维生素A与维生素E增强叶酸防畸效果的研究

为观察维生素A与维生素E能否增强叶酸的防畸效果 ,采用环磷酰胺致大鼠胎鼠发育畸形作为动物模型 ,孕鼠在孕期分别补充叶酸和叶酸 +维生素A +维生素E ,观察其防畸效果。结果显示孕鼠不补充叶酸和维生素、单独补充叶酸和联合补充叶酸、维生素A和维生素E使胎鼠脑膨出率分别为 87 2 7%、42 0 3%和 30 0 8% (P <0 0 1)。联合补充组与单独补充叶酸组相比 ,脑膨出率降低更为明显 (P <0 0 5 ) ,上枕骨骨化程度明显提高 (P <0 0 1) ,胎鼠平均体重增加 (P <0 0 5 )。结果提示叶酸、维生素A、维生素E有明显促进胚胎发育及拮抗环磷酰胺的致畸作用 ,且叶酸与维生素A、维生素E联合应用的作用明显优于单独补充叶酸     

叶酸和维生素B_(12)联合抗酒精发育毒性的实验研究

目的:研究叶酸(FA)和维生素B12(VB12)联合抗酒精发育毒性的效果。方法:以5g/kg乙醇灌胃孕D6～D15的ICR小鼠建立酒精发育毒性动物模型,于孕D1～D16每天按三个组别分别灌胃FA60mg/kgbw、VB121mg/kg、FA60mg/kgbw+VB121mg/kgbw,设酒精模型组和阴性对照组,所有动物于孕D18剖杀观察。结果:与酒精模型组比较,FA和VB12联合干预组孕期母鼠增重下降现象明显改善,活胎率显著增加,活胎体重、身长、尾长均显著增加,胸骨、枕骨、四肢骨骨化异常发生率显著下降(P<0.01),尾椎骨骨化点数显著增加(P<0.01);FA单独干预组上述发育毒性表现也有一定程度的改善,但不如联合组;VB12单独干预组的预防作用不明显。结论:FA和VB12联合干预对酒精的发育毒性具有预防控制作用。     

大豆异黄酮与叶酸对大鼠神经管畸形的保护作用

目的　研究大豆异黄酮的抗氧化作用及其与叶酸配伍对大鼠神经管畸形的保护性作用。方法　以环磷酰胺制备大鼠神经管畸形的模型 ,生理盐水作对照组 ,另外设单独叶酸组、叶酸配伍大豆异黄酮共 5个干预组 (叶酸的量固定不变 ) ,分别进行抗氧化指标、胎鼠畸形发生率、生长发育指标和光镜及透射电镜的检测。结果　 ( 1)干预组较模型组孕鼠血清SOD含量增加、MDA含量降低 ,NO含量有所下降 ,且与大豆异黄酮有剂量 -反应关系 ;( 2 )胎鼠大体形态结果显示 ,干预实验组胎鼠脑膨出发生率较模型组均有下降 ,并以 40mg/ (kg·bw)的大豆异黄酮配伍叶酸组下降最明显 ;( 3)干预组胎鼠的各项生长发育指标均较模型组有所增长或增重 ;( 4)光镜病理切片显示 ,干预组细胞碎片和小群凋亡细胞聚集的现象较模型组明显减少 ;( 5 )透射电镜结果可以看见细胞凋亡的严重程度以及凋亡细胞的数量较模型组有明显改善。结论　大豆异黄酮在一定剂量时与叶酸配伍可以较单独补充叶酸更为有效地预防大鼠神经管畸形的发生。     

牛磺酸对低水平铅暴露大鼠神经行为与功能的影响

目的　探讨牛磺酸对低水平铅暴露大鼠神经行为与功能的影响。方法　将成年Wistar大鼠随机分为对照 (Cont)组、铅 (Lead)对照组、Lead+0 .5 %牛磺酸 (Tau)组、Lead+1 .0 %Tau组和 Lead+1 .5 % Tau组 ,自孕 9d起 ,各 Tau补充组母鼠饲料中添加不同水平牛磺酸 ,于孕1 6 d至产后 2 5 d,染铅各组饮 0 .1 4%的醋酸铅蒸馏水。仔鼠于生后 2 5 d与母鼠分笼喂养 ,饮食同母鼠。自生后开始观察生长发育及行为发育情况 ,3 0 d开始做辨别学习能力试验。试验结束后 ,处死动物 ,测血铅 ,脑铅 ,单胺类神经递质 ,乙酰胆碱。结果　 1 .各 Tau补充组脑铅含量 (ng/g)低于Lead组 ,高于 Cont组 (P<0 .0 0 1 )。 2 .负向趋地、听觉惊愕、触须定位达标时间 (d)各 Tau补充组短于 Lead组 (P<0 .0 1 ) ,3 .辨别学习能力试验 ,达到学会标准所用时间 (d) ,各 Tau补充组短于 Lead组 (P<0 .0 0 1 )。4.各脑区去甲肾上腺素含量 Lead+1 .0 % Tau组高于 Lead组而与 Cont组无差别 ,各脑区多巴胺含量 Lead组低于 cont组 ,其中小脑、皮层含量低于 Lead+1 .0 % Tau组 (P<0 .0 5或0 .0 1 )。结论　补充适量牛磺酸对低剂量铅暴露大鼠神经系统发育具有保护作用。     

产前补充牛磺酸对室内生长受限IUGR胎鼠脑超微结构的影响

【目的】了解宫内生长受限(intrauterine growth restriction,IUGR)胎鼠脑超微结构变化及产前补充牛磺酸对其变化的影响。【方法】将15只健康孕鼠随机分为3组:正常对照组、I UGR模型组及I UGR模型牛磺酸用药组。后两组自妊娠第1天开始饲以对照组食量的40%建立I UGR模型,牛磺酸组在饲料中添加牛磺酸300mg/(kg.d)直至自然分娩。记录胎鼠出生体重和脑重,JEM-1220透射电镜观察各组胎鼠脑超微结构变化。【结果】1)I UGR组胎鼠体重和脑重均显著低于正常对照组(P0.01);2)补充牛磺酸胎鼠出生体重和脑重均明显增加(P0.01);3)透射电镜显示I UGR胎鼠大脑和小脑皮质结构稀疏紊乱,可见大量散在分布的凋亡细胞,神经元突触数量减少,胶质细胞增生,神经元数量减少,排列稀疏。【结论】补充牛磺酸可显著改善I UGR引起的脑超微结构病理改变(透射电镜显示),从而显著改善I UGR胎鼠脑发育。     

孕鼠补充牛磺酸对宫内生长受限胎鼠脑组织PirB表达的影响

目的 探讨宫内生长受限(intrauterine growth restriction,IUGR)胎鼠脑组织中PirB的表达情况及孕鼠补充牛磺酸对其表达的影响。方法 采用全程低蛋白饮食法建立IUGR胎鼠模型,将18只孕鼠随机分为对照组、IUGR模型组(IUGR组)、IUGR+孕鼠补充牛磺酸组(牛磺酸组),每组6只。每窝随机抽取3只胎鼠断头取脑。应用免疫组化法检测各组胎鼠脑组织每高倍视野PirB阳性细胞数,Western Blot 法检测各组胎鼠脑组织中PirB蛋白表达情况,实时荧光定量PCR(Real-time PCR,RT-PCR)法检测各组胎鼠脑组织中PirB mRNA的表达情况。结果 对照组、IUGR组与牛磺酸组: 1)免疫组化法检测三组中PirB阳性细胞数分别为(18.40±1.52)、(66.17±3.66)、(21.17±2.71)个/高倍视野;2)Western Blot 法检测三组中PirB蛋白半定量分析结果PirB/β-actin分别为0.05、0.31、0.09; 3)RT-PCR法检测三组中PirB-mRNA表达水平的2-ΔΔCT值分别为1(0.87,1.15)、0.08(0.06,0.11)、1.22(0.97,1.55)。对照组、牛磺酸组与IUGR组比较,PirB阳性细胞数均低于IUGR组,PirB mRNA和蛋白的表达均低于IUGR组,牛磺酸组与IUGR组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 本研究结果显示孕鼠补充牛磺酸后IUGR胎鼠脑组织PirB的表达减少,提示牛磺酸可能通过减少或抑制PirB的表达而发挥对IUGR胎鼠脑损伤的保护作用。     

叶酸联合维生素B6/B12心对脑缺血半暗带区影响

目的 研究叶酸(FA)、维生素B6(VB6)和维生素B12(VB12)对局灶性脑缺血-中脑动脉闭塞(MCAO)大鼠缺血半暗带区(ischemie penumbra,IP)的影响.方法 将SD大鼠随机分为中脑动脉闭塞模型组(MCAO)、MCAO+叶酸组(MCAO+FA)和MCAO+复合维生素(叶酸+VB6+VB12)组(MCAO+CV);预防性给药28 d后,手术制备各组大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,造成局灶性脑缺血,对脑部进行磁共振(MRI)扫描,观察预防性给予叶酸及其联合VB6及VB12,对缺血半暗带区的改善效果.结果 缺血后6 h,半暗带区表观弥散系数(ADC):MCAO+FA组为0.61±0.04,MCAO+CV组为0.63±0.04,均高于MCAO组的0.50±0.05(P<0.05),2组平均弥散系数(DCavg)依次为0.74±0.04,0.77±0.06,均高于MCAO组的0.67±0.04(P<0.05),MCAO组部分各向异性值(FA)为0.80±0.06,高于MCAO组的0.62±0.04(P<0.05).结论 补充叶酸能使脑缺血半暗带区向正常灌注区发展,抑制缺血核心区的扩大,联合补充VB6和VB12效果更佳.     

槲皮素对PM2.5发育毒性的拮抗作用

目的研究槲皮素对PM2.5发育毒性的拮抗作用。方法收集2014年11月—2015年3月采暖期北京市某地区大气颗粒物样品于石英滤膜上,通过水浴超声和冷冻干燥操作收集石英滤膜上的PM2.5颗粒,以无菌PBS配制成不同浓度的PM2.5溶液。将健康ICR孕鼠随机分为空白对照组、PM2.5模型对照组、维生素C(VC)干预组和3个槲皮素干预组。除空白对照组的各组孕鼠于孕3、6、9、12、15天分别进行气管滴注PM2.5溶液(15 mg/kg),空白对照组给予相应剂量的干净滤膜洗脱液。各组孕鼠于孕0~17 d每天灌胃,空白对照组和PM2.5模型对照组给予0.15%羧甲基纤维素钠灌胃,VC干预组给予100 mg/kg的VC,槲皮素三个干预组分别予以50mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg的槲皮素羧甲基纤维素钠混悬液灌胃。各组孕鼠于孕18天处死,收集母鼠血液,检测血清中的过氧化氢酶(CAT)活力和谷胱甘肽(GSH)含量;称量活胎重量、胎盘重量、胎鼠身长和尾长,记录活胎数、死胎数和吸收胎数,并进行活胎骨骼和内脏畸形检查。结果与空白对照组相比,PM2.5模型对照组的胎鼠出生体重下降、胎鼠身长变短、14肋骨畸形发生率增加和枕骨骨化不全程度加重,同时母鼠血清CAT活力下降,差异均有统计学意义。与PM2.5模型对照组相比,槲皮素中剂量组的胎鼠体重和胎鼠身长改善效果最明显,表现为胎鼠体重增加和胎鼠身长增长;槲皮素低剂量组和中剂量组母鼠血清CAT活力显著升高;槲皮素干预组的枕骨骨化不全的情况得到明显改善。与PM2.5模型对照组相比,VC干预组的胚胎毒性加重及14肋骨畸形的发生率升高。结论孕期补充槲皮素对PM2.5引发的发育毒性具有一定的拮抗作用,且保护作用有适宜的剂量范围。     

叶酸配伍大豆异黄酮对大鼠神经管畸形的影响

目的研究不同剂量叶酸配伍大豆异黄酮对神经管畸形孕鼠体内过氧化状态的影响。方法采用正交设计方案来观察叶酸和大豆异黄酮在不同的配伍干预下对环磷酰胺致神经管畸形(脑膨出为主)的孕鼠体内重要的抗氧化物质谷胱甘肽及其酶以及一些与抗氧化相关元素水平的影响。将100只鼠龄25～3个月的孕鼠随机分为对照组、模型组、配伍干预组和单独干预组。孕20d时,处理孕鼠并进行血中谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧化物酶及元素硒、锰、铁抗氧化相关指标的检测;剖腹取出胎鼠,统计其畸形发生率。结果叶酸配伍大豆异黄酮的交互作用对血中谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧化物酶及元素硒、锰、铁等抗氧化相关指标的水平均产生了影响,且两者之间的配伍关系对抗氧化相关指标的影响随配伍的不同而表现不同。研究结果显示,叶酸07mg/kg配伍大豆异黄酮160mg/kg的干预效果最佳;与叶酸或大豆异黄酮的2倍剂量(叶酸14mg/kg、大豆异黄酮320mg/kg)进行单独干预比较,结果显示配伍干预效果要优于单独干预效果。结论叶酸是预防神经管畸形发生的主要因素,而大豆异黄酮加强了体内抗氧化能力,有可能增强叶酸的保护作用而使神经管畸形的发生率下降,而增强效果的发挥依赖于最佳配伍的选择。     

叶酸、VB_6、VB_(12)体外对同型半胱氨酸致主动脉内皮细胞损伤的保护作用

目的:观察叶酸(FA)、VB6、VB12对同型半胱氨酸(Hcy)致血管内皮细胞损伤的交互保护作用。方法:原代培养大鼠主动脉内皮细胞(RAEC),根据正交分析结果分为6组,阴性对照组、阳性对照组(Hcy)、维生素对照组(FA+VB6+VB12)及三组维生素防护组(Hcy+FA,Hcy+FA+VB12,Hcy+FA+VB6+VB12),维生素用含终浓度为1.0mmol/L Hcy的培养基配制。干预24 h后,取上清液,通过MTT细胞增殖实验比较各组SOD、GSH-PX、MDA、NO、NOS等指标的差异。结果:叶酸与VB12能缓解1.0mmol/L Hcy对RAEC增殖的抑制作用,而VB6则无明显效果。叶酸与VB6无交互作用,与VB12存在交互作用;VB6与VB12之间也存在交互作用;FA、FA+VB12、FA+VB6+VB12三种组合均能拮抗Hcy对SOD、GSH-PX、NOS酶活性的抑制作用,保护内皮细胞功能。结论:同时补充叶酸、VB6、VB12可能是三者在体外保护Hcy损伤内皮的较理想组合。     

WIF-1、SFRP-1在环磷酰胺致大鼠神经管畸形中神经上皮细胞表达的变化

目的:通过检测WIF-1和SFRP-1在环磷酰胺(CP)致大鼠神经管畸形(NTDs)中神经上皮细胞的表达及表达的变化,研究CP对胎鼠神经上皮细胞Wnt信号通路的影响,探讨NTDs发生的分子机制,为NTDs的预防、基因治疗提供理论依据。方法:将SD孕鼠随机分为实验组和对照组,分别于妊娠13天8～9时一次性腹腔注射CP(15 mg/kg)和等量的生理盐水。分别于给药后8、12、24 h处死孕鼠,剖腹取出胎鼠,用10%中性福尔马林固定,常规石蜡包埋、连续切片。应用免疫组织化学方法检测WIF-1与SFRP-1在神经管神经上皮细胞的表达及其变化。结果:①WIF-1免疫组化显示,给药后8 h,实验组WIF-1阳性细胞分布与对照组相似(P>0.05);给药后12 h,实验组WIF-1阳性表达增强(P<0.05);给药后24 h,实验组与对照组相比,神经管背侧、顶板区WIF-1阳性表达明显增强(P<0.01)。②SFRP-1免疫组化显示,SFRP-1在实验组和对照组各个时间段均有阳性表达,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:①WIF-1在神经上皮细胞表达增强与CP致NTDs密切相关。②SFRP-1在神经上皮细胞表达的改变未发现与CP致NTDs有相关性。③Wnt信号通路异常与CP致NTDs密切相关。     

环磷酰胺与同型半胱氨酸制备NTDs大鼠的比较

目的比较环磷酰胺和同型半胱氨酸两种致畸物质在建立大鼠神经管畸形模型中的作用.方法将大鼠按体重随机分为8组,即正常对照组、4个不同剂量的环磷酰胺组和3个不同剂量的同型半胱氨酸组,正常对照组给予生理盐水,环磷酰组的剂量分别为7.5,10.5,12.5和15 mg/kg,均于怀孕第13 d一次性腹腔注射相应剂量的环磷酰胺;同型半胱氨酸组的剂量分别为600,300和150mg/kg,于怀孕第1 d开始经口给药,每天1次,并持续整个怀孕期.各组孕鼠均于怀孕第14d随机处死3只,剖腹取胎鼠进行光镜形态学观察;其余孕鼠均于怀孕第20 d时处死,进行胎鼠外形、病理及电镜的检测.结果环磷酰胺组胎鼠神经管畸形发生处有大量的凋亡细胞存在;以12.5 mg/kg的剂量组致畸率高且致死率低;在本实验剂量范围内未发现同型半胱氨酸对大鼠的明显致神经管畸形的作用.结论可以利用12.5 mg/kg环磷酰胺制备大鼠神经管畸形模型;畸形的发生与胚胎神经管细胞过度凋亡有关;而大鼠对同型半胱氨酸没有对环磷酰胺致神经管畸形敏感.     

Al(NO_3)_3对大鼠胚胎的发育毒性研究

应用体外全胚胎培养方法 ,以Al(NO3) 3为受试物 ,培养基中Al3+ 浓度为 0 6～ 9 0 μg ml,直接染毒旋转培养的大鼠胚胎 48h ,观察Al(NO3) 3对大鼠胚胎生长发育和形态分化的影响 ,以探讨铝的胚胎发育毒性及其机理。结果发现 ,随着铝剂量增加 ,胚胎生长发育和器官分化的各项指标均呈现下降趋势 ,有一定的剂量 效应关系。其中 ,胚胎卵黄囊、神经管及心脏分化发育等对铝的作用较为敏感 ,相关指标在Al3+ 浓度为1 2 μg ml时比对照组显著降低 (P <0 0 5 )。≥ 3 0 μg ml时 ,除下颌外各项指标均明显降低 (P <0 0 5或P <0 0 1) ,同时胚胎畸形发生率明显升高 ,畸形以神经管闭合不全、体屈异常多见。表明Al(NO3) 3可导致胚胎发育迟缓和神经系统等器官发育畸形。     

Al（NO3）3对大鼠胚胎的发育毒性研究

应用体外全胚胎培养方法,以Al(NO3)3为受试物,培养基中Al3+浓度为0.6～9.0μg/ml,直接染毒旋转培养的大鼠胚胎48h,观察Al(NO3)3对大鼠胚胎生长发育和形态分化的影响,以探讨铝的胚胎发育毒性及其机理。结果发现,随着铝剂量增加,胚胎生长发育和器官分化的各项指标均呈现下降趋势,有一定的剂量-效应关系。其中,胚胎卵黄囊、神经管及心脏分化发育等对铝的作用较为敏感,相关指标在Al3+浓度为1.2μg/ml时比对照组显著降低(P<0.05)。≥3.0μg/ml时,除下颌外各项指标均明显降低(P<0.05或P<0.01),同时胚胎畸形发生率明显升高,畸形以神经管闭合不全、体屈异常多见。表明Al(NO3)3可导致胚胎发育迟缓和神经系统等器官发育畸形。     

Effects of maternal micronutrient supplementation on fetal loss and infant mortality: a cluster-randomized trial in Nepal

BACKGROUND: We previously reported that maternal micronutrient supplementation in rural Nepal decreased low birth weight by approximately 15%. OBJECTIVE: We examined the effect of daily maternal micronutrient supplementation on fetal loss and infant mortality. DESIGN: The study was a double-blind, cluster-randomized, controlled trial among 4926 pregnant women and their 4130 infants in rural Nepal. In addition to vitamin A (1000 microg retinol equivalents), the intervention groups received either folic acid (FA; 400 microg), FA + iron (60 mg), FA + iron + zinc (30 mg), or multiple micronutrients (MNs; the foregoing plus 10 microg vitamin D, 10 mg vitamin E, 1.6 mg thiamine, 1.8 mg riboflavin, 2.2 mg vitamin B-6, 2.6 microg vitamin B-12, 100 mg vitamin C, 64 microg vitamin K, 20 mg niacin, 2 mg Cu, and 100 mg Mg). The control group received vitamin A only. RESULTS: None of the supplements reduced fetal loss. Compared with control infants, infants whose mothers received FA alone or with iron or iron + zinc had a consistent pattern of 15-20% lower 3-mo mortality; this pattern was not observed with MNs. The effect on mortality was restricted to preterm infants, among whom the relative risks (RRs) were 0.36 (95% CI: 0.18, 0.75) for FA, 0.53 (0.30, 0.92) for FA + iron, 0.77 (0.45, 1.32) for FA + iron + zinc, and 0.70 (0.41, 1.17) for MNs. Among term infants, the RR for mortality was close to 1 for all supplements except MNs (RR: 1.74; 95% CI: 1.00, 3.04). CONCLUSIONS: Maternal micronutrient supplementation failed to reduce overall fetal loss or early infant mortality. Among preterm infants, FA alone or with iron reduced mortality in the first 3 mo of life. MNs may increase mortality risk among term infants, but this effect needs further evaluation.     

叶酸、维生素B_6、B_(12)对局灶性脑缺血大鼠血浆同型半胱氨酸水平和抗氧化作用的研究

目的:研究叶酸(FA)、维生素B6(VB6)和维生素B12(VB12)对局灶性脑缺血大鼠血浆同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)水平和抗氧化作用。方法:SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、大脑中动脉闭塞模型组(MCAO)、MCAO+FA组和MCAO+FA+VB6+VB12组(MCAO+CV)。后三组均经手术造成MCAO模型,维生素补充前、补充28d后和手术后24h分别检测大鼠血浆Hcy浓度及血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量,缺血后检测脑组织抗氧化指标。结果:补充FA、VB6和VB12后及缺血后,MCAO+FA组和MCAO+CV组血浆Hcy均低于Sham组和MCAO组,且MCAO+CV组低于MCAO+FA组;MCAO+FA组和MCAO+CV组血清或脑组织SOD和GSH-Px活性均高于MCAO组,MDA含量低于MCAO组。结论:补充FA、VB6和VB12能降低血浆Hcy浓度,提高机体抗氧化能力,减轻脑缺血造成的氧化应激损伤。     

妇女妊娠前后增补叶酸预防神经管畸形的成本效果分析

目的：对我国妇女妊娠前后服用叶酸预防神经管畸形干预进行成本效果评价。方法：从社会的角度，构建决策树进行成本效果分析，并进行敏感性分析。结果：全国普遍实施增补叶酸干预的方案（FA2）和北方普遍干预且南方农村干预的方案（FA4）效果较好，敏感性分析显示疾病发生率、干预成本等因素影响其成本效果。结论：该干预是一项具有成本效果的预防技术，其中以北方普遍干预而南方农村干预方案的效果和成本效果较佳。     

细胞凋亡在环磷酰胺致大鼠神经管畸形中作用

目的 探讨细胞凋亡在环磷酰胺致大鼠神经管畸形发生中的作用。方法 利用环磷酰胺致大鼠神经管畸形的模型,体内实验利用光镜、透射电镜的方法进行检测,而在体外实验中利用倒置相差显微镜、流式细胞仪和单细胞凝胶电泳的技术检测细胞凋亡在其发生中的作用。结果 (1)光镜病理切片观察到,细胞核浓缩深染并碎解成许多碎片;(2)透射电镜观察可见细胞核固缩以及染色质分布欠均匀等细胞凋亡的特征性变化;(3)倒置相差显微镜观察发现加有环磷酰胺的组别漂浮细胞增多,神经突触变短,存活细胞数减少,网络变稀疏;(4)流式细胞仪检测发现有明显的“凋亡峰”的出现;而通过单细胞凝胶电泳实验检测时出现明显的“彗星状细胞”。结论 细胞凋亡是导致神经管畸形发生的重要作用机制之一。