银杏黄酮甙对人巨细胞病毒转染血管内皮细胞的影响

目的观察银杏黄酮甙对人巨细胞病毒（HCMV）感染后血管内皮细胞（VEC）增殖、凋亡及NO分泌量的影响,探讨银杏黄酮对VEC的保护作用。方法应用MTT比色法检测细胞的增殖、流式细胞技术观察细胞凋亡以及硝酸还原酶法检测细胞的NO分泌量。实验分为4组,分别为正常对照组,HCMV感染组,银杏黄酮甙组,HCMV感染＋银杏黄酮甙组。结果①HCMV促进人脐静脉内皮细胞（HUVEC304）的增殖（P〈0.05）、抑制HUVEC304的凋亡（P〈0.01）和降低HUVEC304的NO分泌水平（P〈0.01）。②银杏黄酮甙可以促进HUVEC304的增殖并呈剂量依赖性（P〈0.05）,增加了其凋亡水平（P〈0.01）,并升高其NO分泌水平（P〈0.01）。③银杏黄酮甙可以抑制HCMV感染的HUVEC304的增殖作用（P〉0.05）,促进其凋亡（P〈0.05）并增加其NO的分泌水平（P〈0.01）。结论银杏黄酮甙对HCMV感染的HUVEC304具有明显的保护作用,其作用机制可能是抑制HUVEC304增殖并促进NO分泌。     

银杏黄酮甙对HCMV感染的HUVEC304产生可溶性细胞间黏附分子-1的影响

目的:探讨人巨细胞病毒（HCMV）对人脐静脉内皮细胞（HUVEC304）产生可溶性细胞间黏附分子-1（sICAM-1）的影响及银杏黄酮甙的干预作用。方法:采用ELISA法分析细胞培养上清中sICAM-1的含量,对HCMV感染离体培养的HUVEC304及银杏黄酮甙作用后的情况进行观察和分析。本实验随机分为4组,分别为对照组,银杏黄酮甙组,HCMV感染组,HCMV感染+银杏黄酮甙组。结果:实验发现HCMV感染HUVEC304,在24 h后,可以强烈增强HUVEC304产生sICAM-1。对照组为（0.385±0.018）ng/m l,加入HCMV后为（1.064±0.037）ng/m l（P<0.05）。用10-2mol/L银杏黄酮甙后,被感染细胞产生的sICAM-1为（0.537±0.024）ng/m l,较感染组显著降低（P<0.05）。结论:HCMV感染HUVEC304后,强烈刺激细胞产生sICAM-1。银杏黄酮甙可减弱HCMV感染细胞产生sI-CAM-1,因而可能对防治动脉粥样硬化有一定的作用。     

人剪切修复基因D介导ox-LDL促进HUVEC凋亡作用

目的探讨人剪切修复基因D(XPD)是否介导氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)促进人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡。方法以ox-LDL建立HUVEC凋亡模型。用脂质体将XPD-siRNA转染HUVEC,给予ox-LDL处理。实验分6组:空白对照组;阴性对照siRNA组;XPD-siRNA组;ox-LDL组;ox-LDL+阴性对照siRNA组;ox-LDL+XPDsiRNA组。MTT测定细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期;用RT-PCR和Western blot检测XPD、Bax和Bcl-2的表达。结果建立HUVEC凋亡模型ox-LDL的最佳浓度为100 mg/L。与阴性对照siRNA组相比,XPDsiRNA组的细胞凋亡率明显下降(P0.05),存活率明显增加(P0.01),G0/G1期细胞减少(P0.05)、S期细胞增加(P0.05),XPD、Bax表达降低(P均0.05),Bcl-2表达增高(P0.05);与空白对照组相比,ox-LDL组细胞凋亡率明显增加(P0.01),细胞存活率下降(P0.05),G0/G1期细胞增加(P0.05)、S期细胞明显减少(P0.01),XPD、Bax表达升高(P均0.05),Bcl-2表达降低(P0.05);与ox-LDL+阴性对照siRNA组相比,ox-LDL+XPD-siRNA组细胞凋亡率下降(P0.05),细胞存活率明显增加(P0.01),G0/G1期细胞减少(P0.05)、S期细胞增加(P0.05),XPD、Bax表达降低(P均0.05),Bcl-2表达增高(P0.05)。结论 XPD能介导ox-LDL促进HUVEC凋亡作用。     

破壁灵芝孢子粉对裸鼠移植性人乳腺癌的抑制作用

目的观察破壁灵芝孢子(GLS)粉对人乳腺癌MCF-7细胞移植瘤生长增殖作用和TMSG-1 m RNA表达的影响。方法建立人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤模型,把30只成瘤裸鼠随机分为五组,每组6只,分别为不同剂量破壁GLS组(1.5、3、4.5 g/kg)、磷酰胺(CTX)模型组、生理盐水组。用药4 w后观察破壁灵芝孢子粉对裸鼠移植瘤体积、瘤重的影响,并计算抑制率;用流式细胞术(FCM)测定细胞增殖周期和细胞凋亡水平;用半定量RT-PCR检测肿瘤组织中TMSG-1 m RNA的表达。结果与对照组比较,中剂量和高剂量破壁GLS组(3、4.5 g/kg)、模型组的移植瘤重瘤体积与对照组比较显著减少(P<0.05),中剂量、高剂量破壁GLS组和模型组的肿瘤抑制率分别为36.7%、44.5%、54.2%;用药4 w后,癌细胞S期和G2/M期细胞所占比例下降,相应的G0/G1期细胞增加,药物抑制了细胞的正常增殖,凋亡实验显示药物组细胞凋亡率增加,药物组总体凋亡率高于对照组(P<0.05或P<0.01);RT-PCR结果,破壁GLS组(1.5、3、4.5 g/kg)可使TMSG-1 m RNA表达明显上调,与生理盐水组比较显著增加(P<0.05或P<0.01)。结论破壁GLS粉具有抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用,同时上调MCF-7细胞裸鼠移植瘤组织中TMSG-1 m RNA的表达发挥潜在的抗肿瘤细胞转移的作用。     

人巨细胞病毒对培养人脐静脉内皮细胞增殖和凋亡的影响

目的 :探讨人巨细胞病毒 (CMV)在动脉粥样硬化发生和发展中的作用。　　方法 :采用流式细胞计数仪观察了人 CMV对离体培养的人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)增殖和凋亡的影响。本实验分为 5组 ,分别为正常对照组 ,肿瘤坏死因子细胞凋亡组 ,无血清培养细胞凋亡组 ,CMV感染 肿瘤坏死因子细胞凋亡组 ,CMV感染 无血清培养细胞凋亡组。　　结果 :实验发现无血清培养和肿瘤坏死因子诱导的细胞凋亡率较正常对照组升高 ,而 CMV感染的细胞凋亡率明显降低 ;细胞计数的结果表明 CMV感染后 3天的 HUVEC细胞数是未感染的 5倍。流式细胞仪的检测结果表明 :CMV感染细胞的增殖指数明显高于正常对照组 ,CMV可使细胞耐受无血清培养条件 ,保持细胞增殖。　　结论 :人 CMV感染 HUVEC后能够改变 HUVEC的细胞增殖过程 ,抑制细胞凋亡 ,HUVEC的过度增生及 HUVEC感染引起的炎性反应可能影响内皮细胞的功能 ,甚至破坏内皮细胞 ,导致血栓形成、脂质代谢紊乱 ,最终形成动脉粥样硬化。     

红景天苷对人恶性黑色素瘤细胞A375增殖和凋亡的影响

目的：观察红景天苷对人恶性黑色素瘤细胞A375增殖及凋亡的影响。方法分别用0、0．01、0．1、1、10、100μg/mL红景天苷处理人恶性黑色素瘤细胞A375后,MTT法检测各组细胞增殖率,Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR检测各组细胞周期依赖性激酶CDk4和CDk2 mRNA、细胞周期素CyclinE和CyclinD1 mRNA的影响。结果与阴性对照组比较,各给药组细胞增殖抑制率明显增多（P＜0．05）。给药组细胞以G0/G1期为主,S期细胞增加,G2/M期细胞减少（P＜0．05）。给药组中的CDk2、 CDk4、CyclinD1和CyclinE mRNA表达较阴性对照组明显降低（P＜0．05）。结论红景天苷能够抑制人恶性黑色素瘤细胞A375增殖和促进其凋亡。     

慢性浅表性胃炎脾胃湿热证患者舌苔脱落细胞活动周期的研究

目的 :探讨脾胃湿热证慢性浅表性胃炎患者舌苔脱落细胞与细胞周期活动的关系。方法 :实验分成 4组 :正常对照组、脾气虚组、脾胃湿热组和脾胃湿热治疗组 ,用流式细胞仪检测各组舌苔脱落细胞内 DNA含量。结果 :脾胃湿热组患者 S期细胞高于正常对照组和脾气虚组 ,差异均有显著性意义 (P <0 .0 1,<0 .0 5 ) ;经过清化饮治疗 1个月后 ,脾胃湿热组患者 S期细胞数目下降 ,而 G1 和 G2 加 M期细胞增加 (P <0 .0 5 )。凋亡细胞不论脾胃湿热组还是脾气虚组均高于正常对照组 ,经过治疗后的脾胃湿热组患者 ,虽然细胞周期有改变 ,但凋亡细胞无明显变化。结论 :脾胃湿热证慢性浅表性胃炎患者的舌苔脱落细胞周期中 ,S期细胞最多 ,治疗后 S期细胞减少 ,G1 期、G2 加 M期细胞增加 ;凋亡细胞脾胃湿热组和脾气虚组均高于正常对照组。     

pEgr1-AIF△1～480质粒联合电离辐射对人乳腺癌MDA-MB-231细胞周期及凋亡的作用

目的通过检测转染pEgr1-AIF△1～480质粒的人乳腺癌MDA-MB-231细胞经电离辐射后细胞周期及凋亡变化,探讨辐射诱导细胞周期进程及凋亡变化间的关系。方法实验分为正常对照组、pcDNA3.1组、pEgr1-AIF△1～480组、5 Gy组和pEgr1-AIF△1～480+5 Gy组。质粒转染MDA-MB-231细胞后行5 Gy照射,分别利用PI单染和AnnexinⅤ/PI双染细胞,流式细胞仪检测各期细胞百分比和凋亡百分比变化。结果 MDA-MB-231细胞经质粒转染和5 Gy X射线照射后,与正常对照组比较,pcDNA3.1组和pEgr1-AIF△1～480组G0/G1期、S期、G2/M期、早期凋亡、晚期凋亡和总凋亡细胞百分比均无显著变化;5 Gy组和pEgr1-AIF△1～480+5 Gy组G0/G1期细胞百分比显著降低(P<0.01),S期和G2/M期细胞百分比显著升高(P<0.01),早期凋亡、晚期凋亡和总凋亡细胞百分比也均显著升高(P<0.01);且与5 Gy组比较,pEgr1-AIF△1～480+5 Gy组S期、早期凋亡、晚期凋亡和总凋亡细胞百分比均显著升高(P<0.01)。结论电离辐射能诱导MDA-MB-231细胞发生S相延迟、G2/M期阻滞和凋亡增加,且pEgr1-AIF△1～480质粒对S相延迟和凋亡具有增强作用。     

1,25(OH)_2D_3对脂多糖诱导下肾小管上皮细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨1,25(OH)_2D_3对脂多糖诱导下人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)增殖与凋亡的影响。方法体外培养HK-2细胞,随机分为正常对照组、脂多糖(1μg/ml)组、1,25(OH)_2D_3(10~(-8)mol/L)组、脂多糖联合1,25(OH)_2D_3组,干预培养48 h,采用细胞计数试剂盒(CCK)-8法检测各组HK-2细胞的增殖,流式细胞术分别检测各组HK-2细胞的细胞周期与细胞凋亡。结果与正常对照组比较,脂多糖组HK-2细胞增殖明显被促进,G0/G1期细胞明显减少,S期及G2/M期细胞明显增加,且细胞凋亡率明显下降;1,25(OH)_2D_3组HK-2细胞增殖明显被抑制,G0/G1期细胞明显增加,S期及G2/M期细胞明显减少,且细胞凋亡率明显增加。与脂多糖组比较,脂多糖联合1,25(OH)_2D_3组HK-2细胞增殖明显被抑制,G0/G1期细胞明显增加,S期及G2/M期细胞明显减少,且细胞凋亡率明显增加。结论 1,25(OH)_2D_3可抑制HK-2细胞的增殖,诱导其凋亡,且1,25(OH)2D3可逆转脂多糖对HK-2细胞的促增殖、抑制凋亡的作用。     

硫化氢在外源性SB203580预处理人卵巢癌细胞增殖与凋亡中的作用

目的探讨硫氢化钠(Na HS,H2S供体)通过p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路对人卵巢癌细胞(SKOV3细胞株)增殖与凋亡的调控作用。方法体外培养人卵巢癌细胞,随机分为正常对照组、Na HS (0. 01 mol/L)组、SB203580(0. 1 mol/L)组、Na HS联合SB203580组,每组均经药物干预处理48 h后收集细胞,细胞增殖采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测,细胞周期分布与细胞凋亡率均采用流式细胞术检测。结果 (1)与正常对照组比较,Na HS组、SB203580组、Na HS联合SB203580组人卵巢癌SKOV3细胞抑制率均显著升高,G1期细胞比例均明显增加,S期细胞均明显减少,且细胞凋亡率均明显增加,差异有统计学意义(均P0. 01)。(2)SB203580组人卵巢癌SKOV3细胞抑制率、细胞周期各时相分布、细胞凋亡率均与Na HS组比较差异无统计学意义(P0. 05),而与Na HS组比较,Na HS联合SB203580组人卵巢癌SKOV3细胞抑制率明显增加,G1期细胞比例明显增加,S期及G2/M期细胞比例明显减少,且细胞凋亡率明显增高,差异有统计学意义(均P0. 01)。(3)与SB203580组相比,Na HS联合SB203580组人卵巢癌SKOV3细胞抑制率明显增加,G1期细胞比例明显增加,S期及G2/M期细胞比例明显减少,且细胞凋亡率显著增高,差异有统计学意义(均P0. 01)。结论 H2S可能通过抑制p38MAPK信号通路抑制人卵巢癌细胞的增殖,促进人卵巢癌细胞凋亡,且H2S可协同SB203580调节人卵巢癌细胞的增殖与凋亡。     

Comparative study of the chitooligosaccharides effect on the proliferation inhibition and radiosensitization of three types of human gastric cancer cell line

Objective:To observe the chitooligosaccharides(COS) effect on the proliferation inhibition and radiosensitivity of three types of human gastric cancer cell line.Mothods:CCK-8 assay was employed to obtain the inhibition ratio of COS on BGC823 cells,MKN45 cells and SGC7901 cells at 48 h after treatment and the proliferation-inhibition curve was drawn with the inhibition ratio of COS on three types of cells.The clonogenic assay was used to detect the cell viability of 0,1,2,4,6 and 8 Gy(6 dose grades) in RAY group and RAY+COS group after X-ray,and the cell survival curve was used to analyze the sensitization enhancement ratio of COS.Flow cytometry was employed to detect cell cycle and apoptosis rate in control group,RAY group and RAY+COS group after 48 h treatment.Results:COS inhibited the proliferation of three types of cells.The inhibition rate was positively correlated with the concentration of COS,and the susceptibility of MKN45 cells,SGC7901 cells and BGC823 cells to COS decreased in turn.The cell viability decreased gradually with the increasing radiation dose in RAY group and RAY+COS group(P0.01).The cell viabilities of RAY+COS group were lower than those of RAY group at all the dose grades under X-ray exposure(P0.01),and the sensitization enhancement ratios of COS on BGC823 cells,MKN45 cells and SGC7901 cells were 1.06,1.28 and 1.15 respectively.In controlled trials,apoptosis rate and percentage in the G_2/M phase of three types of cells in RAY+COS group were higher than those in control group and RAY group,and percentage in the S phase and the G_0/G_1 phase in RAY+COS group were lower than those in the other two groups(P0.01).Conclusions:COS can inhibit the proliferation of three types of human gastric cancer cells and enhance the radiosensitivity by inducing apoptosis and G_2/M phase arrest.     

阿司匹林对胃癌细胞株7901增殖和凋亡的影响

目的 体外观察阿司匹林（ASA）对胃癌细胞株SGC-7901细胞平殖的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 采用噻唑蓝（MTT）法、流式细胞仪（FCM）、电镜和^3h-TdR核素标记等技术,研究ASA和SGC-7901细胞增殖的抑制和可能的机制。结果 MTT显示体外ASA对SGC-7901有细胞毒作用,与浓度和作用时间有相关性,^3H-TdR实验表明,ASA对细胞DNA合成有抑制制作。FCM显示,DNA直方图上出现典型的亚二倍体“凋亡峰”,凋亡率在7.8%-34.4%。使S期、G2/M期细胞比例升高,G1期比例下降,呈一定剂量效应关系。电镜下见典型的细胞凋亡形态学特征：细胞核染色质致密浓缩,凋亡小体形成等。结论 体外ASA对SGC-7901细胞增殖有抑制作用,可能与诱导细胞凋亡和阻止细胞周期的进展有关。     

舒林酸抑制结肠癌LOVO细胞增殖作用机制研究

目的 研究舒林酸对结肠癌细胞株LOVO生长的影响,并探讨其作用机制。方法 采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测舒林酸对结肠癌细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪（FCM）分析其对细胞凋亡及细胞周期的影响,放免法分析其对前列腺素E2（PGE2）的影响。结果 MTT比色显示舒林酸能抑制LOVO细胞增殖,呈剂量和浓度依赖性;FCM显示舒林酸能促进细胞凋亡,使G0／G1期细胞比例升高,S期细胞比例降低;PGE2表达水平呈剂量依赖性下调。结论 舒林酸可抑制结肠癌细胞株LOVO生长,促进其凋亡;其作用机制可能与阻止细胞周期进展、抑制COX-2活性及PGE2合成有关。     

Visfatin转基因对胰岛β细胞功能和活性的影响

目的 探讨Visfatin基因过表达对胰岛β细胞增殖、凋亡、细胞周期和胰岛素释放的影响.方法 将MIN6细胞分为对照组、绿色荧光蛋白转染组和Visfafin转染组,对照组以空质粒、绿色荧光蛋白转染组以荧光蛋白质粒、Visfatin转染组分别以2、5、10 mg/L Visfatin质粒转染细胞,40、60 h后收集细胞,采用实时聚合酶链反应和Western blot法检测Visfatin mRNA和蛋白表达,应用噻唑蓝法及流式细胞仪检测细胞增殖、凋亡和周期,运用酶联免疫法检测葡萄糖刺激的胰岛素释放.采用单因素方差分析进行统计学分析.结果 与对照组相比,2、5、10 ms/L Visfatin质粒转染40 h及5 mg/L Visfatin质粒转染60 h后细胞增殖率分别升高1.60、1.87、1.75、1.51倍(t值分别为4.98、13.52、11.02、6.14,均P<0.05).棕榈酸诱导的细胞凋亡率降低,与对照组和绿色荧光蛋白转染组相比,质粒转染组细胞凋亡率分别降低42%、48%(F值分别为4.58、6.12,均P<0.05).与对照组相比,Visfatin质粒转染40 h后G_0/G_1期细胞减少12.3%,S期细胞增加13.2%(F值分别为5.25、6.23,均P<0.05).与对照组相比,质粒转染组细胞基础胰岛素分泌无改变,葡萄糖刺激后胰岛素释放有所增加,差异无统计学意义(P>0.05).结论 Visfatin可促进胰岛β细胞增殖,抑制胰岛β细胞凋亡,对细胞周期有调节作用.     

HCMV感染对人神经胶质瘤细胞HOXB1～4及HOXB9基因表达影响的研究

目的　研究人神经胶质瘤U2 5 1细胞株的HOXB基因表达状态及人类巨细胞病毒 (HCMV)感染对U2 5 1细胞HOXB1,HOXB2 ,HOXB3,HOXB4及HOXB9基因表达的影响 ,以探讨HCMV致畸的可能机制。方法　应用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)技术检测U2 5 1细胞感染HCMV和 /或全反式维甲酸 (ATRA)处理前后HOXB1,HOXB2 ,HOXB3,HOXB4和HOXB9基因的相对表达水平。结果　U2 5 1细胞表达HOXB1,HOXB2 ,HOXB3,HOXB4及HOXB9基因 ;HCMV感染后 ,U2 5 1细胞HOXB1基因表达明显上调 ,HOXB2和HOXB4基因表达轻微上调 ,HOXB3基因于HCMV感染后表达被抑制 ,HOXB9基因的表达在HCMV感染后不同时间无明显变化 ;ATRA能显著上调HCMV感染后U2 5 1细胞HOXB1基因的表达。结论　HCMV感染能诱导U2 5 1细胞HOXB基因表达改变 ,HCMV有可能通过调控HOXB基因表达异常引起胚胎发育畸形。     

内皮素-1及其受体拮抗剂对血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的　探讨内皮素 - 1(ET- 1)及其特异性内皮素 A受体 (ETA- R)拮抗剂 (BQ12 3)对脐动脉血管平滑肌细胞(HUSMC)凋亡的影响。方法　组织块培养 HU SMC,传代后分为对照组、ET- 1组、BQ12 3+ET- 1组。流式细胞术测定细胞核 DNA降解规律、凋亡细胞数、及细胞周期中各时相细胞的变化。结果　 ET- 1组可见明显 Ap峰 ,凋亡细胞百分比 (13.86 %± 4 .85 % )较对照组 (1.5 8%± 0 .2 3% )显著增加 (P<0 .0 5 )。ET- 1组 HUSMC的 G0 / G1 期细胞百分数 (31.5 6 %± 2 .73% ) ,较对照组 (71.15 %± 1.34% )明显降低 (P <0 .0 1)。 S期细胞百分数 (37.6 5 %±3.0 1% )和 G2 / M期细胞百分数 (30 .78%± 0 .30 % ) ,分别较对照组 (19.10 %± 1.99% )和 (12 .2 1%± 1.86 % )明显升高 (P<0 .0 1)。 BQ12 3+ET- 1组各期细胞百分数与相应对照组比较 ,统计学均无差异 (P>0 .0 5 )。结论　 ET- 1促 HU SMC凋亡和增殖的程度不同 ,产生增殖与凋亡的失平衡。BQ12 3可完全抑制 ET- 1的上述作用 ,具有临床应用前景     

银杏叶总黄酮的研究进展

银杏作为药用植物使用已久,其银杏叶提取物是一类作用广泛、不良反应较少的天然药物来源。银杏叶中富含的黄酮类化合物与银杏内酯,它们对心脑血管疾病具有活血化瘀、通脉舒络的作用。近年来银杏叶制剂的研究进展较快,其中片剂、胶囊剂、冲剂、口服液、气雾剂以及注射液等,并有多种银杏叶的复方制剂,其中银杏叶总黄酮的药理作用价值,推动了国内外学者对它的深入研究。本文综述近年来在国内外银杏叶总黄酮的最佳采收条件、提取工艺、药理作用等方面的研究进展。     

人巨细胞病毒对脐血巨核系祖细胞集落生长的影响

目的：探讨人巨细胞病毒（HCMV）对巨核系祖细胞（CFU－MK）的分化和增殖的影响。方法：收集20例脐血标本,采用体外甲基纤维素半固体培养技术,观察3种不同浓度 HCMV AD169株对CFU－MK集落形成的影响。结果：3个感染组的CFU－MK集落数均减少,与灭活病毒组比较,分别为24．0％、35．8％和48．6％（P＜0．05）,显示抑制程度与病毒感染滴定呈剂量－浓度依赖关系。结论：HCMV在体外能抑制CFU－MK的分化和增殖,提示巨细胞病毒感染引起的血小板减少与CFU－MK受该病毒抑制有关。