异种脱蛋白骨复合物修复大段骨缺损的血管化观察

背景: 异种骨修复动物大段骨缺损过程中血管化的报道较少.目的: 验证异种脱蛋白骨作为组织工程支架材料修复长骨大段缺损成骨过程中的血管化特点.设计、时间及地点: 随机对照动物实验,于2005-03/2007-02在解放军第三军医大学完成.材料: 山羊24只,体质量(22.5±2.5)kg,右侧胫骨中下段截除胫骨总长度20%形成节段性骨缺损.方法: 24只实验山羊随机分为2组,实验组16只动物植入异种脱蛋白骨 自体间充质干细胞 重组人骨形态发生蛋白2,用半环槽式外固定器固定;以另8只植入自体骨为对照.术后每隔4周进行股动脉墨汁灌注后,取新骨组织制成厚切片.主要观察指标: ①大体解剖及影像学观察新骨血管化情况.②厚切片观察新骨血管网,并用Image-proplus真彩图像分析软件测量血管数目和面积.结果: 所有实验山羊术后伤口无溃烂、流脓,无死亡.①动物肌肉和软组织已经被墨汁黑染,皮下、肌肉筋膜和骨膜可见血管大小、分支、走行方向及相互吻合呈网状.术后4周骨缺损区出现植入物边缘毛糙,8周出现大小不等、形状不规则的透光性骨吸收区.12周以后,两组骨缺损区两断端之间高密度钙化影,新生骨与两断端完全相连接.②术后4～24周,实验组与对照组血管表现数目逐渐增多,排列渐趋规则,血管大小、分布区域趋向均匀.两组血管数目和面积相比,差异均无显著性意义(P>0.05).结论: 异种脱蛋白骨复合物材料修复大动物大块骨缺损过程中血管化程度与自体骨相当.     

改良法制备异种脱蛋白骨复合重组人骨形态发生蛋白支架材料修复长骨大段骨缺损

背景:异种脱蛋白骨因其来源广泛和独特的生物学特性作为组织工程骨支架材料而受到较多关注.目的:采用改良法制备异种脱蛋白骨复合重组人骨形态发生蛋白支架材料,评价其修复大动物大段长骨缺损的成骨能力.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-05/2006-12在解放军第三军医大学实验动物中心及西南医院中心实验室完成.材料:市售猪股骨;山羊24只,10～12个月龄,雌雄不限.半环槽外固定器由解放军第三军医大学李起鸿教授研制.专利号:CN01256565.方法:山羊24只,随机分为单纯异种脱蛋白骨组、自体骨组及异种脱蛋白骨 重组人骨形态发生蛋白组,在每只山羊右侧胫骨中下段截除胫骨总长度20%形成节段性骨缺损,按分组情况植入不同材料,采用半环槽式外固定器固定.异种脱蛋白骨制备参照文献完成.主要观察指标:术后4～24周每隔4周进行X射线及术后24周取新生骨进行双能X射线、组织学、生物力学检测骨缺损修复效果.结果:①制得的异种脱蛋白骨为三维多孔结构,其孔隙率为(78.5±6.45)%,孔径大小为(472.5±7.02)μ m.②各组骨缺损表现为时间依从性的骨修复.生物力学试验抗压缩、三点抗弯曲、抗扭转试验,以及同一时间点平均成骨量均为自体骨组>异种脱蛋白骨 重组人骨形态发生蛋白组>单纯异种脱蛋白骨组.③自体骨组、异种脱蛋白骨 重组人骨形态发生蛋白组与正常组比较,山羊胫骨骨密度及骨矿含量、抗压缩压强及极限压强、抗弯曲载荷及极限载荷、抗扭转扭矩及极限扭矩平均值差异均无显著性意义.结论:改良法制备的异种脱蛋白骨复合重组人骨形态发生蛋白修复山羊胫骨大段缺损成骨能力与自体骨相当,可以作为组织工程支架材料.     

复合型完全脱蛋白骨修复骨缺损的实验研究

目的：探讨复合型完全脱蛋白骨修复骨缺损的成骨作用。方法：用复合型完全脱蛋白骨(CFDB)来修复兔桡骨缺损，以自体髂骨移植和空白缺损为对照，术后4、8、12、24周取材，通过X线摄片和不脱钙硬组织切片检测，评价复合型完全脱蛋白骨的成骨作用。结果：X线摄片可见4周时材料密度较高；8周时材料与宿主骨交界处模糊；12周时材料边缘部分区域密度接近宿主骨；24周时缺损区域密度更接近宿主骨，但仍存有一些高密度影。经组织学形态观察可见4周和8周时新骨贴附材料生长；以后新骨增多；材料随着时间的推移逐渐降解吸收；24周时成骨量明显增多，仍可见部分残余材料。结论：CFDB可用于骨缺损的修复。     

异种完全脱蛋白骨复合自体红骨髓体内的异位成骨能力

背景：骨组织工程发展很快，但目前缺乏理想的支架材料，体外构建的组织工程化活性骨在体内的成骨能力各家报道不一。目的：探讨异种完全脱蛋白骨支架材料复合自体红骨髓体内植入的成骨作用。设计：随机对照的实验研究。单位：解放军济南军区第一五二医院骨科．平顶山市第一人民医院老干部病房，平顶山煤业集团朝川矿医院骨科。材料：实验在济南军区第一五二医院动物实验室完成。4月龄日本大耳白兔40只．体质量2.0～2．5kg，雌雄不限(平顶山市第一五二医院动物实验室提供)。干预：将经物理、化学方法处理制得的小牛完全脱蛋白骨(CFDB）支架材料与兔自体红骨髓复合后植入兔大腿肌肉内(40只)进行实验．术后4，8周分别进行检测。主要观察指标：①常规组织学检查。②碱性磷酸酶活性测定。③植入物成骨的定量判断。结果：实验组4周和8周移植物组织块ALP活性分别为(63.48&;#177;0．873)和(69．527&;#177;0．635)IU／L．移植物组织块成骨含量分析分别为(2.50&;#177;0.38)和(4.70&;#177;0.67)分．对照组4周和8周穆植物组织块ALP活性分别为(2.50&;#177;0.38)和(4．70&;#177;0．67）IU／L，移植物组织块成骨含量分析分别为(1．90&;#177;0．54)和(3．40&;#177;0．54)分，表明，实验组在同时间点的成骨能力显著高于对照组，并随植入时间的延长，新骨形成增多。结论：异种完全脱蛋白骨支架材料可作为骨组织工程支架材料，复合自体红骨髓后植入体内，其成骨能力明显增加。     

部分脱蛋白骨复合成骨细胞体内植入后形成软骨或骨的实验研究

目的探讨部分脱蛋白骨(PDB)作为成骨细胞支架材料体内植入的成骨作用.方法将PDB与人胚骨膜成骨细胞体外复合培养1周后植入裸鼠体内,于术后4周及8周取出材料行聚乳酸(ALP)活性及常规组织学检查.结果植入8周时ALP活性比4周时强,并比单纯植入的材料强得多;实验侧4周见有多个软骨团块形成,8周时有片块状或条索状新骨形成,且软骨或新骨形成增多,而对照侧未见软骨或骨形成.结论PDB复合成骨细胞体内植入后能形成软骨或骨,并随植入时间的延长,软骨或新骨形成增多;PDB可用于成骨细胞的支架材料.     

骨形态发生蛋白2复合异种脱蛋白骨支架材料修复山羊大段骨缺损

背景：单纯骨形态发生蛋白2修复骨缺损只有骨诱导性，单纯异种脱蛋白骨只有骨传导性。目的：评估异种脱蛋白骨复合骨形态发生蛋白2修复山羊大段长骨缺损的效果。设计、时间及地点：随机分组设计、动物对照观察实验，于2005—03／2007—02在解放军第三军医大学创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室完成。材料：山羊24只用于制备大段长骨缺损模型。市售猪股骨用于制备脱蛋白骨。重组骨形态发生蛋白2为美国Biosource公司产品。方法：山羊右侧胫骨中下段截除胫骨总长度20％制备节段性骨缺损模型。24只山羊按植入材料的不同分为3组，单纯异种脱蛋白骨组、自体骨组和异种脱蛋白骨＋重组骨形态发生蛋白2组，每组8只。主要观察指标：植入后4，8，12，16，20，24周X射线评估骨缺损情况。植入后24周取新生骨组织进行双能X射线、组织学、生物力学检测修复效果。结果：植入后12，24周自体骨组和异种脱蛋白骨＋重组骨形态发生蛋白2组X射线评分均高于单纯异种脱蛋白骨组，差异有显著性意义（P〈0．05）。植入后24周自体骨组和异种脱蛋白骨＋重组骨形态发生蛋白2组骨密度和骨矿含量均高于单纯异种脱蛋白骨组，差异有显著性意义（P（0．05）。自体骨组和异种脱蛋白骨＋重组骨形态发生蛋白2组之间比较差异均无显著性意义（P〉0．05）。植入后24周生物力学测试表明，自体骨组〉异种脱蛋白骨＋重组骨形态发生蛋白2组〉单纯异种脱蛋白骨组。植入后24周，自体骨组、异种脱蛋白骨＋重组骨形态发生蛋白2组，新生骨与最初两断端连成一体，新生骨骨小梁排列整齐有序。单纯异种脱蛋白骨组，新生骨与最初两断端部分相连。结论：重组骨形态发生蛋白2复合异种脱蛋白骨修复山羊胫骨大段缺损成骨能力与自体骨相当。     

异种完全脱蛋白骨复合自体红骨髓体内的异位成骨能力

背景骨组织工程发展很快,但目前缺乏理想的支架材料,体外构建的组织工程化活性骨在体内的成骨能力各家报道不一.目的探讨异种完全脱蛋白骨支架材料复合自体红骨髓体内植入的成骨作用.设计随机对照的实验研究.单位解放军济南军区第一五二医院骨科,平顶山市第一人民医院老干部病房,平顶山煤业集团朝川矿医院骨科.材料实验在济南军区第一五二医院动物实验室完成.4月龄日本大耳白兔40只,体质量2.0～2 5 kg,雌雄不限(平顶山市第一五二医院动物实验室提供).干预将经物理、化学方法处理制得的小牛完全脱蛋白骨(CFDB)支架材料与免自体红骨髓复合后植入免大腿肌肉内(40只)进行实验,术后4,8周分别进行检测.主要观察指标①常规组织学检查.②碱性磷酸酶活性测定.③植入物成骨的定量判断.结果实验组4周和8周移植物组织块ALP活性分别为(63.48±0.873)和(69.527±0.635)IU/L,移植物组织块成骨含量分析分别为(2.50±0.38)和(4.70±0.67)分,对照组4周和8周移植物组织块ALP活性分别为(2.50±0.38)和(4.70±0.67)IU/L,移植物组织块成骨含量分析分别为(1.90±0.54)和(3.40±0.54)分,表明,实验组在同时间点的成骨能力显著高于对照组,并随植入时间的延长,新骨形成增多.结论异种完全脱蛋白骨支架材料可作为骨组织工程支架材料,复合自体红骨髓后植入体内,其成骨能力明显增加.     

部分脱蛋白骨单纯植入修复骨缺损的成骨作用

目的：探讨部分脱蛋白骨修复骨缺损的成骨作用。方法：用部分脱蛋白骨(PDB)来修复兔桡骨缺损，以自体髂骨移植和空白缺损为对照，术后4，8，12，24周取材，通过X线摄片和不脱钙硬组织切片检测，评价部分脱蛋白骨的成骨作用。结果：X线片可见4周时材料密度较高；8周时材料与宿主骨交界处模糊；12周时材料边缘部分区域密度接近宿主骨；24周时缺损区域密度更接近宿主骨，仍存有一些高密度影。经组织学形态观察可见4周和8周时新骨贴附材料生长；以后新骨增多；材料随着时间的推移逐渐降解吸收；24周时成骨量明显增多，仍可见部分残余材料。结论：部分脱蛋白骨可用于骨缺损的修复。     

部分脱蛋白骨单纯植入修复骨缺损的成骨作用

目的:探讨部分脱蛋白骨修复骨缺损的成骨作用。方法:用部分脱蛋白骨(PDB)来修复兔桡骨缺损,以自体髂骨移植和空白缺损为对照,术后4,8,12,24周取材,通过X线摄片和不脱钙硬组织切片检测,评价部分脱蛋白骨的成骨作用。结果:X线片可见4周时材料密度较高;8周时材料与宿主骨交界处模糊;12周时材料边缘部分区域密度接近宿主骨;24周时缺损区域密度更接近宿主骨,仍存有一些高密度影。经组织学形态观察可见4周和8周时新骨贴附材料生长;以后新骨增多;材料随着时间的推移逐渐降解吸收;24周时成骨量明显增多,仍可见部分残余材料。结论:部分脱蛋白骨可用于骨缺损的修复。     

用于成骨细胞支架材料的部分脱蛋白骨细胞相容性的研究

目的探讨部分脱蛋白骨的细胞相容性 . 方法将猪肋骨用理化方法制得部分脱蛋白骨 ( PDB) , 检测其性能后 , 与成骨细胞体外复合培养 , 了解细胞相容性及细胞毒性 . 结果 PDB的主要成份为羟基磷灰石 , 蛋白质含量仅有原骨组织的 1/5, 具有原骨组织的网状孔隙结构系统 , 原骨组织骨盐支架的三维多孔结构存在 , 对人胚骨膜成骨细胞的形态特征、细胞周期、倍体水平无有害影响 . 结论 PDB具有原骨组织的网状孔隙结构系统 , 良好的细胞相容性 .     

异种去蛋白松质骨复合骨髓间充质干细胞修复骨缺损的组织学变化

背景:目前应用各种人造支架复合细胞修复骨缺损研究很多,但是各种人造支架都没有骨的天然结构,所以修复效果不够理想.目的:将大鼠骨髓间充质干细胞接种到异种去蛋白松质骨上,移植修复大鼠股骨节段性缺损,以体内修复效果来评价复合体应用前景.方法:分离培养大鼠骨髓间充质干细胞并进行扩增,用BrdU体外进行标记.同时制备牛去蛋白松质骨,在体外与标记后的细胞复合.制备大鼠双侧股骨中段5 mm缺损模型,实验分成3组,缺损处分别移植骨髓间充质干细胞/去蛋白松质骨复合体、单纯去蛋白松质骨及单纯骨髓间充质干细胞.结果与结论:BrdU免疫染色结果显示,在各组细胞均呈阳性表达,但随着移植时间的延长而减弱.X射线放射学评分及苏木精-伊红染色组织学评分结果显示,各时间段复合体组成骨效果均好于其他组.复合体组Ⅰ型胶原蛋白表达随着时间的延长有明显增强,强于其他组.提示骨髓间充质干细胞复合异种去蛋白松质骨的成骨能力明显强于单纯的支架修复能力,单纯的骨髓间充质干细胞虽然有成骨能力,但不能修复节段性骨缺损.     

大块血管化组织工程骨修复的骨缺损

背景：目前在构建较大体积组织工程骨方面还存在比较多的问题,其中最主要的就是缺血坏死。血管化的构建是保证大块组织工程骨生物学功能的关键因素。 目的：制备大块血管化组织工程骨,行原位移植修复兔股骨干大面积缺损,探讨组织再生方式及特点。 方法：建立仿兔股骨干结构支架材料内血管化预构模型,基于预构血管化支架,再构建大块血管化组织工程骨。18只8周龄新西兰大白兔分成实验组和对照组,实验组用大块血管化组织工程骨进行体内原位移植;对照组体内原位移植大块组织工程骨,未进行血管化处理。造模后2,4,8周通过大体观察、X射线片以及组织切片观察比较2组大块骨缺损的修复情况。 结果与结论：大体观察及影像学观察结果均显示,造模后2,4,8周实验组的成骨情况均优于对照组。实验组兔造模后2,4,8周的新生骨组织占总移植骨面积比均显著高于对照组（P〈0.01）。提示修复大面积的骨缺损,采用大块血管化组织工程骨比单纯采用组织工程骨的效果更好。     

改良法制备异种脱蛋白骨复合重组人骨形态发生蛋白支架修复长骨大段骨缺损

BACKGROUND: For its extensive sources and specific biological characteristics, heterogeneous deproteinized bone (DPB) as the tissue-engineered scaffold material gets a good application prospect in repair of large segmental bone defects.OBJECTIVE: To prepare scaffold material by compositing modified heterogeneous DPB with recombinant human bone morphogenetic protein 2 (rhBMP2) and evaluate the osteogenic ability in repairing large segmental long bone defects in large-sized animals.METHODS: Twenty-four goats were randomly and evenly divided into three groups: DPB, autologous bone, and DPB+rhBMP2. Bone defects (20% in length) were made in the middle and lower segments of the right tibia of each goat, and according to group design,different bone grafts were implanted and fixed using semi-ring slot external fixer. At 4-24 weeks after surgery, X-ray examination was performed once every other 4 weeks. At 24 weeks after surgery, newly formed bones were taken out for determining the repair effects of bone defects through duat-energy X-ray analysis, histological observation, and biomechanical analysis.RESULTS AND CONCLUSION: The prepared DPB exhibited a three-dimensional porous structure, with a porosity of (78.5±6.45)% and pore size of (472.5±7.02) μm. Time-dependent bone repair was found in each group. Results regarding anti-compression test, three-point anti-bend test, and anti-torsion test were greatest in the autologous bone group, followed by the DPB+rhBMP2 group, and lastly the DPB group. There were no significant differences in tibial bone density, bone mineral content,anti-compression pressure and ultimate pressure, anti-bending load and ultimate toad, anti-torsion torque and ultimate torque between autologous bone group, DPB+rhBMP2 group and normal bone control group. These findings indicate that modified heterogeneous DPB composited with rhBMP2 has osteogenic ability equivalent to autologous bone in repairing large segmental long bone defects in goat tibias. Therefore, it can be applied as tissue-engineered scaffold material.     

不同类型骨移植材料修复牙周牙槽骨缺损

背景:植骨材料是影响植骨效果最主要的因素。目的:评价不同骨移植材料修复牙周牙槽骨缺损时诱导活性与临床效果。方法:回顾性分析24例存在牙周牙槽骨缺损患者的个体与治疗资料,均随访6个月以上,对比分析分别采用自体骨、Bio-oss骨粉及二者联合修复牙周牙槽骨缺损患者的情况,观察患者的牙周X射线片新生骨量及形态。结果与结论:仅1例Bio-oss骨粉患者无效,无效率4%。与治疗前比较,治疗后患者牙齿松动度减轻,为无松动~Ⅱ度松动(P<0.05)。X射线观察联合材料组骨充盈高度显著高于其他两组(P<0.05)。提示以自体骨与Bio-oss骨粉联合应用能够互相弥补不足,起到移植效果的加成作用。     

组织工程人工骨材料修复长骨节段性缺损的现状与展望

背景：骨移植、人工替代物置换、骨延长等长骨节段性缺损修复方法虽已在临床上应用,但均有各自的局限性。目的：就目前骨缺损的治疗加以回顾总结,并对长骨大段性缺损的修复方式作展望性分析。方法：由第一作者检索PubMed数据库、中文生物医学文献期刊数据库2000-01/2010-12有关长骨大段性缺损修复的文章。英文关键词为＂bone defect,bone tissue engineering,artificial bone,bone transplantation,therapy＂,中文关键词为＂骨缺损,骨组织工程,人工骨,骨移植,治疗＂。排除标准陈旧性文章及重复性研究。结果与结论：保留33篇文献进行文献证据提取。长骨节段性缺损的治疗包括自体骨移植、异体骨移植、骨延长、人工骨替代移植等,以组织工程人工骨的研究、利用为热点和主要发展方向,但以基础性研究和动物实验为多,少见于临床应用。组织工程人工骨在应用于临床长骨缺损治疗之前,尚存诸多问题急需解决,但仍为最有开发前景的骨缺损修复材料。     

组织工程人工骨材料修复长骨节段性缺损的现状与展望

背景:骨移植、人工替代物置换、骨延长等长骨节段性缺损修复方法虽已在临床上应用,但均有各自的局限性.目的:就目前骨缺损的治疗加以回顾总结,并对长骨大段性缺损的修复方式作展望性分析.方法:由第一作者检索PubMed数据库、中文生物医学文献期刊数据库2000-01/2010-12有关长骨大段性缺损修复的文章.英文关键词为"bone defect,bone tissue engineering,artificial bone,bone transplantation,therapy",中文关键词为"骨缺损,骨组织工程,人工骨,骨移植,治疗".排除标准陈旧性文章及重复性研究.结果与结论:保留33篇文献进行文献证据提取.长骨节段性缺损的治疗包括自体骨移植、异体骨移植、骨延长、人工骨替代移植等,以组织工程人工骨的研究、利用为热点和主要发展方向,但以基础性研究和动物实验为多,少见于临床应用.组织工程人工骨在应用于临床长骨缺损治疗之前,尚存诸多问题急需解决,但仍为最有开发前景的骨缺损修复材料.     

骨组织工程支架材料修复骨缺损的特性

目的:介绍各种骨组织工程支架的特性及在修复骨缺损中的作用.方法:以"骨组织工程,支架材料,骨缺损"为中文关键词;以:"bone tissue engineering,scafold,bone defect"为英文关键词,采用计算机检索2000-01/2010-06相关文章.纳入骨组织工程支架修复骨缺损相关的文章.选择28篇文献重点介绍各种骨组织工程支架的特性及在修复骨缺损中的特点.并应用硫酸钙人工骨进行验证.结果:用于骨组织工程的支架材料众多,目前,骨组织工程支架材料主要分为3类:生物衍生材料、无机材料和高分子材料,每种材料在修复骨缺损中都有各自的优缺点.随着研究的不断深入,复合支架材料成为目前的研究热点之一.一些具有生物活性的无机材料,如生物玻璃、羟基磷灰石已经被用来加入到胶原、壳聚糖的基体中来制备新型的骨组织工程复合支架材料.至今还未研制出一种理想的适于骨组织工程的支架材料.临床验证显示硫酸钙人工骨修复大块骨缺损效果较好.结论:相信随着各学科的发展,骨组织工程用支架材料的性能会越来越完善,从而促进骨组织工程的发展,最终应用于临床.     

骨修复替代材料修复骨缺损的选择与应用

背景：在骨缺损治疗方面,近几年集中在骨修复替代材料领域出现了一系列重大科研突破,催生了很多全新的骨修复替代材料。目前临床上可供选择的骨修复替代材料种类繁多,各种材料的特性不同,各有优势和缺点。如何正确选择与应用是创伤骨科医师面临的实际问题,值得讨论和推敲。目的：通过对自体骨、同种异体骨和人工骨材料在应用中的相关文献分析,评价3种骨修复替代材料的生物性能,有利于骨科医师更好的理解几种骨修复替代材料的理化、生物性能,进一步提高诊断和治疗水平。方法：人工骨材料在骨缺损修复中起到不可取代的作用,并且也获得良好的临床效果,但近期临床效果并非是与传统材料的最终比较结果。人工骨材料安全性和稳定性的验证尚缺乏足够的实验依据,确切疗效尚须长期的临床观察。寻找具有良好生物特性的人工骨材料抑制是骨科的研究热点。分别对自体骨、同种异体骨、人工骨材料3种骨修复替代材料治疗骨缺损的理化、生物性能,安全性综合比较进行实验数据分析。结果与结论：①在骨缺损修复过程中,从修复质量、免疫排斥和疾病传播等多方面来衡量,自体骨都是最佳的选择,成为骨移植的金标准。但来源有限且取骨区可能产生并发症,取骨又造成第二术区的创伤,因而它的临床应用受到了很大的限制。②同种异体骨的来源比自体骨多,但与宿主间的免疫排斥反应,并有感染疾病如肝炎病毒的可能。③人工骨材料成型迅速,在计算机辅助设计和辅助制作的帮助下,能更好的合成与缺损骨形态接近的骨修复替代材料,人工骨材料的骨诱导性和仿生物性骨结构方面还不能令人满意。④现有的骨修复替代材料均存在各自不同某些缺陷,不能完全满足临床质量的需要。未来能代替天然骨骼,解决骨缺损修复的材料应当是优势的组合,是骨修复替代材料的发展趋势。