骨髓增生异常综合征患者的骨髓细胞端粒酶活性研究

为了研究骨髓增生异常综合征(MDS)患者的骨髓单个核细胞中端粒酶的表达特点,并与正常骨髓和急性白血病骨髓进行比较,用PCR-ELISA法对20例正常骨髓、21例骨髓增生异常综合征和32例急性白血病骨髓单个核细胞的端粒酶活性进行了半定量检测.结果发现正常骨髓细胞端粒酶表达范围0-0.30 U,平均(0.11±0.08)U,其中仅有3例阳性.急性白血病骨髓细胞端粒酶表达范围0-0.96 U,平均(0.42±0.26)U,阳性率78.1%,与正常骨髓相比,有显著性差异(P＜0.01).MDS骨髓细胞端粒酶的表达范围0-0.97 U,平均为(0.27±0.19)U,阳性率为66.7%.与正常相比,端粒酶表达均值之间的差别有显著性(P＜0.05),其中高风险组端粒酶表达较高(P＜0.05).按IPPS评分等级分为INT-1,INT-2和HIGH组的MDS骨髓细胞端粒酶活性水平之间有显著性差异(P＜0.05).端粒酶活性与染色体异常程度无明显关系.结论提示,正常骨髓细胞具有临界水平的端粒酶活性,急性白血病骨髓细胞端粒酶活性显著升高,而MDS骨髓细胞端粒酶活性则介于正常与急性白血病骨髓细胞端粒酶活性之间,其中高风险组、按IPPS评分预后差的MDS端粒酶活性较高.     

端粒、Bcl-2、P53对急性白血病患者端粒酶活性的调节

端粒酶作为急性白血病 (ＡＬ)治疗的新靶位已引起普遍关注 ,但端粒酶活性的调控因素目前尚未阐明。我们选择既往已被证实与ＡＬ发病密切相关的因素 :凋亡抑制蛋白Ｂｃｌ 2和突变型Ｐ5 3水平和端粒长度[1 ,2 ] ,以发现这些因素对端粒酶活性的调控作用。病例和方法1　临床资料　采集 1998年 9月～ 2 0 0 1年 9月住院的 14 8例ＡＬ患者骨髓标本。其中急性非淋巴细胞白血病 (ＡＮＬＬ) 92例 ,急性淋巴细胞白血病 (ＡＬＬ) 5 6例 ,初治 75例 ,复发 36例 ,完全缓解 (ＣＲ) 37例。其中 14 8例检测了端粒酶活性 ,初治 70例检测了端粒长度 ,85例检测…     

以吡柔比星为主的联合化疗对初治急性白血病的疗效观察

目的:观察以吡柔比星为主的联合化疗对初治急性白血病的疗效.方法:治疗组,61例初治的急性白血病患者,其中急性非淋巴细胞白血病(ANLL)43例,予TA方案化疗[吡柔比星(THP)联合阿糖胞苷(Ara-C)],急性淋巴细胞白血病(ALL)18例,予VTLP方案化疗[THP联合长春新碱(VCR)、左旋门冬酰胺酶(L-Asp)、强的松(Pred)];对照组,53例初治的急性白血病中ANLL 36例,予DA方案化疗,ALL 17例,予VDLP方案化疗[两方案均以柔红霉素(DNR)代替THP].2个疗程后比较两组疗效.结果:治疗组2疗程的完全缓解(CR)率(81.97%)明显高于对照组(50.94%)(P＜0.05),但两组的总有效率差异无显著性(P＞0.05).结论:以吡柔比星为主的联合化疗可作为初治急性白血病的有效治疗方案.     

儿童肿瘤及急性白血病中ICAM-1(CD54)的表达及在CIK细胞免疫治疗中的临床意义

本研究旨在探讨细胞间黏附分子1(ICAM-1,CD54)在初诊儿童肿瘤及急性白血病细胞上的阳性表达率,以了解其分布规律及其临床意义。采用免疫组织化学方法检测46例儿童实体瘤的病理组织切片ICAM-1的阳性率,通过流式细胞仪检测60例儿童急性白血病细胞上ICAM-1的阳性率。儿童实体瘤包括淋巴瘤10例,肝母细胞瘤3例,神经母细胞瘤6例,横纹肌肉瘤2例,尤文氏肉瘤6例,纤维肉瘤2例,原始神经外胚层肿瘤5例,肾母细胞瘤11例,骨肉瘤1例;急性白血病包括急性淋巴细胞白血病(ALL)20例,急性非淋巴细胞白血病(ANLL)40例(M1 6例、M2 7例、M3 7例、M4 15例、M5 5例)。结果表明,儿童肿瘤组中3例肝母细胞瘤ICAM-1全部阳性,而在淋巴瘤、横纹肌肉瘤、神经母细胞瘤及尤文氏肉瘤阳性率不高,纤维肉瘤、肾母细胞瘤及原始神经外胚层肿瘤患儿中未见ICAM-1表达。急性白血病组中ALL的ICAM-1阳性率为55%,ANLL的M1、M2、M3型ICAM-1的阳性率为65%,M4、M5型为50%。结论:ICAM-1在儿童肿瘤、急性白血病细胞上的表达呈一定变异性,其在肝母细胞瘤及ANLL(M1、M2和M3)上阳性率高,而在纤维肉瘤、肾母细胞瘤及原始神经外胚层肿瘤等中不表达。     

热休克蛋白90α、70、27mRNA在急性白血病细胞中表达的研究

运用RNA分子杂交的方法,观察了热休克蛋白(heat shock protein,HSP)90α、70、27在22例白血病病人细胞,正常血细胞及K562红白血病细胞系中的表达。结果表明:16例白血病病人中,4例急性淋巴细胞白血病(ALL),6例急性非淋巴白血病(ANLL)、1例慢性粒细胞白血病急变期(慢粒急变)和2例骨髓增生异常综合征(MDS)血细胞呈现HSP27高水平表达,较正常血细胞显著增多,ALL(5例)与ANLL(7例)白血病细胞HSP27表达水平无明显改变。检测了7例白血病细胞HSP70的表达水平,除1例ALL及1例MDS明显升高外,其余5例(包括1例ALL,3例ANLL和1例慢粒急变)显著低于正常血细胞。17例白血病病人细胞(包括9例ANLL、5例ALL、2例慢粒急变和1例MDS)HSP90α表达水平均升高,明显高于正常。结果提示:白血病细胞HSP90α表达水平的升高可能与白血病细胞活跃异常增殖有关,而HSP27基因的高表达可能不是某种急性白血病的特殊标志。     

苏丹黑阳性的急性淋巴胞细胞白血病

为确定急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞可否苏丹黑E(SBB)阳性,作者复审了350例新近诊断的ALL,发现有6例(1.6％)SBB阳性。瑞氏-姬姆萨染色时白血病细胞形态均属典型的原始淋巴细胞,其中4例为L1、2例为L2。白血病细胞的SBB阳性率皆大于5％,最高达64％,过氧化物酶(pox)及氯代醋酸酯酶皆阴性,6例普通ALL抗原检查均阳性;1例胞浆免疫球蛋白阳性;1例对抗非淋巴表面抗原的单克隆抗体不起反应;E玫瑰花结,T细胞表面抗原(T101)、表面免疫球蛋白皆阴性。染色体分析均无ph~1或与急性非淋巴细胞白血病(ANLL)有关的异常;1例患者有无效的免疫球蛋白基因重组。所有这6例患者用ALL治疗方案反应良好,均获完全缓解。     

氟达拉宾、阿糖胞苷、粒细胞刺激因子方案诱导治疗难治、复发性急性白血病的临床观察

目的:观察氟达拉宾、阿糖胞苷、粒细胞刺激因子(FLAG)方案诱导治疗难治、复发性急性白血病(AL)的疗效。方法:应用FLAG方案诱导治疗难治复发的急性髓性白血病(ANLL)14例和急性淋巴细胞性白血病ALL4例患者,观察其疗效及不良反应。结果:18例患者的总有效率为66%;其中8例ANLL获得完全缓解(44%)、3例ANLL部分缓解(16%);仅1例ALL部分缓解(6%)。不良反应主要是骨髓抑制和感染,化疗期间无1例患者死亡。结论:FLAG方案作为难治、复发性ANLL的诱导治疗方案是有效、安全的。     

158例血液病患者外周血EB病毒DNA检测结果分析

目的回顾性分析血液病患者EB病毒(EBV)感染的状况。方法应用聚合酶链反应技术检测25例健康体检者和158例血液病患者的EBV的DNA,其中血液病患者中淋巴瘤50例,白血病67例[其中急性淋巴细胞白血病(ALL)组21例,慢性淋巴细胞白血病(CLL)组19例,急性非淋巴细胞白血病(ANLL)组21例,慢性髓性白血病(CML)组6例],淋巴组织增殖性疾病(LPD)29例,噬血细胞性淋巴细胞组织增多症(HLH)12例。结果EBV感染率:淋巴瘤组24.0%,ALL组19.0%,CLL组15.8%,ANLL组19.0%,CML组16.7%,LPD组13.8%,HLH组为41.7%,健康对照组为4.0%。淋巴瘤组、HLH组与对照组EBV感染率差异有统计学意义(P<0.05),白血病组、LPD组与对照组EBV感染率差异无统计学意义(P>0.05)。结论淋巴瘤及HLH的发病和EBV的感染有关,白血病及LPD的发病与EBV感染无关。     

45例儿童急性淋巴细胞性白血病流式细胞术免疫分型的研究

目的研究儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)免疫表型的特点。方法采用流式细胞仪对45例初治儿童急性淋巴细胞性白血病进行免疫表型分析。结果①45例ALL中T淋巴细胞性ALL(T-ALL)5例(11.1%),B淋巴细胞性ALL(B-ALL)36例(79.9%);ALL1型(L1)9例(20%),ALL2型(L2)27例(60%),ALL3型(L3)5例(11.1%);②45例ALL中4例符合急性混合性白血病(HAL)的诊断标准(8.9%),25例(55.6%)为髓系抗原阳性的ALL(My+ALL),其中CD13阳性率最多,为44.4%(20例),CD33为22.2%(10例),CD15为22.2%(10例)。B-ALL中My阳性率为55.6%,T-ALL中My阳性率为20%,有明显差异;L1中My阳性率为22.2%(2/9),L2中My阳性率为70.4%(19/27),L3中My阳性率为40%(2/5),L2中My阳性率明显高于L1和L3(P<0.05)。结论结合免疫表型分析与细胞形态学检验能为儿童急性淋巴细胞性白血病的诊断提供更可靠和更有价值的分型依据。     

急性白血病患者血清腺苷脱氨酶、乳酸脱氢酶测定的意义

目的 探讨急性白血病患者血清腺苷脱氨酶(ADA)、乳酸脱氢酶(LDH)测定意义.方法 采用全自动生化分析仪酶连续监测法测定59例初治或复发白血病患者、部分缓解病例及以40名健康体检者为正常对照的血清ADA及LDH.结果 急性淋巴细胞白血病(ALL)、急性非淋巴细胞白血病(ANLL)的ADA分别是103±40 U/L、31±24U/L,LDH分别是2189±1961 U/L、613±409U/L,分别与正常对照组相比及ALL与ANLL相比均明显升高(P<0.05).血清ADA≥54U几作为诊断ALL的临界值,其敏感性为92.3%,特异性为95.0%,以LDH≥900U/L作为诊断ALL的临界值,其敏感性为了92.3%,特异性为90.0%.ALL、ANLL的缓解组的ADA及LDH均比初治或复发组明显降低.结论 结合临床资料,血清ADA、LDH测定对ALL和ANLL具有诊断、鉴别诊断及疗效观察的价值.     

急性白血病患者肝细胞生长因子及血管内皮生长因子血清水平检测及临床意义

目的 检测急性白血病(AL)患者治疗前后外周血血清肝细胞生长因子(HGF)和血管内皮生长因子(VEGF)的水平,探讨血清HGF和VEGF与急性白血病的发生、发展及预后等方面的关系.方法 应用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELSIA)法动态检测并分析患者疾病不同时期血清HGF和VEGF的水平.结果 急性非淋巴细胞白血病(ANLL)组血清HGF水平(1 196.86±282.31)ng/L明显高于正常对照组(332.55±65.16)ng/L(P<0.01);急性淋巴细胞白血病(ALL)组血清HGF水平(1 224.53±283.19)ng/L明显高于正常对照组水平(332.55±65.16)ng/L(P<0.01);ANLL患者CR组治疗前后血清HGF水平分别为(1 140.31±266.23)ng/L,(478.50±183.75)ng/L(P<0.01),NR组治疗前后血清HGF水平分别为(1 432.51±235.30)ng/L,(1 386.63±197.95)ng/L(P>0.05).结论 AL患者血清HGF及VEGF水平均较正常对照组HGF水平及VEGF水平升高.血清HGF及VEGF水平可作为监测AL的疗效指标.血清VEGF水平可作为AL的预后判断指标,血清HGF水平对白血病的预后判断有一定意义.     

IL-24体外诱导儿童急性白血病骨髓单个核细胞凋亡研究

本研究探讨IL-24对儿童急性白血病骨髓单个核细胞(BMMNC)凋亡的影响,为临床应用提供理论依据。纳入本研究的确诊未治的儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)、儿童急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者各20例。取患者骨髓分离单个核细胞;用琼脂糖电泳方法检测BMMNC DNA;采用碘化丙锭染色流式细胞术和细胞核形态观察同时检测体外培养的急性白血病BMMNC增殖、分化过程中的凋亡状况;观察IL-24对它们的影响,并进行了定量分析。采用RT-PCR检测bcl-2及caspase-3 mRNA表达水平,观察IL-24对它们的影响。结果发现:IL-24可诱导体外培养的急性白血病BMMNC凋亡。在培养的48小时,可见到DNA出现梯形条带;IL-24 50 ng/ml用药组细胞凋亡程度较没加IL-24的对照组明显增加。IL-24可下调体外培养的急性白血病BMMNC bcl-2基因mRNA的表达,上调caspase-3 mRNA的表达。结论:IL-24可诱导白血病BMMNC凋亡,其机制之一可能是下调bcl-2 mRNA的表达,上调caspase-3 mRNA的表达。     

MRP在急性白血病患者骨髓涂片中表达的临床意义

目的 探讨多药耐药相关蛋白（multidrug resistance assoliated protien, MRP）在急性白血病（acute leukemia AL）患者骨髓涂片中的表达及其与临床疗效的关系。方法采用免疫组化染色技术检测42例AL患者骨髓涂片中MRP的表达。其中初发AL29例，复发13例。按FAB分类：其中急性淋巴细胞白血病（acute lymphocytic leukemia ALL）10例，急性髓细胞白血病（acute mylogenous leukemia AML）31例。结果 初发AL患者NRP的表达阳性率（17．2％）与复发患者（46．2％）有差异。骨髓涂片中MRP表达阳性患者化疗缓解率54．5％低于NRP表达阴性患者95％，具有统计学差异。结论AL患者骨髓涂片中MRP的检测是判断疗效的一个简便可行的方法，对其疗效有其一定影响关系。     

抗凋亡基因survivin在急性白血病细胞表达及其临床意义

目的　探讨急性白血病 (AL)原代细胞survivin基因表达及其与AL疗效的关系。方法　应用RT PCR方法检测 50例初发AL患者survivin基因mRNA表达。结果　AL细胞survivinmRNA阳性率为 82 .0 % (50例中 41例 )。survivinmRNA阳性表达在急性淋巴细胞白血病细胞 (89.5 % )较在急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)细胞 (75 .0 % )稍多见 ,但均高于正常对照组 (33 .3 % ) ,P值分别 <0 .0 1 ,<0 0 5。在 2 2例ANLL患者白血病细胞中 ,survivinmRNA表达阴性者接受 1个疗程化疗后骨髓缓解(BMR)率 (83 .3 % )明显高于阳性者 (2 5 .0 % ,P =0 .0 2 3) ;1 3例ANLL患者接受高三尖杉酯碱和阿糖胞苷联合治疗 ,survivinmRNA阴性表达者BMR率 (1 0 0 .0 % )高于阳性表达者 (2 7.3 % ) ;survivin/ β actin >0 .6者BMR率低。结论　survivin基因在AL细胞高表达 ,可能是导致AL细胞对化疗药物不敏感的原因之一     

人端粒重复序列结合因子(hTRF1)蛋白质在急性白血病中的表达水平与端粒酶活性关系的研究

为了研究人端粒重复序列结合因子（TRF1）蛋白质在急性白血病（AL）及正常骨髓组织中的表达水平，AL和正常骨髓组织中端粒酶活性及TRF1蛋白质表达水平与端粒酶活性的关系，定量分析了AL患者及正常人骨髓组织中TRF1蛋白质的表达水平，并应用经倍比稀释的TRF1^33-277纯化蛋白质作为定量标准，建立以抗TRF1^33-277单克隆抗体的定量Western blot的方法，而且以该方法检测TRF1蛋白质在组织中的表达水平；另外，应用TRAP-PCR-ELISA法检测AL患者及正常人骨髓组织端粒酶活性，以研究TRF1蛋白质表达水平与端粒酶活性的关系。结果表明：20例AL患者骨髓组织中TRF1表达水平较正常人骨髓组织显著降低，差异具有显著性（P〈0．01）；急性淋巴细胞性白血病患者的TRF1表达水平较急性非淋巴细胞性白血病患者略减低，但差异无统计学意义（P〉0．05）；化疗缓解的患者TRF1表达水平较前增高，但仍低于正常（P〈0．01）；化疗后完全缓解患者的TRF1表达水平较未缓解的患者显著增高，差异具有显著性（P〈0．01）；AL患者初发未治时骨髓细胞端粒酶的活性明显高于正常人（P〈0．05）和首次缓解者（P〈0．01）；初发未治时，ALL患者骨髓细胞端粒酶活性略高于ANLL患者，但差异无统计学意义（P〉0．05）。TRF1蛋白质表达水平与端粒酶活性呈明显负相关（P〈0．001）。结论：TRF1蛋白质在AL患者骨髓细胞中的表达明显减低．且与疗效及端粒酶活性相关。     

Allogeneic bone marrow transplantation for malignant hematologic disorders in children.

In the present study we carried out allogeneic bone marrow transplantation (BMT) in 14 leukemia children with high risk prognostic factors. Six patients with acute nonlymphocytic leukemia (ANLL), four with acute lymphocytic leukemia (ALL), two with chronic myelogenous leukemia (CML), and two with myelodysplastic syndrome (MDS). Among these patients, six with ANLL, two with ALL, one with CML and one with MDS were alive in complete remission 8 to 58 months post-BMT. Four patients died of relapse (one with ALL, and one with MDS), and chronic GVHD (one with ALL and one with CML). In six patients recombinant granulocyte colony stimulating factor (rG-CSF) was used to shorten the period of granulocytopenia. The mean time of recovery to granulocyte count of 500/mm3 was 13.2 days in the rG-CSF+ group, being 15.9 days faster than that in the rG-CSF- group. In light of these results, allogeneic BMT is shown to be a choice of treatment for leukemia children with high risk prognostic factors and rG-CSF may be an effective reagent to prevent infectious episodes in BMT.     

核干细胞因子mRNA在原代白血病细胞中的表达

【目的】探讨急性白血病（AL）患者骨髓单个核细胞（BMNC）核干细胞因子（NS）基因的表达水平。【方法】采用半定量RT—PCR方法检测52例AL患者及20例骨髓正常的非恶性血液病（对照）的BMNCNS基因的表达水平。【结果】在52例AL患者的BMNC中均存在NS基因的表达,20例非恶性血液病对照的BMNC极低表达或不表达NS基因。急性淋巴细胞白血病患者和急性非淋巴细胞白血病患者NSmRNA的相对表达量均明显高于对照组（P〈0．01）。但在AL各亚型之间NSmRNA的表达无明显差异（P=0．253）,NSmRNA的表达水平与患者初诊时骨髓原始细胞数呈正相关,与外周血白细胞数及血小板数无关。【结论】Ns基因在AI。原代细胞中表达上调,但NSmRNA表达水平与AL患者某些临床特征无相关性。     

血涂片分类检出白血病研究

目的强调全血细胞分析仪使用仍然需要进行血涂片镜检分析的重要性。方法采用全血细胞分析仪与血涂片镜检进行白血病细胞检查。结果检出白血病30例，其中27例与骨髓诊断一致，另3例未查骨髓（因患者拒查），但治疗后有缓解。结论血涂片分类可发现慢性粒细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、急性淋巴细胞白血病、急性非淋巴细胞白血病M1、M3和M7型等。用血细胞分析仪分析血液时，不能忽视血细胞形态学镜检，以防止白血病漏诊。     

急性白血病病人黏着斑激酶的表达及临床意义

目的观察黏着斑激酶（FAK）在急性白血病（AL）病人白血病细胞中的表达及临床意义。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测50例AL病人白血病细胞FAK mRNA的表达水平,以10例健康人作为正常对照。收集病人骨髓细胞,用24h常规培养方法制备染色体,采用R显带技术分析其染色体核型。结果正常对照组FAK mRNA阳性表达率为20.0%,AL病人为66.0%,差异有显著性（χ2=5.49,P〈0.05）。其中急性淋巴细胞白血病（ALL）和急性非淋巴细胞白血病（ANLL）病人FAK mRNA阳性表达率和表达水平均高于正常对照组（P=0.04,χ2=4.44,t=7.98、5.60,P〈0.05）,但ALL和ANLL比较差异无显著性（P〉0.05）。初诊和复发AL病人白血病细胞FAK mRNA阳性表达率和表达水平比较差异无显著性（P〉0.05）,但均高于正常对照组（χ2=9.38,P=0.02,t=8.79、7.58,P〈0.05）。缓解组病人FAK mRNA阳性表达率和表达水平明显低于初诊组和复发组（χ2=10.26,P=0.02,t=4.43、7.82,P〈0.05）,与正常对照组相比差异无统计学意义（P〉0.05）。AL病人异常核型检出组FAK mRNA的表达率和表达水平均明显高于未检出组（χ2=5.82,t=6.72,P〈0.05）。结论 FAK mRNA在AL中存在较高的表达,且与疾病的转归相关,可能为白血病的治疗提供新靶点。