二苯乙烯苷对过氧化氢诱导内皮细胞凋亡的影响

目的探讨二苯乙烯苷对过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的影响及其可能机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,以过氧化氢作用内皮细胞建立细胞凋亡模型,再加入不同浓度的二苯乙烯苷作用24 h。采用MTT法检测细胞生长活力,Hoechst33258染色观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR、免疫印迹法检测Caspase-3的表达。结果与空白对照组相比,300μmol/L过氧化氢作用后细胞增殖明显受到抑制,Ho-echst33258染色可见大量凋亡细胞,流式细胞仪检测出明显的凋亡峰,Caspase-3的表达量显著增加;加入二苯乙烯苷作用后,与过氧化氢组比较,10μmol/L二苯乙烯苷能够显著提高细胞增殖率,抑制细胞凋亡,并且使Caspase-3的表达减少(P<0.05)。结论二苯乙烯苷能够抑制过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡,其作用机制与抑制Caspase-3表达有关。     

miR-155通过调控CaSR表达影响VSMC生长的机制研究

目的 miR-155可以通过干扰血管平滑肌细胞(VMSC)生物活性来抑制动脉粥样硬化斑块的形成,但具体机制不十分清楚.本研究主要观察miR-155对VSMC中钙敏感受体(CaSR)表达的影响,同时探讨CaSR在miR-155调控VSMC生物活性过程中的作用.方法 培养VSMC,将miR-155 mimic、Ad-CaS...     

抑制p22phox表达对高糖所致的内皮细胞活性氧生成和细胞凋亡的影响

目的 探讨p22phox基因沉默在高浓度葡萄糖诱导的内皮细胞活性氧生成和细胞凋亡中的作用.方法 将原代培养的人脐静脉内皮细胞分为对照组、高糖组、高糖+siRNA转染组和siRNA转染组,采用Western-blot检测p22phox蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞内活性氧水平及细胞凋亡率.结果 siRNA能有效抑制p22phox表达,高糖能诱导内皮细胞p22phox表达增加.高糖+siRNA转染组的细胞内活性氧水平和细胞凋亡率明显低于高糖组(P<0.05).结论 抑制p22phox表达能降低高糖所致的内皮细胞活性氧生成和细胞凋亡.     

Caspase-3参与白花败酱草皂苷诱导Hela细胞凋亡

目的研究白花败酱草总皂苷对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用及其机制。方法采用MTT法观察白花败酱草水提液和总皂苷对Hela细胞生长增殖的抑制作用;光镜和透射电镜观察总皂苷和水提物诱导Hela细胞发生凋亡的情况;观察总皂苷和水提物对Hela细胞半胱天冬酶(Caspase-3)活性的影响。结果白花败酱草总皂苷在体外剂量依赖性地抑制Hela细胞的增殖,诱导细胞的凋亡,并通过对凋亡关键酶Caspase-3的激活,实现其促进Hela细胞凋亡的作用,达到抑制肿瘤细胞增殖的目的。结论 Caspase-3参与白花败酱草皂苷诱导Hela细胞凋亡的作用。     

红花对AngⅡ诱导大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞凋亡和Caspase-3表达的影响

目的 观察中药红花对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠动脉平滑肌细胞增殖和Caspase-3表达的影响.方法 培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,将经3次传代生长良好的大鼠平滑肌细胞用无血清的DMEM/F-12培养基培养24h,随机分为模型组、红花组、DMSO对照组、空白对照组.模型组、红花组均加AngⅡ、DMSO,同时红花组加入红花,DMSO组仅加入DMSO,空白对照组加入等剂量培养基;采用原位末端标记技术检测凋亡细胞,免疫组化法检测Caspase-3表达.结果 模型组、红花组、DMSO对照组、空白对照组细胞凋亡率分别为4.44％ ±1.81％、19.94％ ±3.92％、3.96％±1.77％、0,红花组与其他三组比较,P均＜0.01,模型组、DMSO对照组与空白对照组比较,P均＜0.05.模型组、红花组、DMSO对照组、空白对照组Caspase-3表达的灰度值分别为134.29±16.86、147.87±12.43、136.20±15.21、130.19±14.32,四组间两两比较,P均＞0.05.结论 红花可以显著促进AngⅡ诱导的大鼠动脉平滑肌细胞凋亡作用,其促进凋亡的途径与Caspase-3蛋白表达无明显关联.     

干扰Sestrin2表达对ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

目的观察干扰Sestrin2表达对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的影响。方法用ox-LDL处理HUVEC复制内皮细胞损伤模型。Western blot检测不同浓度ox-LDL处理HUVEC不同时间Sestrin2的蛋白表达水平及转染Sestrin2 siRNA后Sestrin2的蛋白表达水平;流式细胞术检测干扰Sestrin2表达后对ox-LDL诱导的HUVEC凋亡率的影响;Western blot检测干扰Sestrin2表达后对ox-LDL诱导的HUVEC中Caspase-3表达的影响及ox-LDL对HUVEC中JNK通路的影响。结果不同浓度(20、50和100 mg/L)的ox-LDL处理HUVEC 24 h均能明显上调Sestrin2表达;50 mg/L ox-LDL处理HUVEC不同时间(24 h和48 h)均能明显上调Sestrin2表达,24 h达高峰;转染Sestrin2 siRNA能明显抑制Sestrin2的表达;ox-LDL能明显诱导HUVEC凋亡,转染Sestrin2 siRNA能明显促进由ox-LDL诱导的HUVEC凋亡;ox-LDL能明显诱导p-JNK和p-c-Jun的表达,且SP600125能明显抑制由ox-LDL诱导的Sestrin2表达。结论 ox-LDL通过JNK/c-Jun信号通路诱导Sestrin2表达,干扰Sestrin2表达能明显促进ox-LDL诱导的HUVEC凋亡。     

替罗非班通过上调miR-22保护ox-LDL诱导的脐静脉内皮细胞损伤

目的 探讨替罗非班对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的脐静脉内皮细胞(EA.hy926)损伤的影响和可能机制.方法 采用低、中、高剂量的替罗非班作用于ox-LDL诱导的EA.hy926细胞,采用细胞计数法(CCK-8)、流式细胞术分别检测细胞活力和凋亡.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-22表达水平...     

miR-155在肝细胞癌中的表达及对肝癌细胞增殖的影响

目的:检测微小RNA-155(miR-155)在肝癌组织中的表达并分析其对肝癌细胞增殖和细胞凋亡的影响.方法:采用TagMan MGB探针法荧光定量P C R分析42例原发性肝癌及对应的癌旁组织miR-155的表达;利用miR-155反义寡核苷酸(ASO-miR-155)降低肝癌细胞HepG2和SMMC7721中miR-155的表达;利用MTT比色法检测肝癌细胞增殖的变化,并通过流式细胞技术检测肝癌细胞早期凋亡情况.结果:42例肝癌及癌旁组织标本中,miR-155在52%(22/42)肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.05);利用脂质体将ASO-miR-155转染肝癌细胞HepG2和SMMC7721后,miR-155的表达明显降低,肝癌细胞HepG2和SMMC7721生长受到明显抑制;并且细胞的早期凋亡明显增加.结论:miR-155在肝癌组织中过表达,降低其表达能明显抑制肝癌细胞的生长并诱导细胞早期凋亡,miR-155有可能成为肝癌治疗的新靶点.     

蓝莓花色苷对人脐静脉内皮细胞凋亡调控基因Bax、Caspase-3表达的影响

目的探讨蓝莓花色苷对血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡及凋亡相关基因表达的影响。方法将HUVEC常规复苏传代,建立HUVEC凋亡模型,随机分成空白对照组、AngⅡ组、蓝莓花色苷组、AngⅡ+蓝莓花色苷组。采用MTT法检测细胞活性,通过Annexin V-FITC标记的流式细胞术检测细胞凋亡率,Western印迹蛋白免疫印迹法检测Bax、Caspase-3蛋白表达。结果与空白对照组相比,AngⅡ组Bax和Caspase-3蛋白表达水平显著增加(P0.01);与AngⅡ组相比,蓝莓花色苷组、AngⅡ+蓝莓花色苷组Bax和Caspase-3的蛋白表达水平明显降低(P0.01)。结论蓝莓花色苷对HUVEC凋亡有一定抑制作用。     

乔松素对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

目的探讨蜂胶乔松素对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响。方法用消化灌注法收集人脐静脉内皮细胞进行体外原代培养,于培养液中给予10 mg/L脂多糖处理以建立细胞凋亡模型,乔松素处理组于模型条件培养液中分别加入不同浓度的乔松素(50、100和200 mg/L)干预,共同孵育24 h。光镜下观察细胞形态,MTT法测定细胞存活率以观察细胞增殖变化,缺口末端标记技术TUNEL法检测细胞凋亡率,免疫细胞化学法检测信号转导系统核因子κB亚基p65核易位变化。结果模型组内皮细胞凋亡率明显高于阴性对照组,不同浓度乔松素组细胞凋亡率均低于模型组,同时细胞存活率增高(P0.01)。加入不同浓度乔松素能显著降低脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞核因子κB p65核易位活性(P0.01)。结论乔松素可通过抑制脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡而保护内皮细胞功能,其机制可能与抑制核因子κB p65活化有关。     

金黄色葡萄球菌α溶血素诱导脐静脉内皮细胞凋亡的研究

目的研究金黄色葡萄球菌（简称金葡菌）α溶血素诱导脐静脉内皮细胞的凋亡效应。方法用不同浓度金葡菌a溶血素感染脐静脉内皮细胞,2、4、8和12h后,用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果金葡菌α溶血素10、30、90和270ng／ml均可诱导脐静脉内皮细胞发生凋亡,以30ng／ml时诱导细胞凋亡能力最强,作用2h后细胞即发生凋亡,并随着诱导时间的延长,细胞凋亡率逐渐增加。结论金葡菌α溶血素可诱导脐静脉内皮细胞凋亡,并存在明显的时间、剂量效应关系,这可能是金葡菌L型垂直感染影响胎儿宫内发育的重要机理之一。     

FADD在非小细胞肺癌组织中的表达及与癌细胞凋亡的关系

目的 探讨FADD在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床生物学意义,并探讨其与NSCLC癌细胞凋亡的关系.方法 采用免疫组化SP法分别检测55例肺癌组织及23例癌旁正常肺组织中FADD的表达,TUNEL法检测NSCLC中癌细胞凋亡.结果 55例NSCLC组织中FADD表达的阳性率为83％,23例正常肺组织中FADD表达的阳性率为91％,差异无统计学意义(P＞0.05).NSCLC中FADD表达程度与肿瘤的分化程度呈正相关(rs =0.483,P=0.000),与肿瘤的TNM分期呈负相关(rs=-0.404,P=0.002).NSCLC中FADD阳性表达率与肿瘤的分化程度、TNM分期有关(均P＜0.01).与肿瘤的性别、年龄、是否吸烟、肿块大小、病理分型、淋巴结转移、胸腔积液无关.所选36例NSCLC中均检测到癌细胞的凋亡,FADD蛋白中等阳性、强阳性的NSCLC中癌细胞凋亡程度较高,而阴性表达的NSCLC中凋亡程度较低.结论 FADD表达异常在NSCLC的发生发展中可能起着重要作用,FADD表达水平与NSCLC细胞凋亡密切相关.     

眼镜蛇毒细胞毒素13诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及对Bcl-2家族基因表达的影响

目的 研究眼镜蛇毒细胞毒素13诱导人脐静脉内皮细胞凋亡作用及其对Bcl-2家族基因表达的影响.方法 CCK-8法测定细胞毒素13对人脐静脉内皮细胞增殖的影响;Annexin V-FITC/PI双染法观察细胞凋亡形态学改变;流式细胞术分析DNA倍体及细胞凋亡率;逆转录聚合酶链反应检测Bcl-2、Bax和Bcl-x_L基因表达的变化,Western blotting检测Bcl-2和Bax蛋白表达的变化.结果 细胞毒素13对人脐静脉内皮细胞增殖具有显著的抑制作用,并可诱导其发生凋亡,其抑制作用呈剂量依赖性.细胞毒素13可上调促凋亡蛋白Bax,而对抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-x_L的表达无明显影响.结论 细胞毒素13可能通过上调Bax表达诱导细胞凋亡,抑制人脐静脉内皮细胞增殖.     

miR-98通过调控PALM3对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞凋亡和炎症因子分泌的影响

目的 明确miR-98对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞凋亡和炎症因子分泌的影响和机制.方法 肺泡上皮细胞A549分成Control、SP(肺炎链球菌刺激)、miR-NC+SP(转染mimics control,肺炎链球菌刺激)、miR-98+SP组(转染miR-98 mimics,肺炎链球菌刺激),qRT-PCR方法检测...     

人脑胶质瘤中survivin、Caspase-3、Caspase-7蛋白的表达及意义

目的研究人脑胶质瘤组织中凋亡相关蛋白survivin、Caspase-3、Caspase-7的表达,探讨其与细胞凋亡、增殖的关系。方法采用免疫组化SP法检测survivin、Caspase-3、Caspas-7在48例人脑胶质瘤和8例正常脑组织中的表达情况。结果胶质瘤组织中的survivin、Caspase-3、Caspase-7的阳性率分别为56．2％、70．8％、68．8％,均高于正常脑组织（P〈0．01）;Caspase-3、Caspase-7之间呈正相关（P〈0．05）。结论survivin的表达水平能反应胶质瘤的恶性生物学行为;Caspase-3、Caspase-7在凋亡过程中可能存在协同作用。     

海洛因海绵状白质脑病胶质细胞凋亡及其Caspase-3蛋白的表达

目的 探讨海洛因海绵状白质脑病（HSLE）胶质细胞凋亡及其Caspase-3蛋白的表达.方法 4例HSLE脑尸检和1例正常对照脑尸检分别进行脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法（TUNEL）染色以及Caspase-3免疫组化染色.利用显微镜观察阳性细胞数的改变,分析小脑不同部位细胞凋亡数与Caspase-3蛋白表达阳性细胞之间的关系.结果 HSLE的小脑深层白质病变区存在TUNEL阳性细胞表达和Caspase-3蛋白表达,明显高于浅层白质和正常对照（P＜0.01）.结论 HSLE深层白质存在胶质细胞凋亡可能是HSLE的发病原因之一,Caspase-3蛋白表达与HSLE细胞凋亡的发生相关.     

高浓度低密度脂蛋白促进内皮细胞NADPH氧化酶4的表达和细胞凋亡

目的分析高浓度低密度脂蛋白(LDL)刺激人脐静脉内皮细胞(hUVEC)时细胞内活性氧(ROS)、NADPH氧化酶4(NOX-4)mRNA水平和凋亡的变化。方法免疫组织化学法检测hUVECⅧ因子相关抗原的表达;RT-PCR检测hUVEC中NOX-4的表达;流式细胞仪检测细胞内ROS生成量和细胞凋亡率,Hoechst染色分析细胞凋亡。结果高浓度LDL刺激hUVEC时,NOX-4mRNA表达上调,细胞内ROS生成增加,细胞凋亡增加。结论高浓度LDL上调hUVCE内NOX-4mRNA的表达并促进细胞内ROS生....     

鸦胆子油乳通过caspase-3途径诱导U937细胞凋亡

目的：研究鸦胆子油乳诱导白血病细胞(U937细胞)凋亡及凋亡过程中caspase-3的变化及其意义。方法：MTT法检测鸦胆子油乳对U937细胞增殖的抑制率；通过细胞形态、DNA片段化电泳、流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡；应用酶联反应法检测caspase-3活性。结果：在31．25～1000．00mg／L浓度下鸦胆子油乳抑制U937细胞的增殖，IC50值为214mg／L，并呈现剂量-时间-效应关系；500mg／L鸦胆子油乳处理U937细胞，出现典型的细胞凋亡形态特征和DNA梯形带。流式细胞术检测显示125、250、500mg／L鸦胆子油乳诱导U937细胞凋亡；在诱导细胞凋亡过程中Caspase-3活性明显增高，且随作用时间延长，活性增加。结论：鸦胆子油乳在体外能够诱导U937细胞凋亡，诱导细胞凋亡可能是鸦胆子油乳抗白血病作用的机制之一，caspase-3活化参与了鸦胆子油乳诱导U937细胞凋亡的调控。     

过表达miR-21对脂多糖诱导人牙髓干细胞炎症、凋亡和自噬的影响

目的 观察过表达miR-21对脂多糖(LPS)诱导的人牙髓干细胞(hDPSCs)炎症、凋亡和自噬的影响.方法 取生长良好的第3～4代hDPSCs,随机分为对照组、LPS组、LPS+miR-NC mimics组、LPS+miR-21 mimics组,LPS+miR-NC mimics组、LPS+miR-21 mimics...