油茶皂苷体外诱导人白血病Jurkat细胞凋亡及其可能机制

目的:探讨油茶皂苷在体外诱导人白血病Jurkat细胞的凋亡及其可能机制。方法:将不同浓度的油茶皂苷作用于人白血病Jurkat细胞,应用细胞计数法检测其对细胞增殖的影响,FCM检测细胞周期分布和细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测细胞caspase-3、多聚ADP-核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]、p-Bcl-2、Bcl-2、Bax和caspase-9蛋白的表达。结果:1～16μg/mL油茶皂苷可抑制Jurkat细胞的增殖,呈剂量依赖性。1～4μg/mL油茶皂苷作用Jurkat细胞24h后,G0/G1期和G2/M期细胞比率下降,S期细胞比率上升,细胞凋亡率随着油茶皂苷浓度的增加而上升;Jurkat细胞中,p-Bcl-2和Bcl-2蛋白的表达水平下调,caspase-3、PARP和caspase-9蛋白的表达水平上调,Bax蛋白的表达水平无明显变化。结论:油茶皂苷能抑制人白血病Jurkat细胞增殖和诱导其凋亡,其作用机制可能与细胞凋亡的线粒体途径有关。     

华蟾素诱导U937细胞凋亡及其作用机制

目的：研究华蟾素诱导白血病U937细胞凋亡，探讨其可能的作用机制。方法：MTT法检测细胞存活率，瑞氏染色及荧光染色观察细胞凋亡形态学改变，琼脂糖凝胶电泳观察DNA片段化改变，TdT原位标记计算凋亡率，流式细胞术检测bcl-2表达，半定量RT-PCR检测Fas和Fas-1 mRNA水平。结果：与对照组相比，0．225～1．8μg/mL华蟾素作用1-3d明显抑制U937细胞生长，具有剂量．时间相关性，24h时的IC50为1．36μg/mL。0．9μg/mL华蟾素作用1d，U937细胞出现凋亡典型形态学改变；DNA电泳出现凋亡特有“梯子”条带。0．225、0．45和0．9μg/mL华蟾素作用1d，TdT原位标记检测凋亡率分别为4．8％、13．57％和24．33％。凋亡细胞bcl-2表达及Fas-1 mRNA水平下降，Fas mRNA水平增高。结论：华蟾素可能通过抑制bcl-2、Fas-1基因及活化Fas基因的途径来抑制U937细胞生长并诱导凋亡。     

三氧化二砷诱导白血病细胞凋亡作用机制研究进展

三氧化二砷治疗白血病和其他肿瘤的机制主要是通过诱导肿瘤细胞凋亡。其诱导白血病细胞凋亡的途径主要有降解融合蛋白，线粒体途径，激活Caspase家族，抑制NF-κB、细胞增殖和端粒酶活性等。现就其诱导白血病细胞凋亡的作用机制作一综述。     

VES诱导的人口腔鳞癌Tca 8113细胞凋亡作用机制的初步研究

目的：明确维生素E琥珀酸酯（vitamin E succinate，VES）诱导的人口腔鳞癌Tea8113细胞的凋亡作用，初步探讨其凋亡机制。方法：PI单染色和Annexin V-PI双染色后，流式细胞术检测VES对细胞周期的影响及细胞凋亡率；RT-PCR、western blot法检测促凋亡基因bax在mRNA水平和蛋白水平上的表达。结果：VES能显著抑制Tea8113细胞的生长，诱导出现典型的凋亡峰，bax基因及蛋白表达上调。结论：VES能诱导口腔鳞癌细胞Tca8113的凋亡，该作用可能与bax基因表达上调有关。     

三氧化二砷诱导白血病细胞凋亡作用机制研究进展

三氧化二砷治疗白血病和其他肿瘤的机制主要是通过诱导肿瘤细胞凋亡.其诱导白血病细胞凋亡的途径主要有降解融合蛋白,线粒体途径,激活Caspase家族,抑制NF-κB、细胞增殖和端粒酶活性等.现就其诱导白血病细胞凋亡的作用机制作一综述.     

三氧化二砷诱导人卵巢癌细胞凋亡机制的研究

目的：探讨三氧化二砷（arsenic trioxide,As2O3)诱导人卵巢癌细胞株3AO细胞凋亡的机制。方法：以人卵巢癌细胞株3AO细胞为体外实验对象。通过台盼蓝染色法，测定不同浓度As2O3作用不同时间对3AO细胞的生长抑制率；采用流式细胞仪检测法，通过碘化丙（PI）／罗丹明123（Rhodammine 123,Rh123)双重染色测定3AO细胞线粒体跨膜电位（△ψm) ；通过吖啶橙染色，荧光显微镜观察As2O3作用后3AO细胞的形态变化。结果：As2O3对3AO细胞的生长具有明显的抑制作用，且具有时间与剂量依赖性（P＜0．05）；3.0μmol/L的As2O3作用48h后3AO细胞中PI－Rh123^-细胞与对照组相比，差异有显著性（P＜0．05）；As2O3作用后，3AO细胞呈现典型的凋亡细胞形态特征。结论：As2O3通过诱导凋亡来抑制人卵巢癌细胞株细胞的生长，其机制与线粒体跨膜电位△ψm下降有关。     

VEGF反义寡核苷酸对白血病细胞凋亡的影响

目的: 观察血管内皮生长因子(vascular endotheliM growth factor,VEGF)反义寡核苷酸对白血病细胞系K562细胞凋亡的作用.方法: 实验分为VEGF反义组、VEGF错义组和空白对照组,应用阳离子聚合物介导硫代修饰VEGF寡核苷酸转染体外培养的白血病细胞系K562细胞48 h后,观察细胞形态,琼脂糖凝胶电泳法检测DNA梯状带,流式细胞仪Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡.结果: 反义组可见细胞集落减少,细胞皱缩,细胞质中颗粒增多,核固缩并出现细胞碎片;而错义组和空白对照组细胞均悬浮成团,细胞轮廓清楚,胞体透亮,生长旺盛.反义组见凋亡梯形带,错义组和空白对照组仅1条DNA条带.反义组细胞凋亡率达23.28%,与错义组和空白对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05).结论: VEGF反义寡核苷酸可诱导白血病细胞凋亡,提示VEGF与抗白血病细胞凋亡有关.     

5-FU诱导白血病细胞凋亡的分子机制研究

目的:检测化疗药物5氟尿嘧啶(5FU)引起的T淋巴白血病细胞凋亡,及与之相关蛋白的表达和信号通路,为探索T淋巴细胞凋亡分子机制打下基础,为相关肿瘤的治疗提供依据。方法:用5FU(10μg/mL)刺激Jurkat细胞36h以诱导细胞发生凋亡,用流式细胞术和MTS比色法检测细胞存活率,计算细胞凋亡率;用Western blot检测p53的表达和caspase3的变化;向Jurkat细胞中瞬时共转染野生型或突变型pCMV p53和pEGFP c1检测p53在5FU诱导的T淋巴细胞凋亡中的作用。结果:5FU能诱导Jurkat细胞凋亡并伴随p53表达增加及caspase3的活化;野生型p53过表达可明显增加细胞对5FU的敏感性。结论:5FU诱导的T淋巴白血病细胞凋亡的分子机制可能涉及p53及caspase3。     

人类白血病诱导分化和凋亡的细胞及分子机制研究

在国家自然科学基金、863计划、上海市自然科学基金和卫生部科学研究基金项目的资助下，“人类白血病诱导分化和调亡的细胞及分子机制研究”项目组，从临床、细胞生物学和分子生物学等诸方面，对急性早幼粒细胞白血病（APL）的分化、凋亡调控进行了系统的、创造性的研究。项目组在原有全反式维甲酸（ATRA）对APL分化诱导治疗的基础上，进一步探索改进疗效的方法，发现小剂量A～（15lug／天）可取得与常规剂量（45lug／天）相同疗效，而副作用明显降低。还比较了不同缓解后的治疗方案的效果，证实化疗与ATRA合用的疗效最佳。该项目发现…     

姜黄素诱导白血病细胞凋亡相关分子机制的研究进展

姜黄素是从姜科姜黄素属植物中提取的一种多酚类化合物,具有抗感染、抗氧化、抗肿瘤等药理作用.姜黄素的抗肿瘤作用日益受到人们的重视,其对多种肿瘤细胞的产生、增殖及转移均有抑制作用.文章综述近年来姜黄素诱导白血病细胞凋亡的相关分子机制.     

白血病细胞核基质蛋白的初步研究

目的比较白血病细胞与正常骨髓细胞核基质成分的差异。方法用高盐法抽取细胞核基质蛋白,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔｔｉｎｇ分析和观察了急性粒细胞性白血病和慢性粒细胞白血病慢性期、急粒变期及化疗前后白血病细胞核基质蛋白的改变。结果慢性粒细胞白血病慢性期、急粒变期及急性粒细胞白血病细胞核基质与正常者有明显差异,主要改变是白血病细胞分别在某些区带出现新的核基质蛋白或核基质蛋白含量的增加,慢性粒细胞白血病急性变后与慢性期相比也在某些区带出现新的核基质蛋白或核基质蛋白含量的增加。化疗前后白血病细胞核基质蛋白成分的比较,表现为化疗后核基质蛋白明显减少。结论白血病细胞与正常骨髓细胞相比,核基质蛋白有明显的差异,核基质蛋白成分的改变可能与白血病的发生、发展以及慢性粒细胞白血病的急性变有关,核基质是某些抗癌药物的作用位点。     

Lycorine induces apoptosis and down-regulation of Mcl-1 in human leukemia cells

Lycorine is an alkaloid isolated from the bulb of the Amaryllidaceae Lycoris. Here, we report that treatment with lycorine resulted in survival inhibition and apoptosis induction in human leukemia cell lines. Lycorine induced apoptosis in human leukemia cells via intrinsic mitochondria pathway and caused a rapid-turnover of protein level of Mcl-1 which occurred before caspases activation. Furthermore, pronounced apoptosis accompanied by the down-regulation of Mcl-1 was also observed in blasts from patients with acute myeloid leukemia. Our findings suggest that lycorine may be a good candidate therapeutic agent against leukemia in worth of further evaluation.     

苏木水提物对卵巢癌细胞增生的抑制及诱导凋亡作用

 [目的　观察苏木水提物对人类浆液性囊腺卵巢癌细胞SKOV3的生长抑制及诱导凋亡作用。方法　采用细胞计数法绘制生长抑制曲线;光镜下观察药物作用后SKOV3细胞经锥虫蓝染色后的形态变化;电子显微镜下观察苏木水提物作用后细胞的超微结构;不同质量浓度苏木水提物作用于细胞后,用流式细胞术（FCM）进行凋亡及周期分析。结果　生长曲线显示苏木水提物对SKOV3细胞有明显的生长抑制作用,且呈现一定的质量浓度依赖性;电镜图可见典型的细胞凋亡特征,如细胞核固缩、染色质凝聚及凋亡小体形成;FCM分析证实：体外培养的SKOV3细胞经不同质量浓度的苏木水提物作用后,细胞生长明显受到抑制,细胞凋亡率随苏木水提物质量浓度的增加而增加。结论　苏木水提物对人类卵巢癌细胞株SKOV3有明显的生长抑制及诱导凋亡作用。     

靶向CD123的重组白细胞介素-3-力达霉素融合蛋白对白血病MO7e细胞的杀伤机制

 目的　研究白细胞介素-3-力达霉素（IL-3-LDM）融合蛋白靶向杀伤CD+123 肿瘤细胞的作用机制。方法　用CCK-8检测IL-3-LDM融合蛋白靶向杀伤人类原巨核细胞白血病MO7e细胞的作用,用IC20浓度的IL-3-LDM及LDM分别与MO7e靶细胞培养后,利用AnnexinV-FITC及碘化丙啶（PI）染色经流式细胞分选术检测分析细胞凋亡率和周期分布变化。结果　LDM、IL-3-LDM对MO7e细胞的IC50分别为116、50 pmol／L。经IC20浓度的IL-3-LDM（12 pmol／L）融合蛋白与LDM（30 pmol／L）分别处理MO7e细胞后,在24、48、72 h分别检测到细胞凋亡率呈逐渐上升趋势（IL-3-LDM组分别为26.1 %、59.3 %和62.1 %,LDM组分别为34.4 %、43.3 %和55.2 %）,且细胞在处理48和72 h后出现明显的G2／M期阻滞现象,与没有靶向的LDM药物作用机制一致。结论　IL-3-LDM融合蛋白作用机制与LDM一致,通过引起细胞G2／M期阻滞导致细胞凋亡进而死亡,证明IL-3靶向作用及其携带的高效药物LDM杀伤作用的有效性。     

Novel insights into the antiproliferative effects and synergism of quercetin and menadione in human leukemia Jurkat T cells

The flavonoid quercetin and menadione (vitamin K₃) are known as potent apoptogens in human leukemia Jurkat T cells. We explored some underlying mechanisms and the potential relevance of the combination quercetin–menadione for clinical applications. In acute treatments, quercetin manifested a strong antioxidant character, but induced a transient loss of Δψ_m, likely mediated by opening of the mitochondrial permeability transition pore. After removal of quercetin, persistent mitochondrial hyperpolarization was generated via stimulation of respiratory Complex I. In contrast, menadione-induced Δψ_m dissipation was only partially and transiently reversed after menadione removal. Results indicate that Ca²⁺ release is a necessary event in quercetin-induced cell death and that the survival response to quercetin is delineated within 1 h from exposure. Depending on dose, the two agents exhibited either antagonistic or synergistic effects in reducing clonogenicity of Jurkat cells. 24-h combinatorial regimens at equimolar concentrations of 10–15 μM, which are compatible with a clinically achievable (and safe) scheme, reduced cell viability at efficient rates. Altogether, these findings support the idea that the combination quercetin–menadione could improve the outcome of conventional leukemia therapies, and warrant the utility of additional studies to investigate the therapeutic effects of this combination in different cellular or animal models for leukemia.     

黄芪总苷诱导人白血病NB4细胞凋亡的机制

目的 研究黄芪总苷(TA)对体外培养的人早幼粒细胞白血病细胞株NB4增殖及凋亡机制的影响.方法 将不同浓度的TA与NB4细胞共培养48 h,采用细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒8(CCK-8)检测细胞生长抑制率,以流式细胞仪检测细胞凋亡率及凋亡过程中细胞内核因子κB(NF-κB)和蛋白激酶B(PKB,又称Akt)蛋白浓度的变化.结果 200、400、600、800 ms/L TA均可抑制NB4细胞生长,抑制率分别为(14.54±3.20)%、(24.79±3.98)%、(57.28±4.71)%和(88.28±4.65)%,呈浓度依赖性增加(P<0.05).200、400、600、800 mg/L TA组的细胞凋亡率分别为(10.03±3.31)%、(14.87±3.65)%、(23.45±1.90)%和(25.26 4-2.07)%,与对照组[(1.80±1.24)%]相比,差异均有统计学意义(P<0.05),且200、400、600 ms/L TA组的细胞凋亡率呈浓度依赖性增加(P<0.05);800 mg/L TA组的细胞凋亡率增加不明显,与600 ms/L TA组相比,差异无统计学意义(P>0.05),但出现了大量的坏死细胞,坏死率达(45.65±3.16)%.细胞凋亡过程中伴随NF-κB蛋白表达下降,不同浓度TA组与对照组差异均有统计学意义(P<0.05),而Akt蛋白的表达无明显变化(P>0.05).结论 黄芪总苷可以抑制NB4细胞增殖,并可以通过不依赖Akt的NF-κB信号通路来诱导NB4细胞凋亡.

Abstract：

Objective To investigate the effect of total astragalosides (TA) on proliferation and apoptosis in human leukemia NB4 cells in vitro. Methods The NB4 cells were treated with TA at different concentrations for 48 h in culture. Growth inhibition rates were measured by CCK-8 method. Flow cytometry was used to explore the cell apoptosis and the activity of NF-κB and Akt during apoptosis. Results TA at different concentrations (200, 400, 600, 800 mg/L) inhibited proliferation of NB4 cells in a dose-dependent manner ( P < 0. 05), and the inhibitory rates of TA on NB4 cells were (14. 54 ± 3. 20) % , (24.79 ±3.98)%, (57.28 ±4.71)% and (88.28 ±4.65)% , respectively. In terms of the induction of apoptosis, there was a significant difference between the TA group and blank control [(1.80±1.24)%, P<0.05]. At TA doses of 200, 400 and 600 mg/L, the apoptotic rates of NB4 cells were ( 10. 03 ± 3.31)% , (14.87 ±3.65)% , (23.45 ± 1.90) % , respectively. Besides, TA induced apoptosis of NB4 cells in a dose-dependent manner in the groups of 200 mg/L, 400 mg/L, 600 mg/L (P<0.05). But there was no significant difference in apoptotic rates between the groups of 800 mg/L and 600 mg/L [(23.45 ±1.90)%, P> 0.05]. In the group of 800 mg/L, the necrotic cells increased highly and the necrotic rate reached (45.65 ± 3.16)%. After TA treatment of NB4 cells at different concentrations (200, 400, 600 mg/L), the expression of NF-kB protein was significantly decreased compared with that of the blank control (9. 79 ±0. 95, P<0.05), while Akt protein was not significantly decreased (P>0.05). Conclusion TA can inhibit the growth of NB4 cells and induce apoptosis in NB4 cells through an Akt-independent NF-kB signaling pathway.     

去氢木香内酯对慢性粒细胞白血病K562细胞增殖的影响及其机制

目的探讨去氢木香内酯对慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞增殖的影响及其机制。方法用不同浓度去氢木香内酯作用于对数生长期的K562细胞,采用瑞特-吉姆萨染色观察细胞形态,CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期、凋亡情况及细胞表面分化抗原CD14和CD11b表达,蛋白质印迹法检测JAK-STAT通路、细胞凋亡及细胞周期相关蛋白表达。结果不同浓度(4.0、6.0、8.0、10.0、12.0μmol/L)去氢木香内酯作用24h均能抑制K562细胞增殖,与对照组比较,差异有统计学意义(F=109.510,P<0.05)。5.0、10.0μmol/L去氢木香内酯作用24h后,K562细胞凋亡率分别为(16.1±3.8)%、(29.6±4.3)%,较对照组的(3.1±0.5)%升高(F=83.255,P<0.05)。5.0、10.0μmol/L去氢木香内酯作用24h后,K562细胞的G2/M期细胞比例分别为(17.0±3.2)%、(28.8±3.9)%,较对照组的(9.1±2.3)%升高(F=161.598,P<0.05);S期细胞比例分别为(48.1±3.9)%、(61.0±5.4)%,较对照组的(39.6±3.6)%升高(F=192.356,P<0.05)。2.5、5.0μmol/L去氢木香内酯作用72h后,K562细胞的CD14表达率分别为(28.6±3.9)%、(41.1±4.4)%,较对照组的(3.1±0.5)%升高(F=132.811,P<0.05);K562细胞的CD11b表达率分别为(42.4±5.0)%、(61.2±5.7)%,较对照组的(4.2±1.1)%升高(F=179.553,P<0.05)。去氢木香内酯能够降低JAK2、STAT5、cyclinE、CDK2、cyclinA、CDC25C、cyclinB1、CDK1及bcl-2蛋白表达,上调p21及bax蛋白的表达。结论去氢木香内酯能够抑制慢性粒细胞白血病K562细胞增殖,可能是通过细胞周期阻滞、诱导凋亡及分化而实现的。     

硼替佐米对白血病细胞株HEL抑制作用的初步探讨

 目的　探讨硼替佐米单独或联合化疗药物对急性白血病细胞株HEL生长的影响及其机制。方法　MTT法检测药物对HEL的生长抑制效应,流式细胞术检测细胞周期变化及凋亡,Western blotting检测凋亡及细胞周期相关蛋白表达。结果　硼替佐米对HEL细胞的生长抑制作用呈浓度依赖关系,其半数抑制浓度（IC50）为7.15 nmol／L;硼替佐米联合化疗药物明显增强抑制HEL细胞生长;流式细胞术检测可见时间依赖性的G2／M周期阻滞;Western blotting检测显示bcl-2表达下降,bax、p27表达增高,联合用药时具有相加效应,但不管是单独或联合用药,p53蛋白的表达均无明显改变。结论　硼替佐米可能是一种有效治疗急性白血病的药物,与柔红霉素联合应用有更强的抑制肿瘤细胞生长和诱导其凋亡的作用,其机制可能与bcl-2,bax及p27蛋白的调节有关,是非p53依赖性的。