多沙唑嗪抑制人血管平滑肌细胞增殖的实验研究

目的探讨多沙唑嗪对人血管平滑肌细胞(VSMCS)增殖的抑制作用。方法将0.1、1、10、25μmol/L的多沙唑嗪(Doxazosin,Dox)作用于体外培养的VSMCS,采用氚-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入的方法检测细胞的增殖。结果在1、10、25μmol/L的Dox作用下,VSMCS的3H-TdR的掺入量分别为(983±58.7)cpm、(730±54.9)cpm、(500±64.1)cpm,显著低于对照组的(1270±96.5)cpm(P<0.01),并表现为剂量依赖性(P<0.01)。结论多沙唑嗪能够抑制人VSMCS的增殖,对经皮腔内冠状动脉成形术(PTCA)后再狭窄可能有防治作用。     

银杏内酯对血管紧张素Ⅱ依赖性血管平滑肌细胞增殖的作用

目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对培养牛主动脉血管平滑肌细胞(VSM C)增殖的作用及银杏内酯对其增殖的影响.方法采用组织块贴壁法培养牛主动脉VSMC ,以3H-TdR掺入法和流式细胞仪分别测定VSMC的DNA合成量及细胞周期中各期细胞构成比.结果 AngⅡ(0.1μmol/L)作用24h 使3H-TdR掺入量比对照组增加34%;S期和G2/M期细胞增多,细胞增殖指数由35.15%增至45.03%.与AngⅡ组相比,AngⅡ加银杏内酯B(G -B,0.1～10μmol/L)组、AngⅡ加G-B和银杏内酯A(G-A)的混合物(G-AB,0.1～10μmol/L)组的3H-TdR掺入量减少;S期细胞构成比和细胞增殖指数减少.结论 AngⅡ对VSMC有促增殖作用 ,可被G-B和G-AB所拮抗.     

银杏内酯对血管紧张Ⅱ依赖性血管平滑肌细胞增殖的作用

目的 观察血管紧张Ⅱ（AngⅡ）对培养牛主动脉血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的作用及银杏内酯对其增殖的影响。方法 采用组织块贴壁法培养牛主动脉VSMC,以^3H-TdR掺入法和流式细胞仪分别测定VSMC的DNA合成量及细胞周期中各期细胞构成比。结果 （AngⅡ）（0.1μmol/L)作用24h使用^3H-TdR掺入量比对照组增加34%;S期和G2/M期细胞增多,细胞增殖指数由35.15%增至45.03%。与（AngⅡ）组相比,AngⅡ加银杏内酯B（G-B,0.1-10μmol/L)组、AngⅡ加G-B和银杏内酯A（G-A）的混合物（G-AB,0.1-10μmol/L)组的^3H-TdR掺入量减少;S期细胞构成比和细胞增殖指数减少。结论 AngⅡ对VSMC有促增殖作用,要被G-B和G-AB所拮抗。     

Atglistatin对棕榈酸诱导的血管平滑肌细胞增殖及ATGL表达的影响

目的:通过构建棕榈酸(PA)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)的增殖模型，初步探讨脂肪代谢关键酶脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)对于VSMC表型转化的影响。方法:在给予不同浓度的PA(分别为50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L)诱导的VSMC的增殖模型中加入40μmol/L Atglistatin,然后通过CCK-8、EDU检测细胞活力及细胞的增殖情况；通过划痕实验检测细胞的迁移能力；通过油红染色检测VSMC中的脂滴的累积情况；通过Western blot检测ATGL以及平滑肌收缩表型蛋白的影响。结果:100μmol/L浓度的PA可以明显诱导VSMC的增殖，促进VSMC的吞脂，使VSMC的脂滴堆积增加；同时，Atglistatin可以加剧PA导致的VSMC的增殖迁移，并增加VSMC的脂滴堆积。结论:Atglistatin可以加剧PA诱导的VSMC的增殖，增加VSMC的脂滴堆积，并加剧VSMC的增殖表型的转变。     

紫杉醇对兔血管内皮和平滑肌细胞增生影响的差异及意义

目的探讨紫杉醇对兔血管内皮和平滑肌增生影响的差异及意义.方法将兔血管平滑肌细胞接种于共培养体系上室、内皮细胞接种于下室建立体外内膜修复模型,观察紫杉醇对兔血管平滑肌和内皮细胞3H-TdR掺入、细胞计数和迁移率的影响,用直线回归法计算紫杉醇对平滑肌和内皮细胞增生迁移的半数有效抑制浓度IC50.结果在1 nmol·L-1～1 μmol·L-1之间,紫杉醇呈浓度依赖地抑制平滑肌细胞3H-TdR掺入、细胞计数和迁移(n=6, P＜0.01).在10 nmol·L-1～1 μmol·L-1之间,紫杉醇呈浓度依赖地抑制内皮细胞3H-TdR掺入、细胞计数和迁移(n=6, P＜0.01).1 nmol·L-1紫杉醇对内皮细胞3H-TdR掺入和细胞计数有抑制倾向,但与对照组相比无统计学差异.而1 nmol·L-1的紫杉醇却已显著抑制内皮细胞迁移(n=6, P＜0.01).紫杉醇对兔血管平滑肌细胞增生、迁移抑制的IC50分别为 10.09±0.47、9.16±0.54 nmol·L-1,对内皮细胞增生、迁移抑制的IC50分别为 19.05±0.35、5.37±0.51 nmol·L-1.10 nmol·L-1紫杉醇作用 20 min 在观察时间内能持续抑制融合内皮组平滑肌增生,而对数内皮组平滑肌增殖在10 d时明显高于对照组.结论紫杉醇在抑制兔血管平滑肌细胞增生的同时也抑制内皮增生,紫杉醇干预后平滑肌细胞增生延迟与内皮细胞再生延迟密切相关.     

马齿苋总黄酮对血小板源性生长因子致家兔血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的：研究马齿苋总黄酮（Portulaca totalflavone,PTF）对血小板源性生长因子-BB型（PDGF-BB）致血管平滑肌细胞（Vascularsmoothmuscle cell,VSMC）增殖的影响并探讨其机制。方法：采用组织贴壁法培养家兔胸主动脉血管平滑肌细胞,细胞计数法观察PTF（8、24、72mg/L）对PDGF-BB所致的VSMC增殖作用的影响;氚-胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）掺入方法测定VSMC DNA的合成;流式细胞仪分析增殖细胞周期,荧光分光光度计测定VSMC内[Ca2＋]i。结果：PTF以浓度依赖方式抑制PDGF-BB诱导的VSMC增殖、DNA合成,血管平滑肌细胞处于G1/G0期的细胞数增多,而G2/S期的细胞数显著减少（P〈0.01）;能抑制高K＋诱导的VSMC内[Ca2＋]i升高（P〈0.01）。结论：PTF可明显抑制PDGF-BB诱导的VSMC增殖,其作用机制可能与其降低VSMC内高钙浓度[Ca2＋]i有关。     

宽叶缬草对兔血管平滑肌细胞增殖及迁移抑制作用的实验研究

血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖及迁移是造成冠状动脉狭窄的一个重要机制 ,实验探讨了宽叶缬草在这方面的作用。结果显示 ,用药组中血管平滑肌细胞数量、3H-TOR掺入试验中 CPM值及细胞迁移距离均小于对照组 (P<0 .0 1) ,具有明显抗 VSMC增殖及迁移的作用     

卡维地洛对血管平滑肌细胞DNA合成的影响

目的 :探讨卡维地洛对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响及其可能机制。方法 :通过贴壁细胞培养法建立豚鼠主动脉血管平滑肌细胞模型 ,应用 [3 H]TDR掺入试验研究卡维地洛对反应性氧族 (reactiveoxygenspecies ,ROS)、血管紧张肽Ⅱ(angiotensinⅡ ,AngⅡ )及胎牛血清 (fetalcalfserum ,FCS)诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响。结果 :卡维地洛呈剂量依赖性地抑制ROS ,AngⅡ及FCS诱导的血管平滑肌细胞DNA合成 ,最大抑制率分别为 (48± 15 ) % ,(42± 7) %和 (44± 14) %。结论 :卡维地洛对ROS及AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞DNA合成呈剂量相关性的抑制作用 ,提示卡维地洛可能通过抗氧化的途径抑制血管平滑肌细胞增殖     

1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙胺基)丙烷盐酸盐对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖及对PDGF-B,bFGF,c-sis,c-myc的影响

用氚 胸腺嘧啶核苷(³H-TdR)掺入法,电镜,免疫组化,原位杂交方法,在自发性高血压大鼠(SHR)观察了1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙胺基)丙烷盐酸盐(DDPH)对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的作用及对生长因子PDGF-B,bFGF及其相关癌基因c-sis与c-myc表达的影响。结果发现:DDPH在降低SHR血压同时,能减少肾动脉VSMC的线粒体,粗面内质网和³H-TdR掺入量,并能逆转VSMC增殖时PDGF-B,bFGF抗原及c-sis与c-mycmRNA的表达增强。提示:DDPH能抑制SHR的VSMC增殖,与生长因子及癌基因调控的分子生物学机制有关。     

氯沙坦抑制ROS/ERK1/2信号途径减轻AGEs诱导的大鼠脑血管平滑肌细胞增殖

目的探讨果糖制备的糖基化终末产物(AGEs)对大鼠脑基底动脉血管平滑肌细胞(BASMC)的增殖以及氯沙坦对增殖的影响和机制。方法培养大鼠脑基底动脉血管平滑肌细胞,用CCK8法测定不同浓度(1,5,10μmol/L)氯沙坦对果糖制备的AGEs(200mg/L)预处理48h诱导血管平滑肌细胞增殖的影响。用western blotting检测AGEs以及氯沙坦处理后对ERK蛋白表达影响。结果 AGEs刺激血管平滑肌细胞增殖(0.827±0.069比0.364±0.052,P<0.01)。给予氯沙坦(5,10μmol/L)后,细胞增殖明显下降(0.658±0.064和0.381±0.058比0.827±0.069,P<0.01)。AGEs还使平滑肌细胞内活性氧簇(ROS)生成增多,并显著增加ERK1/2蛋白表达,氯沙坦则明显抑制ROS和ERK1/2蛋白水平。结论果糖制备的AGEs诱导脑基底动脉血管平滑肌细胞增殖,氯沙坦可能通过阻断AT1受体而抑制ROS和ERK1/2表达,减少平滑肌细胞的异常增殖。     

甘草酸单铵对体外培养人和大鼠淋巴细胞前列腺素和DNA合成的影响

本文测定了不同浓度的甘草酸单铵(AG)对体外培养人和大鼠淋巴细胞的~3H胸腺嘧啶核苷(~3HTdR)参入抑制率及PGI_2和TXA_2合成的影响。结果表明:AG在1.5×10~(-7)和3×10~(-7)时增加~3HTdR参入抑制率。利用RIA方法测定了AG对淋巴细胞PGI_2和TXA_2的影响,发现在4×10~(-7)mol/L、4×10~(-8)mol/L和4×10~(-11)mol/L的AG作用下,可显著降低TXA_2的释放,而对PGI_2的释放无显著影响。     

转化生长因子β_1在动脉粥样硬化形成中的作用及机制研究

目的 研究转化生长因子(TGF-β_1)在动脉粥样硬化形成中的作用及机制。方法 用ELISA法测定冠心病患者血TGF-β_1水平,并用人动脉血管平滑肌细胞作为对象,采用MTT法、~3H-胸腺嘧啶脱氧核苷(~3H-TdR)参入法、流式细胞分析仪观察TGF-β_1对流产死胎胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的作用及机制。结果 ①冠心病组的血清TGF-β_1低于正常对照组;血管病变越严重,TGF-β_1水平越低。②体外培养平滑肌细胞增殖活性(MTT法、~3H-TdR参入法)随TGF-β_1浓度增加而逐渐减低,且与平滑肌细胞密度无关。③随着TGF-β_1浓度的升高G_1期细胞比例增加、G_2期细胞比例减少。结论 TGF-β_1能明显抑制平滑肌细胞的增殖,人体内血TGF-β_1对动脉粥样硬化形成具有保护作用。     

二甲双胍对晚期糖基化终产物诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 探讨二甲双胍对晚期糖基化终产物( AGE)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响.方法 采用传代细胞培养法培养VSMC细胞;将100、200、400mg/L的AGE分别作用于VSMC,且设200 mg/L BSA组与空白对照组;10-5、10-3、10-3mol/L的二甲双胍+200 mg/L的AGE分别作用VSMC,于加药后12、24、48及72 h观察增殖变化;后用四氮唑蓝法测定其吸光度值.结果 各浓度AGE组在不同时间均能促进VSMC增殖;其中,100 mg/L AGE组12 h时对VSMC就有增殖作用,而200 mg/L AGE组增殖作用最明显,且在24h作用最强;400mg/L组同200 mg/L组相比无统计学差异(P＞0.05);各浓度二甲双胍组在24h、48 h、72 h各组均能抑制VSMC增殖,相比均有统计学意义(P＜0.05);各浓度二甲双胍组相比,10-4mol/L、10-3 mol/L组24h抑制作用最强,经比较有统计学意义(P＜0.05).结论 二甲双胍对AGE诱导的VSMC增殖有抑制作用.     

SB_(224289)对5-HT诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的研究 5 HT1B受体拮抗剂SB2 2 42 89对 5 HT诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖的影响 ,探讨肺血管构型重建的 5 HT1B受体机制。方法分离培养大鼠肺动脉平滑肌细胞 ,用MTT法和3 H TdR掺入法检测细胞增殖和DNA合成。结果SB2 2 42 89能剂量依赖地抑制 5 HT诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖。SB2 2 42 89能剂量依赖地抑制 5 HT诱导的肺动脉平滑肌细胞的DNA合成 ,SB2 2 42 89能阻断 5 HT对肺动脉平滑肌细胞的促有丝分裂作用。结论SB2 2 42 89能抑制 5 HT引起的肺动脉平滑肌细胞的增殖。5 HT1B受体在 5 HT诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖中有重要作用。     

洛伐他汀对醛固酮诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响

目的:探讨洛伐他汀对醛固酮诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响及其作用机制。方法:采用胰酶消化法分离培养SpragueDawley大鼠心肌成纤维细胞,以3H胸腺嘧啶核苷(3HTdR)掺入法、四氮唑蓝比色法和流式细胞仪观察洛伐他汀对醛固酮诱导心肌成纤维细胞增殖的DNA合成、细胞数目和细胞周期的影响。结果:(1)0.1,1,10μmol·L-1浓度的洛伐他汀抑制醛固酮诱导的心肌成纤维细胞3HTdR掺入率和A490值,其中1,10μmol·L-1组的3HTdR掺入率[(1292±s152),(1030±163)counts·min-1]和A490值[(0.287±0.008),(0.231±0.007)]显著低于对照组、0.1和0.01μmol·L-1组(P<0.01);(2)洛伐他汀可增加G0/G1期细胞百分率,降低S期细胞百分率、增殖指数和DNA含量;(3)甲羟戊酸可逆转洛伐他汀的上述作用。结论:洛伐他汀可抑制醛固酮诱导的心肌成纤维细胞增殖及DNA合成,阻止其由G1期进入S期,其机制可能与甲羟戊酸代谢途径有关。     

冠心病患者血浆硫化氢含量变化

目的观察冠心病患者血浆硫化氢水平变化,探讨硫化氢在冠心病发病中的临床意义。方法选取冠心病患者45例,将其分为稳定型心绞痛组、不稳定型心绞痛组和心肌梗死组,各15例;选择健康体检者15名为对照组。血浆硫化氢检测采用分光光度法检测。结果冠心病患者组血浆硫化氢水平为(37．08+10．36)μmol/L低于对照组的(50．98+6．23)μmol/L(P＜0．01);冠心病稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛组和心肌梗死组血浆硫化氢水平分别为(47．73±3．87)μmol/L、(37．38±4．60)μmol/L、(26．87±7．56)μmol/L,各组间均有显著性差异(P＜0．01)。结论冠心病患者组血浆硫化氢水平与健康人对比相对较低,并与病变程度相关,而提示内源性硫化氢不足可能参与冠心病的病理过程。     

普洛托品对兔胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的　观察普洛托品 (Pro)对正常和内皮素 (ET)诱导的血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的影响。方法　采用组织块贴壁法培养兔胸主动脉VSMC ,应用细胞计数、[3 H] TdR参入量、微量MTT比色测定及电镜法 ,观察Pro对VSMC增殖、DNA合成和细胞超微结构的变化。结果　ET对VSMC的增殖和DNA合成有显著的促进作用 ;1、10、10 0μmol·L-1浓度Pro能够逆转ET所致的 [3 H] TdR参入量、MTT比色的吸光度、细胞计数的增多及电镜下细胞超微结构的改变 ,且随着浓度的增加及时间的延长 ,抑制作用愈显著 ;10、10 0 μmol·L-1浓度Pro对未经ET处理的VSMC有抑制其增殖作用 ,但其抑制作用弱于ET处理组。结论　Pro可显著地抑制正常及ET诱导的VSMC增殖 ,并且对ET诱导的VSMC增殖抑制作用更明显 ,提示Pro可作为临床防治动脉粥样硬化的有效药物。