长链非编码RNA Lnc00478在卵巢癌组织及细胞系中的表达及临床意义

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)Lnc00478在卵巢癌中的表达及其对卵巢癌生物学行为的影响。方法收集该院2018-2019年收治的卵巢癌患者病历资料,选择手术后病理诊断为卵巢癌的标本,且癌旁组织未检测到癌细胞的标本80例,采用实时荧光定量PCR检测卵巢癌组织及癌旁组织中Lnc00478的表达水平,分析其表达水平与卵巢癌的临床病理特征的关系;利用Lnc00478小干扰RNA(siRNA)转染人高转移卵巢癌细胞(HO-8910PM细胞),验证Lnc00478对HO-8910PM细胞增殖、侵袭及迁移的影响。结果与癌旁组织相比,卵巢癌组织中Lnc00478表达水平更高,差异有统计学意义(P<0.05)。卵巢癌组织中Lnc00478的表达水平与肿瘤大小、发病年龄、肿瘤TNM分期及淋巴结转移有关。与siRNA-NC相比,siRNA-1敲低Lnc00478后,HO-8910PM细胞增殖有所减慢,迁移能力和侵袭能力也有所降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Lnc00478在卵巢癌组织中的表达水平受多种因素的影响,敲低Lnc00478可抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,借助Lnc00478有望提高对卵巢癌的诊断和治疗水平。     

基质金属蛋白酶-26促进乳腺癌细胞的黏附、迁移和侵袭

目的获得稳定表达MMP-26蛋白的乳腺癌细胞株,明确MMP-26蛋白在乳腺癌细胞黏附、迁移和侵袭中的作用。方法将含有MMP-26基因全长序列的pcDNA3.1质粒稳定转染人乳腺癌MCF-7细胞株,筛选阳性表达克隆扩大培养,对比其转染前后在Matrigel上的黏附和铺展能力以及在Boyden小室中的迁移和侵袭能力的差异。结果RT-PCR和细胞免疫荧光结果显示转染组MMP-26 mRNA及蛋白均稳定高表达;MMP-26转染细胞在Matrigel的黏附和铺展速度大于对照组,其黏附率与对照组比较差异有显著性,P〈0.01;MMP-26转染组细胞在Boyden小室中的迁移速度和侵袭能力明显增强,与对照组比较差异有显著性（P〈0.05）。而MMP-26抗体对其有明显的抑制作用。结论MMP-26能有效的促进乳腺癌细胞在Matrigel上的粘附、迁移和侵袭能力,其可能在乳腺癌的早期侵袭中发挥重要作用。     

HSP70反义脱氧寡核苷酸对卵巢癌细胞HO-8910生长凋亡的影响

目的 探讨热休克蛋白70(HSP70)反义脱氧寡核苷酸(ASODN)对体外培养的人卵巢癌细胞株HO-8910生长和凋亡的影响.方法 取对数生长期HO-8910人卵巢癌细胞,与不同终浓度(5、10.15和20μmol/L)的HSP70 ASODN及正义脱氧寡核苷酸(SODN)共同孵育.四甲基偶氮唑蓝光吸收法(MTT)检测细胞增殖情况;流式细胞仪分析细胞DNA含量及细胞周期动力学改变.结果 MTT检测表明HSP70 ASODN能够抑制HO-8910细胞增殖,且一定范围内呈浓度、时间依赖性.流式细胞仪检测分析可见亚二倍体峰,凋亡指数(AI)随HSP70 ASODN浓度升高而升高,差异有统计学意义(P＜0.05).细胞周期分析提示HSP70 ASODN使细胞停滞于G1/G0期,S期细胞逐渐减少,G2/M期无明显变化.结论 HSP70 ASODN可抑制卵巢癌细胞HO-8910生长并可诱导凋亡.     

Hugl-1基因在人大肠癌组织中的表达及其对LS174细胞增殖和迁移能力的影响

目的研究Hugl-1基因在人大肠癌组织中的表达及其与临床病理的相关性,探讨外源Hugl-1基因转染对大肠癌LS174细胞增殖和迁移能力的影响。方法采用RT-PCR及Western-blot法检测人大肠癌组织及相应癌旁正常组织中mRNA和蛋白质的表达水平。以成功构建的分别能稳定表达外源pcDNA3.0-Hugl-1、空载体pcDNA3.0的大肠癌细胞系和未转染的LS174细胞为研究对象,通过软琼脂集落形成、划痕修复、细胞黏附和Transwell细胞侵袭等一系列细胞学功能实验,观察稳定转染细胞株Hugl-1的表达差异对肿瘤细胞增殖、黏附、运动和侵袭的影响。结果 Hugl-1基因在大肠癌组织中表达下调或缺失,表达水平低于癌旁正常组织。Hugl-1表达降低与肿瘤分期及淋巴结转移相关。RT-PCR、Western-blot显示重组体pcDNA3.0-Hugl-1转染细胞株中目的基因Hugl-1在mRNA和蛋白质水平上表达均较空载体转染细胞株和未转染细胞株增强（P〈0.05）;对转染前后的细胞观察表明,重组体转染组细胞增殖能力无明显改变,但是其迁移运动和侵袭能力降低,细胞黏附能力增加。结论研究表明,Hugl-1表达下调与大肠癌的发生发展有关,Hugl-1基因表达下调可能使肿瘤细胞的结构稳定性丧失,促使肿瘤细胞扩散。     

RhoA基因转染对QZG肝细胞生物学行为的影响及其机制的研究

目的探讨RhoA基因转染QZG肝细胞系后细胞骨架和体外侵袭能力的变化。方法构建持续激活型的RhoA真核表达载体,以脂质体介导转染肝细胞系QZG,用RT-PCR检测RhoA mRNA表达水平,观察细胞骨架的变化和体外侵袭能力。结果RT-PCR表明稳定转染细胞株中有RhoA mRNA高表达,而且在荧光显微镜下可见到细胞株绿色荧光,细胞形态和骨架发生变化。Boyden小室体外侵袭试验中实验组比空白对照组侵袭能力增加41.4%（P=0.006）。结论RhoA影响细胞的骨架变化和侵袭能力,在肝癌发生和发展中发挥重要作用。     

苦参碱对人胃癌细胞株SGC-7901体外侵袭能力的抑制作用

目的探讨苦参碱对人胃癌细胞株SGC-7901体外侵袭能力及乙酰肝素酶(HPSE)mRNA表达的影响作用。方法SGC-7901细胞体外培养,以0.125、0.25和0.5mg/m l不同浓度苦参碱进行预处理48h后,采用半定量RT-PCR检测各组培养细胞HPSE mRNA表达的变化,应用细胞黏附实验检测细胞黏附能力的改变,Transwell小室检测侵袭及趋化能力的变化。结果与对照组比较,各浓度苦参碱处理组SGC-7901细胞HPSE mRNA的表达和细胞黏附侵袭能力均受到明显的抑制(P<0.01),其抑制效应与药物的浓度呈正相关,组间比较,P<0.01。结论苦参碱可能通过下调SGC-7901细胞HPSE mRNA的表达而显著抑制细胞的体外侵袭能力,其抑制作用呈剂量依赖性。     

增殖诱导配体shRNA对结直肠癌细胞增殖与转移的影响

目的 探讨增殖诱导配体(APRIL)shRNA对结直肠癌细胞的增殖与转移的影响.方法 用RNA干扰技术敲低结直肠癌细胞株SW480中APRIL基因的表达,以免疫印迹技术、细胞黏附、损伤修复及侵袭力检测等体外实验对比APRIL基因敲低前后细胞株SW480的增殖、黏附、侵袭及转移能力的变化.结果 转染组细胞APRIL蛋白表达的灰度值为0,显著低于阴性对照组的1.0±0.3和未转染组的1.1±0.4,差异有统计学意义(F=42.15,P=0.00);转染组、阴性对照组及未转染组最大增殖细胞数分别为(6.1±4.7)×104个、(36.4±14.4)×104个和(41.3±19.2)×104个,转染组细胞增殖能力明显受到抑制(F=24.76,P<0.05);转染组细胞黏附的平均吸光度(A)值为0.343,低于阴性对照组的0.409及未转染组的0.412,细胞黏附率相对于未转染组降低39%;转染组、阴性对照组及未转染组迁移至损伤区细胞数分别为(47.89±13.16)个、(98.78±23.26)个和(108.01±39.11)个,与阴性对照组、未转染组比较,细胞迁移能力的差异有统计学意义(F=65.53,P<0.01);细胞侵袭力(A值0.58±0.10)相对于阴性对照组(A值0.94±0.23)与未转染组(A值1.11±0.21)差异亦有统计学意义(F=5.771,P<0.05).结论 APRIL有促细胞增殖作用,很可能参与结直肠癌细胞的侵袭和转移,并具增强结直肠癌侵袭和转移潜能.     

H—ras癌基因转染后SMMC7721细胞转移特性的体内外检测

目的：研究H-ras癌基因与肝癌转移行为的关系。方法：应用基因转移技术将H-ras癌基因导入人肝癌细胞株SMMC7721，通过对几种转移相关指标的体内外检测，观察转染前后细胞转移特性的变化。结果：体外检测显示转染后细胞的粘附、运动能力提高，Ⅳ型胶原酶（cⅣase)的分泌增加，表皮生长因子受体（EGFR）表达增加，且上述变化与H-ras基因的蛋白产物p21的表达有明确的相关关系。裸鼠体内实验性转移试验为阴性结果。结论：H-ras癌基因能在体外诱导人肝癌细胞转移表型的产生，提高细胞的转移潜能，但在活体内还受多种正性、负性调控因子的影响。     

应用体外实验对与人肺癌转移相关基因的研究

目的:应用体外实验研究RAB5A基因过表达与人非小细胞肺癌转移相关,进一步确认该基因在人肺腺癌细胞系侵袭和转移中的作用以期待此研究能对肺癌转移的预防进而减少对肺癌患者造成的肺功能损害及为有效选择有利患者生活质量的治疗手段提供理论基础。方法:采用体外重建基底膜侵袭实验和肿瘤细胞黏附能力的测定,分析RAB5A正义真核表达载体转染后的AGZY83-a和反义RNA转染后的A-nip973细胞的侵袭、转移能力的改变。结果:RAB5A正义表达载体PcDNA3.1-RAB5A转染的AGZY83-a重建基底膜侵袭能力明显增强,t检验P<0.005,差异有显著性意义;对基底膜成分的黏附能力增大;t检验P<0.05。PcDNA3-AntiRAB5A反义RNA表达载体对Anip973重建基底膜侵袭力明显下降,P<0.001;对基底膜成分黏附能力降低。结论:RAB5A在侵袭转移表型形成中发挥重要的作用。反义RNA可阻断RAB5A基因的翻译过程,相关体外试验研究结果为有效治疗肿瘤转移奠定了基础。     

长链非编码RNA CTD-3162L10.1调节SEMA3B表达对卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响

目的分析卵巢癌中长链非编码RNA CTD-3162L10.1对信号素3B(SEMA3B)表达的调节作用及对卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响。方法实时定量聚合酶链式反应(qPCR)检测23对卵巢癌和癌旁组织中CTD-3162L10.1的表达。qPCR检测卵巢癌细胞株A2780、SKOV-3、HO-8910、OC3、OVCAR-3和人健康卵巢上皮细胞IOSE80中CTD-3162L10.1的表达。以CTD-3162L10.1表达水平最低的卵巢癌细胞株为转染对象,分别转染空载质粒和表达CTD-3162L10.1的质粒,命名为对照组和实验组。qPCR检测转染效率。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和Transwell侵袭实验分别检测高表达CTD-3162L10.1对卵巢癌细胞增殖和侵袭能力的影响。qPCR检测SEMA3BmRNA的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测SEMA3B、胰岛素样生长因子结合蛋白-6(IGFBP-6)、磷酸化的蛋白激酶B(p-AKT)蛋白的表达。结果 CTD-3162L10.1在卵巢癌和癌旁组织中的表达量分别为(1.05±0.35)和(7.28±1.67),卵巢癌组织中CTD-3162L10.1呈低表达(P0.05)。与人健康卵巢上皮细胞相比,卵巢癌细胞株中CTD-3162L10.1呈低表达(P0.05),OVCAR-3细胞中的表达量最少(P0.05)。与对照组相比,实验组OVCAR-3细胞中CTD-3162L10.1表达明显增加(P0.05),表明转染成功。与对照组相比,CTD-3162L10.1可明显抑制实验组OVCAR-3细胞的增殖能力和侵袭能力(P0.05)。与对照组相比,实验组OVCAR-3细胞中SEMA3B mRNA表达明显增加(P0.05)。SEMA3B、IGFBP-6蛋白表达增加,p-AKT蛋白表达降低。结论 CTD-3162L10.1在卵巢癌中呈低表达,高表达CTD-3162L10.1可抑制卵巢癌细胞OVCAR-3的增殖能力和侵袭能力,其分子机制可能是通过促进SEMA3B基因表达实现。     

LRIG2基因在膀胱癌中的表达及其对膀胱癌细胞株生物学行为的影响

目的了解LRIG2基因在膀胱肿瘤和正常膀胱组织中的表达及其与膀胱肿瘤分级、分期之间的关系。并将携带有LRIG2基因的重组质粒载体pCMV-LRIG2转染膀胱癌细胞株BIU-87,观察对其生物学行为的影响。方法利用半定量RT-PCR技术检测38例膀胱肿瘤组织和16例正常膀胱黏膜组织内LRIG2基因mRNA表达情况。用脂质体介导的基因转染技术,将携带有LRIG2基因的重组质粒载体pCMV-LRIG2转染至膀胱癌细胞株BIU-87,检测转染前后细胞生长力、侵袭力及黏附能力的改变。结果肿瘤组织内LRIG2mRNA的表达水平显著低于正常膀胱组织,且与肿瘤的分级、分期呈负相关。转染pCMV-LRIG2组细胞生长速度较未转染组和空载体转染组明显减慢,侵袭力显著低于未转染组和空载体转染组,而黏附能力显著高于未转染组和空载体转染组。结论 LRIG2有类似于抑癌基因的作用,通过对EFG-EGFR信号转导途径发挥负反馈抑制作用,从而抑制BIU-87细胞的生长、侵袭和转移。     

乙型肝炎病毒X基因对HepG2肝癌细胞生物学行为的影响及其机制

目的:研究乙型肝炎病毒X基因(HBX)对HepG2细胞生物学行为的影响及机制.方法:HepG2瞬时转染HBX真核表达载体pcDNA3.1-HBX(HepG2/HBX),转染pcDNA3.1的HepG2细胞和未转染任何质粒的HepG2细胞分别作为空白对照组和阴性对照组.转染后48 h收集细胞,流式细胞仪分析细胞凋亡率的变化;transwell检测细胞侵袭能力;RT-PCR检测PEG10 mRNA表达量的变化.结果:实验组细胞凋亡率为(4.8±1.8)％,空白和阴性对照组细胞凋亡率分别为(12.9±1.4)％和(11.7±2.2)％,P＜ 0.05.实验组细胞体外侵袭力增强(P＜0.05),PEG10基因的表达水平明显上调(P＜0.05).结论:HBX通过上调PEG10的表达,抑制HepG2细胞凋亡并增强其体外侵袭能力.     

小干扰RNA抑制卵巢癌模型裸鼠移植瘤葡萄糖调节蛋白94的表达及意义

背景：一些实验在模型鼠移植瘤中葡萄糖调节蛋白94被敲除后,细胞黏附中断,刺激肝起源细胞增殖,进而促进肝肿瘤的发生,推测葡萄糖调节蛋白94在肝癌中起到保护作用。 目的：应用小干扰RNA技术抑制裸鼠卵巢癌模型皮下移植瘤内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白94的基因表达,探讨移植瘤中葡萄糖调节蛋白94基因及蛋白表达的变化对移植瘤生长的影响。 方法：从GeneBank中选取人类葡萄糖调节蛋白94基因序列,构建受控于人RNA聚合酶Ⅲ启动子U6的真核表达载体psiSTRIKETM/葡萄糖调节蛋白94。建立人卵巢癌HO-8910细胞株裸鼠皮下接种模型,并将真核表达载体转染入裸鼠移植瘤体内,观察肿瘤生长情况。卵巢癌裸鼠模型经过不同给药方案干预后分为特异性小干扰RNA组,非特异性小干扰RNA组和生理盐水对照组, RT-PCR和免疫组化SP法检测葡萄糖调节蛋白94 mRNA和蛋白在肿瘤内的表达情况,并观察模型裸鼠的移植瘤生长情况。 结果与结论：成功构建RNA干扰质粒载体,所有裸鼠模型均接种成功,5 d后即可见皮下肿瘤形成,14 d左右肿瘤直径达7-10 mm。转染质粒完毕后抑瘤率为65.1%,与非特异性小干扰RNA组和生理盐水对照组比较,差异有显著性意义（P＜0.01）。psiSTRIKETM/GRP94治疗后瘤体内葡萄糖调节蛋白94 mRNA和蛋白显著下调（P ＜0.01）。说明靶向葡萄糖调节蛋白94 mRNA的小干扰RNA可显著抑制人卵巢癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能是诱导葡萄糖调节蛋白94 mRNA和蛋白表达下调所致。     

HSP70反义脱氧寡核苷酸对卵巢癌细胞HO-8910生长凋亡的影响

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)反义脱氧寡核苷酸(ASODN)对体外培养的人卵巢癌细胞株HO-8910生长和凋亡的影响。方法取对数生长期HO-8910人卵巢癌细胞,与不同终浓度(5、10、15和20μmol/L)的HSP70 ASODN及正义脱氧寡核苷酸(SODN)共同孵育。四甲基偶氮唑蓝光吸收法(MTT)检测细胞增殖情况;流式细胞仪分析细胞DNA含量及细胞周期动力学改变。结果MTT检测表明HSP70 ASODN能够抑制HO-8910细胞增殖,且一定范围内呈浓度、时间依赖性。流式细胞仪检测分析可见亚二倍体峰,凋亡指数(AI)随HSP70 ASODN浓度升高而升高,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞周期分析提示HSP70 ASODN使细胞停滞于G1/G0期,S期细胞逐渐减少,G2/M期无明显变化。结论HSP70 ASODN可抑制卵巢癌细胞HO-8910生长并可诱导凋亡。     

构建大鼠前甘丙肽原基因修饰永生化星形胶质细胞株对镇痛研究的意义

目的:转基因细胞移植镇痛是慢性疼痛治疗的新方向,构建大鼠前甘丙肽原基因修饰的永生化大鼠星形胶质细胞株,为转甘丙肽基因细胞移植镇痛的研究提供理论依据。方法:实验于2003-05/2004-10在华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉学研究室完成。采用DNA重组技术将质粒pBSKS(+)-前甘丙肽原中的大鼠前甘丙肽原基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)上,经酶切鉴定和测序分析后,采用脂质体介导法将重组质粒pcD-NA3.1(+)-前甘丙肽原和空质粒pcDNA3.1(+)分别转染永生化大鼠星形胶质细胞株,经G418(600mg/L)筛选,挑选阳性克隆并扩大培养。采用免疫细胞化学法、反转录-聚合酶链反应和放射免疫法检测转染细胞大鼠甘丙肽的表达及分泌,同时检测Neo基因的存在以证实转染成功。结果:重组质粒经酶切后分别出现5.4kb和521bp片段,测序分析与文献报道结果一致,表明重组质粒pcDNA3.1(+)-前甘丙肽原亚克隆成功。Neo基因检测显示重组质粒和空质粒已成功转染到星形胶质细胞株中,筛选获得星形胶质细胞株/前甘丙肽原和星形胶质细胞株/Neo两种细胞株。星形胶质细胞株,星形胶质细胞株/前甘丙肽原和星形胶质细胞株/Neo的前甘丙肽原免疫染色均阳性,平均光密度分析结果显示星形胶质细胞株/前甘丙肽原的前甘丙肽原表达明显高于星形胶质细     

nm23-H1基因转染对人舌癌Tca8113细胞株生物学行为的影响

目的研究nm23-H1基因转染对人舌癌Tca8113细胞株生物学行为的影响。方法采用脂质体转染法将真核表达载体pAdEasy-nm23-H1转染Tca8113细胞,分为Tca8113-Ad-nm23-H1组(转染pAdEasy-nm23-H1)、Tca8113-Ad组(转染空载体pAdEasy)和Tca8113组(未转染)。采用RT-PCR检测nm23-H1基因在细胞中的表达,噻唑蓝比色法检测转染前、后细胞体外增殖能力的变化,流式细胞术分析转染前、后细胞周期及凋亡的改变,采用Transwell小室和冲刷实验观察细胞侵袭、黏附、趋化运动能力的变化,克隆形成实验观察转染前、后细胞克隆形成能力。结果与Tca8113-Ad组和Tca8113组比较,Tca8113-Ad-nm23-H1组细胞体外增殖能力、细胞侵袭、黏附、趋化运动能力、克隆形成率及细胞S期比例下降(P<0.05);细胞G2/M期比例及凋亡率明显增高(P<0.05)。结论 nm23-H1基因转染后对人舌癌Tca8113细胞的增殖能力、侵袭转移能力均有明显抑制作用;nm23-H1基因可明显抑制人舌癌Tca8113细胞G2期向M期过渡,同时促进癌细胞凋亡。     

肌腱愈合及粘连形成机制的研究:胰岛素样生长因子1基因真核表达载体的构建及表达

目的:探讨真核表达载体介导外源性胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因转染肌腱细胞的可能性。方法:组织块法培养原代肌腱细胞,体外重组真核表达载体pcDNA3.1(+)-IGF-1,并以脂多胺DOGS为介导转染培养的肌腱细胞,反转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测IGF-1mRNA的表达,ELISA法检测IGF-1活性蛋白表达。结果:成功构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-IGF-1;RT-PCR检测显示转染后的肌腱细胞成功表达IGF-1mRNA;ELISA结果显示转染组IGF-1蛋白表达较对照组明显增高(t=-2.873,P<0.05)。结论:重组的真核表达载体pcDNA3.1(+)-IGF-1能够将IGF-1cDNA成功导入肌腱细胞并表达。     

嵌合抗原受体设计的NK细胞在多发性骨髓瘤中的应用研究

目的:通过建立CAR(CD138-CD28-CD3ζ)-NK细胞,探讨CAR(CD138-CD28-CD3ζ)-NK细胞对多发性骨髓瘤的抗肿瘤作用。方法:把抗CD138scFv-CD28-CD3连接到pc DNA3.1质粒,使用三质粒慢病毒包装系统转染293T细胞,收集病毒后感染NK92MI细胞系,应用嘌呤霉素筛选阳性细胞株;通过RT-PCR及Western blot检测CAR在NK92MI细胞系的表达,流式细胞术检测NK92MI细胞分泌细胞因子cd107a的能力。结果:经过基因工程技术,体外构建了CAR基因片段,基因测序验证基因序列正确。通过病毒包装技术,获得表达该片段的病毒株。经过病毒转染实验,获得表达CAR融合蛋白的稳转NK细胞株。PCR及Western blot证实,CAR融合蛋白在NK细胞表达。细胞杀伤实验证实CARNK细胞分泌细胞因子cd107a的能力明显优于对照组,具有明显的杀伤多发性骨髓瘤细胞的效应。结论:CAR能在体外构建并在NK92细胞表面表达,CARNK细胞能杀伤表达CD138抗原的多发性骨髓瘤细胞株,从而发挥抗骨髓瘤效应。     

干扰CXCR4抑制急性单核细胞白血病细胞株SHI-1黏附、侵袭及成瘤能力

目的:研究干扰人趋化因子受体4(CXCR4)基因表达对白血病细胞株SHI-1细胞体外增殖、黏附、侵袭能力及裸鼠皮下成瘤能力的影响。方法:通过构建干扰CXCR4表达的慢病毒载体,重组病毒颗粒感染SHI-1细胞,干扰SHI-1细胞CXCR4表达,定量PCR检测CXCR4、MMP-2和MMP-9表达;流式细胞术检测SHI-1细胞膜表面CXCR4蛋白表达;MTT法检测细胞体外增殖能力;将SHI-1等与骨髓基质细胞共培养,检测SHI-1细胞黏附能力及跨Matrigel基质胶迁移能力;将白血病细胞SHI-1接种于裸鼠皮下并观察其在裸鼠皮下生长情况。结果:干扰CXCR4表达的慢病毒颗粒感染SHI-1细胞后,SHI-1/CXCR4i细胞的CXCR4 mRNA表达较感染阴性对照病毒的SHI-1/NC细胞下调76%,SHI-1/CXCR4i细胞膜表面CXCR4表达明显下调;SHI-1/CXCR4i细胞MMP-2、MMP-9表达分别也分别下降63%和62%;SHI-1/CXCR4i细胞体外增殖能力无显著改变,但其黏附能力及跨Matrigel基质胶迁移能力明显下降;SHI-1/CXCR4i细胞不能在裸鼠皮下形成肿瘤,而SHI-1及SHI-1/NC细胞均能在裸鼠皮下形成肿瘤,且肿瘤体积无显著差异。结论:干扰CXCR4表达可使SHI-1的黏附、移行能力显著下降,并能完全抑制SHI-1在裸鼠皮下形成肿瘤,CXCR4可作为白血病治疗的一个靶点。     

长链非编码RNA肿瘤易感候选基因11在卵巢癌组织中的表达及意义

目的 观察长链非编码RNA (lncRNA)肿瘤易感候选基因ll(CASC11)在卵巢癌组织中的表达情况,探讨抑制该基因对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭力的影响.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测卵巢癌组织和癌旁组织中CASC11表达情况.将SKOV3细胞分为si-CASC11组、阴性对照组和空白组,分别转染CASC11的干扰物序列、阴性对照序列和加入转染试剂,采用实时荧光定量PCR法检测细胞中CASC11表达情况,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活力,采用划痕实验检测细胞迁移能力,采用Transwell小室检测细胞侵袭能力.结果 卵巢癌组织中CASC11相对表达量高于癌旁组织,差异有统计学意义(P＜0.001).不同分化程度、国际妇产科联盟(FIGO)分期和淋巴结转移情况下,卵巢癌组织中CASC11相对表达量差异有统计学意义(P＜0.05).与阴性对照组和空白组比较,si-CASC11组细胞中CASC11相对表达量降低,细胞增殖活力、迁移能力、侵袭能力降低,差异有统计学意义(P ＜0.05或P＜0.01).结论 卵巢癌组织中CASC11呈高表达,且与恶性进展临床病理指标相关,抑制CASC11表达能够显著抑制SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力.