兔下丘脑-垂体移植的内分泌功能研究

目的：探讨幼兔的下丘脑—垂体异体异位移植后内分泌重建的可能性。方法：以徒手定向穿刺成兔垂体区，射频毁损垂体建立去垂体动物模型，将制备好的幼兔的下丘脑-垂体组织植入模型兔的臀部肌肉内，放免测定术后1、3及8W血清T4、PRL、GH水平。结果：垂体去除组上述激素水平持续下降。移植组术后8W上述激素恢复到术前水平。结论：下丘脑-垂体细胞的异体异位移植，内分泌过继可靠。     

混合胎垂体下丘脑黑质细胞的微囊研究

为了将微囊包膜技术应用于垂体移植，本文采用海藻酸钠包裹混合的胎垂体下丘脑黑质细胞，通过测定微囊细胞培养液中生长激素（ＧＨ）与泌乳素（ＰＲＬ）分泌水平、促甲状腺素释放激素（ＴＲＨ）刺激ＰＲＬ分泌试验及用微囊细胞免疫兔等方法，发现微囊细胞分泌活性良好，微囊内垂体细胞功能受到下丘脑细胞分泌因子的调节，且ＰＲＬ分泌受到控制；微囊膜能通透垂体激素与下丘脑因子，并具有免疫隔离作用。结果提示：本微囊可作为具有免疫隔离性能的移植物．可在颅外移植而垂体细胞功能仍能正常发挥，同时能避免移植后高泌乳素血症发生。     

脑垂体移植的实验研究——Ⅴ.垂体靶器官的内分泌功能重建

新西兰幼兔垂体移植到切除垂体的青紫兰成兔正中隆起下方,用免疫抑制剂环孢素治疗1个月。术后抽血测定血清 T_4,PRL,LH 水平。半年后杀死动物。研究发现:用环孢素治疗的垂体移植动物存活良好。动物的 T_4,PRL,LH 水平与正常对照组动物相似。这表明移植垂体具有正常的内分泌功能,而且与下丘脑建立了功能联系。不用环孢素治疗的垂体移植动物,内分泌激素测定结果提示移植没有成功。     

异体垂体移植大鼠E2诱致催乳素瘤的实验研究

目的 探讨催乳素瘤的发病机理,验证其原发于腺垂体的假说。方法 应用雄性Ｓ．Ｄ大鼠进行异体垂体移植,并通过背部埋植１７－β－雌二醇（Ｅ２）药泵,观察Ｅ２对大鼠原位垂体,异体移植于肾囊的垂体及血浆催乳素（ｐｒｏｌａｃｔｉｎ,ＰＲＬ）水平的影响。并利用上述垂体细胞原代培养及原位杂交组化方法,研究经Ｅ２作用１２０ｄ后的原位及移植垂体细胞中ＰＲＬ基因表达水平的改变。结果 经Ｅ２作用６０ｄ及１２０ｄ后,大鼠体     

脑垂体移植的实验研究 Ⅲ 移植垂体的內分泌功能重建

本文在两种基因型不同的兔间行垂体移植术,以PRL、LH、T_4水平检测植于下丘脑正中隆起下方的垂体内分泌功能的重建情况。短期观察表明。仅在免疫抑制剂联合治疗下,植入的幼兔垂体才能存活,有分泌功能,且受下丘脑激素调控。而植入的成年兔垂体,应用了免疫抑制剂仍不能克服排异,移植没有成功。     

垂体细胞微囊在兔腹腔内的形态学观察

为了将微囊包膜技术应用于垂体移植，作者将胎垂体细胞用２．２％海藻酸钠进行包裹，经６天培养后，微囊移植于兔腹腔内。每周从兔腹腔中取出微囊，在显微镜下观察其形态，结果显示：在移植后１２周的观察期内，微囊结构完整，囊内细胞活性良好。提示本微囊垂体细胞在移植后存活１２周以上。     

胎垂体下丘脑黑质细胞混合培养研究

为了判断混合胎垂体下丘脑黑质细胞能否作为一种理想的移植物，本文将脑垂体下丘脑黑质细胞进行混合培养（ＰＨＮ）通过组织学检查与激素测定，与单纯胎垂体细胞培养（Ｐ）及胎垂体下丘脑细胞培养（ＰＨ）相比较，结果显示，在ＰＨＮ组，不仅培养的细胞无明显为性，而且培养液中生长激素（ＧＨ）与泌乳素（ＰＲＬ）浓度可平衡在一定水平，提示在胎垂体下丘脑黑质细胞混合培养中，垂体细胞可保持良好的活性与功能。     

微囊化垂体瘤细胞移植的实验研究

本实验企图通过移植前的垂体ＧＨ腺瘤细胞培养，测定培养液及移植鼠术前、后血中的垂体激素水平和对移植后微囊化的ＧＨ腺瘤细胞的光、电镜观察，了解经微囊化后的ＧＨ腺瘤细胞是否能存活并正常分泌ＧＨ，是否会在受体动物中造成高催乳素（ＰＲＬ）血症以及微囊包膜完整性能维持多久。结果发现：移植术后１２周，微囊化的ＧＨ腺瘤细胞存活良好并具分泌功能，大多数微囊包膜结构仍然完整，术前体外ＧＨ腺瘤细胞培养液中，ＰＲＬ浓度相当高，但移植后动物血中ＰＲＬ和ＧＨ浓度与术前无显著性差异。提示微囊化的ＧＨ腺瘤细胞，在选择性垂体移植中作为供体来源的前景良好。     

脑垂体移植实验研究——Ⅳ.兔脑垂体移植后生化指标的改变

本文以正常兔子为对照,分析了垂体切除及垂体移植后兔血中8项生化指标的改变。发现垂体全切组的兔子处于极显著的高 Na、高 Cl、高 UN 状态(P<0.01),垂体切除后再移植的三组,Na、Cl、UN 也明显高于对照组(P<0.05)。以上四组的 TP、ALb 均较正常组低(P<0.05)。垂体未切除而额外移植垂体的两组,上述各指标均无明显变化。六个组的血糖均普遍偏高,而 K、Ca 无显著改变。以上结果显示了实验动物体内水、电解质平衡的失调和生化代谢的变化,提示临床和实验中在植入的垂体功能恢复前,应注意营养饮食、调节水和电解质平衡、监测糖、蛋白代谢指标。由此可间接了解各生物体内垂体损伤及术后植入垂体功能重建的程度。     

下丘脑部的垂体移植

自1934年开始垂体移植实验至今绝大多数工作都是在小鼠、大鼠及仓鼠等一类小动物中进行的.有关大动物及人身上进行的垂体移植实验报道甚少,尚无移植成功的肯定性结论.因而仍处在动物实验和临床探索阶段.垂体移植动物实验50多年的发展证实,虽然腺垂体在动物或人体内的许多部位都能较好的存活,但激素分泌功能的恢复并不理想,更不用说全面的功能恢复,只有下丘脑才是最理想的移植部位.本文就下丘脑垂体移植的有关问题进行综述.     

兔角膜内皮细胞移植治疗角膜内皮损伤

目的 研究兔角膜内皮细胞（CECs）移植的可行性和移植后细胞的形态和功能。方法 体外培养兔CECs并用Brdu标记后接种在Gelatin膜载体上;采用α-氰基丙烯酸脘基酯作为组织黏合剂,将接种有兔CECs的载体与机械去除了内皮细胞的自体兔角膜植片相黏合,原位缝合对21只新西兰白兔的右眼进行CECs移植;另外17只兔的右眼作为对照仅移植没有接种任何细胞的载体膜。术后1、2、4、8、12周观察兔眼角膜移植片的透明情况、眼压和植片厚度,并利用共焦显微镜进行移植细胞的形态观察和计数。观察12周后处死动物,角膜标本分别进行组织切片、免疫组织化学染色和电镜观察。结果 CECs在Gelatin膜载体上生长良好,体外培养3—5d后细胞汇合,细胞密度可以达到约2700个／mm^2。术后2周,所有植片均发生了水肿,并逐渐浑浊。CECs组植片在术后4周左右逐渐水肿减退,开始恢复透明;而对照组角膜植片则持续水肿,逐渐浑浊。术后移植细胞的密度随时间推移逐渐降低,术后12周时,移植细胞的平均密度为（2023±330）个／mm^2。Brdu单克隆抗体免疫组织化学染色显示,植片上的细胞为移植细胞。结论 Gelatin膜作为内皮细胞培养载体并进行内皮细胞移植是一种可行的方法。     

胚胎脑垂体移植治疗席汉氏综合症的临床研究

采用胎龄为６个月左右水囊引产的胚胎脑垂体植入股四头肌内，并将血管束植入垂体内的颅外移植法治疗产后大出血所致的席汉氏综合症。结果：与术前相比，内分泌激素水平显著增高（Ｐ＜０．０５），临床症状明显改善。提示：移植的脑垂体存活，并具有分泌功能；颅外移植法治疗席汉氏综合症有一定临床价值。     

大白兔颈动脉移植后血浆一氧化氮浓度的变化

目的:探讨大白兔颈动脉移植后血浆一氧化氮(NO)浓度的变化及其意义.方法:建立大白兔颈动脉移植模型,根据移植前供体血管不同处理方法将30只大白兔随机分为A(自体血管移植组)、B(无预处理异体血管移植组)、C(青霉素和链霉素处理后常温保存异体血管移植组)、D(青霉素和链霉素处理后液氮冷冻保存异体血管移植组)4组.观察移植后血管形态变化.测定并比较移植后1,2,3周血浆NO浓度.结果:B组血管移植后宿主血浆NO平均含量显著高于A组和D组(P＜0.05);C组血浆NO含量和D组与A组无显著差异(P＞0.05).在血管形态上,A组结构正常,仅有炎性细胞浸润.其余各组术后1周可见内膜开始增生,2周内膜明显增厚,3周内膜增厚最显著.其中B组改变最严重.结论:青霉素和链霉素可降低供体血管的抗原性及宿主诱导型一氧化氮合酶活性;液氮冷冻保存可能具有协同效应.     

玻璃化冷冻兔卵巢组织自体移植后卵巢功能观察

目的 观察玻璃化冷冻兔卵巢组织经子宫系膜内种植后卵泡的发育情况。方法 15只新西兰白兔随机分为两组：1组（10只）,玻璃化冷冻兔卵巢组织子宫系膜内种植;2组（5只）,对照组。通过卵巢组织光镜、阴道脱落细胞学检查,观察种植后卵巢组织长期存活、卵泡生长发育及内分泌功能恢复及维持情况,观察存活的卵巢组织对促性腺激素的反应性,采集MⅡ期成熟卵进行卵泡浆内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection, ICSI）,进一步观察移植后发育成熟的卵母细胞的受精情况。结果 移植2个月和6个月后卵巢组织中各级卵泡所占的比例与正常卵巢组织相比差异无统计学意义﹙P＞0.05）;移植半年后对卵巢组织应用卵泡刺激素,与未用卵泡刺激素的卵巢组织相比,近成熟卵泡所占的比例明显增多﹙P＜0.05）;成熟卵母细胞ICSI受精后,能够得到正常的胚胎。结论 玻璃化冷冻兔卵巢组织自体子宫系膜内种植能够很好地恢复卵巢功能,其功能可维持较长时间,结合体外受精技术可以产生正常的胚胎。     

酒精保存加高压蒸气灭菌骨移植修复下颌骨缺损的实验研究

目的　探讨酒精保存加高压蒸气灭菌骨修复骨缺损的能力及其作为自体骨移植替代材料的合理性、可行性。方法　在 2 8只成年家兔右侧下颌骨下缘制备长 10mm、深 5mm的骨缺损模型 ,其中实验组 (16只 )植入酒精保存加高压蒸气灭菌骨 ,另外 12只不植入任何物质 ,作为对照组。分别于术后 2、4、8、12周取材、制片 ,在普通光镜下进行观察。结果　实验组术后 4周可见缺损区有大量新骨形成 ,骨质增生活跃 ;8周时移植骨大部分被新生骨替代 ;12周时骨缺损基本修复 ,而对照组无 1例达骨性连接。结论　经酒精保存加高压蒸气灭菌后的同种异体骨移植后有较好的生物相容性 ,可以引导骨生长 ,能作为自体骨移植的一种替代材料     

二步冷冻保存同种异体骨-ACL-骨移植后排斥反应的影响

目的 :探讨新鲜异体和二步冷冻保存同种异体骨 前交叉韧带 (ACL) 骨移植后排斥反应的差异。方法 :将 6 0只新西兰兔和 6 0只日本大耳兔分别随机分成自体骨 ACL 骨移植组、新鲜异体骨 ACL 骨移植组和二步冷冻保存同种异体骨 ACL 骨移植组 ,分别于术前及术后 1周、2周、3周、4周各采血 2ml测定血清中白细胞介素 2 (IL 2 )水平 ,术后 4周、12周切取移植关节 ,作苏木精 -伊红染色。结果 :光镜下检查显示 ,自体移植组和二步冷冻保存移植组均未见明显炎性细胞浸润 ,胶原排列规则 ,分化成熟。新鲜异体移植组有大量淋巴细胞浸润 ,其IL 2水平明显高于自体移植组和二步冷冻保存同种异体移植组且高于术前水平 (P <0 .0 1)。结论 :二步冷冻减轻了同种异体骨 ACL 骨移植后排斥反应 ,移植后其组织学改变同自体移植相似     

自体骨髓间充质干细胞移植促进交叉韧带重建后腱骨愈合的研究

目的探讨自体骨髓间充质干细胞对促进兔前交叉韧带重建后腱骨愈合的影响。方法采用骨髓穿刺法获取兔骨髓,体外分离、培养、扩增获得骨髓间充质干细胞。18只成年新西兰大白兔随机分为两组,每组9只,每只兔行双侧前交叉韧带重建手术,实验组将骨髓间充质干细胞和生物蛋白胶混合注入兔前交叉韧带重建模型的肌腱和骨道间隙内,对照组只注射生物蛋白胶,分别在2、4、8周各时间点每组处死3只兔子取材。组织学观察腱骨界面的愈合情况。结果对照组,术后8周在腱骨界面之间为瘢痕组织,腱-骨结合较紧密,有类Sharpey纤维成分。实验组,术后2周腱骨结合部位已经出现未成熟的类软骨细胞,术后8周为较成熟的软骨细胞,排列较整齐,从肌腱向骨道逐渐移行,类似于正常前交叉韧带的止点结构。结论前交叉韧带重建后,自体骨髓间充质干细胞移植于腱骨界面,形成类似正常前交叉韧带止点样结构,有利于促进腱骨愈合。