扶正祛风方通过TGF-β1/Smad信号通路抑制膜性肾病大鼠足细胞转分化的机制

目的:研究扶正祛风方对膜性肾病(MN)模型大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad信号通路及足细胞上皮间充质转化(EMT)的影响,探讨其保护足细胞的分子机制。方法:大鼠随机分为正常组和造模组,造模组经阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)诱导构建MN模型后分为模型组、氯沙坦钾组(0.05 g·kg^-1)及扶正祛风方高、中、低剂量(41,20.5,10.25 g·kg^-1)组,给药4周。给药0,2,4周检测24 h尿蛋白(24 h-Upro)水平;给药4周后检测尿素氮(BUN)及血肌酐(SCr)水平,肾组织经苏木素-伊红(HE),马松(Masson),过碘酸-六胺银(PASM)染色后光镜观察病理改变,透射电镜观察肾小球基底膜(GBM),足突改变;免疫组化(IHC)观察足细胞EMT标志物结蛋白(Desmin)的分布及表达强度;蛋白免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)分别检测肾组织TGF-β1,Smad2/3,磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3),Smad7,Desmin mRNA及蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组24 h-Upro,BUN,SCr水平显著升高(P<0.01),免疫复合物沉积升高,GBM增厚和足突融合明显,Desmin mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.01),TGF-β1,Smad2,Smad3 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Smad3 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,扶正祛风方各组及氯沙坦钾组24 h-Upro,BUN水平降低(P<0.05),扶正祛风方中剂量组血SCr水平降低(P<0.05),扶正祛风方各组及氯沙坦钾组肾小球上皮下免疫复合物沉积减少,GBM增厚和足突融合减轻,扶正祛风方高、中剂量组和氯沙坦钾组Desmin在基底膜的表达强度降低;扶正祛风方中剂量组肾组织TGF-β1和p-Smad2/Smad2 mRNA及蛋白表达降低,Smad7 mRNA及蛋白表达升高(P<0.05),扶正祛风方高剂量组p-Smad3/Smad3 mRNA及蛋白表达降低(P<0.05),扶正祛风方高、中剂量组及氯沙坦钾组肾组织Desmin mRNA及蛋白表达降低(P<0.05)。结论:扶正祛风方可能通过抑制TGF-β1/Smad信号通路激活介导的足细胞EMT实现MN足细胞保护的作用。     

宣通三焦、活血通络方对膜性肾病大鼠肾保护作用及肾脏组织中Nephrin、NEPH1表达的影响

目的观察宣通三焦、活血通络方对膜性肾病大鼠血尿生化指标、肾脏病理及肾组织中Nephrin、NEPH1表达的影响。方法取40只清洁级健康SD雄性大鼠,随机选取10只作为正常组,其余大鼠采用阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)进行膜性肾病造模。将造模成功的大鼠随机分为膜性肾病组、雷公藤+激素组、中药组各10只。正常组、膜性肾病组给予生理盐水灌胃,雷公藤+激素组给予雷公藤多苷片和醋酸泼尼松片混悬液灌胃,中药组给予宣通三焦、活血通络方混悬液灌胃,均1次/d,连续4周。测定各组大鼠24h尿蛋白定量(24h UTP)及血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、白蛋白(ALB)、肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平,光镜、电镜、免疫荧光下观察各组大鼠肾脏病理改变,实时荧光定量PCR法测定肾组织中Nephrin和NEPH1 mRNA表达情况。结果与正常组比较,膜性肾病组、雷公藤+激素组、中药组大鼠24h UTP及血清TG、TC水平均明显升高(P均0.05),血清ALB水平及肾组织中Nephrin和NEPH1 mRNA相对表达量均明显降低(P均0.05),SCr、BUN无明显变化(P均0.05);与膜性肾病组比较,雷公藤+激素组、中药组大鼠24h UTP及血清TG、TC水平均明显降低(P均0.05),血清ALB水平及肾组织中Nephrin和NEPH1 mRNA相对表达量均明显升高(P均0.05);中药组血清TC、TG水平均明显低于雷公藤+激素组(P均0.05),雷公藤+激素组和中药组其余指标比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论宣通三焦、活血通络方可以降低膜性肾病大鼠蛋白尿,升高血ALB,调节脂代谢,改善肾脏病理改变,其机制可能与上调肾组织中Nephrin、NEPH1的表达有关。     

叶景华糖肾方对糖尿病肾病大鼠足细胞Desmin蛋白表达的影响

目的观察糖肾方对糖尿病肾病大鼠模型足细胞蛋白Desmin的影响,通过以方测证的方法探讨足细胞损伤的中医病机。方法清洁级SD大鼠30只,予腹腔注射STZ,制备糖尿病肾病(DN)大鼠模型,随机分为正常组、模型组、糖肾方组,正常组与模型组予蒸馏水灌胃,糖肾方组以糖肾方灌胃,6周后处死,收集血、尿液,检测血糖、尿微量白蛋白,光镜观察肾组织病理形态,RT-PCR检测Desmin的mRNA表达。结果 3组尿微量蛋白水平比较,糖肾方组大鼠尿微量蛋白(9.98±1.78)mg/24 h少于模型组(14.64±2.73)mg/24 h(P0.01)。光镜下观测肾小球病理改变发现,糖肾方组肾小球基底膜增厚,系膜基质增生等病理损伤程度均低于模型组。RT-PCR显示糖肾方组Desmin表达(1.805±0.269)则明显低于模型组(3.548±0.621)(P0.01)。结论糖肾方能够有效减少糖尿病肾病大鼠的蛋白尿,改善肾小球病理损伤,下调足细胞Desmin蛋白的表达,保护足细胞,并根据以方测证的原理推论虚和瘀可能是糖尿病肾病足细胞损伤的中医病机。     

益气活血化瘀汤对膜性肾病大鼠肾脏组织Podocin表达的影响

目的观察益气活血化瘀汤对膜性肾病大鼠肾脏组织Podocin蛋白表达的影响,为临床治疗膜性肾病(MN)提供依据。方法 SD大鼠随机分为正常对照组和造模组,其中造模组采用抗Fx1A血清一次性尾静脉注射诱导被动型Heymann肾炎模型,造模成功后将造模组随机分为模型组、洛丁新(盐酸贝那普利)组、益气活血化瘀汤低、中、高剂量组。各组按相应剂量灌胃4周,每周留取大鼠24 h尿量,检测24 h尿蛋白定量(UTP)。于4周末处死大鼠,心脏取血,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血清总蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、三酰甘油(TAG),取肾脏组织行Masson、PASM染色观察肾脏组织病理改变,免疫荧光观察肾脏组织IgG、C3改变,免疫组化观察Podocin蛋白在肾脏组织的阳性表达情况。结果与正常组相比,其余5组UTP均升高(P 0.05);与模型组相比,各给药组UTP均减少(P0.05),肾脏组织Podocin蛋白表达增加(P 0.01),TP、ALB有所升高但差异无统计学意义(P 0.05),Scr、BUN、TC、HDL-C、TAG差异无统计学意义(P 0.05);与洛丁新组相比,益气活血化瘀汤低、中、高剂量组UTP减少,但差异无统计学意义(P 0.05),各生化指标差异无统计学意义(P 0.05),益气活血化瘀汤低、中、高剂量组肾脏组织Podocin蛋白表达增加(P 0.01);益气活血化瘀汤各组之间各指标差异无统计学意义(P0.05)。结论益气活血化瘀汤可以明显降低膜性肾病大鼠的尿蛋白水平,减少肾脏病理损伤,能够上调肾脏组织Podocin蛋白的表达,延缓膜性肾病的进展。     

糖尿病肾病风邪证要素与理化指标的相关性及祛风通络法干预机制研究

目的:探究糖尿病肾病风邪证要素与理化指标的相关性及祛风通络法对其干预机制。方法:选择2012年9月—2017年5月收治的糖尿病肾病患者129例,记录患者糖尿病肾病病程、体质指数及风邪症候积分,检测24 h尿蛋白量、血清白蛋白、糖化血红蛋白(HbA1c)、血肌酐(Scr),分析风邪症候积分与各理化指标间的关系。将51只成年健康大鼠分为假手术组、模型组及祛风通络组,每组各17只,将模型组及祛风通络组大鼠建立糖尿病肾病模型,假手术组仅作手术切口。术后给予假手术组及模型组大鼠10 mL/kg剂量蒸馏水灌胃,祛风通络组大鼠10 mL/kg剂量祛风通络汤药灌胃,30 d后测定各组大鼠24 h尿蛋白量、血糖水平、血清肝肾功指标、大鼠肾脏组织中各足细胞损伤标志蛋白表达水平,观察各组大鼠肾脏病理情况。结果:24 h尿蛋白量、血清白蛋白及HbA1c不同的糖尿病肾病患者风邪症候积分有明显差别(P0.05);糖尿病肾病风邪证要素积分与24 h尿蛋白量呈正相关(P0.05);假手术组大鼠肾脏未见明显病理变化;模型组大鼠肾脏可见毛细血管阻塞,肾小球肾小管萎缩,系膜细胞及基质增生,间质炎症细胞浸润及纤维组织增生;祛风通络组大鼠肾脏病理情况与模型组大鼠类似,但症状明显较轻;假手术组及祛风通络组大鼠谷丙转氨酶、尿素氮及Scr水平明显低于模型组(P0.05);模型组大鼠24 h尿蛋白量明显大于假手术组及祛风通络组(P0.05);祛风通络组大鼠肾脏中软骨素(nephrin)、足细胞裂隙膜蛋白(podocin)及足细胞标记蛋白(podocalyxin)表达水平明显高于假手术组及模型组(P0.05);模型组大鼠肾脏结蛋白(desmin)表达水平明显高于假手术组及祛风通络组(P0.05)。结论:糖尿病肾病风邪证要素与患者24 h尿蛋白量呈正相关;祛风通络法对肾功能具有保护作用,其机制为抑制足细胞损伤。     

苏木治疗大鼠膜性肾病的实验研究

目的:观察中药苏木(水提取物)对大鼠膜性肾病(MN)的疗效,探讨其在膜性肾病治疗中的作用。方法:采用阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)复制大鼠MN模型,随机分为模型组(B组)、苏木组(C组)、雷公藤组(D组)、强的松组(E组),另设正常对照组(A组),每组10只。各治疗组分别给予苏木、雷公藤多甙片、强的松连续灌胃治疗4周。用药前后检测各组大鼠24h尿蛋白定量等,第4周末观察各组大鼠肾脏光镜下病理变化,并进行白介素18(IL-18)定量酶检测。结果:模型组血脂、24h尿蛋白定量显著升高,血浆蛋白降低明显,苏木组、雷公藤组、强的松组相关指标有好转趋势。光镜下观察模型组肾小球明显肿胀,球内细胞数增多,肾小球基底膜增厚,系膜区系膜细胞增生;各治疗组基底膜增厚不明显,损伤相对减轻。IL-18检测在治疗组表达较模型组有所减少。结论:苏木应用于大鼠膜性肾病后,血、尿化验有好转趋势,大鼠生存表现有所改善,病理及生化检测提示,苏木对大鼠膜性肾病有一定治疗作用。IL-18检测提示苏木在抑制免疫反应方面起到一定作用。     

升阳益胃汤合补阳还五汤对特发性膜性肾病大鼠肾脏的保护作用及对Nephrin、CD2AP表达的影响

目的 观察升阳益胃汤合补阳还五汤对特发性膜性肾病大鼠肾脏的保护作用及对肾组织中肾病蛋白(Nephrin)、CD2相关蛋白(CD2AP)表达的影响。方法 取40只雄性SD大鼠,随机选择10只大鼠作为正常组,余30只大鼠尾静脉一次性注射羊抗大鼠F×1A血清0.4 mL/100 g制备特发性膜性肾病模型。将造模成功后大鼠随机分为模型组、升阳合补阳组、贝那普利组,每组10只。升阳合补阳组给予升阳益胃汤合补阳还五汤全方颗粒剂溶液9.2 g/(kg·d)灌胃,贝那普利组给予盐酸贝那普利溶液0.000 88 g/(kg·d)灌胃,正常组和模型组给予等量蒸馏水灌胃,均1次/d,连续灌胃6周。于灌胃6周末收集各组大鼠24 h尿液,用以检测24 h尿蛋白水平;腹主动脉取血,检测血白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平;取肾组织,HE染色和Masson染色观察肾脏病理形态,免疫组化法和Western blot法检测肾脏组织中Nephrin、CD2AP表达情况。结果 与正常组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白及血清TC水平均明显升高(P均<0.05),血清ALB水平明显降低(...     

益肾通络方对膜性肾病大鼠的肾保护作用及足细胞骨架相关蛋白的影响

目的探讨益肾通络方对膜性肾病大鼠的肾脏保护作用及可能的机制。方法健康雄性SD大鼠60只随机分为对照组10只和造模组50只,造模组采用尾iv阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)的方法复制膜性肾病大鼠模型。造模成功后再随机分为模型组、盐酸贝那普利组和益肾通络方低、中、高剂量(6.61、13.22、26.44 g/kg)组,各组按照相应剂量ig给药,每天1次,连续给药4周。给药结束后检测大鼠24 h尿蛋白定量(UTP)、血清总胆固醇(TC)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平;免疫荧光检测各组大鼠肾组织Ig G免疫复合物沉积情况,电镜下观察肾小球基底膜及足细胞形态结构;免疫组化及实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测各组大鼠肾足细胞骨架相关蛋白ezrin、synaptopodin的表达。结果与模型组比较,各治疗组大鼠UTP、TC水平均显著下降(P0.01),TP、ALB水平均显著上升(P0.01);益肾通络方中、高剂量组与盐酸贝那普利组疗效相当,效果优于益肾通络方低剂量组;各组大鼠BUN、Scr相比无明显差异。与对照组比较,模型组大鼠肾足细胞骨架相关蛋白ezrin、synaptopodin m RNA表达显著减少(P0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠肾足细胞相关蛋白ezrin、synaptopodin m RNA表达均有不同程度增加(P0.01);益肾通络方中、高剂量组大鼠肾组织ezrin、synaptopodin m RNA表达量与盐酸贝那普利组相当,均高于益肾通络方低剂量组。结论益肾通络方对膜性肾病大鼠具有治疗作用,其机制可能与防止足细胞骨架相关蛋白ezrin、synaptopodin降解、维持足细胞骨架及足突结构完整性相关。     

益气活血化瘀汤对膜性肾病大鼠肾脏组织Nephrin mRNA 和Podocin mRNA表达的影响

目的观察益气活血化瘀汤对膜性肾病大鼠肾脏组织Nephrin mRNA、Podocin mRNA表达的影响。方法 SD大鼠随机分为正常对照组和造模组,其中造模组采用抗近端小管刷状缘抗原(抗Fx1A)血清一次性尾静脉注射诱导被动型海曼(Heymann)肾炎模型,造模成功后将造模组随机分为模型组、洛丁新组及益气活血化瘀汤低、中、高剂量组,每组6只。每组按相应剂量灌胃4周,每周收取大鼠24 h尿量,检测24 h尿蛋白定量(UTP)。4周末处死大鼠,心脏取血,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血清总蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-c)、三酰甘油(TG)水平,取肾脏行Masson、PASM染色观测肾脏组织病理改变,免疫荧光法观察Ig G、C3改变,实时荧光PCR检测Nephrin mRNA、Podocin mRNA的表达。结果与正常对照组比较,其余5组UTP均升高(P0.05),Nephrin mRNA、Podocin mRNA表达量均减少(P0.01);与模型组比较,给药组UTP均减少(P0.05),Nephrin和Podocin mRNA表达量均增加(P0.01),TP、ALB有所升高但差异无统计学意义(P0.05),Scr、BUN、TC、HDL-c、TG差异无统计学意义(P0.05);与洛丁新组比较,益气活血化瘀汤低、中、高剂量组UTP有所减少,但差异无统计学意义(P0.05),各生化指标差异无统计学意义(P0.05),益气活血化瘀汤低、中、高剂量组肾脏组织Nephrin mRNA、Podocin mRNA表达均有所增加,但差异无统计学意义(P0.05);益气活血化瘀汤各组之间各指标差异无统计学意义(P0.05)。结论益气活血化瘀汤可明显减少膜性肾病大鼠的尿蛋白程度,减少肾脏病理损伤,上调肾脏组织Nephrin mRNA、Podocin mRNA的表达,延缓膜性肾病的进展。     

活血通络方对膜性肾病大鼠肾功能的影响及对肾组织IFN-γ、VEGF干预机制的研究

目的:探讨活血通络方治疗膜性肾病的疗效,为临床治疗膜性肾病提出新的方法和途径。方法:将90只SD雄性大鼠,适应性喂养7天后随机选取15只为空白对照组,其余75只参照改良Border法进行造模,造模成功后将大鼠随机分为模型对照组、贝那普利组、活血通络方5.04、10.08、20.16g/kg组。空白对照组与模型对照组大鼠给予蒸馏水,贝那普利组给予盐酸贝那普利片(10mg/kg/d),治疗组给予活血通络方。在给药的第4周末检测大鼠血总蛋白(TP)、血白蛋白(ALB)、24小时尿蛋白定量(24hUTP)、γ干扰素(IFN-γ)、血管内皮生长因子(VEGF)及IFN-γmRNA、VEGFmRNA表达。总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、血尿酸(UA)的水平;观察大鼠肾脏病理形态学变化;免疫组化及Real-time PCR检测肾组织细胞因子的表达。结果:大鼠造模期间,共有3只死亡。造模4周后,造模组大鼠24h尿蛋白定量较空白对照组明显升高;治疗结束后,与空白对照组相比,模型对照组TP、ALB显著下降,24h-UTP、TC及TG显著升高,与模型对照组相比,活血通络方治疗各组与贝那普利组TP、ALB均不同程度升高,TC、TG均明显下降,活血通络方5.04、10.08、20.16g/kg/d组与贝那普利组相比,差异不明显,各组BUN、Scr水平无明显差异;治疗结束后与模型对照组比较,贝那普利组及活血通络方5.04、10.08、20.16g/kg/d组IFN-γmRNA表达下降,VEGF mRNA表达显著上升。结论:活血通络方可明显升高膜性肾病大鼠血总蛋白、血白蛋白水平,显著降低膜性肾病大鼠24小时尿蛋白定量,降低血TC、TG水平,下调膜性肾病大鼠肾组织IFN-γmRNA,上调VEGF mRNA,具有保护肾功能的作用。     

丹参多酚酸盐对阳离子化牛血清白蛋白致膜性肾病大鼠的影响

目的观察丹参多酚酸盐对阳离子化牛血清白蛋白致膜性肾病大鼠血液生化指标、肾组织病理形态及足细胞裂孔隔膜蛋白CD2相关蛋白(CD2AP)、结蛋白(Desmin)表达的影响,探讨丹参多酚酸盐对膜性肾病大鼠的肾保护作用及其可能机制。方法健康雄性SD大鼠随机分为对照组和造模组,采用尾iv阳离子化牛血清白蛋白的方法复制膜性肾病大鼠模型。造模成功的大鼠随机分为模型组、盐酸贝那普利组和丹参多酚酸盐低、中、高剂量(16.7、33.3、66.7 mg/kg)组。每组按相应剂量给药,给药结束后检测大鼠24 h尿蛋白定量(UTP)和血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平;免疫荧光、光镜、电镜下观察大鼠肾脏病理形态;免疫组化及实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测各组大鼠肾组织CD2AP、Desmin m RNA的表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠UTP显著增加(P0.01),血清TC、TG水平显著升高(P0.01),血清TP、ALB水平显著降低(P0.01)。与模型组比较,各治疗组大鼠UTP、TC、TG水平均显著降低(P0.05、0.01),TP、ALB水平均显著升高(P0.01);丹参多酚酸盐各剂量组与盐酸贝那普利组大鼠UTP、TC、TG、TP、ALB比较无显著差异;丹参多酚酸盐各剂量组组内比较亦无明显差异。各组大鼠BUN、Scr相比无明显差异。与对照组比较,模型组大鼠肾组织CD2AP蛋白及m RNA表达量均显著减少,Desmin蛋白及m RNA表达量显著增多(P0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠CD2AP蛋白及m RNA表达量显著增多,Desmin蛋白及m RNA表达量显著减少(P0.01);各治疗组之间相比无显著差异。结论丹参多酚酸盐对膜性肾病大鼠的肾保护作用可能与上调CD2AP表达、下调Desmin表达,抑制足细胞损伤,保护肾小球滤过屏障的完整性有关。     

扶正祛风方治疗特发性膜性肾病的临床观察

目的:探讨扶正祛风方治疗特发性膜性肾病疗效。方法:选取2017年4月至2019年1月北京中医药大学东方医院收治的特发性膜性肾病患者86例进行回顾性分析,按照治疗方法不同分为对照组和观察组,每组43例,对照组常规西医治疗,观察组加扶正祛风方,均治疗6个月,观察2组患者治疗前、完成治疗后肾功能、血脂、凝血功能、免疫功能、氧化应激变化并比临床疗效。结果:1)治疗后2组患者24 h尿蛋白定量(24 h-UTP)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、血管性血友病因子(vWF)、E-选择素(CD62E)、血小板计数(PLT)、CD8+较治疗前下降,白蛋白(ALB)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醇(MDA)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、CD4+、CD4+/CD8+较治疗前升高(P<0.05),且观察组优于对照组(P>0.05),而2组患者治疗后血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)比较差异无统计学意义(P>0.05)。2)观察组临床控制率、总有效率为37.21%、88.37%,高于对照组的20.93%、74.42%,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:扶正祛风方可抑制尿蛋白形成,改善肾脏微循环,提高免疫功能,从而提高特发性膜性肾病疗效。     

降脂通络软胶囊对膜性肾病大鼠肾保护作用及对肾组织Bcl-2和Bad表达的影响

目的观察降脂通络软胶囊对膜性肾病大鼠模型血液生化指标及对肾组织Bcl-2、Bad表达的影响,探讨降脂通络软胶囊对膜性肾病大鼠的肾保护作用和可能机制。方法将60只SD大鼠随机选取10只为对照组,其余50只进行造模,造模成功后将大鼠随机分为模型组、贝那普利组和降脂通络软胶囊(25、50、100 mg/kg)组,每组各10只,各组按相应剂量给药,在给药的第4周末检测大鼠24 h尿蛋白定量(UTP)及血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平;采用电镜、免疫荧光观察肾脏病理形态学变化,免疫组化及Real-time PCR法检测各组大鼠肾组织Bcl-2、Bad的表达情况。结果与模型组比较,各给药组UTP、TC、TG均有所降低(P0.05),各给药组TP、ALB均有所升高(P0.05)。降脂通络软胶囊50、100 mg/kg组与贝那普利组UTP、TC、TG、TP、ALB比较差异不显著(P0.05),效果优于降脂通络软胶囊25 mg/kg组(P0.05)。与对照组比较,各给药组及模型组BUN、Scr均未见明显变化,差异不显著(P0.05)。与模型组相比,各给药组大鼠肾组织中Bcl-2 mRNA的表达较模型组明显上调,Bad mRNA表达下调,差异显著(P0.05);降脂通络软胶囊50、100 mg/kg组与贝那普利组Bcl-2、Bad比较差异不显著(P0.05),效果优于降脂通络软胶囊25 mg/kg组(P0.05)。结论降脂通络软胶囊对膜性肾病大鼠的肾保护作用可能与其上调肾组织中Bcl-2 mRNA表达,下调Bad mRNA表达,抑制足细胞凋亡、修复受损足细胞有关。     

乌蛇驱风汤及诸加减方对豚鼠慢性湿疹模型的疗效比较

目的:比较乌蛇驱风汤及诸加减方对豚鼠慢性湿疹的疗效。方法:健康豚鼠58只,随机抽取8只,雌雄各半,作为正常组,将其余的50只豚鼠参照进行造模,背部剃毛,小剂量2,4-二硝基氯苯为抗原,多次刺激豚鼠皮肤制备慢性湿疹模型,将造模成功的48只豚鼠分雌雄随机分为6组,分别为1号方组(乌蛇驱风汤原方,8.05 g·kg-1),2号方组(7.22 g·kg-1),3号方组11.75 g·kg-1,4号方组(12.86 g·kg-1),丁酸氢化可的松乳膏组(0.5 g·kg-1)、模型组,口服ig给药,连续给药7 d,末次用药后24 h,处死所有实验动物,根据皮损局部的症状评分和皮损处的病理改变进行疗效评估。结果:与正常组比较,模型组病理症状评分明显升高(P0.05),模型组皮损处的病理表现仍呈现表皮和真皮水肿,表皮层增厚,以棘层细胞增生为主,真皮浅层血管轻度扩张,周围有以淋巴细胞为主的炎症细胞浸润;与模型组比较,1号方组,2号方组,3号方组,4号方组及丁酸氢化可的松乳膏组病理症状评分明显降低(P0.05),乌蛇驱风汤组及丁酸氢化可的松乳膏组皮损组织病理改变较模型组明显改善,与氢化可的松组病理表现相似;各乌蛇驱风汤加减方组组织病理表现较模型组改善不明显。结论:乌蛇驱风汤对豚鼠慢性湿疹的疗效优于诸加减方,与丁酸氢化可的松乳膏组疗效相当。     

基于肠道菌群探讨补脾益肾方改善5/6肾切除大鼠肠道屏障延缓慢性肾脏病进展的作用机制

目的 探讨补脾益肾方延缓5/6肾切除大鼠慢性肾脏病进展的作用机制。方法 雄性SD大鼠随机分为4组：假手术组、5/6肾切除模型组、补脾益肾方低剂量组、补脾益肾方高剂量组。假手术组和5/6肾切除模型组予蒸馏水灌胃,补脾益肾方低剂量组和高剂量组分别给予低剂量和高剂量补脾益肾方治疗,灌胃为期4周。检测各组大鼠血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量、硫酸吲哚酚、二胺氧化酶;肾脏组织采用PAS和Masson染色;结肠组织采用HE染色;Western-blot检测ZO-1、Occludin、Claudin-1三种紧密连接蛋白及IL-22在结肠组织的表达水平;采用16S rDNA高通量测序并进行生物信息学分析。结果 与假手术组相比,5/6肾切除组大鼠的血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量、血清硫酸吲哚酚和二胺氧化酶水平明显升高;与5/6肾切除组相比,补脾益肾方高剂量组大鼠的血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量、血清硫酸吲哚酚和二胺氧化酶水平明显下降,肾脏病理损伤缓解;补脾益肾方亦可调整肠道菌群,提高益生菌Prevotella（普氏菌属）、Phascolarctobacterium（考拉杆菌属）和Megamon...     

十二味穿甲片对大鼠免疫性肝纤维化模型的影响

目的:研究十二味穿甲片对大鼠免疫性肝纤维化模型的影响,并探讨其相关的作用机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,阳性药组(秋水仙碱,0.1 mg·kg-1),中药十二味穿甲片2.8,1.4,0.7 g·kg-1剂量组。除正常组外,其余各组采用猪血清制备大鼠免疫性肝纤维化模型,造模同时给药进行抗肝纤维化干预,共6周。通过计算体重、肝脏指数,检测肝功能丙氨酸转氨酶(ALT),天冬氨酸转氨酶(AST),总蛋白(TP),白蛋白(ALB),球蛋白(GLO)水平和白球比(A/G),酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清透明质酸(HA)含量。苏木素-伊红(HE)染色以观察肝组织病理变化及马松(Masson)三色染色观察胶原纤维增生情况,评价药物的抗纤维化作用。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清ALT,HA水平明显升高,肝指数明显升高(P0.01),ALB,A/G明显降低(P0.01),模型组肝组织的病变较明显;与模型组比较,十二味穿甲片除对血清AST,GLO的变化无明显影响外,能够显著降低肝纤维化大鼠血清ALT和纤维化指标HA水平(P0.01),不同程度地升高血清TP,ALB和A/G,并能显著地减轻肝组织的病变,尤以十二味穿甲片2.8 g·kg-1剂量效果最显著。结论:十二味穿甲片可明显改善模型大鼠肝纤维化程度,显示出一定的抗肝纤维化作用。     

加味升降散对膜性肾病大鼠肾保护作用及对肾组织线粒体活性氧表达的影响

目的:观察加味升降散对膜性肾病(MN)大鼠模型血液生化指标及对肾线粒体活性氧(ROS)表达的影响。方法:将60只SD雄性大鼠,适应性喂养7 d后随机分为4组,造模成功后西药组给予盐酸贝那普利(10 mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃,中药治疗组给予加味升降散(13.22 g·kg~(-1)·d~(-1))灌胃,模型组和正常组给予同等剂量的生理盐水灌胃。4周后,生化试剂盒测定各组大鼠24 h尿蛋白定量(UTP),血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),总蛋白(TP),白蛋白(ALB),尿素氮(BUN),肌酐(SCr),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定大鼠肾组织线粒体ROS mRNA的表达。结果:与正常组比较,其余各组造模后UTP,TC,TG均升高(P0.01),TP,ALB显著下降(P0.05);治疗后,加味升降散组、盐酸贝那普利组与正常组比较,血液生化指标及对肾线粒体ROS均改善,但未恢复正常水平。治疗结束后,与模型组比较,加味升降散组、盐酸贝那普利组UTP,TC,TG均有所降低(P0.05),加味升降散组、盐酸贝那普利组TP,ALB均有所升高(P0.05)。加味升降散组与盐酸贝那普利组UTP,TC,TG,TP,ALB比较无统计学意义。治疗结束后,与模型组比较,加味升降散组、盐酸贝那普利组大鼠肾组织中足细胞线粒体ROS mRNA的表达较模型组明显下调(P0.05);加味升降散组与盐酸贝那普利组线粒体ROS mRNA比较差异无统计学意义。结论:加味升降散对膜性肾病大鼠的肾保护作用可能与其能够下调肾组织线粒体ROS mRNA表达,抑制足细胞凋亡、修复受损足细胞有关。