重组合异种骨移植同源抗原刺激对脾细胞上清液中IL-2的影响

为探讨重组合异种骨（RBX）移植对机体免疫功能的影响，以RBX、牛BMP、经处理的同源松质骨粒、羟基磷灰石移植建立4组BALB／C小鼠股后肌袋模型．术后2、7、14、28、42天杀鼠取脾细胞．留取上清液．3H-TdR掺入法时体内植骨及体外同源抗原刺激后IL-2生物学活性进行了研究．结果表明：①RBX（BMP）移植后2天IL－2一过性升高；②术后7、14天IL-2水平显著降低；③体外抗原刺激各时间点3H-TdR掺入cpm值明显降低，且与抗原量呈剂量依赖关系．上述结果提示，RBX移植对T淋巴细胞和IL－2诱导CTLL增殖有明显的抑制效应，可能对IL-2也有直接的抑制作用．作者认为，本研究对用RBX移植后既能成骨及不发生明显免疫排异的机理是一种有意义的探讨，为临床使用提供了免疫学上的依据．     

小鼠体内异种骨移植局部肿瘤坏死因子α基因表达及细胞定位

目的：观察肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）在异种骨转移局部的表达及细胞定位。方法：将经过一定化学处理的牛松质骨载体植入小鼠股部肌袋内，于术后５，１０和２０ｄ取材，制备石蜡切片，应用原位杂交技术检测植骨局部ＴＮＦα ｍＲＮＡ的表达与细胞定位。结果：①术后５，１０和２０ｄ，植骨局部均有ＴＮＦα ｍＲＮＡ的阳性表达，以１０ｄ时阳性表达率最高（Ｐ〈０．０５）；②阳性反应细胞在载体周边呈散在局灶性或弥漫性分布；③     

复合BMP同种异体半关节异位植入的免疫研究

目的：探讨BMP骨诱导与免疫反应之间的关系．方法：将复合BMP5mg的冻于异体半关节植入兔腰大肌肌袋内，并采用原位杂交技术对术后不同时间各组IL-1和IL-6 mRNA表达强度进行比较．结果：骨移植术后，实验组较对照组成骨作用增强．植骨局部在移植术后第4周起即可见IL-1和IL-6 mRNA的阳性表达，实验组与对照组植骨局部均可见IL-1和IL-6 mRNA的阳性表达，不同时间点各组间IL-1和IL-6 mRNA表达强度无明显差异．     

骨形态发生蛋白诱导犬的自体及异体气管移植段软骨再生的比较

目的：将重组人骨形态发生蛋白—2(rhBMP—2)植入犬的自体及异体气管移植段内，促进新生软骨形成，比较rh—BMP—2在自体及异体气管移植段内诱导软骨再生的作用．方法：16只杂种犬随机等分为4组，颈部切去5环气管埋入腹腔大网膜中作为移植段．A．B组为自体移植．C．D组为异体移植，其中A，C组移植段植入rhBMP—2，B和D组移植段不植入任何物质作为对照。术后4wk处死动物，标本行大体及组织学观察．结果：4组移植段软骨环均有不同程度的软骨再生，且以A，C组再生更明显．结论：rhBMP—2可刺激气管移植段软骨再生，但在自体及异体移植段内的作用效果不同.     

脱细胞保鲜异种骨移植免疫反应的实验研究

目的　研究脱细胞保鲜异种骨移植的免疫排斥反应。方法　以大鼠为动物模型 ,分别植入脱细胞保鲜牛皮质骨(PBCTB)和松质骨 (PBCCB)、新鲜骨 (FBC)、去抗原牛松质骨 (BCB) ,采用体外二次刺激增殖实验 ,酶联免疫吸附实验及局部组织学观察 ,研究移植后大鼠体内的细胞免疫、体液免疫及宿主对该移植物的局部病理反应。结果　保鲜牛皮质骨、松质骨显著降低了异种骨的抗原性、其中保鲜松质骨尤佳 ,与BCB相比较 ,没有统计学差异。结论　脱细胞处理的保鲜松质骨显著降低了细胞的免疫原性 ,同时可以避免化学毒物的残留 ,是一种理想的植骨材料。     

骨髓细胞移植上调血管内皮生长因子及其受体的表达并改善缺血心脏功能

目的：通过骨髓细胞移植对心肌梗死大鼠模型血管内皮生长因子及其受体表达的影响，探讨骨髓细胞移植改善缺血心脏功能的可能机制。方法：利用左前降支冠状动脉结扎术制备大鼠心肌梗死模型，然后行异体骨髓细胞移植；分别于术后1d，3d，7d，14d和28d取材；利用免疫荧光和RT—PCR技术分析细胞移植对血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(Flk一1)表达的影响和移植细胞的分化情况；通过免疫组化计算血管数量；应用血流动力学检测大鼠心脏功能在术后各时间点的变化。结果：VEGF和Flk-1在移植组动物的心肌梗死区残存细胞、梗死周边区细胞以及部分移植细胞内表达。移植组VEGF和Flk-1的mRNA表达明显高于对照组。分别于术后3d和14d达到高峰，以后逐渐减弱。术后7d，14d和28d移植组血管数量较同期对照组明显增加，移植组心脏功能较对照组明显改善。术后14d可在部分移植细胞中检测到心肌细胞或血管内皮细胞特异性蛋白的表达。结论：骨髓细胞移植通过上调移植细胞及受者内源性VEGF和Flk—1的表达，促进血管新生，进而改善缺血心脏功能。     

BMP诱导自体气管移植段软骨再生的量效关系

目的：将重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)植入犬的自体异位气管移植段内诱发新生软骨,寻求rhBMP-2在气管移植段内诱发软骨的量效关系及最佳的rhBMP-2用量．方法：8只杂种犬,颈部切取5环气管段作为移植段．移植段各环间软组织中植入不同含量的rhBMP-2后埋入自体的腹腔大网膜中．不同含量的rhBMP-2均以胶原为缓释载体．术后4wk处死动物取材,并行大体及组织学观察．结果：各组移植段固有软骨环均被轻度吸收．rhBMP-2植入组移植段环间均有不同程度的软骨再生,且各组新生软骨量随植入物中rh—BMP之含量的增加而增加．结论：rhBMP-2可刺激气管移植段软骨再生,且存在量效关系,以每环间植入5mg的rhBMP-2较为合适．     

自体移植静脉p21, p16, CyclinD1 mRNA基因表达与SMC增殖的关系

目的：探讨P16，P21和CyclinD1 mRNA在自体移植静脉的表达及其与平滑肌细胞(SMC)增殖的关系．方法：以新西兰兔建立自体移植静脉SMC增殖模型，用增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组化染色观察SMC增殖水平，用原位杂交观察P16，P21和CyclinD1 mRNA表达水平．结果：P16 mRNA在正常颈静脉无表达，移植后仅少量表达，与内膜SMC增殖无相关性．p21 mRNA在正常颈静脉低水平表达，4-8wk表达明显增加，12wk降低，表达水平在1-8wk与内膜SMC增殖呈负相关(r＝-0．908，P＜0．01)．CyclinD1 mRNA 1-2wk为表达高峰，4wk后逐渐下降，表达水平与内膜SMC增殖呈正相关(r＝0．951，P＜0．01)．结论：p21和CyclinD1 mRNA表达与自体移植静脉内膜SMC增殖有明显相关性，p21可能对自体移植静脉内膜SMC增殖起抑制作用，CyclinD1可能起促进作用．     

IL-15基因转染抗瘤免疫研究回顾与展望

在人体多种正常组织细胞中,IL-15 mRNA广泛表达,但长信号肽阻碍其蛋白的表达,即IL-15的mRNA表达与蛋白表达不一致。肿瘤细胞中也存在此现象,并且发现部分肿瘤细胞株IL-15 mRNA与IL-15蛋白同时缺失。针对此现象,学者们结合IL—15似于IL-2又优于IL-2的抗瘤特性,进行了不同形式IL—15基因转染不同细胞的抗瘤免疫研究。     

ARBX与RBX治疗感染性骨缺损的实验对比

目的：研究抗感染重组合异种骨（ARBX）对感染性骨缺损的治疗作用。方法：在36只新西兰大白兔胫骨近端制备大小为0．8cm×1．2cm×1．8cm的矩形骨缺损并注入金色葡萄球茵,以构建感染性骨缺损模型．2周后再次手术清除病灶。实验分为ARBX组（植入ARBX）、RBX组（植入RBX）及对照组（不植骨）,每组12只。术后12周对缺损修复情况行大体解剖学、影像学、组织学、细菌学观察。结果：ARBX组骨缺损骨皮质与髓腔组织结构接近正常,与相邻正常组织连接较佳,均无明显的骨髓炎表现,而RBX组标本外观显示骨折、死骨、脓液征象,修复新生骨增生与缺损交替存在,与相邻正常组织连接松散,髓腔可见炎症细胞和脓肿存在。ARBX组细菌计数及改良x线N0rden感染分值低于其他两组（P〈0．01）。结论：ARBX抗感染的同时可诱导成骨,是一种较理想的一期修复感染性骨缺损的植骨材料。     

复合rhBMP2的异种骨的研制及成骨活性

目的：研制新型具有诱导成骨活性的异种骨植骨材料。方法：在重组合异种骨（RBX）基础上,以基因重组人BMP2（rhBMP2）取代从牛皮质骨中提取的牛BMP,与去抗原牛松质骨载体（BCB）复合,制成复合rhBMP2的异种骨（rhBMP2/BCB）,并采用小鼠股部肌袋模型,通过组织学、骨计量学方法检测rhBMP2/BCB的诱导成骨活性。结果：实验组（rhBMP2/BCB组）术后7d在小鼠肌袋可诱导软骨生成,14d形成纺织骨,21d改建成板状骨并形成大量骨髓;对照组（BCB组）于术后各时间点均未见有软骨成骨形成。实验组的碱性磷酸酶活性和钙含量均高于对照组,有非常显性差异（P＜0．01）。结论：rhBMP2/BCB具有较好的骨诱导能力,是一种较理想的植骨材料。     

重组人骨形成蛋白－2与异种骨复合移植的扫描电镜观察

目的：明确含有重组人骨形成蛋白－２（ｒｈＢＭＰ－２）的新型复合异种骨的骨修复能力。方法：将ｒｈＢＭＰ－２与经综合化学处理的新生小羊骨松质（ＣＢ）结合，制备成复合异种骨．将复合异种骨植人兔下颌骨缺损，并以单纯松质骨移植、自体骨移植作为对照组，术后２、４、８、１２周分别取材做扫描电镜观察。结果：复合异种骨移植后，植骨区有大量新骨形成，新骨的量随移植时间延长而逐渐增多。自体骨移植组扫描电镜下表现与复合异种骨组基本相同。而单纯骨松质载体移植后，植入区多为纤维结缔组织，新骨形成少．结论：ｒｈＢＭＰ－２可显著促进复合异种骨内的新骨形成。这种新型复合异种骨可能是一种较理想的植骨材料，可望用于人体植骨     

rhBMP-2在体内诱导成骨中I，II型胶原及碱性磷酸酶的表达

目的：对rhBMP－2在诱导成骨中CollagenI,II及碱性磷酸酶（ALP）的表达进行研究,方法：将含rhBMP-20.5mg的松质骨载体植入55只BALB／c小鼠的右侧股部股袋内,分别术后3－21d共8个时间点取材,采用免疫组织化学方法对新生骨组织中的I,II型胶原进行检测,对ALP活性进行定量分析,观察rhBMP-2在诱导成骨中CollagenI,II及ALP的表达情况,结果：（1）II型胶原的出现是和成软骨,软骨细胞的出现相伴随的,但是,肥大,变性的软骨细胞并不表达II型胶原,（2）作为成骨细胞成熟标志物的I型胶原,ALP在软骨形成期即有表达,但是随着成骨细胞的出现,骨组织的形成I型胶原仍表现为高表达,而ALP的表达则呈下降趋势,结论：在诱导成骨中rhBMP－2促进了CollagenI,IIey ALP的表达。     

Experiment study on combined free periosteum grafting and new reconstituted bone xenograft in repairing segmental defects

Segmental bone defects in long bones often pose achallenge tO their sMcal ~nt, and the vasculallzedperiosted po used either alone or in combination withother ~ materials has been Preferred as a uSeals solution to this Problems"'l. HOwever, the use Of vascularized graft has to resort to ndcrosuopcal tecboqUes, Whichmakes it difficult tO populallze this OPe~ in the graSsests level intitutions. We Pimeeded with combined useOf free Periosteum and new reconshtuted bine xenograft(NRBX) in re…     

兔骨髓间充质干细胞复合带部分松质骨的小牛皮质骨成骨实验研究

目的:探讨带部分松质骨的小牛皮质骨材料作为组织工程材料的可能,为该材料的临床应用提供实验依据.方法:分离兔骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs);BMSCs与带部分松质骨的小牛皮质骨复合培养,测定细胞黏附率及细胞毒性,应用电镜观察细胞在骨材料表面生长情况.并饲养3月龄新西...     

基因重组人骨形成蛋白-2对培养骨髓细胞的生物学效应

目的 骨髓是机体重要的造血器官,其中的单个核细胞主要是单核细胞和巨噬细胞,骨髓组织在骨损伤修复过程中也发挥重要的作用,为提高骨形成蛋白（ＢＭＰ）修复骨缺损的能力。方法 本实验观察了基因重组人骨形成蛋白－２（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎＢｏｎｅＭｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃＰｒｏｔｅｉｎ－２,ｒｈＢＭＰ２）对培养骨髓细胞生物学活性的影响。结果 低浓度的ｒｈＭＢＰ２）对培养骨髓细胞生物学活性的影响。结     

珊瑚/胶原/重组人骨形成蛋白-2复合人工骨的异位骨诱导(英文)

目的：评价珊瑚／胶原／重组人骨形成蛋白－２ （ｒｈＢＭＰ－２）复合人工骨的骨诱导活性。　方法：将珊瑚／胶原／ｒｈＢＭＰ－２ 植入大鼠背部肌肉内,以珊瑚／胶原或珊瑚／ｒｈＢＭＰ－２ 植入作对照。术后１ 周和４周取材,通过组织学和计算机图像分析评价其异位诱导成骨情况。　结果：珊瑚／胶原／ｒｈＢＭＰ－２ 植入后１ 周,在局部诱导软骨形成;４ 周,形成含骨髓的板层骨;诱导成骨的量有明显的ｒｈＢＭＰ－２ 剂量依赖性（Ｐ＜ ０．００１）。珊瑚／胶原或珊瑚／ｒｈＢＭＰ－２ 植入区无骨或软骨形成。　结论：珊瑚／胶原／ｒｈＢＭＰ－２ 复合人工骨具有良好的异位骨诱导活性,是一种较理想的骨移植替代材料     

鸵鸟羟基磷灰石陶瓷支架负载骨髓基质细胞异位成骨性能

目的:观察鸵鸟羟基磷灰石陶瓷支架负载骨髓基质细胞后植入裸鼠皮下的成骨性能. 方法:获取兔髂骨松质骨骨髓基质细胞,体外分离、扩增、诱导后接种于鸵鸟羟基磷灰石支架. 支架/细胞复合物植入裸鼠背部皮下,支架单纯植入作为对照. 植入后3, 6 wk取材,通过大体、组织学观察评价成骨活性. 结果:支架/细胞复合物植入后3 wk,以软骨为主的大量未成熟骨在材料表面及孔隙内形成;植入后6 wk,更多的成熟骨形成. 在支架材料和骨组织的邻接区域见成骨细胞及破骨细胞,部分区域有血管和多核巨细胞分布,可见软骨内成骨方式. 结论:支架/细胞复合物显示良好的成骨活性,鸵鸟羟基磷灰石陶瓷可以用于骨组织工程支架材料.     

联合应用IL-2和IL-3的基因疗法增强骨髓移植后骨髓细胞毒活性及抗肿瘤效果的实验研究

目的：探讨联合应用成纤维细胞介导ＩＬ２和ＩＬ３的基因疗法对骨髓移植（ＢＭＴ）后荷瘤小鼠抗肿瘤作用的效果及机理。方法：将分别转染ＩＬ２基因及ＩＬ３基因的ＮＩＨ３Ｔ３细胞以单独或联合方式移植至ＢＭＴ的荷瘤小鼠腹腔内８ｄ后，取出小鼠骨髓细胞检测杀伤活性的变化以及ＩＬ２受体的表达，并观察荷瘤小鼠的存活期。结果：ＩＬ３基因治疗虽然可加速ＢＭＴ后造血重建过程，但对骨髓细胞的ＮＫ、ＬＡＫ活性具有一定的抑制作用；ＩＬ２基因治疗可明显提高骨髓细胞的杀伤活性；联合应用基因治疗后荷瘤小鼠骨髓ＮＫ、ＬＡＫ活性及骨髓细胞ＣＤ２５表达升高，明显延长大剂量化疗后接受ＢＭＴ的荷瘤小鼠的存活期。结论：联合应用ＩＬ２和ＩＬ３的基因疗法能协同提高骨髓细胞ＩＬ２受体表达水平，提高骨髓细胞毒活性，增强ＢＭＴ后的抗肿瘤效果。