α—半乳糖苷酶消除猪血管内皮Galα（1,3）Gal的初步研究

为了探讨预防异种器官移植产生的免疫排斥反应,采用α－半乳糖苷酶（α－ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ）处理猪股静脉内皮,观察猪血管内皮上的主要异种抗原决定簇α－半乳糖α（１,３）半乳糖（Ｇａｌα（１,３）Ｇａｌ）的表达变化及血管内皮形态学改变,结果发现用α－半乳糖苷酶能在３０分钟内消除猪血管内皮上的异种抗原Ｇｌａα（１,３）Ｇａｌ被处理的猪血管内皮在１小时内未见形态学的病理改变,提示α－半乳糖苷酶直接处     

化学合成的转化生长因子α七肽的抗体制备及对BT325细胞增殖…

转化生长因子α（ＴＧＦα）抗体可被用于识别和定位细胞产生的ＴＧＦα及抗肿瘤，作以化学合成的七肽为抗原制备抗体，并观察其生物效应。方法：采用碳化二乙胺为交联剂，将人工化学合成的ＴＧＦα七肽（ＮＨ３－Ｖａｌ－Ｖａｌ－Ｓｅｒ－Ｈｉｓ－Ｐｈｅ－Ａｓｎ－Ａｓｐ－ＣＯＯＨ）与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）偶联，并以此作抗原免疫家兔制备ＴＧＦα抗体，观察此抗体的生物学效应，结果：ＴＧＦα七肽合成正确，七肽与ＢＳＡ偶联     

中国内江猪胰腺组织异种抗原的研究

为获取临床猪→人异种胰腺移植的基础资料，分别采用植物凝集素ＢＳＩＢ４，健康人血清，人类血型抗原Ａ，Ｂ，Ｈ物质单克隆抗体免疫组化法检测１０头内江猪胰腺组织中异种移植抗原的表达。结果显示：内江猪胰腺组织中血管内皮，导管上皮细胞表达α－Ｇａｌ；部分胰岛细胞，胰腺外分泌细胞和所有导管上皮细胞均表达人类血型Ａ抗原。结论；人体内存在抗内江猪胰腺组织部分细胞的天然抗体；内江猪胰腺组织异种移植抗原的表达情况有可能     

尿中某些酶测定在丁胺卡那肾毒性监测中的应用

探讨药物致肾损伤早期诊断方法。用酶法测定碱性磷酸酶（ＡＬＰ）。速率法测γ－谷氨酰转肽酶（ＧＧＴ）,Ｎ－乙酰－β－Ｄ氨基葡萄糖苷酶（ＮＡＧ）、β－半乳糖苷酶（Ｇａｌ）及肌肝（ＵＣｒ）,磺柳酸法测尿蛋白（Ｐｒｏ）。结果：尿酶升高均早于尿蛋白的出现,特别是ＮＡＧ于用药后第３天即有显著升高,Ｇａｌ则在用药后３ｄ内持续升高,尿酶,特别是ＮＡＧ是药物引起肾损伤早期诊断指标。     

化学合成的转化生长因子α七肽的抗体制备及对BT_（325）细胞增殖的抑制作用

目的：转化生长因子α（ＴＧＦα）抗体可被用于识别和定位细胞产生的ＴＧＦα及抗肿瘤，作者以化学合成的七肽为抗原制备抗体，并观察其生物效应．方法：采用碳化二乙胺为交联剂，将人工化学合成的ＴＧＦα七肽（ＮＨ３－Ｖａｌ－Ｖａｌ－Ｓｅｒ－Ｈｉｓ－Ｐｈｅ－Ａｓｎ－Ａｓｐ－ＣＯＯＨ）与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）偶联，并以此作抗原免疫家兔制备ＴＧＦα抗体，观察此抗体的生物学效应．结果：ＴＧＦα七肽合成正确；七肽与ＢＳＡ偶联率达１２．５８∶１；免疫动物抗血清先经硫酸铵沉淀分离，再经用连接有ＴＧＦα七肽胃蛋白酶（ｐｅｐｓｉｎ）偶联物的活化ＣＮＢｒ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析柱纯化，ＴＧＦα七肽抗体得率为０．７ｇ／Ｌ抗血清；免疫细胞化学染色显示该抗体能识别ＢＴ３２５细胞产生的ＴＧＦα；ＴＧＦα七肽抗体具有剂量依赖性抑制肿瘤细胞（ＢＴ３２５细胞）生长的作用．结论：作者制备的ＴＧＦα七肽抗体具有识别、定位细胞产生的ＴＧＦα和抗肿瘤的生物学效应．     

自制基因枪在小鼠活体转基因中的应用

将携带有β－半乳糖苷酶基因的质粒ｐＳＶ－β－Ｇａｌ包裹在直径１～５μｍ的金微粒表面，用自行设计并构建的基因枪加速微弹轰击成年小鼠耳朵及幼鼠腹部皮肤。１～２ｄ后剪下轰击部位组织，用β－半乳糖苷酶的底物Ｘ－Ｇａｌ进行组化检测，在显微镜下看到轰击部位出现许多酶与底物特异反应所形成的深蓝色斑点，证实β－半乳糖苷酶基因转移到了小鼠体内并且获得表达。     

自制基因枪在小鼠活体转基因中的应用

将携带有β－半乳糖苷酶基因的质粒ｐＳＶ－βＧａｌ包裹在直径１￣５ｕｍ的金微粒表面，用自行设计并构建的基因枪加速微弹轰击成年小鼠耳朵及幼鼠腹部皮肤。１￣２ｄ后剪下轰击部位组织，用β－半乳糖苷酶的底物Ｘ－Ｇａｌ进行组化检测，在显微镜下看到轰击部位出现许多酶与底物特异反应所形成的深蓝色斑点，证实β－半乳糖苷酶基因转移到了小鼠体内并且获得表达。     

不同类型标本的衰老相关—β—半乳糖酸苷酶染色方法

目的：研究衰老相关－β－半乳糖苷酶（ＳＡ－β－Ｇａｌ）组化染色在不同类型组织切片中的应用。方法：比较血涂片、冰冻切片及石蜡切片在不同条件下ＳＡ－β－Ｇａｌ的显色效果。结果与结论：冰冻切片结果良好；石蜡切片经抗原修复后，结果不及未经抗原修复者；血涂片以４０ｇ／Ｌ多聚甲醛固４５ｍｉｎ者效果最佳。ＳＡ－β－Ｇａｌ可用于不同类型的组织标本。     

培养人脐动脉内皮细胞的组织化学和免疫细胞化学的研究

用细胞化学方法研究了体外培养人脐动脉内皮细胞的Ｍｇ－ＡＴＰ酶及碱性磷酸酶活性，并与人脐带切片中血管内皮以及大鼠脑、心、肾及肝等切片中血管内皮有关酶相比较。同时，用免疫细胞化学方法检查了培养脐动脉内皮细胞的Ⅷ因子相关抗原。结果显示∶（１）培养４８及７２ｈ的脐动脉内皮细胞、人脐带血管及大鼠脑、心、肾、肝血管内皮都呈Ｍｇ－ＡＴＰ酶阳性。（２）碱性磷酸酶在上述各标本的血管内皮均呈阴性反应。（３）培养的人脐动脉内皮细胞呈Ⅷ因子相关抗原阳性。以上结果提示∶（１）体外培养人脐动脉内皮细胞和体内重要器官血管内皮的功能有相似性，是一种较为理想的研究人类动脉血管内皮生理功能和疾病的细胞模型。（２）Ｍｇ－ＡＴＰ酶可作为脐血管内皮以及脑、心、肾、肝等器官血管内皮的标志酶之一。     

Fabry病肾脏的电镜观察

Ｆａｂｒｙ病由Ｆａｂｒｙ于１８９８年首先描述，是一种Ｘ染色体连锁的先天性遗传缺陷，其α－半乳糖苷酶Ａ缺乏，导致糖鞘脂（Ｇｌｙｃｏｓｐｈｉｎｇｏｌｉｐｉｄ）在组织中沉积，表现为全身出现血管周围泡沫样细胞〔１〕。本病绝大多数为男性患者，女性非常罕见，国外...     

中国版纳近交系小型猪心脏异种抗表位α1,3—Gal的分布

目的：研究中国版纳小型猪心脏的异种抗原α1,3-Gal的分布和半宣分析，为小型猪心脏的转基因和异种移植提供资料。方法：通过亲和免疫组织化学法和图像分析对10头版纳小型猪心脏进行α1,3-Gal的分布和半定量研究。结果：α1,3-Gal分布，心肌细胞未发现α1,3-Gal分布。半定量分析发现α1,3-Gal表达量心房内膜最多，心肌间质最少。结论：异种抗原α1,3-Gal在心脏中的表达存在较大差异，提示可以通过转基因猪来克服超急性异种排斥反应。     

体外循环前后血中可溶性细胞间粘附分子—1,肿瘤坏死因 …

目的 观察先天性心脏病患者体外循环下心脏直视手术前后血中可溶性细胞间粘附分子－１（ｓＩＣＡＭ－１）、肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）及尿微量白蛋白（Ｕ－Ｍａｌ）的变化，探讨体外循环对血管内皮细胞损伤或激活及血管通透性的影响。方法 于诱导麻醉期间、体外循环结果、停机２、４ｈ、术后第１天清晨取血及尿标本，分别用酶联免疫吸附法测定ｓＩＣＡＭ－１和放射免疫法测定ＴＮＦ－α及Ｕ－Ｍａｌ的浓度。结果 体外循环结     

急性淋巴细胞白血病细胞分化与花生凝集素受体表达

用系列单抗与标记的花生凝集素（ＰＮＡ）对３８例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）细胞行免疫分型与确定分化阶段，检测ＡＬＬ细胞ＰＮＡ受体表达情况，与正常成熟淋巴细胞（ＮＭＬ）对照。发现Ｔ－ＡＬＬ，Ｎｏｎ－Ｔ－ＡＬＬ细胞大多表达ＰＮＡ受体，而ＮＭＬ细胞极少表达ＰＮＡ受体，两者有显著差别（Ｐ＜０．０１）。经神经氨酸酶（ＮＡ）预处理后，Ｎｏｎ－Ｔ－ＡＬＬ与ＮＭＬ细胞ＰＮＡ受体表达明显增加（Ｐ＜０．０５），以ＮＭＬ为甚，而Ｔ－ＡＬＬ细胞ＮＡ处理前后ＰＮＡ受体表达未见明显区别；ＡＬＬ细胞ＰＮＡ受体表达与细胞分化程度存在显著的等级相关（ｒ８＝－０．３５７，Ｐ＜０．０５）。结果表明ＡＬＬ细胞上大多存在Ｄ－半乳糖－β（１－３）－Ｎ－乙酰氨基半乳糖基（Ｄ－Ｇａｌ－β（１－３）－Ｎ－ＧａｌＮＡＣ）；ＡＬＬ细胞分化程度越高。细胞上Ｄ－Ｇａｌ－β（１－３）－Ｎ－ＧａｌＮＡＣ连接唾液酸末端越多。     

猪囊尾蚴融合蛋白电泳分析

猪囊尾蚴２８ＫＤａ、１８ＫＤａ、３４ＫＤａ抗原片段经培养、诱导、表达４种β－半乳糖苷－猪囊尾均重组基因融合蛋白电泳４种融翕旧白经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳主以其为抗原对囊虫病人进行简化－Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ （ｓｉｍｐｌｉｆｉｅｄ－Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ，ＳＷＢ）检测，结果发现，融合蛋白与粗制抗原相比组合 分明显减少且具有高度的特异性和敏感性。     

镉中毒对大鼠血,尿氨基酸及酶水平的影响

１．５ｍｇ／ｋｇ氯化镉单次染毒后２４小时，测定大鼠尿及血液中β－半乳糖苷酶（β－Ｇａｌ），乳酸脱氢酶（ＬＤＨ），谷草转氨酶（ＧＯＴ）及各种游离氨基酸。结果发现染毒鼠尿中ＬＤＨ增高达７倍，ＧＯＴ增高６１％，但β－Ｇａｌ没有的显著增加，尿中各游离氨基酸无显著变化；血浆中丝氨酸和异亮氨酸含量明显下降（分别为Ｐ＜０．０５，＜００１）。肾超微结构见近曲小管胞浆空泡数目增加。     

培养人脐动脉内皮细胞的组织化学和免疫细胞化学的研究

用细胞化学方法研究了体外培养人脐动脉内皮细胞的Ｍｇ－ＡＴＰ酶及碱性磷酸酶活性，并与人脐带切片中血管内皮以及大鼠脑，心，肾及肝等切片中血管内皮有关酶相比较，同时，用免疫细胞化学方法检查了培养动脉内皮细胞的Ⅷ因子相关抗原，结果提示，（１）培养４８及７２ｈ的脐动脉内皮细胞，人脐带血管及大鼠脑，心，肾，肝血管内皮都呈Ｍｇ－ＡＴＰ酶阳性。（２）碱性磷酸酶在上述各种标本的血管内皮均呈阴反应。（３）培养的人脐动     

The Screening of Colorectal Cancerby Enzymatic Detection of Sialic Acid－free β－D－Gal（1→3）－D－GalNAc in Rectal Mucus

ＴｈｅＳｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆＣｏｌｏｒｅｃｔａｌＣａｎｃｅｒｂｙＥｎｚｙｍａｔｉｃＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＳｉａｌｉｃＡｃｉｄ－ｆｒｅｅβ－Ｄ－Ｇａｌ（１→３）－Ｄ－ＧａｌＮＡｃｉｎＲｅｃｔａｌＭｕｃｕｓＭｕＣｈｕａｎｊｉｅ（穆传杰）；ＬｉＳｈｉｓｈｅ...     

克服异种移植超急性排斥的方法

人供体器官严重短缺极大地限制了同种器官移植的推广和应用 ,但也极大地推动了异种器官移植的研究。由于种种原因 ,猪被认为是人异种器官移植最理想的供体。猪→人的移植属于非协同异种移植 ,其主要障碍是超急性排斥。克服超急性排斥是猪→人异种移植成功的第一步 ,也是关键的一步。目前普遍认为 ,这种超急性排斥是由天然抗体 (主要是ＩｇＭ ,此外还有ＩｇＧ、甚至ＩｇＡ)和供者异种抗原 (主要是Ｇａｌα1,3Ｇａｌ)反应 ,补体激活 [通过经典和 (或 )旁路补体激活途径 ]介导组织损伤 ,属于体液免疫范畴。据此 ,研究人员设计了许多对策克服超…     

猪抗原和对应抗体在异种移植中的研究进展

移植中,半乳糖-α1,3半乳糖(Gal)是一种主要的抗原,但α半乳糖转移酶基因敲除(GalT-KO)的猪不表达Gal抗原。而GalT-KO的猪器官用于异种移植明显降低了免疫排斥但不能完全消除排斥反应,这表明异种器官移植受体中除抗Gal抗体外还存在非Gal抗体。利用多糖分析和蛋白质组学的方法分别鉴定出了两种新的异种抗原(N-羟乙酰神经氨酸和Sda血型抗原),然而它们在异种移植中的病理作用仍有待进一步研究。除Gal抗原以外,其他多个非Gal抗原缺失基因工程猪的构建是将来异种移植研究的重要方向。     

刺蒺藜果实中两种甾体皂苷的分离与鉴定

采用层析分离技术,从刺蒺藜Ｔｒｉｂｕｌｓ ｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ果实中分离出２种甾体皂苷,利用各种光谱分析,鉴定为海柯皂苷元３－Ｏ－β－Ｄ吡喃葡萄糖基（１→４）－β－Ｄ吡喃半乳糖苷（Ⅰ）和海海柯皂苷元３－Ｏ－β－Ｄ吡喃葡萄糖基（１→２）－「β－Ｄ－吡喃木糖（１→３）－β－Ｄ吡喃葡萄糖基（１→４）－β－Ｄ－吡喃半乳糖苷（Ⅱ）。化合物Ⅰ为首次从刺蒺藜果实中分得,化合物Ⅱ为首次从蒺藜原植物中分得。