系统性红斑狼疮患者的外周血淋巴细胞亚群结果分析

目的研究40例系统性红斑狼疮(SLE)患者不同状态的外周血总T淋巴细胞(CD3+)、T辅助淋巴细胞(CD3+/CD4+),T抑制淋巴细胞(CD3+/CD8+),B淋巴细胞(CD3-/CD19+),NK淋巴细胞(CD3-/CD16+CD56+)的差异并初步探讨其在SLE发病中的意义。方法根据SLE疾病活动积分(SLEDAI)将SLE患者分为活动组(24例)和非活动组(16例),流式细胞仪检测外周血CD3+/CD4+,CD3+/CD8+,CD3-/CD19+,CD3-/CD16+CD56-表达百分率,对其与SLE临床活动度、尿蛋白、补体和抗dsDNA抗体水平的相关性进行研究。结果活动组和非活动组SLE患者外周血总T细胞(CD3+)与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);活动组和非活动组SLE患者外周血T细胞(CD3+/CD4+、CD3+/CD8+)、B淋巴细胞(CD3-/CD19+)、NK淋巴细胞(CD3-/CD16+CD56-)表达百分率与健康对照组相比,T、B淋巴细胞表达的分率差异均有统计学意义(P=0.043,P=0.027);NK淋巴细胞(P=0.612)差异无统计学意义;活动组与非活动组的总T细胞,差异无统计学意义,而T辅助淋巴细胞(CD3+/CD4+)、B淋巴细胞(CD3-/CD19+)差异具有统计学意义,提示T辅助淋巴细胞(CD3+/CD4+)、T抑制淋巴细胞(CD3+/CD8+),与SLE活动度相关。T、B、NK细胞与SLE临床表现相关性分析显示,T辅助淋巴细胞(CD3+/CD4+)与SLEDAI,抗dsDNA抗体呈正相关(P=0.096);B细胞与C3呈负相关(P=0.048);NK细胞与SLEDAI和抗dsDNA抗体呈负相关(P=0.096)。结果显示T、B、NK细胞异常与SLE临床表现明显相关。结论 SLE患者的外周血总T细胞(CD3+)、T辅助淋巴细胞(CD3+/CD4+)、T抑制淋巴细胞(CD3+/CD8+)、B淋巴细胞(CD3-/CD19+)、NK淋巴细胞(CD3-/CD16+CD56+)可作为SLE诊断及评价活动性的指标。     

老年慢性阻塞性肺疾病患者T淋巴细胞免疫状况的研究

目的 研究老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的免疫功能及临床意义.方法 采用流式细胞术分别测定57例老年稳定期、63例老年加重期COPD患者和45例正常老年人的T淋巴细胞亚群及各亚群CD25,CD69的水平.结果 与正常对照组相比,COPD稳定期患者CD3+CD4+/CD3+CD8+比值降低(P<0.05),CD4+CD25+,CD8+CD25+T淋巴细胞增高(P<0.05),急性加重期患者CD4+T淋巴细胞、CD3+CD4+/CD3+CD8+比值显著降低(P<0.01),CD3+CD8+,CD8+CD69+T淋巴细胞增高(P<0.05),CD4+CD69+T淋巴细胞显著增高(P<0.01).急性加重期与稳定期比较,CD4+T淋巴细胞、CD3+CD4+/CD3+CD8+比值下降(P<0.05).结论 T淋巴细胞亚群和活化参数是观察老年COPD患者T淋巴细胞免疫功能的重要指标,T淋巴细胞可能参与COPD发病及病情发展.     

红细胞输注无效患者外周血T淋巴细胞亚群和调节性T细胞的变化

目的研究红细胞输注无效患者外周血T淋巴细胞亚群、调节性T细胞(Treg细胞)水平变化。方法采用流式细胞仪分别检测30例红细胞输注无效患者和30例红细胞输注有效患者输血前后外周血T淋巴细胞亚群(CD3~+,CD4~+,CD8~+,CD4~+/CD8~+、CD4~+CD25~+Treg)的水平。结果红细胞输注无效组输血后的CD3~+T细胞百分比、CD4~+T细胞百分比以及CD4~+/CD8~+比值较输血前升高(P0.05),而CD8~+T细胞百分比无改变(P0.05),CD4~+CD25~+Treg水平较输血前下降(P0.05);红细胞输注有效组输血前后外周血T淋巴细胞亚群(CD3~+,CD4~+,CD8~+,CD4~+/CD8~+、CD4~+CD25~+Treg)的水平没有变化(P0.05)。结论红细胞输注无效患者存在T淋巴细胞异常活化现象,调节性T细胞CD4~+CD25~+数量的减少可能是其活化的原因,进而导致患者红细胞输注无效。     

CD14~+/人白细胞DR抗原测定在原位肝移植术患者感染监测中的作用

目的 探讨原位肝移植术后CD14~+单核细胞人白细胞DR抗原(CD14~+/HLA-DR)表达率的变化及其在术后感染监测中的作用.方法 按照美国胸科医师协会/危重病医学会(ACCP/SCCM)的感染性休克定义,将63例肝移植术后患者分为非感染组(47例)、感染组(10例)、感染性休克组(6例);用流式细胞仪动态监测患者移植前后CD14~+/HLA-DR表达率,并进行受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析,评价其在感染监测中的价值.结果 感染组和感染性休克组术后CD14~+/HLA-DR表达率均显著低于非感染组(感染组;(29.6±7.2)%,感染性休克组:(16.3±10.5)%比(62.3±18.3)%,均P＜0.01],但两组间差异元统计学意义(P=0.128).CD14~+/HLA-DR表达率对感染预测的ROC曲线下面积为0.965,在最佳截断点(cut off)值为36.35%时敏感性和特异性分别为100.0%和93.6%,CD14~+/HLA-DR表达率对感染性休克预测的ROC曲线下面积为0.968,在最佳截断点值为31.97%时敏感性和特异性分别为100.0%和87.7%.3组患者移植前后不同时间点比较发现,感染发生时,感染组、感染性休克组CD14~+/HLA-DR表达率较非感染组移植后显著下降(P＜0.05和P＜0.01),在感染最重时两组CD14~+/HLA-DR表达率均降到最低值(感染组:(29.6±7.2)%,感染性休克组:(16.3±0.5)%,均P＜0.01].结论 对高危或可疑感染的肝移植术后患者,动态监测CD14~+/HLA-DR表达率可作为病情判断及预后的良好指标,CD14~+/HLA-DR≤36.35%可作为肝移植术后发生感染的预警值;CD14~+/HLA-DR≤31.97%可作为判断合并感染性休克的警戒指标.     

淋巴细胞亚群联合检测对脓毒症患者不良预后的评估价值

目的 探讨T、B和NK淋巴细胞亚群相关指标对脓毒症患者不良预后的预测价值.方法 应用前瞻性研究方法,选取宁夏人民医院急诊重症监护室(EICU)及ICU共101例脓毒症患者为对象,检测入院48 h内外周血T、B和NK淋巴细胞亚群相关指标水平,随访至出院,观察指标异常对死亡结局的危险度,评估各指标联合检测对死亡风险的预测价值.结果 脓毒性休克患者CD3、CD3 +/CD4+低于脓毒症组和严重脓毒症组,严重脓毒症和脓毒性休克患者CD3 +/CD8+,CD3-/CD19+,CD4 +/CD8+低于脓毒症组,CD (16+56)+高于脓毒症组(P＜0.05);死亡患者的单核细胞高于生存患者,CD3、CD3-/CD19+、CD3 +/CD4+、CD4 +/CD8+低于生存患者(P＜0.05); CD3-/CD19+、CD3 +/CD8、CD4 +/CD8+为脓毒症预后的保护因素,OR值分别0.235、0.006、0.108;淋巴细胞亚群联合预测因子、APACHEⅡ评分、SOFA评分对死亡风险预测效能的ROC曲线下面积分别为0.993、0.877、0.848;淋巴细胞亚群联合判别函数对病情程度的误判率为19.8％,对患者结局的误判率为4％.结论 脓毒症患者淋巴细胞亚群表达异常,淋巴细胞亚群的联合检测对脓毒症患者的病情及预后有指导价值.     

肾移植急性排斥反应时B7-2/CD28信号通路的表达

背景:以往动物研究表明,在器官移植急性排斥反应时共刺激分子的表达与急性排斥反应密切相关.目的:观察急性排斥反应时患者移植肾脏组织和外周血中B7-2/CD28信号通路的表达.方法:对53例同种异体肾移植患者于移植前1 d、移植后1,3,7,14,21,28 d分别取外周血以及在临床诊断急性排斥反应当天和抗排斥治疗1周后额外采血,用流式细胞仪检测共刺激分子B7-2/CD28在外周血淋巴细胞中的表达;同时,行经皮肾穿刺活检供肾修整结束时、移植后7 d、1个月、6个月、1年或以上获取活检肾脏组织,用免疫组织化学方法检测活检组织中B7-2/CD28的表达情况.结果与结论:移植后1,3 d内所有患者外周血中CD28+,CD4+/CD28+,CD8+/CD28+细胞比率均有显著下降(P < 0.05),一二周后恢复到术前水平;移植后7 d未发生急性排斥反应的患者肾脏组织B7-2阳性表达率显著上升(P < 0.05),1个月后下降至移植前水平(P > 0.05).移植后发生急性排斥反应的患者外周血CD28+,CD4+/CD28+,CD8+/CD28+细胞比率及肾脏组织B7-2阳性表达率明显上升(P < 0.05),经抗排斥治疗1周后均好转.结果证实,在肾移植后出现急性排斥反应时,肾脏组织以及外周血中共刺激分子B7-2/CD28的表达上调与急性排斥反应的发生密切相关.     

探讨Double/Triple Hit淋巴瘤的流式免疫表型特征在疾病诊断及生存结局相关性中的应用

目的：本研究目的是确立二次或三次打击淋巴瘤(Double/Triple- Hit lymphoma,D/THL)流式免疫表型特征,研究与B淋巴细胞白血病(B-LBL)在免疫表型上的差异,并探讨流式免疫表型特征与D/THL生存结局的相关性。方法 采用多色FCI分析法对40例D/THL患者和25 B-LBL患者的样本的免疫表型进行检测和评价,并将流式免疫表型结果与基因亚型以及总体生存率进行统计学对比分析。结果 90%(36 / 40)的D/THL病例CD10表达呈阳性,近一半病例(48%,19 / 40)缺乏表面轻链。45%(18 / 40)的病例CD45表达呈弱阳性, 40%(16 /40)CD19表达呈弱阳性, 43%(17 / 40)CD20表达呈弱阳性。28%(11 / 40)显示伴随CD19和CD20的弱表达,38%(15 / 40)的CD19和CD20表达呈差异化表达(variable expression)。在不同基因亚型之间,除Dim CD45和 BCL2阳性发生率达有差异外(BCL2+/MYC+组Dim CD45发生率明显低于BCL2+/BCL6+/MYC+组(p=0.03);BCL2+/MYC+组中bcl2阳性率为96%,而其它基因亚型组阳性率均为0%),其它表型发生率差异均无统计学意义。与B-LBL相比,B-LBL的CD45和CD20低表达发生率明显高于D / THL(c2 = 20.78、20.83,);CD19和CD20同时弱表达在D / THL发生率稍多(28%D/ THL vs. 10% B-LBL),但差异无统计学意义(c2 = 2.31)。B-LBL的TdT阳性发生率明显高于D / THL(cc2= 30.74,)。对30例已经死亡患者进行了生存分析显示,不同基因型总体生存率无显著性差异(BCL2+ MYC+对BCL6+/MYC+,P=0.08;BCL2+MYC+对BCL2+/BCL6+/MYC+,P=0.13;BCL6+/MYC+对BCL2+/BCL6+/MYC+,P=1.0);Dim CD45和Bcl2阳性预示着与较低的总体生存率(P = 0.01,0.015)相关。 结论D / THL流式免疫表型特征研究有助于D / THL鉴别诊断。对流式免疫表型与疾病结局的生存分析结果,将有利于临床对D／THL整体预后进行危险分层管理,以便能针对特定病人及时采取个体化治疗。     

流式免疫表型特征在判断二次或三次打击淋巴瘤生存结局中的临床价值

目的确立二次或三次打击淋巴瘤(double/triple-hit lymphoma,D/THL)流式细胞免疫表型(flow cytometric immunophenotyping,FCI)特征,分析其与B淋巴细胞白血病(B-LBL)在免疫表型上的差异,并探讨流式免疫表型特征与D/THL生存结局的相关性。方法用多色FCI分析法对40例D/THL患者和25例B-LBL患者的骨髓和外科活检样本免疫表型进行检测和评价,并将流式免疫表型结果与基因亚型以及总体生存率进行统计学分析。结果 90%(36/40)的D/THL病例CD10表达呈阳性,48%(19/40)的病例缺乏表面轻链,45%(18/40)的病例CD45表达呈弱阳性,40%(16/40)CD19表达呈弱阳性,43%(17/40)CD20表达呈弱阳性,28%(11/40)伴随CD19和CD20的弱表达,38%(15/40)的CD19和CD20表达呈差异化表达(variable expression)。Bcl2~+/Myc~+、Bcl6~+/Myc~+和Bcl2~+/Bcl6~+/Myc~+3种基因亚型D/THL之间,Bcl2~+/Myc~+组CD45弱表达和CD20差异表达的发生率明显低于Bcl2~+/Bcl6~+/Myc~+组(P=0.03,0.02);Bcl2~+/Myc~+组中Bcl2阳性率为96%,其他基因亚型组阳性率均为0,差异有统计学意义(P=0);其他流式免疫表型特征发生率差异均无统计学意义。B-LBL的CD45和CD20弱表达发生率明显高于D/THL(χ~2=20.78、20.83,P0.01);D/THL病例CD19和CD20同时弱表达发生率(28%)稍多于B-LBL病例(12%),但差异无统计学意义(χ~2=2.19,P0.05);B-LBL的Td T阳性发生率明显高于D/THL(χ~2=30.74,P0.01)。对30例已经死亡患者进行生存分析显示,不同基因型总体生存率差异无统计学意义(Bcl2~+/Myc~+对Bcl6~+/Myc~+,P=0.08;Bcl2~+/Myc~+对Bcl2~+/Bcl6~+/Myc~+,P=0.13;Bcl6~+/Myc~+对Bcl2~+/Bcl6~+/Myc~+,P=1.0);CD45弱表达和Bcl2阳性预示着较低的总体生存率(χ~2=11.2、10.4,P=0.01、0.015)。结论 D/THL与B-LBL都可以出现CD45和CD20弱表达及Td T阳性,但B-LBL的生存率明显高于D/THL。D/THL患者的CD45弱表达和Bcl2阳性预示着较低的总体生存率。     

复发性阿弗他溃疡患者外周血淋巴细胞亚群指标、免疫球蛋白及补体水平的变化及意义

目的 探讨免疫因素与复发性阿弗他溃疡(RAU)发病的关系.方法 选取2019年10月至2020年9月在宁夏医科大学总医院就诊的RAU患者123例作为RAU组.另外,选取同期体检的健康者120例作为对照组.采用流式细胞术检测淋巴细胞亚群指标CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+百分比,CD4+/CD8+,CD3-CD16+CD56+、CD3-CD19+百分比;采用免疫散射比浊法检测体液免疫相关指标免疫球蛋白IgA、IgG、IgM及补体C3、C4水平.采用SPSS20.0统计软件对上述指标的检测结果进行组间比较.结果 RAU组与对照组外周血淋巴细胞CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+百分比,CD4+/CD8+,CD3-CD16+CD56+、CD3-CD19+百分比比较,差异均无统计学意义(P>0.05);RAU组免疫球蛋白IgA、IgG和补体C3、C4水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 RAU患者的细胞免疫与体液免疫功能均存在异常,免疫因素可能参与了RAU的发生和发展过程.     

外周血CD4+CD25high调节性T细胞比例变化在肾移植受者移植后免疫监测中的应用术

背景:相关实验表明调节性T细胞在移植物免疫耐受中起重要作用.目的:观察外周血CD4+CD25high调节性T细胞比例变化与肾移植受者移植后免疫变化的相关性.设计、时间及地点:回顾性病例分析,于2007-09/2008-07在广东省第二人民医院器官移植中心及其实验室完成.参试者:52例病情稳定的维持性血液透析患者行同种异体肾移植治疗.方法:肾移植后患者均服用三联免疫抑制剂.所有患者移植后发生急性移植肾排斥反应以及感染均按照相应指南诊断及治疗.分别于移植前和移植后1,2,4,8,12周以及发生排斥反应和感染时抽血检测外周血CD4+CD25high调节性T细胞.按其免疫力恢复情况分为正常组26例,排斥反应组17例,感染组9例.主要观察指标:用流式细胞仪检测外周血CD4+CD25high调节性T细胞的比例,所得结果进行相关分析.结果:与正常组比较:排斥反应组CD4+CD25highFoxP3/CD4+的比值降低(P<0.05),而感染组显著增高(P<0.01).与感染组比较:排斥反应组CD4+CD25highFoxP3/CD4+的比值显著降低(P<0.01).结论:肾移植后受者外周血CD4+CD25high调节性T细胞比例与受者免疫状态密切相关.CD4+CD25high调节性T细胞比例的变化可以反应机体的免疫状态的变化,其升高或降低可以作为预测肾移植受者移植后发生感染或排斥反应的指标之一.     

胃肠道癌患者外周血CD8+T细胞功能相关标志物的检测及意义

目的探讨胃肠道癌患者外周血T细胞亚群和CD8+T细胞CD28共刺激分子等功能相关性标志物的表达及意义.方法用三色或四色荧光标记流式细胞术检测27例胃肠道癌患者及16例正常对照的外周血淋巴细胞.结果与正常对照组相比,肿瘤患者外周血T细胞标志如CD3+、CD4+、CD8+表达水平及CD4+/CD8+比值差异无显著性;CD8+CD28-T细胞显著增加(P<0.01),而CD8+CD28+T细胞显著降低(P<0.05).表达HLA-DR的活化CD8+T细胞显著增加(P<0.01),分泌IFN-γ的CD8+T细胞(Tc1)明显增多(P<0.01),而分泌IL-4的CD8+T细胞(Tc2)则正常人和肿瘤患者均很低.患者CD8+T细胞CD28及IFN-γ的表达变化与肿瘤分期无关.结论胃肠道癌患者中CD8+T细胞存在系统性活化的表现,其机制可能与CD28/B7以外的信号传递有关.胃肠道癌患者体内Tc1细胞的增加与肿瘤的分期缺乏明确关系.     

生脉注射液对急性肺损伤小鼠中性粒细胞凋亡及CD4+/CD8+影响的研究

目的 通过生脉注射液对内毒素(LPS)致急性肺损伤小鼠的预防性治疗,观察其血液中CD4+/CD8+含量变化及中性粒细胞凋亡情况,探讨生脉注射液在保护急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征发病中的作用机制.方法 雄性C57小鼠38只,体重22～27 g,随机分为正常对照组(对照组)10只;LPS损伤模型组(模型组)10只;生脉注射液预防组(预防组)18只,同时分低、中、高剂量组各6只,分别接受生脉注射液0.05ml/只、0.2 ml/只、0.35ml/只.应用流式细胞法检测各组小鼠的CD4+/CD8+分布及中性粒细胞凋亡的变化.结果 中性粒细胞凋亡:模型组和生脉组中性粒细胞凋亡明显高于对照组(P<0.01),生脉组和模型组间差异不大(P>0.05);CD4+百分比:模型组及生脉组CD4+百分比明显高于对照组(P<0.01),生脉组与模型组及治疗组之间CD4+百分比(P>0.05),生脉组与模型组的数据基本持平;CD8+百分比:模型组CD8+百分比明显高于对照组(P<0.01),生脉组CD8+百分比与对照组接近(P>0.05),生脉组CD8+百分比低于模型组(P<0.05).结论 生脉注射液在急性肺损伤中对中性粒细胞凋亡的抑制并不显著,其对CD8+表达的抑制,可能对急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征产生一定的保护作用.     

CD24在初诊结直肠癌患者外周血CD3~+细胞上表达的意义

目的探讨结直肠癌外周血CD3+细胞(荧光强度>104)中CD24的表达及其临床意义。方法 50例初诊结直肠癌患者(观察组)和50名健康体检者(对照组),均应用流式细胞术直接免疫荧光法检测外周血CD3+细胞上CD24的表达水平,比较2组CD3+细胞上CD24荧光强度。结果观察组外周血CD3+细胞上CD24荧光强度为373.02±27.92,对照组为293.84±9.54,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论结直肠癌患者外周血中CD3+细胞上CD24荧光强度可作为外周血中筛选结直肠癌的一个新的分子标志物。     

强直性脊柱炎患者外周血T细胞亚群表达的临床意义

目的 探讨强直性脊柱炎(AS)患者外周血中T细胞亚群分布以及在AS细胞免疫中所发挥的作用.方法 采用流式细胞技术检测30例未经治疗的活动期AS患者及30例健康对照人群外周血中的CD4+、CD8+T细胞亚群,并探讨其与Bath AS功能指数(BASFI)、Bath AS测量指数(BASMI)、病程、年龄及血沉(ESR)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)的相关性.结果 AS患者CD4+水平和CD4+/CD8+比值分别为(29.24±9.22)%和0.96±0.49,较正常对照组的(40.09±6.86)%和1.70±0.67显著降低(P均＜0.01);CD8+水平为(32.91±6.86)%,较正常对照组的(25.60±5.97)%明显增高(P＜0.01);AS患者外周血CD4+水平与BASMI呈负相关(r=-0.479,P＜0.01).CD8+与血沉、hs-CRP、BASFI、BASMI呈正相关(r值分别为0.373、0.430、0.462、0.530,P均＜0.05).CD4+/CD8+比值与hs-CRP、BASFI、BASMI呈负相关(r值分别为-0.465、-0.473、-0.426,P均＜0.05).CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值与AS患者的年龄、病程均无明显相关性(P均＞0.05).结论 AS患者外周血存在T淋巴细胞亚群紊乱,其水平与AS的严重程度、活动性有关,提示T细胞亚群失衡在AS的发生发展中具有重要意义.     

慢性乙肝患者调节性T细胞的检测及临床价值

目的 通过检测慢性乙型肝炎患者外周血中CD4+CD25nt/hiCD127lo调节性T细胞比例以及替比夫定治疗前后调节性T细胞的变化,探讨慢性乙型肝炎的病理机制.方法 荧光标记的单克隆抗体染色外周血淋巴细胞,利用流式细胞仪检测CD4+CD25nt/hiCD127lo调节性T细胞比例.结果 慢性乙肝患者外周血CD4+CD25nt/hiCD127loTreg细胞占CD4+T细胞的比例为(7.5%±1.7%),较正常对照组显著增多(6.0%±1.4%,P<0.01),替比夫定治疗后则明显下降(6.5%±1.9%,P<0.01).结论 CD4+CD25nt/hiCD127loTreg细胞的增多与乙型肝炎的慢性化有关,替比夫定治疗可有效改善患者的免疫状态.     

再生障碍性贫血中T-bet的表达及其对CD4+T细胞极化的调控

再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)是一种以造血组织为靶细胞的自身免疫性疾病,其中T淋巴细胞介导的细胞免疫异常为AA发病机制中的关健环节,以Thl淋巴细胞数量增多和功能充进为主要特征.近年来研究认为,T-bet是Th1细胞的特异性转录因子,是CD4+ T淋巴细胞向Th1极化的关键因素,在AA患者中T-bet高表达,是AA发病机制中的重要环节.本文就T-bet及其与AA的关系,诸如AA患者中T-bet的表达,T-bet对CD4+T细胞极化的调控进行综述.     

支气管哮喘患儿外周血淋巴细胞CD19~+CD23~+和CD4~+CD25~+的表达及意义

目的探讨支气管哮喘患儿外周血淋巴细胞CD19＋CD23＋和CD4＋CD25＋的表达及意义。方法采用流式细胞分析技术及免疫化学发光法分别检测34例哮喘发作期（哮喘发作组）和32例哮喘缓解期（哮喘缓解组）外周血CD19＋CD23＋表达率、CD4＋CD25＋表达率和血清总IgE水平,并与25例体检儿童（对照组）进行比较。结果哮喘发作组外周血CD19＋CD23＋表达率为（19.31&#177;9．08）％分别高于哮喘缓解组（8．63&#177;3．54）％和对照组;哮喘发作组CD4＋CD25＋表达率为（2．79&#177;1．69）％和哮喘缓解组为（3.36&#177;1．17）％均低于对照组;哮喘发作组IgE水平为（177．01&#177;90．38）IU/ml和哮喘缓解组为（160．76&#177;77．54）IU／ml均高于对照组．三组的差异均有统计学意义（F分别=36．62、24．67、24．35,P均〈0．05）。CD19＋CD23＋表达率与IgE呈正相关,CD4＋CD25＋表达率和IgE呈明显负相关,CD19＋CD23＋表达率和CD4＋CD25＋表达率亦呈明显负相关,差异均有统计学意义（r分别：0．22、-0．41、-0．34,P均〈0．05）。结论哮喘急性发作时外周血CD19＋CD23＋和CD4＋CD25＋改变明显。     

Flt3配体胞外域的原核表达纯化及对脐血CD34+细胞的扩增作用

背景:Fms 样酪氨酸激酶3配体(Flt3配体)是一种重要的生长因子,通过激活特定的酪氨酸激酶受体,调控造血细胞的生长、生存和/或分化,具有促进造血干细胞体外扩增的应用潜力.目的:构建pET32a(+)-hFLext原核表达载体,表达、纯化hFLext蛋白,观察其对脐血CD34+细胞的扩增作用.方法:克隆hFLext,构建pET32a(+)-hFLext重组表达载体.转化大肠杆菌 BL21,IPTG诱导蛋白表达,镍珠亲合层析纯化蛋白.磁珠分选脐血CD34+细胞,单独加入hFLext或联合干细胞因子、血小板生成素孵育1周,观察体外扩增作用.结果与结论:成功克隆hFLext,并构建了pET32a(+)-hFLext重组表达载体.在大肠杆菌BL21成功表达Trx-hFLext融合蛋白,经8 mol/L尿素变性包涵体蛋白,逐步透析复性,镍珠亲合层析纯化蛋白,成功获得高纯度的Trx-hFLext融合蛋白.Trx-hFLext融合蛋白不仅具有维持及轻度刺激CD34+细胞体外扩增的作用,并且与干细胞因子及血小板生成素具有协同作用,为造血干/祖细胞体外扩增研究奠定了基础.     

Successful collection and transplantation of peripheral blood stem cells in cancer patients using large-volume leukaphereses

It was the aim of our study to determine the collection efficiency and yield of CD34+ cells in 88 cancer patients (pts, 44 males/44 females) who underwent 154 large-volume leukaphereses (LV-LPs). The diagnoses were as follows: 18 patients had Non-Hodgkin's lymphoma, 9 Hodgkin's disease, 24 multiple myeloma, 6 acute leukemia, 27 breast cancer, and 4 patients had solid tumors of different types. During the course of LV-LPs, 20 liters (l) of blood were processed at a median flow-rate of 85 ml/min (CS 3000 Baxter) and 130 ml/min (COBE Spectra), respectively. Peripheral blood stem cells (PBSC) were collected following granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF)-supported cytotoxic chemotherapy. A 31% and 21% mean decrease in the platelet and white blood count was noted at the end of the LV-LPs when compared with the pre-leukapheresis values. The aphereses were well tolerated without adverse effects. The level of circulating CD34+ cells was closely related to the number of CD34+ cells contained in the respective leukapheresis product (R = 0.89, P < 0.001). Compared with 270 patients who underwent 838 regular 101 LPs, the yield of CD34+ cells/kg was almost two-fold greater (4.84 ± 0.63 × 10⁶ [Mean ± SEM] vs 2.60 ± 0.16 × 10⁶, P < 0.001). The antigenic profile of CD34+ cells was assessed in 54 separate products collected on the occasion of 27 LV-LPs following the processing of 101 and 201, respectively. The intra-individual comparison included differentiation as well as lineage-associated markers (CD38, Thy-1, c-kit, CD33, CD45RA). No difference in the subset composition was observed between the first and second product, arguing against a preferential release of particular CD34+ cell subsets during the procedure. As shown by molecular biological or immunocytochemical examination, the likelihood of harvesting malignant cells using large-volume aphereses was not increased in comparison with regular leukaphereses. Single harvests of ≥2.5 × 10⁶ CD34+ cells/kg could be obtained in 74% of the patients, compared with 52% in case of regular LPs. As the majority of patients were autografted with more than 2.5 × 10⁶ CD34+ cells/kg following high-dose therapy, hematological recovery in general was rapid and not related to the type of apheresis product used. Considering patient comfort and savings in resource utilization, large-volume leukaphereses have become the standard procedure for PBSC collection in our center. © 1996 Wiley-Liss, Inc.     

广州地区人类免疫缺陷病毒感染者的免疫状态分析

目的：探讨广州地区各期的HIV感染者的CD4^ 、CD8^ 淋巴细胞数及CD4^ ／CD8^ 比值及其变化规律。方法：使用流式细胞仪及三色荧光标记的单克隆抗体试剂对55例未经过高效抗逆转录病毒治疗(HARRT)的HIV感染者的抗凝血浆进行CD3^ 、CD4^ 、CD8^ 淋巴细胞的绝对值计数，根据CD4^ 细胞计数进行分组(≥500个／mm^3为Ⅰ组，共7例499～201个／mm^3为Ⅱ组，共15例20051个／mm^3为Ⅲ组，共9例≤50个／mm^3为Ⅳ组，共24例)。另设肝炎对照组(慢性乙型肝炎患者19例)及健康对照组(正常健康人64例)。结果：(1)CD4细胞数比较：Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组与两个对照组之间比较均有显著差异．Ⅰ组与两个对照组之间比较均无显著差异。(2)CD8^ 细胞数比较：Ⅰ、Ⅱ组与健康对照组、Ⅳ组与两个对照组之间比较均有显著差异，Ⅲ组与两个对照组之间比较均无显著差异。(3)CD4^ ／CD8^ 比值比较：Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组与两个对照组、Ⅰ组与健康对照组之间比较均有显著差异，I组与肝炎对照组之间比较无显著差异。(4)肝炎对照组与健康对照组之间比较．CD4^ 、CD8^ 细胞数、CD4^ ／CD8^ 比值均无显著差异。结论：随着疾病进展，HIV感染者的CD4^ 细胞数及CD4^ ／CD8^ 比值进行性减少，CD8^ 细胞数在早期明显增加，晚期明显减少，CD8^ 细胞数及CD4^ ／CD8^ 比值的显著改变可能比CD4细胞数更早出现。