内GABA和Glu两种递质显著降低(P<0.05),5-HT显著升高(P<0.05)。相关分析表明:5-HT、ACh、NE等的功率与临床痴呆评分呈明显负相关,Glu的相对功率与CDR评分呈显著性正相关,NE则呈负相关。结论:AD病人脑内的GABA和Glu的功能相对较弱,5-HT的功能增强,Ach则未见明显变化。AD病人的整体脑功能下降,但脑内的各种功能状态能够保持大体平衡。5-HT、ACh、NE等的功能高低与痴呆病情的严重程度成反比。     

益眠达片对失眠大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响

目的观察益眠达片对失眠大鼠下丘脑单胺类神经递质含量的影响,探讨其治疗失眠的作用机制。方法将大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、益眠达片组,艾司唑仑组,每组10只。除空白对照组外,其余各组大鼠均用对氯苯丙氨酸建立大鼠失眠模型。益眠达片组和艾司唑仑组分别给予益眠达片和艾司唑仑混悬液灌胃,其余2组给予生理盐水灌胃。6 d后,采用荧光分光光度计测定下丘脑内去甲肾上腺素(NE)及5-羟色氨(5-HT)、5-羟吲哚醋酸(5-HTAA)含量。结果与模型对照组比较,益眠达片组可以降低大鼠下丘脑内NE含量、升高下丘脑内5-HT、5-HTAA含量(P0.01)。结论益眠达片改善失眠大鼠唾眠的机制与其影响大鼠下丘脑内单胺类神经递质含量有关。     

电针“三阴交穴”调节自然围绝经期大鼠雌激素及单胺类神经递质的实验研究

目的研究电针"三阴交穴"对自然围绝经期大鼠单胺类神经递质的影响。方法将大鼠分为正常组、模型组与电针组,电针组大鼠在三阴交处进行电针,隔日1次,共治疗15次。其他两组大鼠进行常规饲养,不进行针刺,隔日抓取。酶免方法(Elisa)检测大鼠卵巢雌二醇(E2)水平和海马部位的单胺类神经递质含量。结果 Elisa结果提示,与正常组比较,模型组大鼠卵巢E2含量降低了59.17%(P0.01)。与模型组比较,治疗组大鼠卵巢E2含量显著增高了65.49%(P0.01),但仍未恢复至正常水平(P0.01)。中枢神经递质的结果显示:与正常组比较,模型组大鼠海马区五羟色胺(5-HT)含量升高了34.35%,NE、DA分别下降了33.86%和34.38%(P0.01)。与模型组比较,治疗组大鼠5-HT含量明显降低了11.13%(P0.05),NE显著上调了19.18%(P0.05),差异有统计学意义。治疗组DA含量虽升高了7.59%,但差异无统计学意义(P0.05)。与正常组比较,模型组的5-HT/NE的比值显著升高(P0.01)。与模型组比较,治疗组的5-HT/NE的比值显著降低了23.47%(P0.01)。结论电针"三阴交"穴可以调节自然围绝经期大鼠的性激素水平及中枢单胺类神经递质的水平。     

电针刺激对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及大脑NO含量的影响

目的：观察电针刺激对血管性痴呆（VD）大鼠学习记忆能力及大脑氧化亚氮（NO）含量的影响。进一步讨论针灸治疗VD的机制,为临床推广和显示中医治疗VD的优势提供有力的实验依据。方法：实验中采取4-血管阻断法制备VD模型,用Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力,并用分光光度比色法测定其大脑中NO的含量。结果：模型大鼠表现明显的学习记忆障碍,在水迷宫实验中,其潜伏期显著延长,在原平台象限跨越平台次数与其余三个象限无显著差异;其大脑NO水平明显升高。而电针组潜伏期较模型组明显缩短,相同时间内跨越原平台次数明显多于其余三个象限;其大脑NO含量较模型组大鼠显著降低。结论：电针刺激能改善VD大鼠学习记忆能力,并能显著降低其大脑NO含量,具有逆转缺血性脑损伤后NO含量升高所致神经元损害过程,可能最终减少血管性痴呆的发生。     

抑郁症患者治疗过程中脑内神经质的变化

目的：用脑电超慢涨落分析仪检测抑郁症患者治疗前后脑内1神经递质的变化。方法：对人组标准的30例患者用脑电超慢涨落分析仪在治疗前后的不同阶段对神经递质含量进行检测。结果：抑郁症患者脑内神经递质（尤其是5～HT及NE）降低，并与其治疗效果呈现正相关。结论：抑郁症患者脑内5-HT及NE含量降低，随着药物治疗和症状的改善，患者脑内5-HT及NE含量逐步提高。     

定志小丸对老龄大鼠学习记忆能力的影响

目的:研究定志小丸对老龄大鼠学习记忆能力和脂质过氧化的影响。方法:选用自然老龄大鼠,采用Y电迷宫法测试行为学指标,用生化法测定血清和脑组织中的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二酶(MDA),用荧光分光光度法测定脑内单胺类神经递质含量。结果:定志小丸200mg/kg给药组明显提高老龄大鼠学习记忆能力,提高记忆的正确反应率(70.5%,73.5%),与空白对照组(61.0%,64.0%)相比差异有显著性意义(P<0.05)。给药组升高老龄大鼠脑内单胺类神经递质的含量,使老龄大鼠脑内空白对照组:(128.2±10.3)Nu/mL;定志小丸200mg/kg组:(143.0±6.8)Nu/mL和血清中空白对照组:(190.0±4.65)Nu/mL;定志小丸200mg/kg组:(222.3±2.3)Nu/mL的SOD活力提高,MDA含量降低。结论:定志小丸能改善老龄大鼠的学习记忆功能,其机制可能与改善脑组织单胺类神经系统功能,降低脑组织中脂质过氧化物的含量有关。     

粒细胞集落刺激因子对血管性痴呆大鼠海马神经细胞凋亡的影响

背景:研究发现,粒细胞集落刺激因子可激活脑内成体神经干细胞,刺激其增殖和分化,还能促进脑内各种神经营养因子分泌,减小脑缺血动物模型的缺血灶,促进慢性脑卒中模型缺失神经功能的长期恢复。目的:观察粒细胞集落刺激因子对血管性痴呆大鼠海马神经细胞凋亡的作用。方法:采用永久性双侧颈总动脉结扎法建立大鼠血管性痴呆模型,抽签法随机分为4组:实验组(皮下注射粒细胞集落刺激因子干预治疗)、对照组(注射生理盐水)、假手术组(仅行颈前正中切开,不结扎颈总动脉)。采用Morris水迷宫进行定向航行观察大鼠逃避潜伏期,评价大鼠空间学习记忆能力,TUNEL染色和图像分析大鼠海马神经细胞的凋亡。结果与结论:对照组和实验组大鼠脑缺血后7d,大鼠平均逃避潜伏期较假手术组明显延长(P<0.01),海马组织TUNEL阳性凋亡细胞较假手术组显著增高(P<0.01),随着时间的延长,14,28d时大鼠学习记忆功能障碍逐渐加重,相应海马组织TUNEL阳性凋亡细胞逐渐增加。14,28d时实验组大鼠平均逃避潜伏期比对照组明显缩短,海马组织TUNEL阳性凋亡细胞也较对照组显著减少。说明脑缺血后早期给予外源性粒细胞集落刺激因子有助于减少海马组织神经细胞的凋亡,改善大鼠学习记忆能力。     

海马干细胞来源的外泌体对血管性痴呆大鼠学习记忆能力改善作用及其机制探究

目的 分析海马干细胞来源的外泌体对血管性痴呆大鼠学习记忆能力改善作用及其机制。方法 取新生SD大鼠海马组织,提取海马干细胞外泌体。成年特殊清洁级(SPF)健康雄性SD大鼠90只,随机分为假手术组、模型组及外泌体组,每组30只,检测各组大鼠学习记忆能力、氧化应激因子水平、海马组织病理学变化、海马组织因子、脑微血管密度以及凋亡相关因子变化。结果 透射显微镜观察到海马干细胞来源外泌体结构呈圆形或椭圆形杯状结构的小囊泡,其结构完整,直径50～100 nm之间;特异性标记蛋白CD9、CD63表达阳性。与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期及错误次数明显延长,平台区域探索时间及有效区停留时间明显缩短,MDA、AchE、ET-1、VEGF、Bax水平均明显升高,SOD、5-HT、Bcl-2水平均明显降低,脑微血管内皮细胞明显减少(P<0.05);与模型组对比,外泌体组大鼠逃避潜伏期明显缩短,平台区域探索时间及有效区停留时间明显延长,MDA、AchE、ET-1、VEGF、Bax水平均明显降低,SOD、5-HT、Bcl-2水平均明显升高,脑微血管内皮细胞明显增多(P<0.05)。假手术组大鼠海...     

不同脑区突触体内单胺类递质水平与惊厥发作和症状严重程度的相关性研究

目的探讨单胺类递质与惊厥发作敏感性及与惊厥症状严重程度之间的关系。方法采用腹腔注射硫代氨基脲建立Wistar大鼠癫痫模型,应用荧光分光光度法测定大脑皮层、海马、纹状体中5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)和去甲肾上腺素(NE)的含量。结果惊厥症状严重程度与3个脑区的5-HT含量、海马区NE水平呈良好负相关(P<0.05～0.01);5-HT含量在惊厥发作各组中均明显下降(P<0.01),DA含量仅在纹状体中有明显下降(P<0.01);NE含量仅在海马区有明显下降(P<0.01)。结论不同部位的神经递质与惊厥发作严重程度密切相关,惊厥敏感性取决于所在脑区特定的单胺类递质含量。