克山病患者心肌中肠道病毒抗原VP1及其基因检测

目的　进一步探讨肠道病毒感染与克山病发病的关系。方法　应用免疫组织化学等方法对克山病患者心肌组织标本进行肠道病毒检测并与其他疾病进行对比。结果　在 11例克山病患者中发现 9例病毒结构蛋白VP1阳性 ,其中 8例同时检测到病毒RNA ;而 8例缺血性心肌病仅 3例VP1阳性 ,其中 2例RNA也阳性。 3例死于其他疾病患者未发现肠道病毒。结论　克山病患者心肌组织中不仅存在肠道病毒基因RNA ,而且也有其表达的结构蛋白VP1,提示肠道病毒感染可能为克山病发病的主要原因之一。     

RNA－RNA原位杂交检测和定量分析心肌中肠道病毒RNA

ＲＮＡ－ＲＮＡ原位杂交检测和定量分析心肌中肠道病毒ＲＮＡ上海医科大学中山医院上海市心血管病研究所彭天庆，杨英珍本研究以同位素Ｓ标记肠道病毒特异的柯萨奇Ｂ－３病毒（ＣＶＢ３）的负股ＲＮＡ为探针作原位杂交对多种心肌石蜡切片进行肠道病毒ＲＮＡ检测，同时结合...     

庚型肝炎病毒合并／重叠其他肝炎病毒感染状况调查

了解庚型肝炎病毒合并／重叠其他肝炎病毒感染状况。方法；分别对４９７例不同病原的病毒性肝炎患者进行ＨＧＶ ＲＮＡ检测，对其中１８０例患者进行抗－ＨＧＶ检测。结果：１．ＨＧＶ在各型病毒性肝炎患者中总的合并／重叠感染率为７．８％．２；ＨＧＶ合并／重叠感染丙型肝炎病毒感染率为１８．９％，高于其他肝炎病毒的合并／重叠感染率．Ｐ〈０．０１。３．有输血史的病人ＨＧＶ ＲＮＡ阳性率高于无输血史的患者，Ｐ〈０．０１     

克山病心肌蜡块标本的肠道病毒RNA检测

为探讨肠道病毒染与克山病的关系，用套式聚合酶链反应分别对２１例楚雄地区克山病尸检心肌及２１例脑外伤尸检心肌的蜡块标本进行了肠道病毒ＲＮＡ检测。发现１８例克山病心肌标本中有肠道病毒ＲＮＡ存在，阳性率高达８５．７％，而脑外伤心示本均为阴性。     

定量PCR比较病毒性心肌炎血和心肌肠道病毒RNA含量及其与心肌病变的关系

目的 研究小鼠柯萨奇病毒性心肌炎模型血,心肌柯萨奇病毒ＲＮＡ含量的关系;外周血中肠道病毒ＲＮＡ含量与心肌病理积分的关系。方法 利用定量ＰＣＲ方法检测病毒性心肌炎小鼠模型急性期外周血,心肌肠道病毒ＲＮＡ含量。结果 ＣＶＢ３感染所致心肌炎小鼠外周血,心肌中肠道病毒ＲＮＡ含量显著正相关。     

病毒性心肌炎血和心肌CVB_3RNA含量与心肌病变的关系

目的研究小鼠柯萨奇Ｂ３病毒性心肌炎模型血、心肌柯萨奇病毒ＲＮＡ含量的关系;外周血中ＣＶＢ３ＲＮＡ含量与心肌病理积分的关系。方法利用定量ＰＣＲ方法检测病毒性心肌炎小鼠模型急性期外周血、心肌ＣＶＢ３ＲＮＡ含量。结果ＣＶＢ３感染所致心肌炎小鼠外周血、心肌中ＣＶＢ３ＲＮＡ含量显著正相关（ｒ＝０．９４,Ｐ＜０．０５）。外周血及心肌中ＣＶＢ３ＲＮＡ含量与心肌病理积分显著正相关（ｒ＝０．８０,Ｐ＜０．０１,ｒ＝０．８５,Ｐ＜０．０１）。结论病毒性心肌炎急性期外周血中ＣＶＢ３ＲＮＡ含量可以反映心肌中病毒ＲＮＡ含量水平,且两者与心肌病理损害均有一致性改变。     

精细胞及血单个核细胞中丙型肝炎病毒RNA及其负链检测

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法对８例慢性丙型肝炎患者的血浆、外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）、精液和精细胞中的正链和负链丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ进行检测，以了解ＨＣＶ在肝外细胞中是否存在，有否复制。结果血浆中正链ＨＣＶＲＮＡ均阳性，而负链ＨＣＶＲＮＡ全部阴性；ＰＢＭＣ中正链ＨＣＶＲＮＡ阳性者５例，其中２例检出负链ＨＣＶＲＮＡ。在３例留取精液的患者中１例精液和精细胞中检出正链ＨＣＶＲＮＡ。精细胞未次洗液ＨＣＶＲＡＮ阴性，精细胞负链ＨＣＶＲＮＡ阴性。上述结果提示：（１）血浆中可能仅有正链ＨＣＶＲＮＡ存在；（２）ＨＣＶ可在ＰＢＭＣ中存在，并可能在其中复制；（３）精液中有ＨＣＶ存在，因此通过性交传播丙型肝炎的可能性确实存在，但ＨＣＶ可能不在精细胞中复制     

肾综合征出血热患者肾组织及血液中出血热病毒RNA的检测及临…

采用地高辛标记的出血热病毒ｃＤＮＡ探针，以原位杂交方法检测２１例肾综合征出血热中层得肾组织中出血热病毒核酸（ＨＦＶ－ＲＮＡ）及其分布，并与肾组织免疫组化方法检测出血热病毒及同期血清斑点杂交检测ＨＦＶ－ＲＮＡ结果进行对比。发现肾组织内ＨＦＶ－ＲＮＡ的检出率重型为６／７例，中型及轻型分别为２／９例及０，与病情严重成正比（Ｐ＜０．０１）；与免疫复合物的沉积不相平行；与血清中ＨＦＶ－ＲＮＡ的检出亦无直接关     

长期血液透析患者庚型肝炎病毒检测100例分析

目的　研究血透患者中庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）携带情况及影响因素。方法　应用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，对我科血透中心１００ 例长期血透（＞ １ ａ）的患者及４００ 例非血透患者（对照组）血清中ＨＧＶ核糖核酸（ＨＧＶ－ＲＮＡ）进行测定。结果　血透组中２４％ ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性，明显高于正常人群的２％ （Ｐ＜ ０．０１）；ＨＧＶ阳性受血率明显增高，分别为７０．８％ 与５１．３％ （Ｐ＜ ０．０１），但均无临床症状；检测１９例ＨＧＶ 阳性血透患者干超滤液，其中均未发现ＨＧＶ－ＲＮＡ。结论　血透患者ＨＧＶ感染率高于普通人群，与输血量有一定相关，病毒不通过聚砜膜。     

穿孔素介导的细胞毒效应在病毒性心肌炎小鼠发病中的作用

探讨穿孔素介导的细胞毒效应在病毒性心肌炎发病中的作用。方法４０只小鼠等分为ＣＶＢ３感染组及非染组，所有小鼠于感染后第１０天处死并取其心脏；采用免疫组化技术检测心肌浸润细胞中ＰＦＰ的表达，原位杂交方法检测心肌中ＣＶＢ３ＲＮＡ；半定分析ＰＦＰ抗原及ＣＶＢ３ＲＮＡ水平，并分析ＰＦＰ抗原水平与ＣＶＢ３复制及心肌病变程度的关系。     

柯萨奇B组病毒逆转录聚合酶链反应检测方法的建立

根据柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＢＶ）基因组５’非编码区核苷酸序列，选用了一对组特异性吸收物，用于逆转聚合酶链反应检测ＣＢＶ－ＲＮＡ，结果显示该法可检出ＣＢＶ１～６型ＲＮＡ，灵敏度为１０ＰＦＵ不能检出其他病毒ＲＮＡ，采用的碘化钠－异硫氰酸胍－氯仿法提取ＣＢＶ－ＲＮＡ与传统的蛋白酶Ｋ－酚－氯仿法及异硫氰酸胍－酚－氯仿法比较，具有快速，简便，稳定，可靠的特点，应用该法检测ＣＢＶ－５感染鼠外周血ＲＮＡ，第３ｄ即为     

慢性肝病患者庚肝病毒RNA检测分析

应用逆转录酶链反应技术（ＲＴ－ＰＣＲ）对９６例慢性肝病患者进行ＨＧＶ ＲＮＡ检测,结果：慢性肝炎９例,肝硬化５６例,肝癌３１例中ＨＧＶ ＲＮＡ阳性分别为１例,６例,３例,总检出率为１０．４２％（１０／９６）在ＨＢＶ感染６３例,ＨＣＶ感染,８例及ＨＢＶ＋ＨＣＶ重叠感染１１例中,ＨＧＶ ＲＮＡ阳性分别为８例,１例和１例,在慢性肝病中ＨＧＶ ＲＮＡ阳性与阴性组间,ＡＳＴ,ＡＬＴ水平无显著性差异（Ｐ〉０．     

人肝癌组织中黄曲霉毒素和肝炎病毒基因检测分析

以肝细胞场（ＨＣＣ）患者手术切除标本为研究材料，采用高效液相色谱荧光法检测组织中的黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１），嵌套式多聚酶链反应技术检测组织中的ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ。在６９．２％（１８／２６例）的ＨＣＣ患者中检出了３．６５－８９．０６ｎｇ不等的ＡＦＢ１／ｇ肝组织；ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ检出率分别为９０．５％（５７／６３例）和１２．７％（８／６３例）。其中，ＡＦＢ１和ＨＢＶＤＮＡ重叠检出率为６１．５％（１６／２６例），ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ重叠检出率为７．９％（５／６３例），４例ＨＣＣ患者重叠检出了ＡＦＢ１、ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ；同步检测对照组５例，无１例出现这种情况。结果表明，上述３种因素均与人类肝癌密切相关，并且可能存在协同致癌效应。     

用PCR检测心肌疾病患儿心肌组织EV－RNA

目的：研究肠道病毒感染与心肌炎和心肌病的关系。方法：用聚合酶链反应及核酸杂交技术检测心肌疾病病人心肌组织中及血清肠道病毒ＲＮＡ，同时用酶联免疫吸附试验测血清柯萨奇Ｂ病毒特异ＩｇＭ、ＩｇＧ抗体，取非心肌炎者心肌、血清作为对照。结果：有心肌损伤病人可用ＰＣＲ技术证明其心肌或血清中存在病毒ＲＮＡ，而无心肌损伤病人及对照组均阴性。结论：应用ＰＣＲ技术配合免疫学检测对于研究病毒感染与心肌炎和心肌病病因的关系很有帮助。     

用PCR检测心肌疾病患儿心肌组织EV—RNA

目的：研究肠道病毒感染与心肌炎和心肌病的关系。方法：用聚合酶链反应及核酸杂交技术检测心肌疾病病人心肌组织中及血清肠道病毒ＲＮＡ，同时用酶联免疫吸附试验测血清柯萨奇Ｂ病毒特异ＩｇＭ、ＩｇＧ抗体，取非心肌炎者心肌、血清作为对照。结果：有心肌损伤病人可用ＰＣＲ技术证明其心肌或血清中存在病毒ＲＮＡ，而无心肌损伤病人及对照组均阴性。结论：应用ＰＣＲ技术配合免疫学检测对于研究病毒感染与心肌炎和心肌病病因的关系     

nRT-PCR法检测心肌活检组织中柯萨奇B组病毒RNA的临床意义

目的 进一步探讨柯萨奇病毒（ＣＶＢ）感染与心肌炎及扩张型心肌病（ＤＣＭ）发病的关系,同时为临床诊断病毒性心肌疾病探求一个快速、敏感和特异的辅助检查方法。方法 应用巢式逆转录聚合酶链反应（ｎＲＴ－ＲＣＲ）检测２７例心肌活检组织中ＣＶＢ ＲＮＡ,并以９例正常及１例先心病心肌标本为对照;同时应用间接免疫荧光法检测其中１０例患者血清ＣＶＢ１－６ＩｇＭ。结果 １４例心肌炎及１３例ＤＣＭ患者中各有５例心肌组织     

柯萨奇B组病毒逆转录聚合酶链反应检测方法的建立

根据柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＢＶ）基因组５’非编码区核苷酸序列，选用了一对组特异性引物，用于逆转录聚合酶链反应检测ＣＢＶ－ＲＮＡ。结果显示该法可检出ＣＢＶ１～６型ＲＮＡ，灵敏度为１０ＰＦＵ，不能检出其他病毒ＲＮＡ。采用的碘化钠－异硫氰酸胍－氯仿法提取ＣＢＶ－ＲＮＡ与传统的蛋白酶Ｋ－酚－氯仿法及异硫氰酸胍－酚－氯仿法比较，具有快速、简便、稳定、可靠的特点。应用该法检测ＣＢＶ－５感染鼠外周血ＲＮＡ，第３ｄ即为阳性，提示本法可用于ＣＢＶ感染的早期诊断     

轮状病毒蛋白的作用

轮状病毒属于呼肠孤病毒科 ,是引起婴幼儿和幼龄动物腹泻的重要病原 ,有的对成人也有致病作用。经流行病学调查 ,发现轮状病毒能感染９０ %的３岁龄儿童 ,每年在世界范围内引起近１００万人的死亡［１,２］。完整的轮状病毒有双层衣壳 ,从内向外呈放射状排列 ,无包膜。基因组为双股ＲＮＡ ,由１１个基因片断组成［３］,绝大多数基因为单顺反子结构。在１１个基因片断中 ,６个编码结构蛋白 (ＶＰ１～ＶＰ７) ,５个编码非结构蛋白 (ＮＳＰ１～ＮＳＰ５) ［４］。结构蛋白组成病毒的衣壳蛋白 ,非结构蛋白和病毒的复制有关。１轮状病毒结构蛋白…     

334例感染性脑疾病病毒病原学的分析

对汕头市３３４例临床诊断感染性脑疾病患者进行病毒病原学及血清学检测，经ｔ检验表明：ＰＶⅠ、Ⅱ、Ⅲ型、ＣＶＡ２４型、Ｂ１型、ＥＣＶ７型及ＥＶ７１型七个型两者差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１）ＣＶＢ５型、ＥＣＶ２４、２７型三个型两者差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。本组研究提示：汕头地区近年来感染性脑疾病的病毒病原主要是肠道病毒（ＰＶ、ＣＶ、ＦＣＶ及其他肠道病毒。）     

肝癌及癌旁组织中丙型肝炎病毒基因负链的研究

运用巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）等方法检测了５例丙型肝炎病毒核糖核酸（ＨＣＶ—ＲＮＡ）阳性患者的肝癌、癌旁组织和周围血清中ＨＣＶ—ＲＮＡ正链和负链，其中男４例，女１例。结果，正链检测：血清及癌旁组织全部阳性，癌组织中３例阳性。负链检测：血清中均阴性，癌组织３例阳性，癌旁组织５例均阳性。本组５例患者肝脏ＨＣＶ—ＲＮＡ负链阳性，推测ＨＣＶ以ＨＣＶ—ＲＮＡ负链作为模板在感染的肝脏组织中复制，ＨＣＶ持续存在于肝脏组织中对肝癌的发生起了一定的作用。