P16、Rb和P53在喉鳞癌组织中的表达及意义

目的探讨抑癌基因P16、Rb和P53蛋白表达与喉鳞癌发生的关系及三者的相关性.方法采用免疫组化(SABC)方法检测80例喉鳞癌患者癌组织及癌旁组织(30例),30例声带息肉患者手术标本中抑癌基因P16、Rb和P53的表达情况.结果声带息肉、癌旁组织及癌组织P53表达率分别为6.66%、46.6%和66.2%(P＜0.0001);P16表达率分别为86.6%、63.3%和41.2%(P＜0.0001);Rb表达率分别为80.3%、66.6%和52.5%(P＜0.05).P53蛋白表达与临床分期、癌细胞分化程度和淋巴结转移有关(P＜0.05).癌组织中P16和Rb蛋白的表达呈负相关(P＜0.05).P16和Rb的表达与临床分期、细胞分化程度和淋巴结转移无关.结论 P16、Rb和P53的异常表达与喉鳞癌的发生与进展有关;P53可作为判定喉鳞癌患者预后的一个指标.     

高危型人乳头瘤病毒E7 mRNA与喉病变的关系

目的检测高危型人乳头瘤病毒(HPV)E7 mRNA表达量并分析其与喉病变的关系。方法经临床明确诊断的喉癌50例、喉癌前病变22例、声带息肉16例共计88例患者,分为喉癌组、病变组、息肉组,分别进行HPV DNA检测及HPV mRNA反转录实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测。结果各组均有HPV-16及HPV-18型特异的E6、E7阳性表达。喉癌组HPV-16和HPV-18的E6及E7的相对表达量均明显高于病变组和息肉组(P<0.05);喉癌组HPV-16和HPV-18的E6及E7检出率明显高于病变组和息肉组(P<0.05);喉癌组HPV mRNA拷贝数明显高于病变组和息肉组(P<0.05),HPV mRNA的表达水平随喉病变的发展而提高。结论 HPV mRNA的表达率随喉病变的发展而增加,其表达量也随之增强,其表达水平与喉病变发展具有一定相关性。检测HPV E7 mRNA可以为喉癌的预防、发展监测提供重要的临床指导。     

人乳腺癌细胞中HPV16 E6/E7与COX-2表达的关系

目的 探讨人乳腺癌细胞中高危型人乳头瘤病毒16型(HPV16) E6/E7与COX-2表达的关系.方法 以HPV16 E6/E7表达阴性的人乳腺癌细胞系MCF-7和分别稳定高表达HPV16 E6、E7和同时高表达E6/E7的乳腺癌细胞系MCF-7-E6、MCF-7-E7、MCF-7-E6/E7及空转细胞MCF-7-vec为研究对象,通过RT-PCR和Western印迹方法检测各乳腺癌细胞系中COX-2基因及蛋白的表达情况.结果 所有细胞系中COX-2 mRNA及蛋白均有阳性表达,且MCF-7-E6、MCF-7-E7和MCF-7-E6/E7细胞中的表达水平要显著高于MCF-7-vect和MCF-7亲本细胞(mRNA:F=135.236,P ＜0.01;蛋白:F =146.125,P＜0.01),而MCF-7-E6、MCF-7-E7和MCF-7-E6/E7细胞中COX-2 mRNA及蛋白的表达水平无显著性差异,MCF-7-vect空转和MCF-7亲本细胞中COX-2 mRNA及蛋白的表达水平也无显著性差异.结论 人乳腺癌中HPV16 E6/E7与COX-2的表达间可能存在密切关系.     

喉鳞癌组织中NF-κB p65与Bcl-cL蛋白的表达及意义

采用免疫组化法检测50例喉鳞癌(LSCC)和20例声带息肉组织中的NF-κB p65和BcL-xL.结果 LSCC和声带息肉组织中NF-κB p65阳性表达率分别为66.0%和5.0%,P＜0.05;Bcl-xL阳性表达率分别为70.0%和10.0%,P均＜0.05.NF-κB p65的表达与喉鳞癌的淋巴结转移有关.认为LSCC组织中NF-κB p65异常活化,Bcl-xL呈高表达,两者可能共同参与了LSCC的发生和发展.     

植酸酮对宫颈癌细胞株中 HPV16／18 E6／E7 mRNA 及蛋白表达的影响

目的观察植酸酮对宫颈癌细胞株中HPV16/18 E6/E7 mRNA及蛋白表达的影响。方法体外培养Caski细胞株(含HPV16)与Hela细胞株(含HPV18),将所有细胞分成实验1、2、3、4组和对照组,每组均包含Caski细胞和Hela细胞。实验1、2、3、4组分别加入含58.6、117、586、5 860 mg/L植酸酮的培养液,对照组加入不含植酸酮的培养液。各组培养72 h后,采用real-time PCR法分别检测HPV16/18 E6/E7 mRNA,采用Western blotting法检测E6/E7蛋白。结果实验1、2、3、4组同一型别细胞中E6/E7 mRNA及蛋白相对表达量低于对照组,且实验1、2、3、4组E6/E7 mRNA及蛋白相对表达量依次降低(P均<0.05)。各实验组内,Caski细胞中E6/E7 mRNA相对表达量低于Hela细胞(P均<0.05)。各实验组内同一型别细胞中,E6 mRNA相对表达量低于E7 mRNA(P均<0.05)。结论植酸酮可下调人宫颈癌细胞株中HPV16/18 E6/E7 mRNA及蛋白表达,且作用呈剂量依赖性;植酸酮对HPV16 E6/E7 mRNA的抑制作用强于HPV18 E6/E7 mRNA,并可能以抑制E6 mRNA表达为主导。     

新疆哈萨克族食管癌组织中乳头瘤病毒16型E6E7基因的研究

为了解HPV16感染后E6E7基因变化在哈萨克族食管癌发病中的作用 ,以及HPV16E6E7基因与食管癌病理组织分级的关系 ,采用聚合酶链 (PCR)技术 ,检测 82例食管癌及癌旁正常食管粘膜组织中HPV 16E6E7基因差别。食管癌、癌旁正常粘膜组HPV16E6E7基因的检出率分别为 3 4. 15 % ( 14 /4 1)和 19. 5 1% ( 8/4 1) ,63 . 41% ( 2 6/4 1)和48. 78% ( 2 0 /4 1) ,差别均无显著性 (P >0 . 0 5 )。然而 ,在食管癌组织的高分化组、中低分化组中HPV16E6E7的检出率分别为 7. 69% ( 1/13 )和 46. 43 % ( 13 /2 8) ,3 8. 46% ( 5 /13 )和 75 % ( 2 1/2 8) ,差别均有统计学意义 (P <0 .0 5 )。提示HPV16E6E7基因与哈萨克族食管癌的发生及癌组织分级密切相关。     

新疆哈萨克族食管癌中HPV感染状况分析

目的:探讨人乳头状病毒(HPV)18, 31, 45E7 3个高危基因亚型在新疆哈萨克族(哈族)食管癌中的感染率及其相关性. 方法:采用聚合酶链反应(PCR)技术检测HPV-18, 31, 45E7基因在316例哈族食管癌中的感染情况. 并随机抽取PCR产物进行测序来验证PCR结果.结果:HPV18, 31和45E7基因亚型在食管癌中阳性率分别为25.3%(80/316), 14.2%(45/316)和7.3%(23/316), 其基因型分布与年龄、性别均无关. HPV31, 45E7基因阳性率在组织病理学分级上无统计学意义. HPV18基因型分布在中低分化食管鳞状细胞癌中的检出率明显高于高分化食管鳞癌(29.6% vs 17.7%, χ2 = 5.398, P<0.05).结论:HPV18型是新疆哈族食管癌的主要高危亚型之一, 其基因型分布与食管癌分化程度有关;HPV31, 45亚型可能不是新疆哈族食管癌最主要的高危亚型.     

人乳头状瘤病毒HPV-E6及P53蛋白与食管鳞癌关系

目的研究人乳头状瘤病毒HPV-E6和p53在食管鳞癌中的表达,以探讨它们在食管鳞癌中发生发展的生物学意义.方法应用LSAB免疫组化方法对16例正常食管粘膜,18例慢性炎症,22例不典型增生以及60例食管鳞癌组织进行HPV-E6和P53蛋白表达的研究.结果在正常食管粘膜、慢性炎症、不典型增生及食管鳞癌中HPV-E6蛋白阳性率分别为37%,39%,50%及73%,P53蛋白阳性率在上述四组中则为0%,6%,41%及63%.四组比较,HPV-E6和P53蛋白表达均有显著差别(P＜0.05).在60例食管鳞癌Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ级分组中,HPV-E6阳性率分别为59%,78%和85%,p53阳性率则分别为45%,67%,80%.三个分级组比较,HPV-E6和P53蛋白表达均有显著差别(P＜0.05). 结论HPV-E6及p53与食管鳞癌的发生发展有着一定相关性,且HPV-E6及p53共同作用很可能更为食管鳞癌发生发展的重要因素.     

喉鳞癌组织中PTEN和PCNA蛋白的表达及意义

采用免疫组化SP法检测50例喉鳞癌(LSCC)和20例声带息肉中张力同源蛋白10缺失的磷酸酶(PTEN)、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果显示PTEN、PCNA在声带息肉与喉鳞癌中的阳性表达率分别为75.0%、41.9%和15.0%、80.0%,阳性表达率组间比较P均<0.05.IWl"EN表达与喉鳞癌病理分级、临床分期有关(P均<0.05),与淋巴结转移无关.PCNA表达与喉鳞癌病理分级、临床分期、淋巴结转移均有关(P均<0.05).认为PTEN和PCNA蛋白的表达异常与喉鳞癌发生发展有关;PCNA可作为判断喉鳞癌恶性程度的辅助指标.     

人乳头状瘤病毒在食管癌中的表达及其作用

背景：人乳头状瘤病毒（HPV）感染与宫颈癌和口腔鳞状细胞癌的发生密切相关，但其与食管癌的关系及其所致相关基因表达的变化尚不十分清楚。目的：研究HPV在食管癌中的表达，探讨其对相关基因蛋白表达的影响。方法：以DNA原位杂交法检测HPV16基因的表达，以免疫组化方法检测HPV16E。突变型p53、p21WAF1、pRb和p16INK4a蛋白的表达。结果：食管癌组织中HPV16DNA的阳性率显著高于正常对照组（65．6％对10．0％，P〈0．001），HPV16E。蛋白的表达率亦显著高于正常对照组（58．9％对15．0％，P〈0．001）；突变型p53蛋白的表达率显著高于正常对照组（53．3％对45．0％，P〈0．05），p21WAF1、pRb和P16INK4a蛋白的表达率则显著低于正常对照组（22．2％对65．0％、23-3％对55．0％和35．6％对85．0％，P〈0．001）。食管癌组织中HPV16E。蛋白与突变型p53蛋白的表达呈正相关，与p21WAF1、pRb和p16INK4a蛋白的表达呈负相关（P〈0．01）。结论：HPV感染是食管癌发生的重要危险因素之一，其可能通过p53突变和p21WAF1、pRb、p16INK4a失活参与了食管癌的发生。     

MCM2和Rb蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的探讨微染色体维持蛋白2（MCM2）和视网膜母细胞瘤（Rb）基因蛋白在喉鳞状细胞癌（LSCC）中的表达变化及意义。方法采用免疫组化法检测60例LSCC组织、10例喉癌前病变、10例声带息肉及10例LSCC癌周正常喉组织中MCM2与Rb蛋白的表达。结果癌周正常喉组织、声带息肉、喉癌前病变和LSCC组织中MCM2的阳性表达率分别为10.00%、10.00%、30.00%和85.00%,Rb蛋白的阳性表达率分别为80.00%、80.00%、60.00%和36.67%;LSCC中MCM2表达水平明显高于喉癌前病变及癌周正常喉组织（P均〈0.05）,且与喉癌病理分级、临床分期及淋巴结转移有关（P均〈0.05）;LSCC中Rb蛋白表达水平明显低于癌前病变及癌周正常喉组织（P均〈0.05）;LSCC组织中MCM2与Rb蛋白的表达呈负相关（r=-0.542,P〈0.05）。结论MCM2的表达升高和Rb蛋白的表达下降与LSCC的发生、发展有关,检测MCM2有助于判定LSCC的恶性程度及预后。     

Immunohistochemical detection of mutant P53 protein and human papillomavirus-related E6 protein in anal cancers

PURPOSE: The wild-type P53 protein, a product of the P53 gene, is a normal growth controlling protein. Mutation of the P53 gene generates a mutant P53 protein which promotes tumor formation through loss of growth suppression. Some of the agents responsible for P53 gene mutation are known, one of which may be tumorigenic human papillomavirus (HPV) infection. Anal cancers are demonstrating a changing trend in the affected population, from older females in the older reported series to younger males more recently. This may be a reflection of infection with tumorigenic HPV types 16 and 18. The E6 oncoprotein of these viruses inactivates the growth-controlling wild-type P53 protein. In this study, our purpose was to determine the incidence of mutant P53 and HPV-16 and 18-related E6 protein and their coexpression in anal cancers. METHODS: We examined 29 anal cancers immunohistochemically for mutant P53 protein, HPV 16 and 18 E6 protein, and coexpression of the two. RESULTS: Mutant P53 protein was present in 58.6 percent of anal cancers overall and in 85.7 percent of anal adenocarcinomas. E6 oncoprotein was present in five cases (17.2 percent), all of which were squamous-cell carcinomas. Coexpression of both mutant P53 and E6 proteins was seen in only three cases (10.3 percent). CONCLUSION: Although tumorigenic HPV may be an important cause for P53 gene mutation in anal cancers, perhaps other mutagenic factors play a predominant role.This work was supported in part by the Bowman Research Fund. Read at the meeting of The American Society of Colon and Rectal Surgeons, San Francisco, California, June 7 to 12, 1992.     

Identification of High-Risk Human Papillomavirus DNA,p16, and E6/E7 Oncoproteins in Laryngeal and Hypopharyngeal Squamous Cell Carcinomas

Human papillomavirus (HPV) was proven to play a significant role in cancer development in the oropharynx. However, its role in the development of laryngeal (LSCC) and hypopharyngeal squamous cell carcinoma (HPSCC) remains to be clarified. High-risk HPV (HR-HPV) viral proteins E6 and E7 are considered to be pertinent to HPV-related carcinogenesis. Hence, our aim was to estimate LSCC and HPSCC for HR-HPV DNA, p16, and E6/E7 oncoprotein status by using molecular virology and immunohistochemistry methods. The prevalence of HPV16 infection was 22/41 (53.7%) and 20/31 (64.5%) for LSCC and HPSCC, accordingly. The majority of HPV16+ tumor samples were stage III or IV. In most samples, the presence of either HPV16 E6 or HPV16 E7 viral protein in dysplastic or tumor cells was confirmed using immunohistochemistry. Our results suggest a high prevalence of HPV16 as a primary HR-HPV type in LSCC and HPSCC. The lack of HPV E6/E7 oncoproteins in some tumor samples may suggest either the absence of viral integration or the presence of other mechanisms of tumorigenesis. The utilization of p16 IHC as a surrogate marker of HR-HPV infection is impractical in LSCC and HPSCC.     

HPV16 E6/E7基因及蛋白表达与宫颈癌的相关性研究

目的研究人乳头状瘤病毒16型（HPV16）E6／E7基因及其蛋白表达在宫颈疾病及其癌变中的作用。方法运用PCR技术检测51例宫颈癌（癌症组）、20例富颈上皮瘤变（CIN）Ⅱ～Ⅲ级（CIN组）、20例宫颈炎（炎症组）患者病变组织中HPV16 E6／E7基因，并运用免疫组化SP法检测癌症组癌组织中HPV16E6、E7的表达情况。结果癌症组、CIN组、炎症组HPV16 E6检出率分别为5％、35％、45％．后两者明显高于前者（P〈0．05），HPV16 E7检出率分别为65％、75％、68．6％，P均〉0．05；癌症组45例HPV16 E6和42例E7蛋白阳性表达（88．2％、82．3％）。HPV16 E6蛋白表达与临床分期、肿瘤分化程度和淋巴结有无转移均无相关性（P〉0．05），HPV16 E7蛋白表达与临床分期和淋巴结有无转移相关（P〈0．05），与肿瘤分化程度无相关性（P〉0．05）。结论HPV16 E6／E7基因与宫颈疾病及其癌变的关系密切。     

早期反应基因在宫颈癌中表达及其与人乳头瘤病毒感染的关系

目的探讨早期反应基因(Iex-1)在宫颈癌中表达及与人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系。方法病理科留存的宫颈病变组织石蜡包块61份,免疫组化法检测宫颈良性病变、宫颈上皮内瘤变、宫颈癌组织中Iex-1表达,分析Iex-1表达与宫颈癌临床病理特征的关系。培养3种不同HPV感染情况的宫颈癌细胞株C-33A(HPV-)、SIHA(HPV16+)、HELA(HPV18+),实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western印迹法检测各宫颈癌细胞株中Iex-1 mRNA和蛋白表达;使用siRNA靶向沉默SIHA细胞中E6后检测Iex-1 mRNA和蛋白表达,分析其与HPV感染的关系。结果宫颈良性病变、宫颈上皮内瘤变、宫颈癌组织中Iex-1表达阳性率依次下降,差异有统计学意义(P<0.01)。分化程度为G1~G2的宫颈癌患者Iex-1阳性率明显高于分化程度为G3的患者(P<0.05);无宫旁浸润、有淋巴结转移的宫颈癌患者Iex-1阳性率明显高于宫旁浸润、无淋巴结转移的患者(P<0.05)。C-33A细胞株Iex-1 mRNA表达水平明显高于SIHA、HELA细胞株(P<0.01);C-33A细胞株Iex-1蛋白表达水平明显高于SIHA、HELA细胞株(P<0.01)。SIHA细胞株和HELA细胞株Iex-1 mRNA和蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。干扰组SIHA细胞中E6 mRNA和蛋白表达水平明显低于空白对照组、阴性对照组(P<0.05);干扰组SIHA细胞中Iex-1 mRNA和蛋白表达水平明显高于空白对照组、阴性对照组(P<0.05)。空白对照组与阴性对照组E6 mRNA和蛋白、Iex-1 mRNA和蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论Iex-1在宫颈癌组织中低表达,且表达水平与宫颈癌病变程度呈负相关;HPV可能经E6蛋白参与调控的信号通路下调了Iex-1表达,促进宫颈癌发展与转移;首次提出了抑制Iex-1的促凋亡作用可能为HPV诱发宫颈癌的新通路。     

贵州地区宫颈上皮内瘤变和宫颈浸润癌患者HPV感染状态及其亚型分布

目的观察贵州地区宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈浸润癌患者人乳头状瘤病毒（HPV）的感染状态及其亚型分布。方法采用导流杂交技术对30例CIN（CIN组）、33例宫颈浸润癌患者（宫颈癌组）、60例自愿接受宫颈HPV感染筛查的妇女（对照组）进行HPV分型检测,所有受检者均来自贵州地区。结果 CIN组HPV阳性13例（43.33%）,宫颈癌组19例（57.58%）,对照组5例（8.33%）。CIN组、宫颈癌组与对照组比较,P均〈0.01。CIN组共检出7种亚型HPV,均为高危型（HR-HPV）,无多型HPV感染（M-HPV）。其中HPV16 7例,HPV31、52各2例,HPV18、33、53、58各1例。宫颈癌组检出5种亚型,亦均为HR-HPV,M-HPV3例。其中HPV16 11例,HPV534例,HPV58 3例,HPV18、59各1例。对照组检出7种亚型,HR-HPV中的HPV16、18、31、39、53、58和低危型HPV的HPV6各1例;M-HPV 1例。CIN组、宫颈癌组HPV16感染率明显高于对照组,P均〈0.05。HR-HPV感染与CIN（OR=8.412,95%CI为2.62~26.99）和宫颈浸润癌（OR=14.929,95%CI为4.74~46.98）紧密相关,且主要与HPV16感染有关（CIN：OR=17.957,95%CI为2.09~154.15;宫颈浸润癌：OR=29.500,95%CI为3.60~242.07）,P均〈0.05。结论贵州地区CIN和宫颈浸润癌与HR-HPV感染密切相关,HPV16为主要感染亚型。     

Expression and clinical significance of high risk human papillomavirus and invasive gene in cervical carcinoma

Objective:To study the expression of E6 and E7 mRNA in high-risk human papillomavirus(HPV) HPV-18 and the relationship between the expression of invasive gene and cervical carcinoma.Methods:A total of 119 patients with cervical cancer,cervical erosion and cervical HPV infection who were diagnosed in our hospital were selected and randomly divided into two groups:cervical cancer group(n= 58) and non-cancerous group(n= 61).Another 60 patients with uterine leiomyoma were selected as normal control group.Detection of HPV18 E6,E7 mRNA expression and invasion,migration,proliferation inhibition genes,epithelial mesenchymal transition genes and proliferation related protein content.Results:The relative expression of E6 and E7 HPV-18 in cervical cancer group was significant higher than that in non-cancerous group and control group(mRNA)(P0.05).The content of TRAF6 and c-FLIP in invasive cervical cancer group was significantly higher than that in non-cancerous group and control group(P0.05).The mR NA content of CD44v6 and MMP-9 in cervical cancer group was significantly higher than that in non-cancerous group and control group(P0.05).The content of DEC-1,IKK16,MBP-1 in cervical cancer group was significant lower than that in non-cancerous group and control group(P0.05).The mR NA content of beta-catenin and Vimentin in cervical cancer group was significantly lower than that in non cancerous group and control group(P0.05).The proliferation related protein E2F1 of cervical cancer group was significantly lower than that of non-cancerous group and control group,Bmi-1 content was significantly higher than non-cancerous group and control group(P0.05).Conclusions:The expression of the detection of cervical cancer in high-risk human papilloma virus HPV-18 E6 and E7 mRNA,and the invasion,migration,proliferation inhibition gene,epithelial mesenchymal transition and proliferation related gene protein content,HPV expression rate of mR NA increased with the development of cervical cancer,the expression is also enhanced.The expression has a certain correlation between the level and development of cervical cancer.Through the above indicators,the development of cervical cancer monitoring and treatment to provide important clinical guidance.