胆汁中结合胆汁酸的薄层层析分离与定量测定

本文介绍用薄层层析法测定胆汁中结合型胆汁酸。溶剂系统为氯仿:无水乙醇:乙酸乙酯:冰醋酸:水(5∶7∶10∶2∶1v/v)。分离后各结合型胆汁酸斑点用磷钼酸显色剂显色,然后用分光光度计进行比色测定。     

胆汁中游离胆汁酸的薄层层析分离与定量测定

本文介绍用薄层层析法测定胆汁中游离型胆汁酸。溶剂系统为异辛烷:异丙醚∶冰醋酸∶正丁醇∶水(12∶5∶5∶3∶1v/v)。分离后各游离型胆汁酸斑点用磷钼酸显色剂显色,然后用分光光度计进行比色测定。     

心肌细胞培养方法和活细胞噻唑兰法测定

目的:介绍心肌细胞培养方法和研究比色分析法测定活心肌细胞.方法:接种不同数量细胞培养后行噻唑兰(MTT)比色分析;正常培养、含不同浓度维拉帕米培养的细胞行MTT代谢比色分析,并测乳酸脱氢酶(LDH)活性.结果:比色值与接种细胞数量、细胞释放的LDH活性呈高度相关(r=0.996、-0.986,P<0.01).结论:MTT比色分析法可用于测定活心肌细胞.     

胆固醇与氯化物之微量测定法

恩格尔哈特Знгедьгард氏及斯米尔诺娃Смир-(?)ова氏法的优点是血清用量较少(用0.1毫升,假如做平行测定时用0.2毫升),因此在必要时可从手指采血,还可以用0.1毫升全血来测定(但全血与血清之胆固醇含量颇不一致)。原理:胆固醇溶液在气仿溶液中与醋酸酐及硫酸作用而呈绿色,然後与同样处理之已知标准液比色之。     

血清中胆固醇的示波极谱法测定及电极反应机制

目的 :研究血清中胆固醇示波极谱的直接测定方法及电极反应机制。方法 :在磷酸缓冲溶液中 ,在JP 2示波极谱仪上于 - 0 .9～ 1.4V范围内扫描。在上述条件下 ,用多种电化学方法 (极谱法 ,循环伏安法等 )研究了胆固醇的电极反应动力学参数。结果 :胆固醇在滴汞电极上于 - 1.0 7V和 - 1.15V产生 2灵敏极谱波 ,后者的灵敏度高于前者 ,且其峰电流于胆固醇浓度在 2 .0× 10 -6～ 7.1× 10 -4mol/L范围内呈良好的线性关系 ,检测限达 1.0×10 -6mol/L。检测回收率平均值为 10 1.6 %。电子转移数为 2 ,电极反应速率常数为 0 .6 82。结论 :示波极谱法可用于血清中微量胆固醇的直接测定 ,结果满意。该法具有快速、简便、灵敏度高、干扰少等优点     

酶法检测血清总胆固醇

酶法检测血清总胆固醇是目前公认为最适于作血清总胆固醇测定的常规方法[1],在各大中小医院实验室测定TC大多采用酶法,既可于作终点法手工操作,分光光度计比色测定,也可于半自动、全自动生化分析仪检测.它具有试剂单一、试验稳定、使用方便等优点.现报告如下.     

3,5-二硝基水杨酸比色法定糖的条件优化

目的优化3,5-二硝基水杨酸比色法定糖条件.方法单因素试验法.结果优化后的参数条件为波长495nm,VDA/V 总为1.5/3.5,反应温度90℃,反应时间5～7min.结论改良后的3,5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖的结果更高效、准确和稳定.     

通辽地区正常人血脂分析(摘要)

于1979年检查了当地健康大学生、1978—1979年检查了当地居民和职工共590人。检查方法:胆固醇用硫磷法,胆固醇标准液为100微克/毫升(克分子消光系数为582);甘油三脂用乙酰丙酮法,标准物为橄榄油80微克/毫升;β-脂蛋白用国产肝素-锰比浊法,肝素系数为2066。使用72型分光光度计比色,受检者均在早晨空腹抽血受检。调查结果列表于下:     

原子吸收分光光度法测定水中硝酸盐氮

水中硝酸盐氮测定一般采用百里酚分光光度法、紫外分光光度法,条件严格。本文用原子吸收分光光度计和自行设计简易架子,在不加任何仪器情况下,进行水中硝酸盐氮测定,操作简便、快速、结果准确[1]。1试验部分1.1仪器与试剂ASS9442型原子吸收分光光度计(北京苏晖分析仪器厂)镉、镍空心阴极灯;比色皿1cm硝酸盐氮标准溶液10ug·ml-11.2仪器测定条件波长228.8nm,镉空心阴极灯,灯电流12mv,光谱通带宽度0.08nm,负高压-700V。1.3分析方法直接取水样25ml于比色管中,加盐酸0.5ml,混匀。将自制比色架固定在燃烧器的狭缝中间位置,再将比色皿固定在比色…     

高胆红素血症对酶法测定HDL-C结果影响探讨

HDL-C(高密度脂蛋白-胆固醇)的测定,近几年来国外国内纷纷改用酶试剂,这种手法的优点是速度快、操作简单,但在检验中发现高胆红素血症影响酶法测定的结果。SB(胆红素)大多为肝胆疾病,临床上患者 HDL-C 常低于正常人,但酶法比色吸光度都偏高,其原因主要是由于胆色素的干扰,因此不能为临床提供可靠有价值的实验数据,为此我们做     

血清胆红素与冠心病的关系

目的探讨血清总胆红素与冠心病的关系。方法对120例冠心病患者与120例健康者作对照,用改良J-G法检测血清总胆红素;用胆固醇氧化酶法(CHOD-PAP)检测总胆固醇(TC);用磷酸甘油氧化酶法(GPO-PAP)检测甘油三酯(TG);用直接匀相测定法检测高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),进行两组比较。结果冠心病组的总胆红素明显低于对照组(P<0.05)。结论血清胆红素的降低,可导致冠心病的发生。     

胆汁及胆囊黏膜中骨桥蛋白、瘦素、内脂素 及脂联素的表达及意义

目的 通过检测胆固醇结石患者胆汁成分和胆囊黏膜基因的表达以探索胆固醇结石的成因。 方法 采用酶联免疫吸附总试验、氧化酶法和咖啡因法检测胆固醇结石患者胆汁中胆固醇、瘦素、内脂素、 脂联素、磷脂、总胆汁酸、胆固醇饱和指数（CSI）水平;免疫组织化学、Western blotting 检测胆囊黏膜组 织中骨桥蛋白（OPN）的表达。结果 观察组患者胆汁CSI、胆固醇、胆固醇百分比、总脂、瘦素及内脂素 浓度较对照组升高（P <0.05）,总胆汁酸、磷脂和脂联素较对照组下降（P <0.05）;观察组胆囊黏膜中OPN 的平均光密度值和蛋白相对表达量较对照组高（P <0.05）。结论 OPN、内脂素、脂联素可能是胆固醇结石 形成的共同因素。     

胆固醇结石症患者与正常人胆汁骨桥蛋白抑成核活性的比较

目的  比较胆固醇结石症患者与正常人胆汁骨桥蛋白（OPN）抑成核活性及浓度的差异。方法  利用超速离心法结合凝胶电泳从胆固醇结石症患者及正常人胆汁中分离、纯化OPN蛋白。通过HOLAN法测定两组OPN的成核时间及成核活性。通过ELISA法检测胆固醇结石症患者与正常人胆汁中OPN浓度差异。结果  胆固醇结石症患者胆汁OPN蛋白较正常人具有较短的成核时间[（17.7±1.07）d vs （20.4±1.90）d],较弱地抑制胆固醇结晶成核活性;且胆固醇结石症患者胆汁OPN蛋白浓度低于正常人胆汁OPN蛋白浓度[（69.60±5.41）ng/ml vs （82.08±5.63）ng/ml],差异均有统计学意义（P <0.05）。结论  与正常人比较,胆固醇结石症患者胆汁OPN蛋白抑制胆固醇成核活性较弱、浓度较低。

     

Use of amphotericin B-cells to detect inhibitors of cellular cholesterol biosynthesis

A new method for detecting inhibitors of cellular cholesterol biosynthesis is reported. It was established according to the principle that amphotericin B binds sterols in the membranes of animal cells to form a complex which kills the cells. The method was simple, reliable and easy to handle. Moreover, the cost was low. Using this method, the authors had screened twenty Chinese herbs and found that Salvia miltiorrhiza and its extracts inhibit cellular cholesterol biosynthesis efficiently.     

Testing cholesterol accuracy. Performance of several common laboratory instruments

The national emphasis on assessing coronary risk by cholesterol testing mandates that analytical determinations be as accurate and precise as is medically necessary. One goal of the National Cholesterol Education Program is to improve the quality of laboratory tests. Currently, 5% limits of imprecision and 5% of bias vs the nationally accepted Abell-Kendall reference method is recommended, with a goal of reducing these limits to 3% by 1992. Clinicians must be aware of how the cholesterol values are obtained, and especially whether the laboratory's method meets the performance goals. We assayed patients' serum samples for cholesterol using several commercially available, routinely used enzymatic methods and by the Abell-Kendall reference method. Precision of these methods was also assessed using serum-based controls. All instruments were operated precisely according to the manufacturers' instructions. Performance was objectively judged based on the National Cholesterol Education Program goals and on medically allowable total error. In all cases, the DuPont aca, the Kodak Ektachem, the Hitachi 737, and the Cobas FARA determined cholesterol levels acceptably. The precision and accuracy goals of 3% are achievable by these methods.     

胃癌患者血浆胆固醇、LDL与胃癌组织病理分型的相关性研究

目的：测定胃癌患者术前血浆胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）的含量,探讨血浆TC、LDL与胃癌不同病理分型之间的相关性。方法：选择胃癌患者143例,根据术后组织病理分型将患者分组：高分化组包括乳头状腺癌16例和管状高分化腺癌43例;中分化组包括管状中分化腺癌39例;低分化组包括低分化腺癌20例、粘液腺癌14例和印戒细胞癌11例。另选胃溃疡患者和正常人各30例作为对照。所有被选中者均取清晨空腹静脉血,用酶法测定血浆TC水平,用沉淀法测定血浆LDL水平。结果：各组胃癌患者的检测值均较正常对照组和胃溃疡对照组明显降低（P＜0.05）,两个对照组之间差异无统计学意义(P＞0.05）。不同分化程度的胃癌患者血浆TC、LDL差异有统计学意义（P＜0.05）。40例胃癌患者术后血浆TC、LDL含量明显高于术前,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：胃癌患者血浆TC、LDL水平与胃癌组织病理分化程度相关,癌组织分化越差,血浆TC、LDL水平越低。血浆TC、LDL水平可作为判断进展期胃癌患者病情变化、治疗效果的有用的指标。     

动脉粥样硬化性脑梗死患者血脂分析

目的探讨血脂异常血症与动脉粥样硬化性脑梗死的关系。方法指标TCH、TG采用酶法检测，HDL—C、LDL—C采用磷钨酸-镁沉淀法检测。结果患病组与对照组血脂四项检测结果比较差异有显著性（P〈0．01）。结论血脂异常与动脉粥样硬化性脑梗死的发生有密切的关联，是动脉粥样硬化性病变形成的必要因素，注意脂类的合理摄入是预防和治疗动脉粥样硬化性脑梗死的重要方面。     

心肌梗死和癌症患者的血脂水平对比研究

目的探讨急性心肌梗死与癌症病人血脂水平的差异及与年龄的关系。方法采用回顾性方法对180例心肌梗死病人和102例癌症病人的血脂水平进行对比分析。结果不论老年还是中年心肌梗死与癌症病人的血浆总胆固醇水平（TC）无明显差别；高密度脂蛋白胆固醇（HDL-CH）水平在中年的急性心机梗塞组最低；低密度脂蛋白胆固醇（LDL-CH）水平在老年和中年均表现为癌症组高于急性心肌梗死组；而血浆甘油三酯（TG）水平则表现为老年低于中年，癌症低于心肌梗死的趋势。结论血浆胆固醇水平与癌症之间无肯定关系，对老年人控制过高的胆固醇水平以减少心血管病的发病率是有必要的；低密度脂蛋白胆固醇（LDL-CH）与癌症的关系有待进一步研究；对较年轻的冠心病患者，提高HDL-CH水平可能会减少急性心机梗塞的发作，尤其是男性；在年轻人群中降低TG水平对预防冠心病可能更有意义。     

血清高密度脂蛋白胆固醇测定及其临床应用

本文采用琼脂糖电泳法与酸法对正常人与冠心病、高血压及糖尿病患者进行血清高密度脂蛋白胆固醇(HDLc)及总胆固醇含量的测定,结果酶法比电泳法简便、灵敏、准确。测定三种病人血清HDLc含量显著低于正常值,呈负相关(P<0.01);用酶法测定三种病人血清总胆固醇含量均升高,呈正相关(P<0.01)。我们认为用酶法测定血清HDLc含量对心血管疾病的防治、诊断、监护具有更重要的实用意义。     

HPLC法测定apoA-1介导的泡沫细胞胆固醇流出的实验研究

目的：建立用高效液相色谱（HPLC）法测定载脂蛋白A‐1（apoA‐1）介导的泡沫细胞内胆固醇流出率的实验方法。方法人单核细胞THP‐1用160 nmol／L佛波酯（PMA）诱导24 h分化为贴壁巨噬细胞（PMA组）,再用50μg／mL乙酰化低密度脂蛋白（ac‐LDL）处理48 h ,诱导巨噬细胞变成泡沫细胞（ac‐LDL组）;加入含apoA‐1的1640培养基培养24 h（apoA‐1组）。油红O染色和HPLC法测定细胞内胆固醇水平,鉴定巨噬细胞源性泡沫细胞模型。采用 HPLC分析和液体闪烁计数法测定apoA‐1介导的泡沫细胞内胆固醇流出率。结果 T HP‐1巨噬细胞源性泡沫细胞经油红O染色后,细胞内可明显观察到大量红色脂滴存在。胆固醇水平测定显示,ac‐LDL组内游离胆固醇、总胆固醇和胆固醇酯的水平明显高于 PMA组（P＜0．01）。ac‐LDL处理细胞48 h后,ac‐LDL 组内总胆固醇水平为80．25μg／mg 细胞蛋白,胆固醇酯水平为47．65μg／mg 细胞蛋白,占总胆固醇的59．38％,与PMA组相比,差异有统计学意义（P＜0．01）。 HPLC分析和液体闪烁计数法结果表明,apoA‐1介导泡沫细胞内apoA‐1组胆固醇流出率分别为5．63％和7．08％（P＜0．01）。结论本研究成功建立了酶促反应结合 HPLC测定泡沫细胞内胆固醇流出的方法,为后续研究细胞脂质代谢提供了实验基础。