钾通道在一氧化氮对支气管哮喘大鼠平滑肌张力调控中的作用

一氧化氮(NO)可松弛气道平滑肌(ASM)，降低气道高反应性，但其作用机制尚不清楚。我们测定NO供体硝普钠(SNP)、钾通道阻断剂4-氨基吡啶(4-AP)、四乙铵(TEA)对支气管哮喘大鼠支气管环张力的影响，探讨钾通道在NO对哮喘大鼠支气管平滑肌张力调控中的作用。     

一氧化氮对气道平滑肌细胞钾通道的影响

一氧化氮可通过cGMP途径和cGMP非依赖性途径，作用于气道平滑肌上高电导钙依赖性钾通道的α亚单位，使通道蛋白磷酸化或共价修饰，开放概率增加。一氧化氮（NO）对其它钾通道也有类似作用。钾通道开放可使钾离子外流，细胞膜趋于复极化或超极化，从而降低平滑肌张力。 深入了解NO开放钾通道的机制可能为哮喘的治疗提供新的途径。     

钾通道开放剂对哮喘豚鼠支气管平滑肌电压依赖性钾通道的作用

采用膜片钳技术探讨哮喘豚鼠支气管平滑肌细胞(ＢＳＭＣｓ)电压依赖性钾离子通道 (Ｉｋ)特性的变化和钾通道开放剂对哮喘豚鼠支气管平滑肌细胞膜Ｉｋ的作用。材料与方法　健康豚鼠 2 5只 ,雌雄不限 ,体重约 30 0～40 0ｇ ,分为 (1)哮喘组 5只 (2 5例细胞 ) ;正常对照组 7只 (2 8例细胞 ) ,行外向峰值钾电流测定 ;(2 )哮喘组 6只 (2 4例细胞) ;正常对照组 7只 (2 5例细胞 ) ,应用钾通道开放剂(Ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ)前后钾通道动力学特性变化测定。支气管平滑肌细胞分离 :将两肺组织中 3～ 4级支气管剪成碎块 ,加入 0 2 5 %胰蛋白酶 ,洗涤后…     

一氧化氮对被动致敏人气道平滑肌细胞钾通道的作用

一氧化氮（NO）是一种重要的细胞信号分子，参与多种病理生理过程。既往动物实验发现硝普钠（SNP）能通过开放钾通道松弛大鼠气道平滑肌，并且在单细胞水平上SNP（NO的供体）能使支气管哮喘（简称哮喘）大鼠模型的气道平滑肌细胞的大电导依赖性钾通道（BKCa）和电压依赖性钾通道（Kv）开放，但一氧化氮对哮喘患者的气道平滑肌细胞（HASMC）钾通道作用尚不十分清楚。我们采用全细胞膜片钳技术，通过哮喘患者血清致敏培养的人气道平滑肌细胞，观察SNP对BKCa和Kv电流及细胞兴奋性的影响。     

钾通道与支气管哮喘

钾通道在气道平滑肌的收缩和松弛反应中起介导作用。本文总结了气道平滑肌上钾通道的分布和功能，各种收缩和松弛激动剂对钾通道的影响，钾通道在哮喘发病中的意义以及钾通道开放剂对支气管的作用及应用前景。     

气道平滑肌钙激活钾通道与支气管哮喘研究进展

钙激活钾通道是气道平滑肌细胞上重要的离子通道之一,它与气道张力调控,气道平滑肌的增殖迁移有一定联系,深入的了解它们的结构功能以及调控因素,有助于揭示哮喘的发病机制,并为临床治疗提供依据.     

气道平滑肌钙激活钾通道与支气管哮喘研究进展

钙激活钾通道是气道平滑肌细胞上重要的离子通道之一,它与气道张力调控,气道平滑肌的增殖迁移有一定联系,深入的了解它们的结构功能以及调控因素,有助于揭示哮喘的发病机制,并为临床治疗提供依据。     

一氧化氮对气道平滑肌细胞钾通道的影响

一氧化氮可通过cGMP途径和cGMP非依赖性途径,作用于气道平滑肌上高电导钙依赖性钾通道的α亚单位,使通道蛋白磷酸化或共价修饰,开放概率增加。一氧化氮(NO)对其它钾通道也有类似作用。钾通道开放可使钾离子外流,细胞膜趋于复极化或超极化,从而降低平滑肌张力。深入了解NO开放钾通道的机制可能为哮喘的治疗提供新的途径。     

延迟整流钾通道在哮喘大鼠模型气道平滑肌张力调控中的作用

目的　探讨电压依赖性延迟整流钾通道 (KV)在哮喘大鼠模型气道平滑肌张力调控中的作用及其对气道反应性的影响。方法　应用等长张力记录方法 ,观察钾通道对正常和哮喘大鼠离体支气管静息张力及收缩张力的影响。结果　 (1)KV 阻断剂 4 氨基吡啶 (4 AP)诱发大鼠离体支气管产生浓度依赖性的收缩反应。哮喘组支气管 (10只 ) 4 AP收缩反应量效曲线较对照组 (10只 )明显左移 ,两者达到最大效应的一半所需浓度的负对数值 (pD2 )分别为 2 5 8± 0 0 7,2 12± 0 0 4,两组比较差异有显著性 (P <0 0 1) ;最大反应强度 (Emax)哮喘组为 (3 2± 5 )mg/mg ,与对照组 [(3 1± 6)mg/mg]比较 ,差异有显著性 (P >0 0 5 ) ;(2 )在对照组中 ,4 AP使支气管对内皮素 1(ET 1)和组胺的收缩反应量效曲线明显左移 ,处理前pD2 分别为 6 2 7± 0 3 8、5 5 9± 0 2 7,处理后为 6 80± 0 47、6 42± 0 14,处理前、后比较 ,差异有显著性 (P均 <0 0 1) ;Emax处理前分别为 (3 6± 8)mg/mg、(3 6± 8)mg/mg,处理后为(40± 8)mg/mg、(3 9± 9)mg/mg,处理前、后比较 ,差异有显著性 (P均 >0 0 5 ) ;(3 )在哮喘组中 ,4 AP对ET 1和组胺诱发支气管收缩反应的量效曲线无显著影响 ,处理前pD2 分别为 6 5 1± 0 0 7、5 86± 0 14,处     

异丙托溴铵对慢性缺氧大鼠气管平滑肌细胞钙激活钾通道的作用

目的　研究异丙托溴铵 (商品名 :溴化异丙托品 )对慢性缺氧大鼠气管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道 (BKCa)的作用。方法　 60只大鼠随机建立慢性大鼠缺氧模型组和正常组。急性分离单个大鼠气管平滑肌细胞。以膜片钳技术的内面向外式记录单通道电流。结果　 (1 )采用内面向外式记录电流 ,慢性缺氧组通道开放概率 (P0 ,0 1 7± 0 0 7)与正常对照组 (0 35± 0 1 0 )比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1 )。正常对照组快开放时间 (τO1 )为 (1 49± 0 41 )ms ,慢性缺氧组为 (0 53± 0 2 3)ms,正常对照组慢开放时间 (τO2 )为 (1 1 9± 3 2 )ms,慢性缺氧组为 (3 8± 1 4)ms,正常对照组快关闭时间(τc1 )为 (2 7± 0 9)ms,慢性缺氧组为 (5 7± 1 5)ms;正常对照组慢关闭时间 (τc2 )为 (1 2 1± 2 3)ms,慢性缺氧组为 (1 9 4± 2 9)ms ,两组快、慢、开、关闭时间比较差异有显著性 (P <0 0 1 )。异丙托溴铵与沙丁胺醇可逆转慢性缺氧对BKCa通道的抑制作用。通道的P0 慢性缺氧组为 0 1 5± 0 0 4、对照组为0 2 8± 0 0 9、沙丁胺醇组为 0 30± 0 0 8,三组间P0 比较差异有显著性 (P <0 0 1 )。慢性缺氧组τO1 、τO2 、τc1 和τc2 分别为 (0 55± 0 2 4 )ms、(3 6± 1 4)ms、(6 1± 1 6)ms、     

哮喘豚鼠模型支气管平滑肌钙通道特性的变化

目的探讨钙离子通道变化与支气管哮喘豚鼠模型气道高反应性的关系.方法利用膜片钳技术细胞贴附式方法测定哮喘A组(4只,22个细胞)和正常对照A组(5只,25个细胞)支气管平滑肌细胞(BSMCs)电压依赖性钙离子通道动力学变化,全细胞式测定哮喘B组(5只,25个细胞)和正常对照B组(6只,24个细胞)BSMCs内向峰值钙电流.结果(1)BSMCs钙通道开放时间哮喘A组为(1.70±0.40)ms,正常对照A组为(0.70±0.10)ms,两组开放时间比较差异有显著性(P＜0.01);哮喘A组BSMCs钙通道关闭时间为(5.7±0.6)ms,正常对照A组为(7.9±0.4)ms,两组比较差异有显著性(P＜0.01);开放概率哮喘A组为(0.40±0.10)%,正常对照A组为(0.20±0.20)%,哮喘A组较正常对照A组增加了46%,两者比较差异有显著性(P＜0.01);(2)哮喘B组BSMCs平均内向峰值钙电流为(-54±23)PA(微微安培),正常对照B组为(-25±8)PA,哮喘B组较正常对照B组增加了1.17倍,两组比较差异有显著性(P＜0.01).结论哮喘豚鼠BSMCs钙离子通道活性增加,可能是气道高反应性主要原因之一.     

外源性一氧化氮对高血压患者离体动脉平滑肌细胞的增殖作用研究

为探讨原发性高血压（EH）患者血管平滑肌细胞（VSMC）与一氧化氮（NO）的关系以及外源性NO对离体VSMC的增殖作用，采用EH患者肠系膜动脉分离、消化后进行离体VSMC培养。应用一氧化氮合成酶（NOS）诱导剂白细胞介素－1（IL－1）干预，检测NO水平，并用外源性NO药物硝普钠进行干预，研究其对VSMC摄入3H－胸腺嘧啶核苷（3H－TdR）的影响。结果：EH组VSMC释放的NO较正常血压（NT）组低（P＜0．01），IL－1诱导后NO明显增加（P＜0．01），但仍较NT组低（P＜0．05）。外源性NO药物硝普钠干预后3H－TdR掺入量随浓度的增高而减低，与对照组相比P＜0．01。提示：EH患者存在着NO产生通路的异常，外源性NO可抑制平滑肌细胞的增殖。     

L-精氨酸对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响

目的 观察L-精氨酸（L-Arg）对哮喘气道重构大鼠气道平滑肌细胞（ASMC）的细胞周期分布及细胞周期调节蛋白（CCRP）表达水平的影响,探讨L-Arg体内干预哮喘大鼠ASMC增殖的可能作用机制。方法实验分成对照组、哮喘组、L-Arg组,建立大鼠哮喘气道重构模型,检测血清NO2^-／NO3^-含量、肺内支气管内管壁和平滑肌层厚度及ASMC核数、ASMC的细胞周期分布以及ASMC内细胞周期素E（cyclin E）、cyclinA、cyclinB、蛋白27^kip1（P27^kip1）的表达。结果 哮喘组大鼠支气管内管壁、平滑肌层的厚度和ASMC数目显著大于对照组（P〈0．05）;L-Arg组大鼠支气管内管壁的厚度、平滑肌层的厚度和ASMC数目显著小于哮喘组（P〈0．05）。哮喘组血清一氧化氮（nitricoxide,NO）水平显著低于对照组（P〈0．05）;L-Arg组血清NO水平显著高于哮喘组（P〈0．01）。哮喘组G0／G1期ASMC比例及P27^kip1表达水平显著低于对照组（P〈0．01）,G2／M＋S期ASMC比例及cyclinE、cyclinA和cyclinB表达水平显著高于对照组（P〈0．01）;L-Arg组G0／G1期ASMC比例及P27^kip1表达水平显著高于哮喘组（P〈0．05）,G2／M＋S期ASMC比例及cyclinE和cyclinA表达水平显著低于哮喘组（P〈0．05）。结论 L-Arg通过调控CCRP的表达水平阻滞细胞从G1期进入S期而抑制哮喘ASMC的增殖。     

多沙唑嗪对高血压患者动态血管平滑肌细胞NO产生的影响

采用高血压患者的肠系膜动脉进行分离培养,检测细胞培养液中的NO含量.结果多沙唑嗪治疗组的NO含量高于对照组(74.56±4.56μmol/L,42.77±6.76μmol/L,P<0.05).认为多沙唑嗪增加了高血压患者动脉血管平滑肌细胞NO的产生.     

内源性一氧化氮在哮喘大鼠气道高反应性中的作用

目的　利用一氧化氮合成前体Ｌ精氨酸（ＬＡｒｇ） 和一氧化氮合酶抑制剂亚硝基Ｌ精氨酸甲酯（ＬＮＡＭＥ）研究内源性一氧化氮在哮喘大鼠气道高反应性中的作用,探讨支气管哮喘的发病机制。方法　用卵白蛋白作为致敏原制备哮喘大鼠模型,建立大鼠离体气管环张力的测定方法,并用ＬＡｒｇ、ＬＮＡＭＥ和ＬＡｒｇ＋ ＬＮＡＭＥ孵育离体气管环,观察气管环乙酰胆碱浓度反应曲线和最大收缩反应的变化,同时观察去上皮对哮喘大鼠气道反应性的影响。结果　哮喘大鼠（１０ 只） 离体气管环经ＬＮＡＭＥ１０５ ｍｏｌ／Ｌ孵育后对乙酰胆碱的最大收缩反应从孵育前（１２４±３９） ｍｇ 上升到（１８７ ±５３） ｍｇ,孵育前、后最大收缩反应比较差异具有显著性（ Ｐ＜ ０．０１）,浓度反应曲线上移,而ＬＡｒｇ 可以逆转ＬＮＡＭＥ的作用,单用ＬＡｒｇ ２×１０５ ｍｏｌ／Ｌ和ＬＡｒｇ１０３ ｍｏｌ／Ｌ孵育气管环,对哮喘大鼠气管环的最大收缩反应和浓度反应曲线与对照组比较,差异无显著性（ Ｐ＞ ０．０５） 。去上皮哮喘大鼠气管环的反应性与上皮完整气管环比较差异有显著性（ Ｐ＜ ０．００５） ,而ＬＡｒｇ、ＬＮＡＭＥ＋ ＬＡｒｇ 和ＬＮＡＭＥ孵育去上     

AngⅡ,NO对VEC,VSMC增殖及凋亡的影响

目的 了解血管活性物质AngⅡ、NO对VEC、VSMC增殖及凋亡的影响。方法 在培养的VEC、VSMC细胞中加入NO、AngⅡ等物质,观察细胞生长及凋亡情况。结果 NO诱导VSMC凋亡而AngⅡ抑制VSMC凋亡,NO拮抗AngⅡ对VEC凋亡的诱导作用。结论 血管活性物质NO、AngⅡ调节VEC及VSMC增殖与凋亡的能力与调节血管张力的相互抵消作用一致,这些血管活性物质的表达失去平衡可使调节血管张力、细胞增殖及细胞死亡的内环境稳定发生紊乱。